CC BY
4И. Н. Подольский, С. Ю. Штрыголь
ИССЛЕДОВАНИЕ ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНОГО ВЛИЯНИЯ 2-МЕТИЛ-3-ФЕНИЛАМИНОМЕТИЛХИНОЛИН-4-ОНА НА ИЗМЕНЕНИЯ ТИНКТОРИАЛЬНЫХ СВОЙСТВ НЕЙРОНОВ В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ КРЫС ПОСЛЕ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ
Национальный фармацевтический университет, г. Харьков, Украина
В статье приведены результаты морфологического исследования влияния 2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-она (атристамина) на изменения тин-кториальных свойств нейронов в сенсомоторной коре (СМК) больших полушарий и коре мозжечка головного мозга крыс в условиях экспериментальной черепно-мозговой травмы (ЧМТ). Показано, что на фоне модельной патологии развиваются значительные изменения в структурно-функциональной организации СМК и коры мозжечка головного мозга животных. При применении атристамина в дозе 100 мг/ кг с целью коррекции нарушений, вызванных ЧМТ, отмечена нормализация соотношения основных типов нейронов СМК практически до уровня интактного контроля. В клетках Пуркинье коры мозжечка уменьшалась выраженность хроматолиза и деструктивных изменений, сохранялась их упорядоченность. Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что церебропротекторное влияние атристамина (100 мг/кг) после ЧМТ носит более выраженный характер по сравнению срефе-ренс-препаратом пирацетамом (400 мг/кг).
Ключевые слова: 2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-он, черепно-мозговая травма, нейропротекторная активность, морфологическое исследование, тинкто-риальные свойства нейронов.
ВВЕДЕНИЕ
Травматические повреждения черепа и головного мозга составляют 30-40% всех травм и занимают первое место по показателям летальности и инвалидизации среди лиц трудоспособного возраста. По данным ВОЗ, каждый год в мире получают черепно-мозговую травму (ЧМТ) более 10 млн. человек [1]. При этом количество пациентов с ЧМТ из года в год растет, что актуализирует поиск новых и более эффективных средств для облегчения последствий перенесенной патологии.
ЧМТ инициирует ряд различных па-тобиохимических гуморальных реакций, которые опосредованно усиливают повреждение мозговой ткани, вызванное первичным механическим воздействием [2]. Поскольку не существует каких-либо способов коррекции первичного звена патогенеза - биомеханической альтерации ткани мозга, то основным направлением фармакотерапии является предотвращение развития вторичных процессов, которые включают высвобождение нейромедиа-торов, генерацию свободных радикалов, кальций-опосредованные повреждения, активацию генов, нарушения функций
митохондрий и воспалительные реакции [3]. Для этого в современной медицинской практике применяются различные группы лекарственных средств (ЛС), интегральным результатом действия которых является защита клеток мозга от гибели [4].
Одними из наиболее распространенных и социально значимых отдаленных последствий перенесенной ЧМТ являются депрессивные расстройства [5]. В долгосрочной перспективе пациенты в восстановительном периоде после ЧМТ в подавляющем большинстве случаев применяют ЛС из группы антидепрессантов [6]. Как следствие, актуальным остается вопрос поиска новых лекарственных средств, которые можно применять в медицинской практике с первых часов после ЧМТ как с целью нейропротекции, так и для профилактики возможных депрессивных расстройств.
Объектом данного исследования явля-ется2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-он (атристамин), который был синтезирован на кафедре медицинской химии Национального фармацевтического университета и изучается как перспективный антидепрессант с ноотропными свойствами (рисунок 1) [7-9].
Рисунок 1 - Структурная формула 2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-она (атристамина)
Ранее на модели экспериментальной ЧМТ с использованием поведенческих тестов (открытое поле, приподнятый крестообразный лабиринт, плавательный тест Порсолта, плавание с нагрузкой, удерживание на вертикальной сетке, экстраполяци-онное избавление) была доказана способность атристамина облегчать последствия перенесенной травмы [10]. Для различных антидепрессантов вообще характерны нейропротекторные свойства [11, 12]. Эти предпосылки послужили основанием для углубленного изучения церебропротектор-ных свойств исследуемого вещества.
Цель исследования: морфологическое изучение церебропротекторного влияния 2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-она на изменения тинкториальных свойств нейронов в головном мозге крыс при коррекции нарушений, возникающих вследствие ЧМТ.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование было проведено на базе ЦНИЛ НФаУ на 20 рандомбредных белых крысах-самках массой 200-240 г с соблюдением биоэтических требований в соответствии с положениями «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1986).
Протокол морфологического исследования был полностью гармонизирован с протоколом эксперимента, в котором изучалась нейропротекторная активность атристамина после ЧМТ с использованием поведенческих тестов [10].
Лабораторные животные были рандоми-зированы в 4 экспериментальные группы:
1) интактная группа (п=5) - животных наркотизировали без воспроизведения ЧМТ;
2) группа контрольной патологии (п=5)
- животных наркотизировали и воспроизводили ЧМТ без дальнейшего лечения;
3) группа атристамина (п=5) - животным на фоне модельной патологии вводили атристамин в дозе 100 мг/кг;
4) группа пирацетама (п=5) - животным на фоне модельной патологии вводили пирацетам в дозе 400 мг/кг.
2-Метил-3-фениламинометилхино-лин-4-он (атристамин) синтезировали ами-нометилированием 2-метил-1Н-хинолин-4-она по реакции Манниха с последующим переаминированием при взаимодействии с анилином [13]. В эксперименте использовали пирацетам в виде 20% раствора для инъекций (ПАТ «Фармак», Киев). Пира-цетам выбран для сравнения на основании того, что он рекомендуется действующим протоколом лечения ЧМТ [14], а доза (400 мг/кг) находится в диапазоне терапевтических в экспериментальной нейрофар-макологии [15, 16].
ЧМТ воспроизводили путем нанесения механической травмы грузом массой 50 г на теменно-затылочную область свода черепа крыс под легким эфирным наркозом. Груз опускали с высоты 60 см. Энергия удара составляла 0,294 Дж [17].
Атристамин и пирацетам вводили животным внутрижелудочно при помощи специального металлического зонда (атри-стамин в виде тонкой водной суспензии, стабилизированной твином-80; пирацетам
- в виде водного раствора) за 30 минут до индукции ЧМТ и один раз в сутки в течение последующих двух дней. Последнее введение - за 30 минут до извлечения мозга. Животные интактной группы и группы контрольной патологии получали эквивалентный объем изотонического раствора внутрижелудочно по аналогичной схеме.
Головной мозг извлекали у наркотизированных крыс (тиопентал-натрий, 60 мг/ кг, внутрибрюшинно) и целиком фиксировали в 96% этаноле, затем делали фронтальные срезы на уровне передних краев височных долей и коры мозжечка. Образцы заливали в целлоидин-парафин, резали на санном микротоме. Срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали тионином по методике Ниссля [18].
Просмотр микропрепаратов проводили под световым микроскопом ¿гапит, микрофотосъемки микроскопических изображений осуществляли цифровой виде-
окамерой Granum ДСМ 310. Фотографии обрабатывали на компьютере Pentium 2,4GHz с помощью программы Toup View.
В полученных микропрепаратах оценивали качественные изменения в нейронах сенсомоторной коры и клетках Пур-кинье коры мозжечка. Для углубленного изучения нарушений в СМК при помощи стандартной морфометрической сетки определяли относительное содержание нейронов основных структурно-функциональных типов (все слои), которые отличались между собой по интенсивности окраски и дифференцировались в соответствии с известными литературными данными [19, 20]. Все измерения выполняли в поле
зрения микроскопа (окуляр - 10, объектив - 40) в 5 повторностях.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В группе интактного контроля функциональное состояние пирамидных нейронов СМК находилось в пределах нормы (рисунок 2 а, см. обложку журнала). В перика-рионе преимущественного большинства нейронов содержался тигроид, который в виде базофильных мелких включений достаточно равномерно заполнял нейроплаз-му - нормохромные нейроны (79,5%), то есть клетки, которые находятся в состоянии умеренной активности (таблица 1).
Таблица 1 - Влияние атристамина и пирацетама на распределение основных структурно-функциональных типов нейронов СМК больших полушарий головного _мозга крыс после ЧМТ_
Группа животных Основные структурно-функциональные типы нейронов, % (min; max)
Нормохромные Гипохромные Гиперхромные Промежуточные
Интактный контроль 79,5 (78; 81) 6,8 (6,6; 7,5) 6,3 (5,9; 6,7) 6,7 (6,3; 7,9)
ЧМТ (контрольная патология) 63,7* (57; 64) 12 2* (9,9; '14,6) 10,8* (10,2; 11,9) 14,8* (12,6; 16,2)
ЧМТ + атристамин, 100 мг/кг 77,3* (69; 80) 7,3* (6,8; 10,8) 8,6* (7,5; 9,5) 6,8#/$ (6,3; 9,9)
ЧМТ + пирацетам, 400 мг/кг 68,7* (68; 72) 10,5* (10,0; 10,6) 8,6* (8,2; 10,0) 11,5* (10,7; 12,5)
Примечание: * - р<0,05 (критерий Манна-Уитни) относительно группы интактного контроля; # - р<0,05 (критерий Манна-Уитни) относительно группы контрольной патологии; $ - р<0,05 (критерий Манна-Уитни) относительно группы пирацетама.
Достаточно редко (6,3%) встречались гиперхромные нейроны (сплошное окрашивание клетки, ядро практически не просматривается). Считается, что такие клетки находятся в неактивном состоянии и представляют собой пул нейронов, за счет которых происходит функциональное восстановление мозга после различных повреждающих воздействий [21]. Наблюдались также и немногочисленные (6,8%) гипохромные нейроны (в нейроплазме снижено содержание тигроида, клетки имеют бледную окраску). Предполагается, что эти клетки долгое время находились на пике функциональной активности, а на момент исследования в них произошло истощение компенсаторных механизмов и, соответственно, снижение активности [21]. Кроме того, были дифференцированы (6,7%) промежуточные формы нейронов (IV типа) - клетки с признаками метаболических нарушений, для которых характер-
ными являются увеличенное в размерах ядро и конденсация хроматина при сохранении нормохромности цитоплазмы [22].
В большинстве клеток Пуркинье в коре мозжечка также наблюдался нормального состояния тигроид, который достаточно равномерно распределен по нейроплазме нейронов (рисунок 3 а, см. обложку журнала). Встречались отдельные гиперхром-ные клетки, которые характеризуются нечеткими очертаниями ядра.
У животных после перенесенной ЧМТ произошли значительные изменения в соотношении основных структурно-функциональных типов нейронов СМК (таблица 1). На фоне модельной патологии при отсутствии фармакокоррекции на 19,9% (р<0,05) уменьшилась численность нор-мохромных нейронов, возросло количество гипохромных (на 79,4%, р<0,05) и промежуточных (на 120,9%, р<0,05) нейронов. Отмечалось также значительное
увеличение числа гиперхромных нейронов - на 71,4% (р<0,05) относительно ин-тактного контроля.
У некоторых нейронов наблюдалась вакуолизация нейроплазмы, а также отмечались признаки хроматолиза (лизиса тигроида) различной степени выраженности (рисунок 2 б, см. обложку журнала), что является морфологическим свидетельством уменьшения резервных энергетических и пластических ресурсов этих клеток [23]. Большинство наблюдаемых гиперх-ромных нейронов имели признаки патологических изменений - сморщивание ядра и нейроплазмы.
В коре мозжечка после перенесенной травмы отмечалось распространение признаков хроматолиза среди клеток Пурки-нье. Более того, отмечались значительные зоны «выпадения, исчезновения» клеток Пуркинье из ряда (рисунок 3 б, см. обложку журнала).
У животных из группы, которой вводили атристамин, в популяции нейронов СМК по сравнению с группой контрольной патологии на 21,4% (р<0,05) была увеличена численность нормохромных нейронов (практически достигала уровня интактного контроля). На 40,2% (р<0,05) относительно группы нелеченных животных уменьшилось количество гипохром-ных нейронов и практически в 2,2 раза (р<0,05) - промежуточных (IV типа), то есть эти показатели также восстановились практически до уровня нетравмированных крыс (таблица 1).
Таким образом, на фоне лечения атри-стамином в целом уменьшается количество нейронов с признаками метаболического неблагополучия. Пул гиперхром-ных нейронов достоверно не изменяется сравнительно с контрольной патологией, однако при этом визуальных признаков патологических изменений в большинстве нейронов данного типа не отмечалось (рисунок 2 в, см. обложку журнала), что дает основания расценивать этот факт как увеличение численности клеток резерва. Значительное ослабление признаков хроматолиза в нейронах под влиянием атристами-на также следует отнести к проявлениям церебропротекторных свойств исследуемого вещества.
В коре мозжечка животных данной группы в клетках Пуркинье уменьшалась выраженность хроматолиза (рисунок 3 в,
см. обложку журнала), а также сохранялась их упорядоченность. Однако прослеживались отдельные случаи гипохромии.
При визуальном анализе микросрезов СМК и коры мозжечка животных, которым вводили пирацетам, были получены неоднозначные результаты по характеру влияния данного лекарственного средства на состояние нейронов (рисунки 2 г, 3 г, см. обложку журнала). Этот факт подтверждается и данными морфометрического анализа (таблица 1): количество нормох-ромных нейронов в данной группе увеличилось на 7,8% относительно контрольной патологии, а показатели для гипохромных, гиперхромных и промежуточных (IV типа) нейронов уменьшились на 13,4%, 20,4% и 22,3% соответственно, однако указанные изменения не достигали достаточного уровня достоверности. Таким образом, на фоне лечения пирацетамом наблюдается тенденция к ослаблению изменений структурно-функциональной организации исследованных отделов головного мозга крыс, которые связаны с черепно-мозговой травмой, а полученные результаты полностью согласуются с данными эксперимента с использованием поведенческих тестов [10].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. С целью экспериментального изучения церебропротекторной активности 2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-она (атристамина) при коррекции нарушений, возникающих вследствие перенесенной черепно-мозговой травмы (ЧМТ), проведено морфологическое исследование сенсомоторной коры больших полушарий и коры мозжечка (клетки Пуркинье) головного мозга крыс.
2. После индукции модельной ЧМТ у животных группы контрольной патологии произошли значительные изменения в соотношении основных структурно-функциональных типов нейронов СМК: достоверно уменьшилось количество нормох-ромных нейронов, а также резко возросла численность клеток с признаками метаболического неблагополучия. В коре мозжечка после перенесенной травмы отмечалось распространение признаков хроматолиза среди клеток Пуркинье, наблюдались значительные зоны «выпадения».
3. На фоне применения атристамина
(100 мг/кг) после ЧМТ отмечалась нормализация соотношения структурно-функциональных типов нейронов СМК практически до уровня интактного контроля. В клетках Пуркинье коры мозжечка уменьшалась выраженность хроматолиза и деструктивных изменений, сохранялась их упорядоченность, что свидетельствует о церебропротекторном влиянии исследуемого вещества в условиях данной модельной патологии.
4. При применении пирацетама (400 мг/кг) все исследуемые показатели имели тенденцию к нормализации, однако ни в одном из случаев различия не носили достоверного характера по сравнению с группой контрольной патологии.
5. Полученные результаты свидетельствуют о том, что после ЧМТ церебро-протекторное влияние атристамина носит более выраженный характер по сравнению с референс-препаратом пирацетамом, что полностью согласуется с интегральными эффектами исследуемого вещества в экспериментах с использованием поведенческих методик.
SUMMARY
I. M. Podolsky, S. Yu. Shtrygol RESEARCH OF THE CEREBROPROTECTIVE EFFECT OF 2-METHYL-3-PHENYLAMINOMETHYLQUINOLIN-4-ONE ON CHANGES OF TINCTORIAL PROPERTIES OF NEURONS IN RAT BRAIN AFTER TRAUMATIC BRAIN INJURY
The article presents the results of morphological study of the effect of 2-methyl-3-phe-nylaminomethylquinolin-4-one (atristamine) on changes of tinctorial properties of neurons in the sensorimotor cortex (SMC) of the cerebral hemispheres and the cerebellar cortex of rat brain in experimental traumatic brain injury (TBI) conditions. It has been shown that significant changes in the structural and functional organization of the SMC and the cerebellar cortex develop in the context of the model pathology. When applying atristamine in dose 100 mg/kg to correct disorders caused by head injury, the normalization of the ratio of main types of neurons in the SMC to the intact control level has been observed. The severity of chromatolysis and destructive changes in the Purkinje cells of cerebellum
cortex after administration of atristamine was reduced, and the order of cells was remained. Analysis of the results shows that the cerebro-protective effect of atristamine (100 mg/kg) after TBI is more pronounced as compared to the reference drug piracetam (400 mg/kg).
Keywords: 2-methyl-3-phenylamino-methylquinolin-4-one, traumatic brain injury, neuroprotective activity, morphological research, tinctorial properties of neurons.
ЛИТЕРАТУРА
1. Про затвердження та впроваджен-ня медико-технолопчних докумешив зi стандартизацп екстрено! медично! до-помоги: наказ МОЗ Украши №34 вщ 15.01.2014. - [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.moz.gov.ua/ua/ portal/dn_20140115_0034.html. - Дата доступа: 17.06.2015.
2. Gaetz, M. The neurophysiology of brain injury / M. Gaetz // Clin. Neurophysiol. -2004. - Vol. 115(1). - P. 4-18.
3. Maas, A. I. R. Moderate and severe traumatic brain injury in adults / A.I.R. Maas, N. Stocchetti, R. Bullock. - Lancet Neurol. -2008. - Vol. 7. - P. 728-741.
4. Loane, D. J. Neuroprotection for traumatic brain injury / D. J. Loane, B. A. Stoica, A.I. Faden // Handbook of Clinical Neurology. - 2015. - Vol. 127. - P. 343-366.
5. Rates of major depressive disorder and clinical outcomes following traumatic brain injury / C. H. Bombardier [et al.] // JAMA. -2010. - Vol. 303(19). - P. 1938-1945.
6. Fann, J. R. Treatment for depression after traumatic brain injury: a systematic review / J.R. Fann, T. Hart, K.G. Schomer // J Neurotrauma. - 2009. - Vol. 26(12). -P. 2383-2402.
7. Скринiнговi дослщження 3-амшометил-2-метилхшолш-4-ошв як потенцшних психотропних засобiв / С.Ю. Штриголь [та шш.] // Кшшчна фармащя. - 2010. - Т. 14, № 1. - С. 35-38.
8. 2-Метил-3-фениламинометилхино-лин-4-он - потенциальный антидепрессант с ноотропными свойствами / С.Ю. Штры-голь [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2012. - Т. 75, № 4. - С. 7-9.
9. Подольський, I. М. Вплив перспективного антидепресанта з ноотропними властивостями 2-метил-3-феншамшомети-лхшолш-4-ону на фази пам'ят / I. М. По-
дольський, С. Ю. Штриголь, I. С. Гриценко // Украшський журнал кшшчно! та лабораторной медицини. - 2013. - Т. 8, № 4.
- С. 104-107.
10. Podolsky, I. M. Neuroprotective activity of 2-methyl-3-phenylaminomethylqui-nolin-4-one in experimental traumatic brain injury in rats / I. M. Podolsky, S. Yu. Shtrygol // Journal of Chemical and Pharmaceutical Research. - 2015. - Vol. 7, № 4. - P. 518-524.
11. The neurotrophic and neuroprotective effects of psychotropic agents / J. Hunsberger, D. R. Austin, I. D. Henter, G. Chen // Dialogues Clin Neurosci. - 2009. - Vol. 11(3).
- P. 333-348.
12. Burns, M. M. Antidepressants in the treatment of stroke / M. M. Burns, D. A. Greenberg // Expert Rev Neurother. -2010. - Vol. 10(8). - P. 1237-1241.
13. 3-Диметиламинометил-2-метил-1Н-хинолин-4-он - эффективный реагент в синтезе 3-аминометилзамещенных хи-нолонов / В. А. Зубков [и др.] // Журнал оргашчно! та фармацевтично! xiMÜ. - 2005.
- Т. 3, № 2(10). - С. 23-27.
14. Про затвердження прототшв на-дання медично'1 допомоги за спещальшстю "Медицина невщкладних сташв": наказ МОЗ Украши №24 вщ 17.01.2005.
- [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.moz.gov.ua/ua/portal/ dn_20050117_24.html. - Дата доступа: 17.06.2015.
15. Шатшов, О. В. Експерименталь-не вивчення ноотропних та церебро-протекторних властивостей похщних (2-оксошдолшшден-3)-оцтово'1 кис-лоти: автореф. дис. ... канд. мед. наук / О.В. Шатшов. - Одесса: ОНМУ, 2014. -20 с.
16. Жиляев, С. О. Експериментальне обгрунтування використання препаратсв кверцетину в рiзних лшарських формах при черепно-мозковш травма автореф. дис. ... канд. фарм. наук / С.О. Жиляев. -Харюв: НФаУ, 2014. - 21 с.
17. Ельский, В. Н. Моделирование черепно-мозговой травмы / В. Н. Ельский,
С. В. Зяблицев. - Донецк: Новый мир, 2008. - 140 с.
18. Меркулов, Г. А. Курс патолого-ги-стологической техники / Г. А. Меркулов.
- М.: Медицина, Ленингр. отд-ние, 1969.
- 424 с.
19. Квитницкий-Рыжов, Ю. М. Современные представления о «тёмных» клетках головного мозга человека и животных / Ю. М. Квитницкий-Рыжов, Т. Ю. Квит-ницкая-Рыжова // Цитология. - 1981. -№ 2. - С. 116-128.
20. Насибуллин, Б. А. Структурно-метаболическое типирование нейронов сен-сомоторной коры головного мозга крыс / Б. А. Насибуллин // Деп. в УкрНИИНТИ 14.03.91 г., № 346-УК.91. - 7 с.
21. Каптарь, В. С. Влияние полидана и пирацетама на условно-рефлекторную память и структурно-функциональное состояние нейронов неокортеса крыс: автореф. дис. ... канд. биол. наук / В.С. Каптарь. -Москва: МГУ, 2007. - 24 с.
22. Насибуллин, Б. А. Сравнительная структурно-функциональная характеристика сенсомоторной коры головного мозга крыс в динамике алкоголизации и при действии феназепама на этом фоне / Б. А. Насибуллин, Д. М. Пыхтеев // Медицинские исследования. - 2001. - Т. 1, № 1.
- С. 59-60.
23. Гуляев, С. М. Морфологическая оценка церебропротекторного действия лантана ацетата при хронической ишемии головного мозга у крыс / С. М. Гуляев, И. О. Убашеев, Н. М. Кожевникова // Морфология. - 2007. - Т. 132, № 4. - С. 24-27.
Адрес для корреспонденции:
61168, Украина, г. Харьков, ул. Блюхера, 4, Национальный фармацевтический университет,
кафедра медицинской химии, тел. + 38-(0572)-67-92-04, e-mail: medchem@nuph.edu.ua, Подольский И. Н.
Поступила 30.06.2015 г.
Рисунки к статье И. Н. Подольский, С. Ю. Штрыголь «Исследование церебропротекторного влияния 2-метил-3-фениламинометилхинолин-4-она на изменения тинкториальных свойств нейронов в головном мозге крыс после черепно-мозговой травмы» (С. 86-91)
" V с. > г 11 ш
* ? '
* *> Л />:
ч V А • ^ 4 О ' % л V
, • г'.
$ * ЧР , у У > ' чК *
а А 9
$ л ТР *
№ ? в. V о | ^ V
с ^ Г Ы - С V «
* ^ * V
\ в ^ -Ч|
б
»
■т
в
г
-
а - группы интактного контроля; б - группы контрольной патологии (ЧМТ); в - группы атристамина; г - группы пирацетама. Окрашивание - тионин по методу Ниссля, ><250. Рисунок 2 - Сенсомоторная кора больших полушарий головного мозга крыс
1»<
О „ и** 1 •
4
V\ .¿¿Л» 5
а - группы интактного контроля; б - группы контрольной патологии (ЧМТ); в - группы атристамина; г - группы пирацетама. Окрашивание - тионин по методу Ниссля, ><400. Рисунок 3 - Кора мозжечка головного мозга крыс
