ИЗМЕНЕНИЕ НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У КРЫС ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ РАДИАЦИОННО-ХИМИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

временному лейкоцитозу на фоне снижения количества миелокариоцитов.

3. Сочетанное воздействие изученных факторов способствует усилению реактивности местного (легочного) иммунитета, кратковременным (на протяжении первых 2 мес) изменениям в корковом веществе тимуса и более длительным и значительным изменениям со стороны В-зависимых элементов селезенки, что в целом отражает компенсаторно-приспособительную реакцию иммунной системы к стрессовым воздействиям.

Литература

1. Воротникова Е. В. // Функциональная морфология лимфатических узлов и других органов иммунной системы и их роль в иммунных процесса. — М., 1983. — С. 37— 38.

В настоящее время вопрос о действии ионизирующей радиации на иммунную систему, в частности на фагоцитарную активность нейтрофилов крови, хорошо изучен [1, 2, 5, 6]. Имеются данные о влиянии на фагоцитоз широко применяемых в народном хозяйстве пестицидов [3, 4, 7]. Однако изучению сочетанного действия неблагоприятных факторов радиационной и нераднаци-опной природы на иммунную систему посвящены единичные публикации [8]. Целью настоящей работы явилось изучение фагоцитарной функции нейтрофилов крови у крыс при хроническом воздействии на организм внешнего у-облучения в сочетании с хлорофосом или линданом.

Исследование проводили в течение года на беспородных белых крысах обоего пола в возрасте 3,5—4 мес. Животных подвергали раздельному и сочетанному действию у-облучепия и пестицидов. Облучение осуществляли 1 раз в неделю в дозе 25 сГр от источника |37Сэ с мощностью дозы 11,4 мГр/с, суммарная доза за время опыта составила 1200 сГр. Ежедневно в составе суточного рациона крысы получали линдан в дозах от 0,02 до 2 мг или хлорофос в дозах от 1 до 20 мг на животное. Максимальная суммарная доза составила при затравке хлорофосом 70 ЬЭ50 и линданом 35 ЬО50. Через 3, 5, 7, 9 и 12 мес от начала эксперимента у животных определяли число нейтрофилов в 1 мкл крови, а также функциональную активность этих клеток по фагоцитарному индексу (ФИ) — проценту клеток, участвующих в фагоцитозе, от общего числа подсчитанных, и фагоцитарному числу (ФЧ) — сред-

2 .Кудрявцева Т. Л.//Там же. —С. 92—93.

3. Патология мышечного тонуса//БМЭ. — М., 1985. — Т. 25. — С. 472—474.

4. Репин Г. Н., Афанасьева Р. Ф. // Гиг. и сан. — 1985. — № 6.— С. 16—19.

5. Санина М. Р., Юрина Н. А., Этинген Л. Е. Лимфатический узел. — М.. 1978. —С. 21—28.

6. Хэм А., Кармак Д. Гистология: Пер. с англ. — М., 1983. _ Т. 2.— С. 91—97.

Поступила 22.03.88

Summary. The experiments on rats show that the 4-month elevated air dryness has no impact on body accumulation of 239Pu but causes more distinct forms of bronchitis and interstitial pneumonia combined with the strain in medullary hemopoiesis and reactivity intensification of pulmonary and B-system immunity. Under prolonger effect of both factors a breakdown in fully adequate immune response can occur.

нему числу микроорганизмов, фагоцитированных одним кейтрофилом. Объектом фагоцитоза являлась суточная культура белого стафилококка. Исследование проводили по общепринятой методике [7].

Результаты исследования (см. таблицу) показали, что все изучаемые показатели нейтрофиль-ного фагоцитоза изменялись в зависимости как от дозы ядохимикатов, так и от времени воздействия исследуемых факторов. У крыс, подвергавшихся только 7-облучению, в периферической крови отмечался нейтрофилез, но к 12 мес исс*-дования количество нейтрофилов возвращалось к контрольному уровню. У животных, которые получали хлорофос или линдан в максимальной и средней дозах, число нейтрофилов превышало контрольные значения в 1,8 и 1,5 раза соответственно через 3 мес от начала опыта. В условиях сочетанного поражения нейтрофилез наблюдался у крыс, получавших наибольшие суточные дозы хлорофоса или линдана, в те же временные интервалы, что и при воздействии только пестицидов. Более выраженным он был в группе животных, получавших максимальную концентрацию линдана; число нейтрофилов в этом случае превышало контрольный уровень в 2 раза.

Наряду с изменением числа нейтрофилов Ш-риферической крови изменялась и функциональная активность этих клеток при воздействии как одного из исследуемых факторов, так и их сочетания. У крыс, подвергавшихся только -у-облуче-нию, число нейтрофилов, участвующих в фагоцитозе, к 7 мес эксперимента превышало контроль-

уд к 612.017.1.014.482.014.46:616.285.7

В. Л. Шведов, Г. Г. Анисимова

ИЗМЕН ЕН И Е НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У КРЫС ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ РАДИАЦИОННО-ХИМИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ

Институт биофизики Минздрава СССР, Москва

3" ©

сСЛ ' 'Я01Г иф -ойхнэн

3" ©

©

*01 'аои-иф -с^хуэн 01ГЭШ1

сОГ ■цсданф -ОйхНОН ОЮИЬ

©

.:01 ■ ■Я01ГИф

-оахцэ„

3-©

кО 1 * 'асжнф •ойхцэн

ю

СЧС1«

оо о"

+Ш+1

«О Ю О соо -

— С* С* -и.«

О О* о" ООО

+1+1+1 +1+1+1

юю со мяо

со — - -со -

О)--

о" о* о' +1 +1 +1 ю «о «о

-Г СО Т

— юсг, с? — со" +1+1+1 (О^Ю

Т СО С) см —"—" +1+1+) ю со о

О* СО С1

со со т

о ОС со

+1+1+1 о со т

».о о —

см ю — +1+1 +1 СМ ю со

СМ СО О) о" о" о +1+1+1 со N

-ТГ СО С» о о" о* +1 +1 +1 со со сг>

тт'со"

со см со

ООО +1 +1 +1

со со <м ОС

о* о" О* о

+1+1+1 +1

СО — 00 со

-Г*Т* СО Т*

-Г — со

О* о" о +1+1+1

»Г СТ. СО

о'о'о" +1+1+1 (..ЮЮ -00 со

»о

с <м

т о» со о о о +1+1+1 ,о —. — о - -Л-со со

ю

ю О! с-1 N

о" о о о

+1 +1 +1 +1

оою »о

•00 —

- о»

С4) ю

СМ <м «о +1+1+1

ОЮт -г" со — +1+1+1 -г СО со

сою —

СО-Г* — +1+1+1 о г-о

— -Г С-) СО

со —т со

+1+1+1 +1 со о оо СО

оо оо со -г

СО СО со »О

ООО +1+1 +1 — «О

тт со

СО СМ СО ООО +1+1+1 ОЮ СО

СО СМ см

о"о о +1+1 +1 СО СОТ

Т сот

СО СМ СО СО

ООО о*

+1 +1 +1 +1

— сооо —

Т СО СО СО

«о

СОЮ —

оо— +1 +1+1

ю сою ю -со

-Ю -

ю

со

о со со о о" о +1+1 +1 юою

со N

ю

Г^-СЧЮ

о о" — +1+1+1 сос^ ю - -о

со ю « со

СМЮО ю

о"о о о"

+! -н +1 +1

ююю ю

— со см о

со ю N со

— см т +1+1+1

со — — с- — т

сою СО СО см со

+1+1+1 +1+1+1

|чОО СО СО СО

ОО со ЮТ -г

ю СО N СО Т N

т со со т

+1+1+1 +1

сто —

00 ^о со

-Г Ю N СО

■со со со СО СО Т со со со

ООО ООО о" о* о

+1+1+1 +1+1+1 +1+1+1

Ю ю СМ Т Ю N со СО гг

<М со СЧ СМ

о"оо о

+1 +1 +1 +1

со — г- —

со т т" ю

ООО +1 +1 +1 ю ю ю

10 СО со

<М Ю Ю Г- СО со

ООО о" о" —

+1+1+1 +1+1+1

ОГ--Ю Ю 10 тг

- -О Ю I— .

со со - - - —

Ю Т <о —

001--о'о

+1+1 +н

СМ СО со +1 +1 +1 N О N

Ю N 00 СО ю ю +1 +1 +1 +1 +1 +1 NN 00 ю со о

о со оо со +1+1+1 +1

ООО +1 +] +1

С» со со

см со со см см со

о о" о о" о" о

+1+1+1 +1+1+1

т см ю со —со

СО со СО СО СО »г"

ООО о +1 +! +1 +1 ОС СО О со

— оо +1+1+1

Ю Ю ю см оою

Т СО О I- О N

ООЮ — — О

+1+1+1 +1+1+1

Ю — Ю СМ О —

о - о - - -

- о - ююю

— см о +1+1+1 ю юю со оо -

ОО со ю СО ю т +1+1 +1 со о со

СО О» СО +1+1+1

СО Ю Т ют ю +1 +1 +1

N О СО О

N Т со СМ

+1+1+1 +1

О — N о

ООО +1+1+1 — О СО

ООО +1+1 +1 СО — ю со т со т со со

ООО +1+1+1

со т т т

ООО О

+1+1+1 +1

Ю — СС Т

Ч- р. <£>

1— о. о. "1-й

"о

у >> О.О.О. ¿>

>. 5 иии =■

и л, шюш Д о

у СЧ СЧ СЧ О

+ +++Г

" « и и I " +

Я 1 ггг.-« Г

-О- х о СЧ о =

О_оо°-*—-оо™ - - - •• — - ~— £ — о ё -этЗооаЗйоосч'

Ч Ч> = II

XX ч ч

сч ю ю 4-<мс-| 1++:

СЧ -

Осчо г

ный уровень в 1,5 раза, а в последующие сроки постепенно возвращалось к контрольному значению. Интоксикация хлорофосом также приводила к увеличению ФИ, причем максимальная концентрация пестицида вызывала эти изменения раньше и держались они дольше, чем при действии меньших доз. Сочетанное воздействие в течение 7 мес также увеличивало данный показатель. При этом у животных, получавших наибольшую дозу хлорофоса, он достигал несколько более высоких значений (76 %), чем у крыс с затравкой той же дозой пестицида, но не подвергавшихся у-облучению (69 %). Сочетанный эффект в данном случае был меньше аддитивного. Существенно изменялся ФИ у крыс, получавших линдан или линдан в сочетании с у-облучепием. Направленность изменений в этом случае была очень похожей на результаты опытов с хлорофосом. Так, при воздействии на организм линдана в максимальной концентрации число фагоцитирующих пейтрофилов увеличилось в 1,8 раза по сравнению с контролем через 7 мес от начала исследований; в последующие сроки этот показатель постепенно снижался до контрольного уровня. Действующей оказалась и минимальная испытанная доза линдана, которая вызывала повышение ФИ в 1,5 раза по отношению к контролю с 5-го по 9-й месяц исследования. При поступлении в организм средней дозы линдана в течение 3 мес отмечалось некоторое снижение числа фагоцитирующих клеток, которое в последующие сроки не отличалось от контроля. По сравнению с действием одного линдана более выраженные изменения ФИ можно было наблюдать у животных, получавших максимальные дозы пестицида в сочетании с у-облучением. у этих крыс через 5 мес от начала опыта число фагоцитирующих нейтрофилов в 2 раза превышало контрольный уровень, а к концу исследования оно уже было в 2 раза ниже контроля. У животных, получавших среднюю дозу линдана в сочетании с •у-облучением, некоторое повышение ФИ отмечали через 7 мес от начала опыта; через 12 мес он уже в 2 раза превышал контрольный уровень.

Из приведенных данных видно, что при соче-танном влиянии на организм хлорофоса или линдана и у-облучения изменения ФИ в зависимости от времени воздействия исследуемых факторов носили однонаправленный характер, при этом более заметные сдвиги вызывал линдан.

Если рассматривать с этой же точки зрения ФЧ, отражающее поглотительную способность клеток, то можно констатировать, что у живот-пых, которых подвергали только у-облучению, данный показатель через 7 мес исследования превышал контрольные значения в 1,7 раза и до конца опыта оставался на этом уровне. У крыс, которые дополнительно получали хлорофос, поглотительная способность нейтрофилов была повышена через 3 мес от начала опыта. При действии средней дозы хлорофоса нентрофнлы кро-

Динамика показателей нейтрофилыюго фагоцитоза в зависимости от суммарной дозы

хлорофоса и линдана. По оси абсцисс — суммарная доза пестицида (в г); по оси ординат: а. б —ФИ в (%), в, г — ФЧ (в

абс. ед.).

а. б — ФИ н ФЧ при воздействии хлорофоса: в, г — ФИ и ФЧ при воздействии линдана. / — пестицид; 2 — пестицнд+у-облученне; 3 — доверительный диапазон контрольных значений.

ви у подопытных животных захватывали в 2,5 раза больше микроорганизмов, чем у контрольных крыс. Сочетанный эффект в данном случае можно оценить как более чем аддитивный. У крыс, получавших максимальную дозу хлорофоса, этот показатель был в 2 раза выше, чем в контроле. Несколько превышало контрольный уровень ФЧ у животных, которые получали наименьшую дозу хлорофоса. Второй пик повышенной фагоцитарной активности приходился на 7-й месяц исследования. В последующие сроки происходило снижение ФЧ, и к концу эксперимента нейтрофи-лы периферической крови опытных животных захватывали в 1,5—2 раза меньше микроорганизмов, чем в контроле. С увеличением дозы хлорофоса, воздействующего в сочетании с у-облу-чением, поглотительная способность нейтрофилов снижалась. При сочетанном поражении животных линданом и у-облучением резкое повышение фагоцитарной активности наблюдали в тот же период, что и в опытах с хлорофосом (через 3 мес). К концу эксперимента этот показатель у всех подопытных животных независимо от дозы препарата был ниже контрольных значений более чем в 2 раза. У животных, получавших максимальную и минимальную дозы линдана в сочетании с у-облучением, на протяжении всего эксперимента сочетанный эффект был меньше аддитивного.

На рисунке, а, б изображена зависимость доза — эффект относительно показателей нейтро-фильного фагоцитоза у крыс при введении им только хлорофоса и при сочетании его с у-облу-чением. Видно, что уже при поступлении в организм минимальных доз хлорофоса как при раздельном, так и при сочетанном воздействии на^ блюдалось снижение процента клеток, участвующих в фагоцитозе, в 2 раза по отношению к контролю. Снижение данного показателя до такого же уровня отмечалось в диапазоне средних доз при сочетании их с у-облучением. У животных, получавших хлорофос в средних дозах, снижение ФИ было незначительным. При введении доз 1 и 10 мг показатель возрастал в 1,6 раза по сравнению с контролем как при воздействии одного хлорофоса, так и при сочетании его с у-облучением. У животных, получавших хлорофос в максимальных испытанных дозах, процент фагоцитирующих клеток оставался повышенным, а при сочетанном поражении он не отличался от контрольного уровня. Что касается способности нейтрофилов к захвату микроорганизмов, то изменение этого показателя в зависимости от суммарной дозы хлорофоса носили волнообразный характер. Причем в случае поступления в организм минимальных и средних суммарных доз этого ядохимиката снижению ФИ соответствовало увеличение поглотительной способности нейт-

рофилов, что, вероятно, является реакцией компенсации угнетения клеточных факторов защиты [2]. При действии максимальных суммарных доз хлорофоса ФЧ снижалось до контрольного уровня у животных, получавших только ядохимикат, и было в 2 раза ниже контроля при сочетанном поражении. Эффект при сочетанном воздействии хлорофоса и у-облучения в большей степени был .обусловлен влиянием пестицида, так как кривые, Отражающие изменения исследуемых показателей, в этом случае в основном повторяют таковые при поражении одним хлорофосом, отличаясь лишь своим расположением по отношению к контролю.

На рисунке, в, г представлена зависимость эффекта от суммарной дозы при хроническом поступлении в организм линдана. Изменения показателей фагоцитоза, так же как и в случае с хлорофосом, носили волнообразный характер; соче-танное поражение организма приводило лишь к изменению амплитуды кривых, т. е. эффект в основном формировался химическим соединением. Исключение составляли лишь высокие дозы, когда при сочетанном воздействии наблюдали более выраженное угнетение антимикробного иммуни-|угта. При воздействии на организм средних и максимальных доз линдана эффект был аддитивным.

Дисперсионный двухфакторный анализ показал, что число нейтрофилов периферической крови крыс как в случае раздельного действия линдана или хлорофоса, так и при сочетании этих пестицидов с у-облучением достоверно зависело от времени поступления в организм ядохимиката (суммарная доза). При этом влияние организованных факторов составило 60—66 % соответственно. у-Облучение при сочетанном поражении лишь увеличивало достоверность и долю влияния суммарной дозы пестицидов до 67—70 %• Что кажется ФИ, то в случае воздействия на организм как хлорофоса, так и линдана, а также при сочетании хлорофоса с у-облучением ведущим фактором, влияющим на ФИ, являлось время, в течение которого пестицид поступал в организм.

Доля влияния организованных факторов на этот показатель достигала 85%, в опытах с линданом достоверной оказалась и величина суточной дозы ядохимиката. При обработке данных по ФЧ обнаружено достоверное влияние на этот показатель величины суточной дозы при введении хлорофоса, а при сочетании хлорофоса с у-облучением достоверной оказалась суммарная доза химического вещества. При сочетанном поражении крыс линданом и у-облучением изменение ФЧ обусловлено в основном временем поступления пестицида в организм.

Таким образом, ведущую роль в развитии эффекта по изучаемым показателям фагоцитоза играют пестициды. Сочетанный эффект можно оценить как менее чем аддитивный, хотя в отдельные сроки эксперимента наблюдались аддитивные и более чем аддитивные эффекты.

Литература

1 .Грибов И. А. //Гиг. труда. — 1965. — № 3. — С. 16—19.

2. Клемпарская И. Н., Львицына Г. М., Шальнова Г. А. и др. Радиоактивные изотопы и иммунитет. — М., 1969.

3. Олгфир А. И. // Гиг. и сан. — 1971. — № 3. — С. 104— 105.

4. Олефир А. И., Минцер О. П., Сова Р. Е. // Там же. — 1977. — № 4, —С. 25—28.

5. Петров Р. В. Иммунология острого лучевого поражения,—М„ 1952.

6. Фарафонов Г. В. // Мед. радиол, — 1977.— Т. 22, № 7,— С. 54—58.

7. Хамидов М. X., Мухтарова М. И. //Мед. журн. Узбекистана. — 1984. — № 5. — С. 49—51.

8. Шубин В. М., Митвер Б. Я., Албегов В. X. и др // Гигиеническая оценка факторов радиационной и нерадиаци-онной природы и их комбинаций. — JL, 1976. — С. 62— 65.

Поступила 04.02.88

Summary. The experiments on rats exposed separately and in combination to radiation and chemical substances showed that the time of body pesticide intake (the total dose) was the leading factor affecting the phagocytosis indices. A daily pesticide dose had a credible impact on some indices. The combined effect was formed primarily due to chemical compounds. In general the effect could be regarded as less than additive though at some time it was additive and more than that.