ИЗМЕНЕНИЕ ФЕНОТИПА И МОРФОЛОГИИ КЛЕТОК МИКРОГЛИИ ПРИ ТРАВМЕ СПИННОГО МОЗГА РАЗЛИЧНОЙ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

229

направлена на выявление значимой для современной клинической медицины проблемы, заключающейся в выраженной вариабельности биологических эффектов, наблюдаемых при имплантации аналогичных КФС-материалов — от эффективной аугментации костной ткани до полного отторжения импланта, сопровождающегося разрушением собственной костной ткани.

С использованием подхода низкотемпературной химической трансформации получены КФС различного фазового состава и морфологии поверхности и проведены комплексные in vitro и in vivo исследования потенциала интегративного, индуцирующего, регенеративного, иммуногенного и провоспалительного потенциала соединений, являющихся участниками цикла естественной биоминерализации костной ткани. Установлено, что ДКФД, ОКФ и ГАп дозозависимо модулируют жизнеспособность, пролиферативную активность, адгезию и миграцию остеобластных клеток в условиях in vitro, а также ингибируют провоспалительную активацию миелоидных клеток врожденного иммунитета (макрофагов), но не влияют на активацию клеток адаптивного иммунитета (T-и B-лимфоцитов). При этом, в условиях in vivo, на модели адъювант-индуцированного хронического латентного асептического воспаления у крыс моделированным хроническим воспалением) выявлено достоверное повышение общего количества лейкоцитов (в 1,8-2 раза, р<0,05) и моноцитов (увеличение в 2,5-2,7 раза, р<0,05) при имплантации ОКФ и ГАп, но не ДКФД. При имплантации тех же материалов животным с нормальным иммунным статусом каких-либо достоверных изменений в показателях крови не выявлено. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант РНФ № 21-73-20251 «Влияние структурных и фазовых трансформаций кальцийфосфатных соединений на механизмы биоинтеграции или отторжения материалов, предназначенных для регенерации костной ткани»).

Литература:

1. Yamada S., Tokumoto M., Tatsumoto N, et al. Am J Physiol Renal Physiol. 2014;306(12): F1418-28.

2. Beghdadi W., Madjene L.C., Benhamou M. et al. Front Immunol.

2011; 2: 37.

ИЗМЕНЕНИЕ ФЕНОТИПА И МОРФОЛОГИИ КЛЕТОК МИКРОГЛИИ ПРИ ТРАВМЕ СПИННОГО МОЗГА РАЗЛИЧНОЙ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ

А.В. Тимофеева, Э.Р. Ахметзянова

Казанский (Приволжский) Федеральный Университет, Казань, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: микроглия, фенотип, травма спинного мозга крысы.

В последнее десятилетие идет активное изучение поведения клеток микроглии при различных поражениях центральной нервной системы, в том числе исследования поляризации данных клеток при травме спинного мозга (ТСМ). Считается, что полученные результаты могут открыть широкие перспективы для терапии пациентов не только с повреждением спинного мозга, но и другими неврологическими заболеваниями, в патогенезе которых активную роль играют клетки микроглии. В нашей работе мы провели количественную оценку различных популяций клеток микроглии нейротоксического (М1)

и нейропротективного (М2а) фенотипа в хронический период (60 сутки) ТСМ различной степени тяжести как в области приближенной к эпицентру повреждения (Th9), так и на удалении от него (L2-L3).

Крысам породы Wistar наносили контузионную ТСМ легкой (1,5 м/с), средней (2,5 м/с) и тяжелой (4 м/с) степени тяжести при помощи импактора на уровне Th8. Количественную оценку клеток микроглии на фоне ТСМ проводили путем иммуногистохимического анализа с использованием антител к Iba1+/CD40+(M1 фенотип) и 1Ьа1+/ТЭР-р+(М2а фенотип) в зонах передних канатиков (VF), передних рогов (VH) и кортикоспинального тракта (CST). Количество 1ьа1+-клеток на 60 сутки после повреждения различной тяжести было достоверно выше в области Th9 с максимальным значением в зоне CST при сравнении с удаленными от эпицентра ТСМ участками L2-L3. При оценке Iba1+/CD40+-клеток было обнаружено, что в зоне CST их количество выше при травме 2,5 и 4 м/с в области Th9, данный показатель снижается на удалении к L2-L3, но остается достоверно выше при сравнении с интактным контролем. Количество Iba1+/TGF-p+-клеток не претерпевало значимых изменений на фоне ТСМ различной степени тяжести на уровне Th9. Однако на удалении от места травмы (L2-L3) было обнаружено достоверное увеличение количества Iba1+/TGF-p+-клеток в области CST и VH в группе 1,5 м/с при сравнении с интактным контролем и группой с тяжелой степенью ТСМ (4 м/с). Также стоит отметить, что в области CST и задних канатиков было отмечено скопление клеток микроглии кольцевидной формы (annular-shaped microglia) [1] в области приближенной к эпицентру травмы Th9, а также на значительном расстоянии от него (C6-C7). При этом клетки микроглии с указанной морфологией отсутствовали в области каудальнее от повреждения L2-L3.

Таким образом, после ТСМ различной степени тяжести наибольшие изменения в распределении М1 фенотипа микроглии были обнаружены в месте приближенном к эпицентру травмы, а именно на уровне Th9, в то время как в отдаленной области (L2-L3) отмечены изменения в популяции как М1, так и М2а. Работа выполнена в рамках Программы стратегического академического лидерства Казанского Федерального Университета (ПРИ0РИТЕТ-2030) и при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 20-34-90060.

Литература:

1. Akhmetzyanova E.R. et al. Frontiers in molecular neuroscience. - 2021. - Т. 14.

ВАСКУЛЯРИЗАЦИЯ ЗОНЫ ЗАЖИВЛЕНИЯ СТЕНКИ МАТКИ КРЫСЫ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ КОНДИЦИОНИРОВАННОЙ СРЕДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ АУТОЛОГИЧНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ КЛЕТОК В ГИПОКСИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ

Н.Б. Тихонова1, А.А. Темнов2 3, В.В. Алексанкина1, А.П. Милованов1, Т.В. Фокина1, А.Н. Склифас3

1 НИИМЧ им. акад. А.П. Авцына ФГБНУ РНЦХ им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия

2 МФТИ, Москва, Россия

3 ИБК РАН, Пущино, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: заживление, матка крысы, кондиционированная среда культивирования, мезенхимальные клетки, васкуляризация.

Гены & Клетки XVII, №3, 2022