CC BY
150
Биология
Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского, 20 13, № 5 (1), с. 141-147
УДК 597.851: 619:616.995.1:636:612.017.11/12
ИЗМЕНЕНИЕ ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ ФОРМУЛЫ КРОВИ ОЗЕРНОЙ ЛЯГУШКИ Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ
© 2013 г. Е.Б. Романова, Г.А. Фадеева, К.С. Вершинина, В.Ю. Николаев
Нижегородский госуниверситет им. Н.И. Лобачевского
romanova@bio.unn.ru
Пвступвла вредакцвю 02.07.2013
Изучение особенностей лейкоцитарной формулы периферической крови озерных лягушек, обитающих в водоемах урбанизированной территории, позволило выявить изменения, происходящие в крови животных под воздействием загрязнения и паразитарной инвазии. Установлено, что к качеству среды наиболее чувствительны нейтрофильные клетки гранулоцитарного ряда. Перераспределение в соотношении агранулоцитов (моноцитов и лимфоцитов) более характерно для паразитарных инвазий. Установлено возрастание относительного содержания эозинофильных гранулоцитов и снижение доли лимфоцитов в крови озерных лягушек в зависимости от обилия паразитов.
Ключевые слвва: лейкоцитарная формула крови, гельминтозы, озерная лягушка.
В наземных биоценозах урбанизированной территории амфибии являются одной из доминирующих групп позвоночных животных и удобным объектом биомониторинга антропогенно нарушенных территорий [1, 2]. Из множества различных методов оценки состояния популяций, особое внимание уделяется гематологическому подходу, позволяющему оценить адаптивный потенциал и физиологическое состояние организма в постоянно меняющихся условиях среды [3-8].
Благодаря эвритопности, высокой численности и темпам размножения, особенностям жизненного цикла со сменой среды обитания, амфибии заражены многими видами паразитов [9, 10]. И для оценки состояния популяций широко используют паразитологический анализ [11-14].
Перспективным методом экологического мониторинга является показатель флуктуирующей асимметрии (ФА), под которым понимают незначительные и ненаправленные отклонениям от строгой билатеральной симметрии. Показатель ФА является мерой стабильности развития организма и в настоящее время рекомендован нормативными документами экологических служб для оценки качества среды [15]. Перечисленные подходы используются, как правило, независимо друг от друга, между тем «хозяин» вместе с живущими в его организме «паразитами» представляют единую структуру со сложными трофическими и регуляторными связями, поэтому в комплексной характеристике природных популяций очевидна ценность интегрированных исследований.
Цель настоящей работы - анализ видовой структуры паразитофауны озерной лягушки Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) урбанизированной территории с применением методов экологического и гематологического анализа.
Материал и методика
Объектом исследования являлись зеленые лягушки рода Pelophylax двух видов: озерная Pelophylax ridibundus и прудовая Pelophylax les-sonae. Сбор материала (80 особей) осуществлялся на территории г. Нижнего Новгорода и Нижегородской области в течение полевого сезона 2011 г. из популяций, в разной степени подверженных действию урбанизации и загрязнению [16].
Точка 1. Оз. Святв (Нижегородская область, Арзамасский район) (43.58815 E; 55.671672 N) находится на территории Пустын-ского заказника, входит в систему Пустынских озер бассейна реки Сережи. Протяженность системы с запада на восток по течению реки на 6.5 км, с севера на юг - 3.6 км, общая занимаемая площадь 303.1 га.
Точка 2. Озерв Сврмввсквй ТЭЦ (г. Нижний Новгород, Сормовский район) (43.904472 E; 56.346639 N), имеет антропогенное происхождение, находится в пойме реки Волги. Площадь около 100 м2. Дно заилено, берега крутые, суглинистые. Находится под воздействием нормативно очищенных сточных вод Сормовской ТЭЦ.
Точка 3. Оз. Паркввве (г. Нижний Новгород, Автозаводский район) (43.843244 E; 56.241192 N). Создано искусственно на месте выемки пес-
ка для жилого массива. Расположено в парковой зоне и находится под воздействием рекреационной нагрузки. Водоохранная зона хорошо озеленена. На расстоянии 10-12 м от береговой линии проходит шоссе. Вода озера мало минерализованная, относится к гидрокарбонатному классу. Индекс загрязнения воды (ИЗВ) - 1.72.1. Класс качества воды - III (умеренно-загрязненная). Приоритетные загрязняющие вещества (концентрация в ПДК) в поверхностном слое: медь (4), железо общее (3), нефтепродукты (1.4), цинк (1.1). В придонном слое:
Точка 4. Озеро очистных сооружений в Ар-темовских лугах (г. Нижний Новгород, Нижегородский район) (44.124914 Е; 56.281872 К). Антропогенного происхождения, ширина 3-4 м, длина около 100 м. Мелководное, дно песчаное, берега крутые, песчаные, луговая растительность. С очистных сооружений в озеро осуществляется сброс нормативно очищенных сточных вод.
Качество среды исследованных водоемов оценивали по стабильности развития лягушек обоих видов, мерой которой служит величина флуктуирующей асимметрии. Балл стабильности развития животных определяли по разработанной для земноводных пятибалльной шкале оценки отклонений состояния организма от условной нормы [15].
Видовая принадлежность озерных лягушек оценивалась по внешним морфологическим признакам [17]. Пол и возраст лягушек устанавливали по стандартной методике [18]. Подсчет лейкоцитарной формулы крови озерных лягушек [19], сбор, фиксацию и обработку гельминтологического материала из озерных лягушек выполняли общепринятыми методами [20]. После изготовления препаратов определяли видовую принадлежность гельминтов [9]. Паразитарный груз оценивался расчетом индексов экстенсивности инвазии (ЭИ, %) и интенсивности инвазии (ИИ, экз.). Для каждой выборки из исследованных популяций рассчитывали общепринятые в экологии индексы: видового разнообразия Шеннона (Н); выравненности Пиелу (е), фаунистического сходства Сьеренсена ^), доминирования Симпсона (С), видового богатства Маргалефа (<$). Для получения статистически корректных оценок различий (¿-критерий Стьюдента) в видовом разнообразии паразито-фауны был применен индекс Шеннона, для которого разработаны соответствующие алгоритмы [21]:
чение дисперсии для первой и второй выборок {УагНг и VarH2) вычисляли по формуле
2 (Р‘' (1^Р-)2 “ (2р‘' Х^р‘)2
t =
H1 - H 2
VarH = -
N
(VarH, + VarH 2)7 2
где Н\ и Н2 — значения индекса Шеннона для первой и второй выборок соответственно. Зна-
S -1
+----2,
2 N2
где pi - доля особей i-го вида, N - суммарная численность, S - число видов.
Проверка данных на соответствие нормальному распределению проводилась с применением критериев Колмогорова-Смирнова, Лиллие-форса и Шапиро-Уилка. Поскольку предварительный анализ показал, что первичные данные не соответствуют нормальному распределению, то дальнейший статистический анализ проводили непараметрическими критериями: Крускала-Уоллеса (К), Манна-Уитни (U), коэффициентом ранговой корреляции Спирмана (r) (при исследовании связи признаков). При статистической обработке использовали прикладные программы STATISTICA 10.0 фирмы StatSoft. Критический уровень значимости (р) принимали равным 0.05.
Результаты и их обсуждение
У озерных лягушек Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) 4 обследованных водоемов обнаружен 21 вид паразитических червей, относящихся к 3 таксономическим группам.
Тип Плоские черви (Plathelminthes). Класс Trematoda: Diplodiscus subclavatus (Pall.), Doli-chosaccus rastellus (Ollson), Gorgodera cygnoides Zeder, G. loossi (Ssinitzin), G. varsoviensis Sinir-zin, G. pawlowskyi Pigulevsky, Gorgoderina skrja-bini (Looss), Halipegus ovocaudatus Vulp., Hap-lometra cylindracea (Zeder), Opisthioglyphe ranae (Froelich), Paralepoderma cloacicola Luhe, Pneu-monoeces asper (Looss), P. variegatus (Rud.) Skrjabinoeces similis (Looss).
Класс Monogenea - Polystoma integerrinum (Frochlich).
Тип Круглые черви (Nematoda): Cosmocer-ca commutata (Deising), C. ornata (Dujardin), Neoxysomatium brevicaudatum (Zeder), Rhabdias bufonis (Schrank), R. rubrovenosus (Schneider), Strongyloides sp.
Было установлено, что величина флуктуирующей асимметрии популяций амфибий, обитающих в оз. Свято (условный контроль), составляла 0.34±0.01, что соответствовало I баллу качества среды (условно нормальное). Популяции амфибий городской территории, обитающие в озере Сормовской ТЭЦ (ФА = 0.63±0.03) и в озере Парковое (ФА = 0.62±0.03), характеризовались IV баллом качества среды, что соответ-
Таблица 1
Показатели видовой структуры сообществ гельминтов озерной лягушки (Pelophylax ridibundus (Pallas 1771)________________________________
Показатель Место отлова
Точка 1 (условный контроль) Точка 2 Точка 3 Точка 4
Балл качества среды I IV IV V
Общая численность выборки N 9 18 17 15
Число зараженных особей 5 5 9 2
Видовое богатство № 8 6 8 3
Интенсивность инвазии, экз. 2.2 2.0 19.5 2.5
Экстенсивность инвазии, % 55.5 27.7 52.9 13.3
Индекс видового разнообразия Шеннона (Н) 1.97 1.70 0.95 0.95
Индекс доминирования Симпсона (С) 0.16 0.20 0.54 0.44
Индекс выравненности Пиелу (е) 0.95 0.94 0.446 0.86
Индекс видового богатства Маргалефа (с[) 2.92 3.11 1.35 1.24
ствовало существенным отклонениям от условной нормы. Наиболее экологически неблагоприятной следует считать обстановку в районе очистных сооружений в Артемовских лугах г. Нижнего Новгорода, где отмечено наибольшее значение ФА (0.70±0.03), соответствующее критическому состоянию среды, V балл. Статистический анализ при парном сравнении групп по критерию Манна-Уитни (Ц) выявил значимые различия между условно контрольной группой (точка 1) и выборками лягушек из городских популяций (точки 2, 3, 4) (Ц-2 = 3.51, р = 0.02; Ц« = 3.63, р = = 0.001; Ц!_4 = 4.42, р = 0.00005).
В водоемах с повышенной антропогенной нагрузкой обнаружено снижение видового разнообразия (по индексу Шеннона) гельминтов у озерных лягушек. Более высокое значение индекса Шеннона соответствовало особям условно контрольного водоема (Н = 1.97) (табл. 1). Анализ показал, что статистически значимые различия видового разнообразия гельминто-фауны (с учетом поправки Бонферрони р = 0.05/6 = 0.008) выявлены между выборками лягушек условно контрольной точки 1 и точки 3 (оз. Парковое) (р = 0.001) и между выборками из точки 2 (оз. Сормовской ТЭЦ)г и точки 3 (р = 0.004) (табл. 2). В естественном водоеме (оз. Свято) ядро гельминтофауны представлено, в основном, трематодами, характеризующимися сложным жизненным циклом (Diplodiscus sub-с1та1ш, Gorgodera cygnoides, Halipegus оуо-caudatus, НарЪте^а cylindracea), а также обычными видами нематод Rhabdias bufonis и
Cosmocerca соттШа1а. В связи с загрязнением водоемов наблюдается не только обеднение видового состава, но и преобладание в гельмин-тофауне нематод, численность которых резко возрастает. Так, в гельминтофауне лягушек точки 3 (оз. Парковое, г. Нижний Новгород, Автозаводский район) численность доминирующих видов (Rhabdias bufonis и R. rubrovenosus) достигала до 40 экземпляров на особь хозяина.
Относительно низкое значение индекса Шеннона (Н3 = 0.95), рассчитанное для гель-минтофауны лягушек точки 3, определялось тем, что этот показатель учитывает одновременно и видовое разнообразие и выравненность выборки. Несмотря на относительно высокое богатство видов (£ = 8), фауна гельминтов лягушек этого биотопа характеризовалась наличием доминантных (Rhabdias bufonis, R. rubrove-nosus) и субдоминантных видов (Strongyhides sp., Gorgodera cygnoides), существенно преобладающих по численности над остальными видами. Индекс доминирования гельминтофауны лягушек этого водоема был максимальным для исследованных выборок и составлял 0.54.
Индекс Пиелу (е, табл. 1), характеризующий эквитабельность (выравненность) паразитофау-ны зеленых лягушек, имел сопоставимые значения в популяции точки 1 (оз. Свято) (е =
0.95), точки 2 (оз. Сормовской ТЭЦ) (е = 0.94), точки 4 (оз. очистных сооружений в Артемов-ских лугах г. Нижнего Новгорода) (е = 0.86). Существенное отличие показателя выравненно-сти в популяции точки 3 (е = 0.46; оз. Парковое)
Таблица 2
Анализ различий видового разнообразия гельминтофауны озерных лягушек
________(P. ridibundus (Pallas 1771)) по индексу Шеннона (Н)___________________________
Показатель Место отлова
Точка 1 (условный контроль) Точка 2 Точка 3 Точка 4
Индекс видового разнообразия Шеннона (Н) 1.97 1.70 0.95 0.95
Величина дисперсии 0.017 0.014 0.001 0.01
¿-критерий Стьюдента t1-2 = 0.87; t1-3 = 4.25; t1-4 = 2.04; t2-3 = 3.04; t2-4 = 1.49
Уровень значимости, р* p¡. 2 = 0.5; p1-3 = 0.001; p1-4 = 0.004; p2-3 = 0.05; p2-4 = 0.02
* С учетом поправки Бонферрони при множественных сравнениях производилась коррекция уровня статистической значимости: р = 0.05/6 = 0.008
связано, по-видимому, с доминированием в па-разитофауне зеленых лягушек двух видов нематод: Rhabdias bufonis (доля вида 0.7) и Rhabdias rubrovenosus. (доля вида 0.17).
Индекс фаунистического сходства Сьеренсена в анализируемых выборках практически не выявил сходства фаун гельминтов. Отметим лишь невысокий уровень сходства видового состава гельминтофауны озерных лягушек точки 3 с выборкой из популяции зеленых лягушек, обитающих в естественном водоеме (точка 1) (Q = 0.25) и с выборкой точки 4 (Q = 0.36).
Анализ лейкоцитарной формулы озерных лягушек, не имеющих паразитов и обитающих на городской территории, показал, что наиболее чувствительны к условиям среды лейкоцитарные клетки гранулоцитарного ряда. Ухудшение условий среды приводило к снижению в крови лягушек доли миелоцитов и юных форм ней-трофильных гранулоцитов. Так, у особей, обитающих в условиях IV балла качества среды (точка 2), число миелоцитов в периферической крови снижалось в 4.5 раза по отношению к условному контролю (U = 2.71, p = 0.03).
Отметим, что качество среды определяло и снижение числа базофильных гранулоцитов в 3.5 раза (U = 2.96, р = 0.017) в крови озерных лягушек, не имеющих паразитов, но обитающих в критических условиях среды (точка 4). Значительных изменений в соотношении агранулоци-тов в лейкоцитарной формуле озерных лягушек с ухудшением качества среды не отмечено, что может быть обусловлено достаточным уровнем адаптации амфибий к специфическим условиям урбанизированной территории.
При сравнении критерием Манна-Уитни (U) лейкограмм зараженных и незараженных гельминтами озерных лягушек Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771), у особей точки 4 (оз. очистных сооружений в Артемовских лугах г. Нижнего Новгорода) выявлены различия в количе-
ственном содержании агранулоцитов (моноцитов и лимфоцитов). При этом показано статистически значимое снижение доли моноцитов (Ц = 2.21; р = 0.03) и возрастание доли лимфоцитов (Ц = 2.15; р = 0.03) у озерных лягушек, зараженных гельминтами. Во всех остальных биотопах, включая условно контрольный водоем, значимых различий в содержании лейкоцитарных клеток между зараженными и незара-женными особями не выявлено, что подтверждалось значением индекса интоксикации и индекса сдвига лейкоцитарных формул крови этих животных.
Периферическая кровь озерных лягушек, зараженных гельминтами и обитающих в точке 2, характеризовалась пониженным содержанием миелоцитов и юных форм нейтрофильных гра-нулоцитов по сравнению с условным контролем (Ц = 1.98, р = 0.04). В крови лягушек, характеризующихся наиболее обильной паразитофау-ной (точка 3, оз. Парковое), выявлено статистически значимое возрастание доли эозинофилов (Ц = 2.73, р = 0.006). Для выяснения взаимосвязи между показателями лейкоцитарной формулы мы воспользовались непараметрическим критерием Спирмана (г), не требующим нормального распределения и показывающего, в какой степени изменения значения одного показателя сопровождаются изменениями другого показателя в данной выборке. Результаты корреляционного анализа выявили статистически значимую корреляцию для пяти пар показателей: миелоциты и палочкоядерные нейтрофиль-ные гранулоциты (г = 0.75, р = 0.020); миелоциты и эозинофилы (г = 0.72, р = 0.027); миелоциты и лимфоциты (г = - 0.77, р = 0.015); палочкоядерные нейтрофилы и лимфоциты (г = = - 0.74, р = 0.022); базофилы и лимфоциты (г = = - 0.76, р = 0.017) (табл. 3). Полученный результат выявляет у зараженных особей наличие прямой (положительной) причинно-следственной
Таблица 3
Значения коэффициента корреляции Спирмана при анализе связи между показателями лейкоцитарной __________формулы озерных лягушек, зараженных гельминтами (оз. Парковое, г. Н. Новгород)_______________
Показатель Миело- циты Палочкоядерные ней-трофилы Сегментоядерные ней-трофилы Эозино- филы Базо- филы Моно- циты Лимфо- циты
Миелоциты 1.00 0.75, р = 0.020 0.59, р = 0.096 0.72, р = 0.027 0.36, р = 0.334 0.05, р = 0.878 - 0.77, р = 0.015
Палочкоядерные ней-трофилы 1.00 0.51, р = 0.156 0.60, р = 0.088 0.34, р = 0.368 0.11, р = 0.764 - 0.74, р = 0.022
Сегментоядерные ней-трофилы 1.00 0.22, р = 0.569 0.39, р = 0.295 - 0.33, р = 0.387 - 0.40, р = 0.282
Эозинофилы 1.00 0.13, р = 0.729 - 0.10, р = 0.794 - 0.61, р = 0.079
Базофилы 1.00 0.61, р = 0.080 - 0.76, р = 0.017
Моноциты 1.00 - 0.54, р = 0.127
Лимфоциты 1.00
Таблица 4
Анализ связи доли лейкоцитарных клеток в периферической крови от обилия паразитов в теле озерных лягушек
Тип клеток Коэффициент корреляции (г) Уровень значимости (р)
Миелоциты 0.35 0.10
Палочкоядерные нейтрофилы 0.18 0.39
Сегментоядерные нейтрофилы 0.18 0.39
Эозинофилы 0.71 0.0002
Базофилы -0.03 0.90
Моноциты -0.0005 0.99
Лимфоциты -0.50 0.014
связи между миелоцитами, палочкоядерными нейтрофилами и эозинофилами и обратной (отрицательной) связи между миелоцитами и лимфоцитами. Повышение относительного содержания в периферической крови незрелых ней-трофильных клеток (в том числе миелоцитов) объясняется токсическим и аллергенным действием чужеродных белков гельминтов. Макрофаги, в том числе эозинофилы, являясь первичными эффекторными клетками, активно фагоцитируют чужеродные белки, участвуя в развитии иммунитета. Возрастание доли эозинофи-лов в крови зараженных особей можно рассматривать как признак своеобразной защитной (антитоксической) реакции организма, компенсирующей снижение числа лимфоцитов, продуцирующих защитные белки, иммуноглобулины. Отметим, что лейкограммы зараженных особей характеризовались большим числом линейных связей между гематологическими показателями по сравнению с незараженными особями, у которых были выявлены только две зависимые пары показателей: палочкоядерные нейтрофильные
гранулоциты и базофилы (г = 0.85, р = 0.005) и лимфоциты и базофилы (г = - 0.80, р = 0.014).
Выявлена умеренная корреляционная связь между обилием паразитов и показателями лейкоцитарной формулы, свидетельствующая о том, что при наличии большого числа паразитов в крови озерных лягушек значимо возрастает доля эозинофилов (г = 0.70, р = 0.0002) и снижается доля лимфоцитов (г = - 0.504, р = 0.014) (табл. 4), что свидетельствует о напряженности иммунных реакций организма хозяина. Уравнение регрессии, аппроксимирующее линейную зависимость между числом лимфоцитов в крови и наличием гельминтов в теле озерных лягушек, имело вид
у = 73.71 -0.22х (Я2 = 0.25,р = 0.0141).
Уравнение регрессии, аппроксимирующее линейную зависимость между числом эозино-филов и наличием гельминтов имело вид
у = 5.4582 + 0.146х (Я2 = 0.499,р = 0.0002).
В результате анализа выявленных зависимостей установлено, что примерно на 25% (показа-
тель детерминации R2 = 0.25) дисперсия числа лимфоцитов может быть объяснена дисперсией числа паразитов. В свою очередь анализ зависимости числа эозинофилов и наличия паразитов, показывает, что примерно на 50% (R2 = 0.499) дисперсия доли эозинофилов в крови амфибий объясняется дисперсией числа паразитов. Соответственно влияние характеристик среды, разных экологических условий и других неучитываемых показателей на возрастание доли эозинофилов в крови амфибий составляет также около 50%.
Основной функцией лимфоцитов, как известно, является участие в иммунных реакциях, представляющих собой цепь молекулярных и клеточных событий, которые разворачиваются в ответ на поступление в организм антигенов [22]. Связь между иммунитетом и гельминтоза-ми достаточно сложная. Гельминты, несущие широкий спектр поверхностных антигенов, распознаются хозяином как нечто генетически чужеродное, вызывая патологические и ответные иммунологические реакции [12, 13]. Напомним, что развитию паразита в организме хозяина способствует и такой феномен, как иммунологическая индукция, которая заключается в способности гельминта изменять процесс синтеза белка с образованием общих белковых антигенов [12]. Поэтому иммунитет при гельминтозах бывает неярко выражен, характеризуется слабым напряжением и кратковременным действием, зависит от физиологических и экологических особенностей гельминтов [13] и проявляется в снижении доли лимфоцитов в периферической крови зараженных особей.
По своим цитохимическим свойствам эозинофильные гранулоциты являются наиболее функционально активными элементами крови у амфибий, обеспечивая защитные реакции организма к гельминтофауне. Макрофаги, в том числе эозинофилы, являются первичными эф-фекторными клетками, которые наиболее активно и действенно борются с паразитом и одновременно участвуют в развитии иммунитета. Специфической функцией эозинофилов считается антипаразитарная, и при паразитарных инвазиях наблюдается резкое возрастание в крови доли эозинофилов.
Таким образом, по изменению соотношения субпопуляций лейкоцитарных клеток в периферической крови зеленых лягушек можно судить о степени нарушений, вызванных наличием паразитов и условиями среды обитания. Анализ лейкоцитарной формулы озерных лягушек, не имеющих паразитов и обитающих в качественно разных условиях среды, показал, что наиболее чувствительны к условиям среды лейкоци-
тарные клетки гранулоцитарного ряда: незрелые нейтрофильные и базофильные гранулоциты. Перераспределение доли агранулоцитов в лейкоцитарной формуле отмечено при паразитарных инвазиях. У особей, зараженных гельминтами и обитающих в качественно разных условиях среды, выявлено снижение относительного содержания незрелых форм нейтро-фильных гранулоцитов и повышение доли эо-зинофилов в периферической крови. Установлена зависимость возрастания доли эозинофильных гранулоцитов и снижения доли лимфоцитов в крови озерных лягушек от обилия паразитов.
Список литературы
1. Леонтьева О.А., Семёнов Д.В. Земноводные как биоиндикаторы антропогенных изменений среды // Успехи совр. биол. 1997. Т. 117. № 6. С. 726-736.
2. Большаков В.Н., Пястолова О.А., Вершинин
В.Л. Специфика формирования видовых сообществ животных в техногенных и урбанизированных ландшафтах // Экология. 2001. № 5. С. 343-354.
3. Чернышова Э.В., Старостин В.И. Периферическая кровь лягушек рода Rana - тест-система для оценки окружающей среды // Изв. РАН. Сер. биол.
1994. № 4. С. 656-660.
4. Вершинин В.Л. Гемопоэз бесхвостых амфибий - специфика адаптациогенеза видов в современных экосистемах // Зоологический журнал. 2004. Т. 83. № 11. С. 1367-1374.
5. Романова Е.Б, Романова О.Ю. Особенности лейкоцитарной формулы периферической крови зеленых лягушек в условиях антропогенной нагрузки // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2003. Т. 39. № 4 С. 384-387
6. Силс Е.А. Сравнительный анализ гематологических показателей остромордой (Rana arvalis, Nilsson, 1842) и озёрной (Rana ridibunda, Pallas, 1771) лягушек городских популяций // Вестник ОГУ. 2008. № 10 (92). С. 230-235.
7. Cooper E.L. Immunity mechanisms // Physiology of the amphibian / Ed. B. Lofts. Academic Press, Inc, 1976. V. 3. P. 163-272.
8. Manning M.I., Horton J.D. RES structure and function of the Amphibia // The Reticuloendothelial system: a Comprehensive Treatise / Eds. N. Cohen, M.M. Siegel N. Y., L.: Plenum Press, 1982. V. 3. P. 393.
9. Рыжиков К.М., Шарпило В.П., Шевченко Н.Н. Гельминты амфибий фауны СССР. М.: Наука, 1980. 279 с.
10. Резванцева М.В. Возрастные особенности гельминтофауны зеленых лягушек (Rana esculenta complex) на востоке Центрального Черноземья // Вестник ТГУ. 2010. Т. 15. Вып. 2. С. 646-659.
11. Начева Л.В., Ткаченко Т.С., Додонов М.В., Воробьева Е.И., Басов А.В. Ксенопаразитарный барьер как защитная реакция при воспалении разного генеза // Успехи современного естествознания. 2007. № 8. С. 41-43.
12. Малютина Т.А. Взаимоотношения в системе паразит-хозяин: биохимические и физиологические аспекты адаптации (ретроспективный обзор) // Российский паразитологический журнал. 2008. № 1. С. 1-17.
13. Шевкопляс В.Н., Лопатин В.Г. Влияние гель-минтозов на течение иммунологических процессов у животных // Российский паразитологический журнал. 2008. № 4. С. 94-101.
14. Чихляев И.В., Файзулин А.И. Использование гельминтологических данных при исследовании формирования ареалов бесхвостых земноводных (Anura, Amphibia) Волжского бассейна // В кн.: Теоретические проблемы экологии и эволюции. Тольятти: ИЭВБ РАН, 2010. С. 209-214.
15. Методические рекомендации по выполнению оценки качества среды по состоянию живых существ (оценка стабильности развития живых организмов по уровню асимметрии морфологических структур). М.: Росмэкология, 2003. 24 с.
16. Гелашвили Д.Б., Охапкин А.Г., Доронина А.И. и др. Экологическое состояние водных объек-
тов Нижнего Новгорода: монография. Нижний Новгород: Изд-во ННГУ, 2005. 414 с.
17. Банников А.Г., Даревский И.С., Ищенко В.Г., Рустамов А.К., Щербак Н.Н. Определитель земноводных и пресмыкающихся фауны СССР. М.: Просвещение, 1977. 415 с.
18. Шляхтин Г.В., Голикова В.Л. Методика полевых исследований экологии амфибий и рептилий. Саратов: Изд-во Саратовского ун-та, 1986. 78 с.
19. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золот-ницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987. 368 с.
20. Судариков В.Е. К фауне гельминтов позвоночных Среднего Поволжья // Труды ГЕЛАН, 1951.
С. 326-330.
21. Мэгарран Э. Экологическое разнообразие и его измерение. М.: Мир, 1992. 184 с.
22. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Истамов Х.И.
Экологическая иммунология. М.: Изд. ВНИРО,
1995. 237 с.
LEUKOGRAM CHANGES IN THE MARSH FROG (PELOPHYLAX RIDIBUNDUS PALLAS, 1771) WITH HELMINTHIASES
E.B.Romanova, G.A Fadeeva, K.S. Vershinina, V.Yu. Nikolaev
The study of features of peripheral blood leukograms of marsh frogs Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771 habitat-ing urban lakes has revealed the changes in their blood under the action of pollution and parasite invasion. Neutrophil granulocytes are found to be the most environmentally sensitive. Redistribution of agranulocytes (lymphocyte/monocyte ratio) is typical of parasite invasion. Increases in the relative content of eosinophil granulocytes and the decline of lymphocytes as dependent on parasite abundance have been established.
Keywords: leukogram, helminthiases, marsh frog (Pelophylax ridibundus Pallas, 1771).
