CC BY
3
УДК «1в.36-02:«15.91|-»7:в1в. 154.577.175.53
О. 3. Нагашян
ИЗМЕНЕНИЕ (Ч-ДЕМЕТИЛАЗНОИ АКТИВНОСТИ В ПЕЧЕНИ И СОДЕРЖАНИЯ 11-ОКСИКОРТИКОСТЕРОИДОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ДИГИДРЕЛА
Армянский филиал ВНИИГИНТОКСа •
В последние годы для повышения урожайности сельскохозяйственных культур широко применяются регуляторы роста растений. Способствуя развитию сельского хозяйства, последние неизбежно загрязняют объекты окружающей среды. В этой связи одной из первоочередных задач является изучение влияния их на организм животных и человека.
Учитывая роль монооксигеназных ф$рментов и коры надпочечников в формировании реакции организма на воздействие неблагоприятных факторов внешней среды (А. И. Арчаков, В. .И. Большее), мы задались целью изучить активность многоцелевых оксигеназ печени и содержание гормонов (стероидов) в плазме крови при введении белым крысам дигидрела — регулятора роста растений, рекомендованного к широкому внедрению в сельское хозяйство нашей страны.
Опыты проводились на белых крысах-самцах массой 220—250 г. В каждой группе исследовалось не менее 6 животных. Дигидрел вводился жнвотным в желудок однократно в дозе 1750 мг/кг ('/а Л Дм). Исследования проводились через 1, 6, 12 и 30 сут после затравки. Состояние монооксигеназных ферментов эндоплазматического ретикулума клеток печени определялось исследованием N-деметилазной активности, а состояние коры надпочечников— содержанием 11-оксикортикостероидов в плазме крови.
N-деметилазная активность определялась в постмнто-хондриальной фракции ткани печени методом Nash, в модификации Cochin, Axelrod.
В сосудики Варбурга или широкодонные пробирки наливали по 2 мл приготовленной опытной и контрольной реакционной смеси, содержащей 25 мкмоль НАД, 0,4 мкмоль НАДФ, 12,5 мкмоль MgClj, 25 мкмоль семикар-базида, 2,6 мкмоль глюкозо-6-фосфата, 2 мл Na-K-фосфэт-ного буфера (рН 7,4), добавляют по 1 мл постмитохон-дриальной фракции. Затем пробы инкубировали в аппарате Варбурга в -Течение 30 минут при t--(-37°С при постоянном встряхивании. После окончания инкубации в пробы добавлялось по 2 мл 20 % ZnSO« и по 2 мл насыщенного раствора Ва(ОН)2. Через 10 минут пробы центрифугировали в течение 10 минут при 4000 об/мин. Затем по 2,5 мл центрнфугата переносили в центрифужные пробирки, прибавляли по 1,0 мл реактива Nash, перемешивали и помещали на 10 мин в водяную баню при t--1-60 °С. После
этого пробирки охлаждали и пробы спектрофотометрирова-ли на спектрофотометре СФ-16 в кювете 1,0 см, длина волны 412—415, против воды.
Количество 11-оксикортикостероидов в плазме крови определялось методом Моор. Метод основан на способности гидрокортизона и кортикостерона вступать в реакцию с концентрированной или умеренно разбавленной серной кислотой с образованием флюоресцирующих продуктов. Полученные результаты обрабатывались методом вариационной статистики (рекомендации по статистической обработке).
При изучении влияния дигидрела на активность ферментов электронтранспортных цепей микросом печени обнаружено, что Г^-деметилазная активность через 1 сут после однократного введения препарата на уровне '/г ЛД50 возрастает и сохраняется в течение 12 сут. Наивысшая активность зарегистрирована через 6 сут, которая в среднем составляла 58 % по отношению к контролю (см. таблицу).
Через 30 сут активность фермента восстанавливается.
В плазме крови изменение содержания 11 -оксикортикостероидов носит иной характер. Спустя 1, 6 и 12 сут после прекращения затравки отмечается достоверное снижение концентрации 11-оксикортикостероидов у всех исследуемы« животных по сравнению с контролем, которое составляет 10, 17,5 и 15,9 % соответственно.
Через 30 сут после введения дигидрела содержание 11-оксикортикостероидов в плазме крови хотя и восстанавливается, однако не выходит за пределы статистической достоверности.
Таким образом, однократное воздействие дигидрела на уровне '/а ЛД50 вызывает изменения как со стороны системы, ответственной за детоксикацию чужеродных веществ (монооксигеназы), так и со стороны неспецифически реагирующей системы (кора надпочечников)
Полученные данные являются еще одним подтверждением предположения о существовании корреляции между индуцированным синтезом микросомальных монооксигеназ и увеличением метаболизма стероидных гормонов в эндо-плазматическом ретикулуме клеток печени (В. Н. Семенова и соавт.; Ю. К. Василенко; Ф. 3. Меерсон).
Лйтерату! а. Арчаков А. И. Микросомальное окисление. М„ 1975.
Большее В. И. — Фармакол. и токсикол., 1980, № 3, с. 373—379.
Василенко Ю. К. Биологическая химия. М., 1978. Меерсон Ф. 3. Адаптация, стресс и профилактика. М., 1981.
N-деметилаэкая активность ткани печени и содержание 11-оксикортикостероидов в плазме крови после однократного
воздействия дигидрела (М±т)
Условия опыта Сроки исследования после затравки
1 6 12 за
N-деметилаза (в мкмолях) Контроль Опыт 11-оксикортикостероидов (в нмолях/100 мл) Контроль Опыт 5.8±0,3 6,7±0,3* 91,3±2,21 83,4±2,74* 6,9±0,1 10,9±0,9* 78,6±3,33 64,9±3,89* 6,6±0,3 7,9±0,3* 81,7±2,21 68,7±3,28* 6,3±0,5 7,6±0,7 84±3,34 79,3± 1,67
* Различие статистически достоверно при значении Р<0,05.
Семенова В. Н„ Федянина В. И., Казанина С. С. к др. — В кн.: Эндокринная система организма и токсические факторы внешней среды. Л., 1979, с. 185—186. Binh P. X., Nyakas С. S„ Endröczi Е. et al. — Endokrinologie, 1980, Bd 76, S. 303—308.
Cochin /., Axelrod I.— J. Pharmacol, exp. Ther., 1959, v. 125, p. 105.
Moor P. de, Sleeno 0., Raskin M. ct al. — Acta endocr.
(Kbh.), 1960, v. 33, p. 297—307. Nash T. — Biochem. J., 1953, v. 55, p. 416.
Поступила 07.07.82
УДК 616-008.944.5:546.73|-034-092-02:в 13.4
. 1 О. Д. Лившиц, А. К. Кощеев ^
ВЫВЕДЕНИЕ КОБАЛЬТА ИЗ ОРГАНИЗМА КРЫС В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАЦИОНОВ ПИТАНИЯ
Пермский медицинский институт
Кобальт (Со) и его соединения широко применяются в различных отраслях промышленности. На предприятиях, применяющих Со, возможно поступление его в организм рабочих (3. И. Израэльсон; Г. М. Пархоменко, и др.). Попадая в организм. Со действует как промышленный яд (3. С. Каплун, 1955). Поэтому проблема изыскания средств обезвреживания и выведения Со из организма является актуальной. В качестве детоксикантов Со наиболее перспективно применение пищевых продуктов, в частности овощей, содержащих, биологически активные вещества, способствующие связыванию, обезвреживанию и выведению из организма токсических веществ (О. Д. Лившиц; А. К. Кощеев и О. Д. Лившиц).
В настоящем сообщении приведены материалы экспериментальных исследований изучения влияния рационов, обогащенных овощами, на выведение Со из организма животных. Исследования проводили на белых крысах-самцах одного возраста с начальной массой 190—200 г. Всех животных до опыта содержали в одинаковых условиях в отношении питания, питьевого режима и ухода. Затравку животных осуществляли хлористым кобальтом (СоС12) ежедневно в течение месяца из расчета 5 мг/кг в пересчете на «он Со. Годный раствор СоС12 вводили перорально металлическим зондом (О. Н. Елизарова). Для раздельного сбора мочи и кала животных помещали в специально сконструированные нами клетки (А. К. Кощеев и О. Д. Лившиц). Опыт приводили в 3 периода— 1 подготовительный и 2 опытных. В подготовительном периоде, продолжавшемся 30 дней, крыс приучали находиться в специальных клетках для раздельного сбора мочи и кала. Животные получали обычный рацион питания (зерновая
смесь: пшеница, ячмень, горох, овсяная крупа, хлеб, молоко, мясо, костная и рыбная мука, кормовые дрожжи, рыбий жир, сочные корма) (3. Ф. Лоскутова). Содержание белка составляло 20,2%, жира—12,2%, углеводов — 59,4 % калорийности общего рациона. Содержание витамина С было равно 7,1 мг, пектина — 0,59 г, клетчатки —
I,1 г, кальция — 34,1 мг. В первом опытном периоде (периоде затравки), продолжавшемся 30 дней, животным ежедневно вводили СоС12. Каждая их группа получала соответствующие рационы питания. Во втором опытном (восстановительном) периоде, продолжавшемся 30 дней, рационы питания оставались такими же, как и в первом опытном периоде, но затравку животных СоС12 не проводили.
В эксперименте использовали 5 групп животных по 15 особей. 1-ю группу крыс затравливали СоС12, она получала обычный рацион питания (контрольная). 2-ю группу животных затравливали СоС12, она получала рацион, обогащенный сырой морковью (50 % обычного рационаН-50,% сырой моркови по массе). Содержание белка составляло
II,6%, жира — 6,1%, углеводов — 38 % калорийности общего рациона. Содержание витамина С было равно
5 мг, пектина—1,2 г, клетчатки — 0,9 г, кальция — 31,3 мг. _ 3-ю группу животных затравливали СоС12, она получала г рацион, обогащенный сырой белокачанной капустой (50 % обычного рацина+50 % сырой капусты по массе). Содержание белка 12,2%, жира 6,1%, углеводов 36 % калорийности общего рациона. Содержание витамина С 17,6 мг, пектина 1,2 г, клетчатки 0,8 г, кальция 30,5 мг. 4-19 группу животных затравляли СоС12, она получала рацион, обогащенный сырой морковью и сырой белокачанной капустой
Таблица 1
Выведение Со (в мг) из организма крыс при воздействии рационов питания в ходе эксперимента
Группа Статистиче- Затравка, сут Восстановительный период, сут
живот- ский показа-
ных тель 10 . 20 30 40 so ' 60
1-Я М±т 0,34±0,01 1,01 ±0,21 1,52±0,41 1,40±0,18 0,92±0i05 0,25±0,07
2-я М±т 0,81±0,07 2,70±0,27 3,23±0,34 3,02±0.56 2,46±0,16 1,12±0,15
t 6,62 4,82 6,10 4,76 9,05 5.43
Р <0,001 1 <0,001 <0.001 <0,001 <0,001 <0,001
3-я М±п\ 0,75±0,09 2,87±0,30 3,72±0,23 3,15±0,39 2.5Ö±0,26 1,24±0.12
t 4,01 4,65 10,0 9,61 5,85 . 7.61
Р <0,01 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
4-я М±т 1,24±0,16 3,59±0,24 4,68±0,40 3,94±0,54 3,12±0,43 1,70±0,17
t 5,62 8,32 9,57 7,93 5,11 8,05
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
5-я М±т, 1,30±0,14 4,12±0,32 5,31±0,45 4,88±0,С5 3,46±0,38 2,70±0,20
t 6,40 8,18 10,24 7,73 6,68 9,10
Р • <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
Примечание, t и Р вычислены по отношению к данным 1-й группы.
