Исследование взаимодействия опухоли и стволовых клеток с использованием генетического маркирования и флуоресцентного биоимиджинга

Мелешина А.В.; Черкасова Е.И.; Сергеева Е.А.; Киселева Е.В.; Дашинимаев Э.Б.; Ширманова М.В.; Загайнова Е.В.

34

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ XI ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ..

Т.А. Маньчева, Д.В. Демидов, П.М. Канаев, Н.А. Плотникова, С.П. Кемайкин ДИНАМИКА МОРФОГЕНЕЗА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ ПРИ КОРРЕКЦИИ МЕЛАТОНИНОМ И МЕТФОРМИНОМ

ФГБОУ ВПО «Мордовский госуниверситет им. Н.П. Огарева», Саранск

К числу наиболее значимых направлений современной медицины относятся исследования закономерностей канцерогенеза и возможной фармакологической коррекции развития злокачественных новообразований.

Задачи исследования. Изучение процессов морфогенеза опухолевой ткани при использовании мелатонина и метформина в условиях экспериментальных неоплазий, индуцированных бенз(а)пиреном.

Материалы и методы. Эксперимент проведен на 200 самках нелинейных белых мышей которые были поделены на три группы по 50 мышей, оставшиеся 50 мышей (4-я группа) служили интактным контролем. Моделировали индуцированный бенз(а)пиреном опухолевый рост кожи, с коррекцией в экспериментальных группах мелатонином и метформином.

Результаты. В эксперименте у мышей контрольной группы формировались опухолевые узелки В экспериментальных группах введение мелатонина и метформина не привело к статистически значимому изменению времени появления первого опухолевого узла и составило в среднем 86 суток. При морфологическом исследовании опухолевых узлов в группе контроля по канцерогенезу развивался плоскоклеточный рак кожи, представленный атипичными, полиморфными, гиперхромными опухолевыми клетками разной степени дифференцировки. В подавляющем большинстве случаев выявлялся плоскоклеточный орогове-вающий рак с формированием специфических «раковых жемчужин». В центральной части опухолевых про-лифератов вторичные изменения. В отдельных случаях была выявлена морфологическая картина плоскоклеточного неороговевающего рака кожи. В легочной ткани мышей обнаруживались множественные метастатические узлы. При изучении патогистологической структуры индуцированных бенз(а)пиреном опухолей кожи у мышей на фоне коррекции мелатонином и метформином не встречались случаи плоскоклеточного неорого-вевающего рака, с единичными метастазами.

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о снижении темпов опухолевой прогрессии на фоне применения мелатонина и метформина.

--------------1-------------1------------2------------з----------------3-------------------------

А.В. Мелешина , Е.И. Черкасова , Е.А. Сергеева , Е.В. Киселева , Э.Б. Дашинимаев ,

М.В. Ширманова1, Е.В. Загайнова1

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ОПУХОЛИ И СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАРКИРОВАНИЯ И ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО БИОИМИДЖИНГА

1 Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород 3Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, Москва

В настоящее время активно обсуждаются возможные механизмы участия стволовых клеток мезенхимального происхождения в туморогенезе: при модулировании иммунного ответа организма, в создании ниши для поддержания роста и жизнедеятельности опухолевых клеток, в ангиогенезе опухоли и в образовании метастазов. В данной работе исследована модель «реципиент-опухоль-стволовые клетки», с использованием мышей линий D2xJ (nude), клеточной культуры опухоли (Hela kyoto) и стволовых клеток стромы жировой ткани человека (СКЖТ), генетически меченых красным флуоресцентным белком Turbo FP635. Для идентификации селективности накопления и анализа распределения в организме реципиента флуоресцентно меченых клеток использовались методы флуоресцентного поверхностного прижизненного имиджинга и лазерной сканирующей флуоресцентной микроскопии. Методом биоимиджинга in vivo в группах животных с комплексным введением стволовых клеток была детектирована флуоресценция в области селезенки на 5 - 9 день после инъекции меченых СКЖТ, которая сохранялась до 10 - 14 сут. В группе с локальным введением стволовых клеток (в область опухоли) мест их локализации выявлено не было. Для верификации распределения и выявления ниш стволовых клеток в тканях животного была применена лазерная сканирующая конфокальная микроскопия (Axiovert 200M LSM 510 META (Carl Zeiss), Германия). Для идентификации экзогенной флуоресценции белка Turbo FP635 регистрировали спектральные данные с 12 внутренних органов и опухолевой ткани реципиента. Скопления клеток со спектральными характеристиками, соответствующими флуоресцентному белку Turbo FP635 обнаружены в опухолевой ткани и костном мозге животных при локальном введении меченых СКЖТ, а также в легких при их системном введении. Полученные данные позволяют сделать вывод, что СКЖТ при системном введении интегрируют в селезенку и могут быть детектированы прижизненным имиджингом, а при системном и местном - в селезенку, костный мозг, легкие, опухолевые ткани реципиента и детектируется методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии.

№ 2/том 11/2012

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Мелешина А. В., Черкасова Е. И., Сергеева Е. А., Киселева Е. В., Дашинимаев Э. Б.