ИССЛЕДОВАНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ДИПЕПТИДНОГО МИМЕТИКА НЕЙРОТРОФИНА BDNF ГСБ-106 С ТИРОЗИНКИНАЗНЫМ РЕЦЕПТОРОМ TRKB С ПОМОЩЬЮ ТЕХНОЛОГИИ ПОВЕРХНОСТНОГО ПЛАЗМОННОГО РЕЗОНАНСА Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

жыщтшт шиим тюшш сщш

Исследование взаимодействия дипептидного миметика нейротрофина BDNF ГСБ-106 с тирозинкиназным рецептором TrkB с помощью технологии поверхностного плазмонного резонанса

Тарасюк А. В.1, Мезенцев Ю. В.2, Гнеденко О. В.2, Поварнина П. Ю .1, Иванов А. С.2

1 - ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва, Российская Федерация 2 - ФГБНУ «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича» (ИБМХ),

Москва, Российская Федерация

Аннотация. Методом поверхностного плазмонного резонанса изучено взаимодействие дипептидного миметика нейротрофина BDNF ГСБ-106 со специфическим для полноразмерного нейротрофина тирозинкиназным TrkB рецептором. Показано достоверное снижение связывания BDNF с TrkB, который был предварительно проинкубирован с ГСБ-106. Полученные данные указывают на взаимодействие ГСБ-106 с TrkB-рецептором. Ключевые слова: нейротрофин; BDNF; TrkB; димерный дипептид миметик; оптический биосенсор; поверхностный плазмонный резонанс Для цитирования:

Тарасюк А. В., Мезенцев Ю. В., Гнеденко О. В., Поварнина П. Ю., Иванов А. С. Исследование взаимодействия дипептидного миметика нейротрофина BDNF ГСБ-106 с тирозинкиназным рецептором TrkB с помощью технологии поверхностного плазмонного резонанса. Фармакокинетика и фармакодинамика. 2022;(4):50-54. https://doi.org/10.37489/2587-7836-2022-4-50-54

Поступила: 21 октября 2022 г. Принята: 17 ноября 2022 г. Опубликована: 24 декабря 2022 г.

Study of the interaction of the GSB-106 BDNF neurotrophin dipeptide mimetic with the TrkB tyrosine kinase receptor using surface

plasmon resonance technology

Tarasiuk AV1, Mezentsev YV2, Gnedenko OV2, Povarnina PYu1, Ivanov AS2

1 - FSBI «Zakusov Institute of Pharmacology», Moscow, Russian Federation

2 - Institute of Biomedical Chemistry (IBMC), Moscow, Russian Federation

Abstract. The interaction of the neurotrophin BDNF dipeptide mimetic, compound GSB-106, with the tyrosine kinase TrkB receptor specific for the full-sized neurotrophin was studied using surface plasmon resonance. The significant decrease in the binding of BDNF to TrkB, which was preincubated with GSB-106, was shown. The obtained data indicate the interaction of GSB-106 with the TrkB receptor.

Keywords: neurotrophin; BDNF; TrkB; dimeric dipeptide mimetic; optical biosensor; surface plasmon resonance

For citations:

Tarasiuk AV, Mezentsev YV, Gnedenko OV, Povarnina PYu, Ivanov AS. Study of the interaction of the GSB-106 BDNF neurotrophin dipeptide mimetic with the TrkB tyrosine kinase receptor using surface plasmon resonance technology. Farmakokinetika i farmakodinamika = Pharmacokinetics and pharmacodynamics. 2022;(4): 50-54. (In Russ). https://doi.org/10.37489/2587-7836-2022-4-50-54 Received: October 21, 2022. Accepted: November 17, 2022. Published: December 24, 2022.

Введение / Introduction

Мозговой нейротрофический фактор (brain derived neurotrophic factor, BDNF), относится к семейству нейротрофинов — эндогенных белков, которые играют ключевую роль в формировании нервной системы, поддержании её нормального функционирования и восстановлении в случае повреждений во взрослом организме [1]. Свои основные эффекты BDNF осуществляет через специфические тирозинкиназные TrkB рецепторы. Многочисленные экспериментальные и клинические данные свидетельствуют о целесообразности использования нейротрофинов и их рецепторов в качестве молекулярных мишеней для создания средств лечения неврологических и психиатрических заболеваний [2—4].

Применение нативных нейротрофинов в клинике оказалось безуспешным из-за фармакокинетических ограничений и серьёзных побочных эффектов. Пер-

спективным подходом для решения этих проблем полноразмерных нейротрофинов является создание их низкомолекулярных миметиков.

В НИИ фармакологии им. В.В. Закусова на основе структуры Р-изгиба 4-й петли BDNF (-Asp93-Ser94-Lys95-Lys96-) был получен димерный дипептид, соединение ГСБ-106 (гексаметилендиамид бис-(#-моносукцинил-Z-серил-Ь-лизина) (рис. 1) [5].

HOOC-(CH2)2-CO-Ser-Lys-NH HOOC-(CH2)2-CO-Ser-Lys-NH

Рис. 1. Структура миметика BDNF ГСБ-106 Fig. 1. Structure of the BDNF GSB-106 mimetic

жыщтшт шям д№шш ш^ммяшш СЩШ

Методом Вестерн-блот-анализа на клетках НТ-22 с использованием антител к фосфорилированной форме рецептора была показана активация TrkB рецептора при инкубации с ГСБ-106 в концентрации 10-8M [6].

ГСБ-106 в концентрациях 10-6—10-8 M проявлял нейропротекторную активность, защищая гиппокам-пальные нейроны линии HT-22 от окислительного стресса, с максимальным эффектом ~50 % от эффекта BDNF в его оптимальной концентрации10-9 М [6—8]. Нейропротекторный эффект был также выявлен на клетках HT-22 в условиях глутаматной токсичности и на клетках нейробластомы человека линии SH-SY5Y в условиях 6-OHDA — индуцированной токсичности [8], при этом в обоих случаях дипептид в концентрации 10-7 M проявлял такую же по выраженности активность, как и BDNF в концентрации 10-9 М.

Нейропротекторная активность ГСБ-106 была подтверждена in vivo на модели ишемического инсульта у крыс [6]. Кроме того, дипептид ГСБ-106 при системном введении проявлял выраженную антидепрессивную активность в батарее тестов и моделей на грызунах [9—12]. Эта активность полностью блокировалась специфическим антагонистом TrkB рецепторов [13].

Таким образом, результаты in vitro и in vivo исследований косвенно свидетельствуют о взаимодействии ГСБ-106 с TrkB рецептором, которое однако может быть и опосредованным.

Целью данной работы явилось подтверждение прямого взаимодействия ГСБ-106 с TrkB рецептором методом поверхностного плазмонного резонанса.

Материалы и методы / Materials and methods

Взаимодействие миметика BDNF ГСБ-106 с TrkB рецептором определялось с помощью метода поверхностного плазмонного резонанса на оптическом биосенсоре Biacore 3000 (Cytiva, США) с использованием чипа NTA (Cytiva, США). Регенерационный раствор (0,01 М HEPES, 0,15 М NaCl, 0,35 М ЭДТА, 0,005 % сурфактант P20, pH 8,3) и рабочий буфер (0,01 М HEPES, 0,15 М NaCl, 50 мкМ ЭДТА, 0,005 % сурфактант P20, pH 7,4) были получены от Cytiva. Экстраклеточный домен TrkB-ECD (Met1-His430), модифицированный по #-концу 6-ю остатками гисти-дина (HisTAG) был фирмы Sino Biological, КНР (каталожный номер 10047-H08H). Нейротрофин BDNF был фирмы Abcam, Великобритания (каталожный номер ab276774).

Соединение ГСБ-106 (гексаметилендиамид бис-(#-моносукцинил-Х-серил-Х-лизина) был синтезирован в отделе химии лекарственных средств ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» как описано в [5].

Эксперимент проводили по частично модифицированной методике [14]. Перед иммобилизацией рецептора TrkB на чипе его раствор (183 нМ) либо один (Контроль 1, К1), либо вместе с аналитами BDNF (360 нМ) (Контроль 2, К2) или ГСБ-106 (1 мМ) (Опыт,

ГСБ-106), инкубировали в течение 1 ч при температуре 4 °С в темноте (см. Схему эксперимента, рис. 2).

Иммобилизация TïkB рецептора. Перед каждой иммобилизацией TrkB поверхность чипа отмывалась инжекцией регенерационного раствора в течение 1 мин при скорости потока 30 мкл/мин. Активация поверхности рабочего канала осуществлялась инжекцией 0,5 мМ NiCl2 в рабочем буфере в течение 1 мин при скорости потока 30 мкл/мин. Далее проводили инжекцию предварительно инкубированных растворов, содержащих TrkB, в течение 10 мин при скорости потока 10 мкл/мин.

Выявление взаимодействия BDNF с иммобилизованным лигандом (TrkB) выполнялось при скорости потока 10 мкл/мин в рабочем буфере в течение 5 мин. Регистрировали сигнал биосенсора в единицах RU (Resonance Unit) на этапе иммобилизации рецептора и после инжекции BDNF. По изменению уровня сигнала биосенсора делали вывод о взаимодействии BDNF с рецептором.

После каждого анализа поверхность чипа обрабатывалась инжекцией регенерационного раствора в течение 3 мин при скорости потока 30 мкл/мин. Отмывка удаляет с поверхности чипа иммобилизованный TrkB и ионы никеля. Эксперимент повторяли дважды. Достоверность результатов оценивали по среднеквадратичному отклонению по выборке методом парного сравнения.

Обработка результатов / Processing of results

Рассчитывали средние значения уровня сигнала биосенсора по двум измерениям в контроле 1, контроле 1 и опыте. Рассчитывали изменение сигнала биосенсора после внесения BDNF. Для удобства межгрупповых сравнений это изменение нормализовали по отношению к уровню сигнала до внесения BDNF с использованием следующей формулы:

(уровень сигнала 2 — уровень сигнала 1))*1000/ уровень сигнала 1,

где: уровень сигнала 1 — до внесения BDNF, а уровень сигнала 2 — после внесения BDNF.

Достоверность результатов оценивали с использованием среднеквадратичного отклонения нормализованного изменения уровня сигнала в группах, а именно, если среднеквадратичные отклонения двух выборок не перекрывались, то различия считали статистически значимыми.

Результаты и их обсуждение / Results and their discussion

В настоящее время в литературе представлены данные по связыванию BDNF и его миметиков Betrofina 3, Betrofina 4 и 7,8-дигидроксифлавона (7,8-DHF) с TrkB [14, 15]. В публикации датских учёных из университета

исшэдшмий мшшшш д№шш вюшм^ сщш

Копенгагена [15] методом плазмонного резонанса на приборе Biacore 2000 ^асоге АВ, Швеция) с чипом СМ4, на котором ковалентно был иммобилизован ТгкВ, определены константы связывания BDNF, Вехойпа 3 и Betrofina 4 с рецептором ТгкВ — 5,4-10-10 М, 1,8-10-6 М и 1,3-10-6 М, соответственно. Научной группой из Университета Атланты (Джорджия, США) [14] методом плазмонного резонанса на приборе Biacore Т200 ^асоге АВ, Швеция) с чипом КТА, который использовался и в нашем исследовании, были получены следующие значения констант связывания соединений с ТгкВ - Кд(ВБ№) = 1,710-6 М и Кд(7,8-БОТ) = 1,54-10-5 М. Стоит отметить, что полученные меньшие значения констант К могут быть связаны с использованием исследователями [14] в качестве рабочего раствора фосфатного буфера, который за счёт осаждения на чип нерастворимого фосфата никеля приводит к завышению сигнала оптического биосенсора. В нашем же исследовании в рабочем растворе содержался ЭДТА, который способен переводить ионы никеля в раствор за счёт хелатирования, тем самым занижая итоговый сигнал биосенсора.

В нашем исследовании ТгкВ рецептор был ориентированно иммобилизован на поверхности NTA-чипа. Были проведены 3 эксперимента по связыванию BDNF с ТгкВ (рис. 2). В первом контрольном эксперименте (К1) рецептор был иммобилизован после инкубации и далее инжектировали раствор 360 нМ BDNF в рабочем буфере. В этих условиях сигнал биосенсора увеличился в среднем на 1330 RU по отношению к уровню сигнала до внесения BDNF (табл. 1, рис. 3), что свидетельствует о связывании нейротрофина с рецептором. Во втором контрольном эксперименте

Инкубация ТгкВ

Иммобилизация на чипе

Определение уровня связывания Инжекция BDNF

m tti Эксперимент

К1

Инкубация ТгкВ с BDNF

Инжекция BDNF

<?t * * ttt Эксперимент

• К2

Инкубация ТгкВ с ГСБ-106

Инжекция BDNF

; 4*. 'Ml ж Эксперимент

■ ГСБ-106

Г?

Рис. 2. Схема эксперимента по связыванию аналитов с TrkB

Примечания: К1 (Контроль 1) — инжекция BDNF после инкубации рецептора без аналита; К2 (Контроль 2) — инжекция BDNF после инкубации рецептора с BDNF; ГСБ-106 (Опыт) — инжекция BDNF после инкубации рецептора с ГСБ-106.

Fig. 2. Scheme of the experiment on the binding of analytes with TrkB

Notes: K1 (Control 1) — injection of BDNF after incubation of the receptor without analyte; K2 (Control 2) — injection of BDNF after incubation of the receptor with BDNF; ГСБ-106 (Опыт) - injection of BDNF after incubation of the receptor with GSB-106.

(К2) рецептор был предварительно проинкубирован с BDNF и далее иммобилизован на чипе. Инжекция раствора 360 нМ BDNF не приводила к изменению сигнала биосенсора, что указывает на то, что места связывания на рецепторе заняты (в предварительной инкубации). В третьем эксперименте (Опыт, ГСБ-106)

Таблица 1

Предварительная инкубации TrkB рецепторов с дипептидным миметиком BDNF ГСБ-106 ухудшает взаимодействие BDNF c TrkB

Table 1

Pre-incubation of TrkB receptors with the dipeptide mimetic BDNF GSB-106 worsens the interaction of BDNF with TrkB

Группа Условия эксперимента Уровень сигнала до инжекции BDNF, RU Изменение уровня сигнала после инжекции BDNF, RU Нормализованное изменение уровня сигнала после инжекции BDNF1, RU

Контроль 1 Инкубация TrkB + инжекция BDNF 1010±20 + 1350±40 +1330±60

Контроль 2 Инкубация TrkB с BDNF + инжекция BDNF 4700±200 0 0*

Опыт Инкубация TrkB с ГСБ-106 + инжекция BDNF 1240±20 +1170±90 +940±70*

Примечания: Данные поверхностного плазмонного резонанса. Уровень взаимодействия BDNF с TrkB определяли по изменению сигнала биосенсора до и после инжекции нейротрофина.

Данные представлены в виде средних по двум измерениям и среднеквадратичных отклонений.

1 — Для удобства межгрупповых сравнений изменение уровня сигнала после инжекции BDNF нормализовали с использованием следующей формулы: (уровень сигнала 2 — уровень сигнала 1)*1000/уровень сигнала 1, где: уровень сигнала 1 — до внесения BDNF, а уровень сигнала

2 — после внесения BDNF; * — статистическая значимость различий по отношению к контролю (среднеквадратичные отклонения выборок не перекрываются).

Notes: Surface plasmon resonance data. The level of interaction between BDNF and TrkB was determined by changing the biosensor signal before and after neurotrophin injection. The data are presented in the form of two-dimensional averages and standard deviations.

1 — For the convenience of intergroup comparisons, the change in signal level after injection of BDNF was normalized using the following formula: (signal level 2 — signal level 1))*1000/signal level 1, where signal level 1 is before the introduction of BDNF, and signal level 2 is after the introduction of BDNF; * — the statistical significance of the differences in relation to the control (the standard deviations of the samples do not overlap).

Oh U>

e я

йо? g

о .к

- a | 8

Sffg S

2-1=

[xj CO Mic

ojo 2 w

Q.® S Sfflfi о 3 g

^ ^ s

OO Q оЗы o^ g

to чЬ

VO U>

to

Л Ul

О

8 8P

§ Bo £ 8 g

с о •

сл ^СЛ Р о

р Р Г" 3

brl л ti*

с^Е-о

a PCTQ

P

СЛ

О rt П)

о 5'

Я- ^

£ 8 нР

Wo

о ^

w о

ft

ЙО? 2

2 л

2QB.8

Р

г-С сл ft

£

VO

80^

- Ра

^ЗГ*

^^ g

3

с рВ

О Р р

сго_ р: оо

° 3

о р

о о о

to

чЬ

VO и> to

(Л Л

I^hQ- А о О

о р ДН •

О ft

а ^^ а о

П. Р й Р *

* д ^ »

ГЧ pj

DBog.

>н I к o\

goSlo

в| Q s Pj

-2 5 п> а о

s S g 3 g * 6d3 « Я

wR а g

Я g

ЙО? rf

ZCjp p

I HH Pi ft

S BB *

vo • * Й o\ ¡=T

p

^ 2 -< 8 Q^ ox

H 13

г- й

сл ft Q. P P

clP Й

<л

td

Cd м

- ^ Cd ft

И « M

О О

Cd Р

tn Н

t-гн О Cd

^ ,_ft

2 о^ й о j;

о о о

о о о

чо

(Л

о

сл р

£2. 2Г

р Р р

^ о ьп <

ft Н-.

ft со г+

Р Я-'

ЙО? zns

ft

ii ^ ft ft £L^

° ^ Ss

M-jjir

trg cr p P. о

1-t сл i-t

P^J О О

rQ g^1

? з^ SS

г^ О

VO I GO

to '

p

C/5 >

?T

on

P

ЙГ-

gCTQ

S.3

a-p о -r

a-

Cd о

ft CfQ P

СЙ О

о о о

о о о

(Л

о

п td W

It1 И Д S

О

СП >

td н

о

>

td О d н н И w

s

н И

О »

•ГГ 65 О) ¿н

Изменение уровня сигнала биосенсора после внесения BDNF, RU

исшэдшмий мшшшш д№шш вюшм^ сщш

Гнеденко Оксана Валентиновна

e-mail: [email protected] ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-7426-9235 к. б. н., с. н. с. лаборатории межмолекулярных взаимодействий ИБМХ, Москва, Российская Федерация

Поварнина Полина Юрьевна Автор, ответственный за переписку

e-mail: [email protected]

ORCID ID: https://orcid.org/0000-0003-3278-8915

SPIN-код: 5498-6724

к. б. н., с. н. с. лаборатории пептидных

биорегуляторов отдела химии лекарственных

средств ФГБНУ «НИИ фармакологии имени

В.В. Закусова», Москва, Российская Федерация

Иванов Алексей Сергеевич

e-mail: [email protected]

ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-7022-6748

SPIN-код: 6456-4643

д. б. н., заведующий лабораторией

межмолекулярных взаимодействий ИБМХ,

Москва, Российская Федерация

Gnedenko Oksana V.

e-mail: [email protected] ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-7426-9235 PhD, Cand. Sci. Biology, Senior Researcher of the laboratory of molecular interactions, IBMC, Moscow, Russian Federation

Povarnina Polina Yu. Corresponding author

e-mail: [email protected]

ORCID ID: https://orcid.org/0000-0003-3278-8915

SPIN code: 5498-6724

PhD, Cand. Sci. Biology, Senior research scientist of the of laboratory of peptide bioregulators of medicinal chemistry department FSBI «Zakusov Institute ofPharmacology», Moscow, Russian Federation

Ivanov Alexey S.

e-mail: [email protected]

ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-7022-6748

SPIN code: 6456-4643

PhD, Cand. Sci. Biology, Head of the laboratory of molecular interactions, IBMC, Moscow, Russia of molecular interactions, IBMC, Moscow, Russian Federation

Список литературы / References

1. Skaper SD. Neurotrophic Factors: An Overview. Methods Mol Biol. 2018;1727:1—17. DOI: 10.1007/978-1-4939-7571-6_1.

2. Aloe L, Rocco ML, Balzamino BO, Micera A. Nerve Growth Factor: A Focus on Neuroscience and Therapy. CurrNeuropharmacol. 2015;13(3):294— 303. DOI: 10.2174/1570159x13666150403231920.

3. Cai J, Hua F, Yuan L, et al. Potential therapeutic effects of neurotrophins for acute and chronic neurological diseases. Biomed Res Int. 2014;2014:601084. DOI: 10.1155/2014/601084.

4. Castren E. Neurotrophins and psychiatric disorders. Handb Exp Pharmacol. 2014;220:461—479. DOI: 10.1007/978-3-642-45106-5_17.

5. Гудашева Т.А., Тарасюк А.В., Помогайбо С.В. и др. Дизайн и синтез дипептидных миметиков мозгового нейротрофического фактора. Биоорганическая химия. 2012;38(3):280—290. [Gudasheva TA, Tarasiuk AV, Pomogaibo SV, et al. Design and synthesis of dipeptide mimetics of brain-derived neurotrophic factor. J Biol Chem. 2012;38(3):280—290. (In Russ).]. DOI: 10.1134/s1068162012030053.

6. Gudasheva TA, Povarnina P, Logvinov IO, et al. Mimetics of brain-derived neurotrophic factor loops 1 and 4 are active in a model of ischemic stroke in rats. Drug Des Devel Ther. 2016;10:3545—3553. DOI: 10.2147/ DDDT.S118768.

7. Gudasheva TA, Povarnina P, Tarasiuk AV, Seredenin SB. The Low Molecular Weight Brain-derived Neurotrophic Factor Mimetics with Antidepressant-like Activity. Curr Pharm Des. 2019;25(6):729—737. DOI: 10.2174/1381612825666190329122852.

8. Логвинов И.О., Антипова Т.А., Гудашева Т.А. и др. Нейропро-тективные свойства дипептидного миметика мозгового нейротрофи-ческого фактора ГСБ-106 в экспериментах in vitro. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2013;155(3):319—322. [Logvinov IO, Antipova TA, Gudasheva TA, et al. Neuroprotective effects of dipeptide analogue of brain-derived neurotrophic factor GSB-106 in vitro experiments. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2013;155(3):319—322. (In Russ).].

9. Gudasheva TA, Povarnina PY, Tarasiuk AV, Seredenin SB. Low-molecular mimetics of nerve growth factor and brain-derived neurotrophic factor: Design and pharmacological properties. Med Res Rev. 2021;41(5):2746— 2774. DOI: 10.1002/med.21721.

10. Поварнина П.Ю., Гарибова Т.Л., Гудашева Т.А., Середенин С.Б. Дипептидный миметик мозгового нейротрофического фактора обладает свойствами антидепрессанта при пероральном введении. Acta Naturae. 2018;10(3(38)):88-92. [Povarnina PYu, Garibova TL, Gudasheva TA, Seredenin SB. Antidepressant Effect of an Orally Administered Dipeptide Mimetic of the Brain-Derived Neurotrophic Factor. Acta Naturae. 2018;10(3(38)):88-92. (In Russ).].

11. Межлумян А.Г, Таллерова А.В., Поварнина П.Ю., Сазонова Н.М., Тарасюк А.В., Гудашева Т.А. Скрининговое изучение эффектов миметиков фактора роста нервов и мозгового нейротрофического фактора на экспериментальной модели депрессии. Фармакокинетика и фар-макодинамика. 2020;(1):11—17. [MezhlumyanAG, TallerovaAV, Povarnina PYu, Sazonova NM, Tarasiuk AV, Gudasheva TA. Screening study of nerve growth factor's and brain-derived neurotrophic factor's mimetics effects at the experimental depression model. Farmakokinetika i farmakodinamika. 2020;(1):11-17. (In Russ).]. DOI: 10.37489/2587-7836-2020-1-11-17.

12. Поварнина П.Ю., Таллерова А.В., Межлумян А.Г. и др. Антидепрессивная активность димерного дипептидного миметика BDNF ГСБ-106 при однократном пероральном введении на модели социального стресса у мышей. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2020;83(4):3-7. [Povarnina PYu, Tallerova AV, Mezhlumian AG, et al. Dimeric dipeptide bdnf mimetic GSB-106 exhibits antidepressant-like activity upon single oral administration in mice under social stress model conditions. Eksperimentalnaya iKinicheskaya Farmakologiya. 2020;83(4):3—7. (In Russ).]. DOI: 10.30906/0869-2092-2020-83-4-3-7.

13. Gudasheva TA, Tallerova AV, Mezhlumyan AG, et al. Low-molecular weight bdnf mimetic, dimeric dipeptide GSB-106, reverses depressive symptoms in mouse chronic social defeat stress. Biomolecules. 2021:11(2):252. DOI: 10.3390/biom11020252.

14. Liu X, Obianyo O, Chan CB, et al. Biochemical and biophysical investigation of the brain-derived neurotrophic factor mimetic 7,8-dihydroxyflavone in the binding and activation of the TrkB receptor. J Biol Chem. 2014;289(40):27571-27584. DOI: 10.1074/jbc.M114.562561.

15. Fobian K, Owczarek S, Budtz C, et al. Peptides derived from the solvent-exposed loops 3 and 4 of BDNF bind TrkB and p75(NTR) receptors and stimulate neurite outgrowth and survival. JNeurosciRes. 2010:88(6):1170— 1181. DOI: 10.1002/JNR.22285.

54

ФАРМАКОКИНЕТИКА И ФШЩИШИКА