CC BY
64
БИОЛОГИЯ
УДК 612.57
ИЗМЕНЕНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА КРОВИ КРЫС ПРИ ВВЕДЕНИИ ГЕПАРИНА
© 2008 г. Р.В. Гиноян, А.Е. Хомутов, О.В. Лушникова
Нижегородский госуниверситет им. Н.И. Лобачевского [email protected]
Поступила в редакцию 03.07.2008
Гепарин в широком диапазоне доз (0.5-5000 МЕ/кг) разнонаправленно влияет на форменные элементы крови. Наблюдается снижение количества эритроцитов, сегментоядерных нейтрофилов, эози-нофилов, повышение процентного содержания палочкоядерных нейтрофилов. Лимфоцитарный статус, количество лимфоцитов, моноцитов, ретикулоцитов и базофилов остаются без изменений.
Ключевые слова: гепарин, кровь, форменные элементы.
Несмотря на некоторую противоречивость литературных данных о влиянии гепарина на отдельные стороны системы кроветворения, в целом препарат обладает заметным стимулирующим действием на гемопоэз. Гепарин уже в дозе 250 МЕ/кг вызывал выраженный лейкоцитоз: у мышей максимум через 1 час, у крыс -через 3 часа. С возрастанием дозы увеличивался лейкоцитоз, который возникал преимущественно за счет лимфоцитов. Опытами на новорожденных и половозрелых мышах и крысах установлено, что многократное введение препарата увеличивало количество в тимусе и селезенке стволовых кроветворных клеток. Представляют интерес исследования, проведённые на кроликах, в ходе которых выяснено, что гепарин существенно не влиял на содержание эритроцитов и гемоглобина, однако количество ретикулоцитов увеличивалось на 15% в первые часы после его введения [1]. Более чётко установленным можно считать факт стимуляции гепарином выработки лейкоцитов и их фагоцитарной активности. Так, отмечено, что под влиянием гепарина происходит возрастание абсолютного числа лимфоцитов и некоторое повышение нейтрофилов и базофилов, увеличивается число митозов в лимфатических узлах. Имеются наблюдения того, что гепарин обладал двухфазным действием на содержание лейкоцитов в крови: вначале, после введения препарата, возникали лейкопения и эозинофилия [2, 3].
Материал и методы
Работа была выполнена на 70 половозрелых лабораторных крысах обоего пола массой 180 -200 г, находящихся на общем рационе вивария. Гепарин вводился в дозах 0.5, 5.0, 50, 500 и 5000 МЕ/кг внутрибрюшинно. В качестве контроля использовались интактные крысы. Забор крови производили из подъязычной вены по истечении 1, 6 и 24 часов после введения гепарина. Количественную оценку эритроцитов, гемоглобина, ретикулоцитов, лейкоцитов и лейкоцитарной формулы производили стандартными клиническими методиками. Полученные результаты были подвергнуты статистической обработке методом парных сравнений по критерию Стьюдента.
Результаты и их обсуждение
Введение гепарина в дозе 0.5 и 5.0 МЕ/кг сопровождалось небольшими количественными изменениями эритроцитов в течение наблюдаемого периода времени, однако эти изменения не имели достоверных различий как между собой, так и относительно контрольных величин. Внутрибрюшинная инъекция гепарина в дозе 50, 500 и 5000 МЕ/кг вызывала достоверное снижение эритроцитарного статуса крови, особенно заметные при регистрации через 6 часов после инъекции (табл. 1).
Таким образом, при введении гепарина в дозах 50, 500 и 5000 МЕ/кг наблюдается эритро-
Таблоца 1
Изменение количества эритроцитов при введении гепарина
Условия опыта Количество эритроцитов (млн.)
1 час 6 часов 24часа
Интактные 8.64±0.29 8.81±0.25 8.85±0.27
Гепарин, 0.5 МЕ/кг 8.56±0.21 8.86±0.18 8.88±0.12
Гепарин, 5.0 МЕ/кг 8.18±0.13 7.93±0.19 8.37±0.06
Гепарин, 50 МЕ/кг 9.02±0.12 7.58±0.42 * 8.13±0.38*
Гепарин, 500 МЕ/кг 7.99±0.25 7.61±0.56 * 8.21±0.23 *
Г епарин, 5000 МЕ/кг 7.62±0.16 7.83±0.34 * 7.91±0.33 *
*р < 0.05.
Таблоца 2
Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов при введении гепарина
Условия опыта Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов в лейкоцитарной формуле
1 час 6 часов 24 часа
Интактные 5. 83± 1.17 5.5±1.05 5.17±1.17
Гепарин, 0.5 МЕ/кг 6.17±1.17 * 6.5±1.05 * 6.17±1.17 *
Гепарин, 5.0 МЕ/кг 6.83±1.17 * 6.33±1.37 * 7.00±1.27 *
Гепарин, 50 МЕ/кг 6.83±0.75 * 5.83±0.98 4.83±0.98 *
Гепарин, 500 МЕ/кг 7.67±0.82 * 7.56±1.55 * 6.50±1.22 *
Г епарин, 5000 МЕ/кг 8.17±0.98 * 7.83±1.33 * 7.00±1.27 *
*р < 0.05.
пения, скорее всего относительная. Относительная эритропения возникает при разжижении крови за счет быстрого увеличения количества жидкости в кровотоке. По-видимому, гепарин, увеличивая тканевую проницаемость, способствует поступлению воды в общий кровоток, снижая количество эритроцитов в периферической крови.
Это предположение подкрепляется и данными, полученными при оценке уровня гемоглобина в крови. При введении гепарина в дозах
0.5-5000 МЕ/кг во всех случаях, несмотря на небольшие повышения и понижения уровня гемоглобина, получены данные, достоверно не отличающиеся от контрольных величин.
Аналогичная картина наблюдается и при исследовании ретикулоцитарного статуса. При всех исследованных дозах гепарина количество ретикулоцитов достоверно не изменяется. Как известно, при различных экстремальных состояниях наряду с резким повышением эритро-цитарного статуса повышается и количество ретикулоцитов, что может говорить о повышении гемопоэза. В данном случае результаты исследований говорят о том, что введение даже высоких доз гепарина не является для организма экстремальным фактором.
Как уже указывалось выше, по данным Н.К. Валейко [1], при введении гепарина наблюдается лейкоцитоз. Однако, по нашим данным, даже высокие концентрации гепарина в инъецируе-
мом растворе не вызывают достоверных изменений общего количества лейкоцитов.
Иная картина наблюдается при оценке палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов. Количество палочкоядерных нейтрофилов при введении всего диапазона доз гепарина увеличивается (табл. 2), а количество сегментоядерных нейтрофилов резко уменьшается (табл. 3), т.е. наблюдается нейтрофилия. Следует отметить, что максимальное снижение количества сегментированных нейтрофилов наблюдается при введении гепарина в дозах 0.5 и 5000 МЕ/кг.
При оценке нейтрофилии необходимо учитывать ядерный сдвиг нейтрофилов в лейкоцитарной формуле. Регенеративный ядерный сдвиг влево указывает на омоложение клеток нейтрофильного ряда: в крови увеличивается содержание палочкоядерных и появляются юные формы. Регенеративный ядерный сдвиг влево обычно сочетается с нейтрофильным лейкоцитозом, что свидетельствует об активации гранулопоэза. Общее число лейкоцитов может быть увеличено, но чаще имеется тенденция к снижению, так как чрезмерная активация гранулопоэза может сопровождаться истощением миелоидного ростка.
Введение гепарина в широком диапазоне доз (0.5-5000 МЕ/кг) не влияло на лимфоцитарный статус крови крыс, количество моноцитов и ба-зофилов в тех же условиях эксперимента также не отличалось от контрольных величин.
Таблица 3
Процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов при введении гепарина
Условия опыта Процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов в лейкоцитарной формуле
1 час 6 часов 24 часа
Интактные 57.45±2.34 65.33±2.16 65.67±1.75
Гепарин, 0.5 МЕ/кг 14.5±1.38 * 16.00±1.90 * 15.83±0.98 *
Гепарин, 5.0 МЕ/кг 39.33±1.63 * 41.33±1.21 * 37.67±2.58 *
Гепарин, 50 МЕ/кг 21.83±6.8 * 25.83±5.91 * 25.00±5.48 *
Гепарин, 500 МЕ/кг 34.17±2.48 * 39.17±2.86 * 34.33±2.16 *
Гепарин, 5000 МЕ/кг 16.17±1.47 * 16.83±0.98 * 17.00±0.89 *
*р < 0.05.
Через 24 часа после введения гепарина в дозах 0.5-5000 МЕ/кг наблюдается достоверное снижение уровня эозинофилов - эозинопения. Эозинопения возникает при избытке в периферической крови глюкокортикоидов, так как эти гормоны способствуют лизису эозинофилов. Известно, что гепарин усиливает синтез и выброс глюкокортикоидов в кровеносное русло.
Заключение
Таким образом, гепарин в широком диапазоне доз (0.5-5000 МЕ/кг) разнонаправленно влияет на форменные элементы крови. Наблюдается снижение количества эритроцитов, сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов, по-
вышение процентного содержания палочкоядерных нейтрофилов. Лимфоцитарный статус, количество лимфоцитов, моноцитов, ретикуло-цитов и базофилов остаются без изменений.
Список литературы
1. Валейко Н.К. Влияние различных доз гепарина на систему свёртывания крови // Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзной конференции. М., 1973. С. 52-54.
2. Хомутов А.Е., Орлов Б.Н. Физиологическая роль гепарина: Учебное пособие. Горький: ГГУ, 1987. 86 с.
3. Маркосян А.А. Физиология свёртывания крови. М.: Медицина, 1996. 464 с.
THE CHANGE OF MOUSE BLOOD MORPHOLOGICAL COMPOSITION UNDER HEPARIN INJECTION
R V. Ginoyan, A.E. Khomutov, O. V. Lushnikova
Heparin in a wide range of doses (0.5-5000 IU/kg) has differing effects on blood corpuscles. The number of erythrocytes, segmented neutrophils, eosinophils is decreased; the percentage of stab neutrophils is increased. Lymphocytic status, the number of lymphocytes, monocytes, reticulocytes and basocytes remain unchanged.
