CC BY
46
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Исследование токсичности препарата "Нафталановое масло" на кроликах в подостром эксперименте
Г. А. Кязимов, Т. Б. Савинова
Научно-Производственное Объединение Фармации и Медтехники Министерства Здравоохранения Азербайджанской Республики, г. Баку;
Всероссийский Научно-Исследовательский Химико-Фармацевтический институт, г. Москва
Исследование посвящено изучению токсичности лекарственного препарата "Нафталановое масло" (производства ООО "Биойл", Азербайджан) (2), зарегистрированного в Азербайджане и на Украине. Исследование проведено в научно-исследовательском центре химии лекарственных средств Всероссийского Научно-Исследовательского Химико-Фармацевтического института (ЦХЛС - ВНИХФИ).
Ранее такие эксперименты были проведены только на базе нафталановой нефти и на обес-смоленном нафталане (1, 3, 4, 5).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Исследования проведены на 20 кроликах-самцах породы Шиншилла с первоначальной массой тела 3,5-3,7 кг.
Производитель животных - НПП "Питомник лабораторных животных' ФИБХ РАН, г.Пущино, Россия. Производитель животных предоставил данные последнего контроля здоровья животных, подтверждающие их SPF-статyс (Животные, свободные от патогенов). Предварительно кролики прошли карантин в условиях вивария. Животные были разделены на две группы по 10 кроликов в каждой (интактный контроль и группа "Нафталановое масло"). "Нафталановое масло" по 0,5 мл наносили два раза в сутки в течение 7 недель на участок спины размером 10х10 см, эпилированный за 24 часа до эксперимента.
Перед началом эксперимента у животных брали кровь для определения некоторых фоновых показателей (число эритроцитов, лейкоцитов, содержание гемоглобина). Во время эксперимента у животных отмечали общее состояние, двигательную активность, потребление воды и корма, динамику массы тела, состояние шерстного покрова, реакцию на внешние раздражители. Каждые 7 дней проводили измерение температуры. Через 21 дней после начала нанесения изучаемого препарата определяли гематологические (общее количество эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, гематокрит, содержание гемоглобина, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средний объем эритроцитов, гематограм-мы), биохимические показатели (общий белок, общий холестерин, глюкоза, креатинин) и актив-
ность некоторых ферментов сыворотки крови (щелочная фосфатаза, аланин- и аспартаттран-саминазы).
Кровь для исследования брали из краевой вены уха в объеме 2,0-2,5 мл. Биохимические показатели и активность ферментов сыворотки крови определяли на полуавтоматическом биохимическом анализаторе крови Screen master Tecno фирмы Hospitex Diagnostics S.A. (Италия) при помощи стандартных наборов фирмы "Human", Германия. Для определения состояния сердечно-сосудистой системы животных на 14 день эксперимента снимали электрокардиограммы во II стандартном отведении (полиграф "Салют"). В конце эксперимента для оценки влияния препарата на экскреторную функцию печени была проведена бромсуль-фалеиновая проба.
По окончании эксперимента животных забивали (методом воздушной эмболии) и проводили патогистологическое исследование внутренних органов кроликов.
Результаты обрабатывали методом вариационной статистики с применением t- критерия Стьюдента и считали достоверными при Р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. Нанесенное на кожу кроликов "Нафталановое масло" по 0,5 мл два раза в день в течение 15 дней не влияло на общее состояние и поведение кроликов. Как интактные, так и получавшие аппликации препаратом "Нафталановое масло" животные оставались подвижными, их внешний вид был опрятным, шерсть гладкая, блестящая, выпадения шерсти не отмечено. Признаков местно-раздражающе-го действия при визуальном осмотре не обнаружено. Животные имели хороший аппетит, суточное потребление корма и воды соответствовало норме. Динамика массы тела экспериментальных животных не отличалась от контроля. Гибели животных не было. Динамика массы тела кроликов (в % к исходной) при 3-х недельном нанесении на кожу "Нафталановое масло" на первой неделе наблюдения в группах животных с интакт-ным контролем показало 103,1±1,1; а с нанесением "Нафталановое масло" 103,8±1,3. На вто-
Таблица 1. Показатели электрокардиограмм кроликов
Параметры ЭКГ Группы животных
Контроль, интакгный «Нафталановое масло»
сек 0,187±0,004 0,178±0,007
Р-<2, сек 0,051 ±0,002 0,45±0,004
(Жв, сек 0,045±0,002 0,048±0,003
БТ, сек 0,034±0,002 0,033±0,005
ТР, сек 0,020±0,010 0,024±0,004
Р, мв. 0,114±0,022 0,114±0,008
К мв. 0,250±0,081 0,224±0,062
Т, мв. 0,113±0,018 0,096±0,022
ЧСС* в мин. 316±9 320±46
* - частота сердечных сокращений
рой и третьей неделе показатели были 107,4±1,4; 112,0±1,7, а с нафталановым маслом было 108,0±1,6; 113,6±1,5 соответственно.
Нанесение "Нафталановое масло" на кожу кроликов не влияло на ректальную температуру, которая в течении всего эксперимента была в границах нормы 38,4-38,8°С.
Ректальная температура кроликов (1°С) при накожном нанесении "Нафталановое масло" в 3-х недельный период наблюдения в контрольно интактной группе была 38,7±0,2; 38,7±0,2; 38,8±0,2; со смазыванием "Нафталановое масло" 38,6±0,1; 38,6±0,1; 38,6±0,2 соответственно.
Нанесение на кожу кроликов "Нафталано-вое масло" в течение 21 дня не нарушало деятельность сердечно-сосудистой системы: показатели электрокардиограмм опытных животных не отличались от контроля (Таблица 1).
Бромсульфалеиновая проба, проведенная на 20 день эксперимента показала, что длительное накожное нанесение "Нафталановое масло" не влияло на выведение красителя из крови экспериментальных животных и в динамике через 2 и 8 минут, и по коэффициенту ретенции. Это свидетельствует об отсутствии повреждающего действия препарата на экскреторную функцию печени.
Показатель бромсульфалеиновой пробы кроликов (мг%) после трехнедельного накожного применения "Нафталановое масло" в 2-х минутных периодах наблюдения в группе животных на интактном контроле был 18,3±2,4; а со смазы-
ванием был 18,0±2,2.
В 8-ми минутных периодах наблюдения в группе животных на интактном контроле было 6,0±1,9, а со смазыванием был 5,8±1,1. Коэффициент ретенции в периодах был 32,8±3,7 и 32,0±3,6, соотвественно.
Накожное нанесение "Нафталановое масло" в течении 3-х недель не влияло на гематологические показатели периферической крови: количество эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, содержание гемоглобина, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроците, средний объем эритроцитов не отличались от контроля и соответствовали физиологической норме. Также не обнаружено отличий от контроля при подсчете гемограмм кроликов: количество лимфоцитов, моноцитов, гранулоцитов соответствовало физиологической норме. В мазках крови не обнаружено патологически измененных клеток по форме, величине, наличию патологических включений, восприятию краски.
Для оценки функционального состояния печени и почек кроликов после длительного нанесения "Нафталановое масло" исследовали некоторые биохимические показатели сыворотки крови и активность некоторых ферментов сыворотки.
В биохимических показателях сыворотки крови кроликов после 3-недельного нанесения "Нафталановое масло" отмечено достоверное увеличение уровня общего белка и снижение
Таблица 2. Активность некоторых ферментов сыворотки крови кроликов после 3-х недельного
нанесения на кожу "Нафталановое масло"
Исследуемые показатели Контроль, интактный М±т
Аланинтрансаминаза (Е\л) 43,0 36,0 31,0 33,6 30,3 34,8±2,7
Аспартаттрансаминаза (Е\л) 32,6 34,9 36,4 32,1 31,5 33,5 ±1,1
Щелочная фосфатаза (Е\п) 252 264 317 286 255 275±14
Исследуемые показатели «Нафталановое масло» М±т
Аланинтрансаминаза (Е\л) 30,2 31,0 26,1 28,4 32,7 29,7±1,4
Аспартаттрансаминаза (Е\л) 40,4 35,7 34,1 39,9 38,8 37,8±1,4
Щелочная фосфатаза (Е\п) 277 287 283 284 270 280±13
общего холестерина, глюкозы, мочевины, креа-тинина по сравнению с контролем. Полученные данные могут свидетельствовать о специфическом действии препарата: направленном на усиление обменных процессов в организме экспериментальных животных.
После 3-недельного нанесения "Нафталано-вое масло" не отмечено изменений активности аланинтрансаминазы, аспартаттрансаминазы и щелочной фосфатазы по сравнению с аналогичными показателями активности ферментов сыворотки крови контрольных животных (Таблица 2).
Местно-раздражающее действие. После трехнедельного нанесения на кожу кроликов "Нафталановое масло" при визуальном осмотре не обнаружено каких-либо отличий от контроля: кожа эластичная, не отмечено признаков гиперемии, шелушения.
Микроскопические исследования также не выявили отличий между контрольной и экспериментальной группами животных: не обнаружено изменений в дерме и в эпидермисе. Железы и корни волос в месте нанесения "Нафталановое масло" без особенностей.
Результаты макро- и микроскопического исследования внутренних органов кроликов. За время проведения эксперимента гибели животных не наблюдалось. При забое осмотр животных показал, что все кролики нормально упитаны, имеют правильное телосложение, опрятны, естественные отверстия чистые.
При визуальном исследовании во время вскрытия со стороны внутренних органов различий у опытных и контрольных кроликов не выявлено. Органы правильно расположены, свободной жидкости в грудной и брюшной полостях нет. Мышца сердца и клапаны без изменений. Просветы трахеи и крупных бронхов свободны. Ткань легких воздушная, розового цвета, без признаков отека. Слизистая оболочка желудка и кишечника без изъязвлений и кровоизлияний. Мозг, почки, надпочечники, печень, селезенка, тимус, поджелудочная железа, семенники обычной формы, окраски, консистенции.
КОНТРОЛЬ ИНТАКТНЫЙ.
Мозг: мягкие мозговые оболочки и внутриже-лудочные сплетения нормальные, дифференци-ровка коры и подкорковых центров обычные.
Печень: обычный дольчатый рисунок, нормальные гепатоциты и синусоиды, узкие портальные тракты.
Почки: обычного строения. Клубочки представлены широкими капиллярными петлями и гло-мерулярным эпителием. Извитые канальцы с нормальным эпителием.
Миокард: обычного строения. Кровенаполнение умеренное. Поперечная исчерченность кардиомиоцитов сохранена.
Легкие: терминальные бронхиолы обычного
строения, респираторный отдел - воздушный. Артериальная и венозная системы без особенностей.
Селезенка: обычные соотношения красной и белой пульпы.
Поджелудочная железа: без особенностей.
Желудок: нормальные соотношения слоев слизистой оболочки.
Тонкая кишка: нормальное строение ворсинок.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. "Нафталановое масло" - это высокоочищенная общая фракция нафтеновых углеводородов, полученная из нафталанской нефти. Препарат применяется в виде лечебных ванн, местных аппликаций, смазываний и обладает смягчающим, рассасывающим, дезинфицирующим и болеутоляющим действием. Показаниями к применению "Нафталановое масло" являются заболевания кожи, суставов и позвоночника, заболевания периферических сосудов и др.
Токсичность "Нафталановое масло" изучена в условиях длительного трехнедельного накожного нанесения на участок эпилированной кожи кроликов (10х10 см).
В результате проведенных исследований не установлено влияния "Нафталановое масло" на основные интегральные показатели животных: аппетит, динамику массы тела, ректальную температуру. В течение всего периода наблюдений не обнаружено раздражающего влияния на кожу животных.
После трехнедельного нанесения на кожу кроликов "Нафталановое масло" при визуальном осмотре не обнаружено признаков гиперемии, шелушения. Микроскопические исследования также не выявили отличий между контрольной и экспериментальной группами животных: не обнаружено изменений в дерме и эпидермисе. Железы и корни волос в месте нанесения "Наф-талановое масло" без особенностей.
Препарат не влиял на количество эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, содержание гемоглобина, среднее содержание гемоглобина в эритроците, среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците, средний объем эритроцитов и гемограммы периферический крови экспериментальных животных.
Результаты изучения биохимических показателей сыворотки крови, характеризирующие функциональное состояние печени, почек и поджелудочной железы кроликов после 3- недельного нанесения "Нафталановое масло", выявили статистически значимое увеличение уровня общего белка и снижение общего холестерина, глюкозы, мочевины, креатинина по сравнению с аналогичными показателями в контроле. Полученные данные могут свидетельствовать о специфическом действии препарата, направленному
на усиление обменных процессов в организме экспериментальных животных.
Показатели бромсульфалеиновой пробы, проведенной на 20 день подострого эксперимента, свидетельствует об отсутствии влияния "Нафталановое масло" на экскреторную функцию печени экспериментальных животных.
Не обнаружено повреждающего влияния изучаемого препарата на сердечно-сосудистую систему кроликов.
Результаты патогистологического изучения кожи кроликов свидетельствует об отсутствии раздражающего действия "Нафталановое масло". Не обнаружено признаков токсического влияния на мозг, сердце, легкие, печень, почки, селезенку, надпочечники, кишечник, семенники.
Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что "Нафталановое масло" (производства ООО "БИОЙЛ", Азербайджан) при длительном нанесения на неповрежденную кожу кроликов не обладает местно-раздражающим действием и не оказывает токсических эффектов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Байрамов Я. К вопросу о сравнительной токсичности нафтала-новой нефти из различных буровых скважин. - Дисс.. канд.мед.н., Баку, 1944; 2. Кязимов Г.А. Новые отечественные препараты -"Нафталановое масло" и "Нафталановая мазь". - Азербайджанский
фармацевтический журнал, Баку, 2003, N.2, с.19-21; 3. Пашаева М.Н. Морфо-гистохимические особенности структур внутренних органов экспериментальных животных в отдаленные сроки исследования при применении обессмоленной нафталановой нефти. -Тематический сборник научных трудов, Баку, 1981, с.37; 4. Паша-ев Т.Г. К вопросу об изменениях, происходящих в организме под воздействием внутреннего введения нативной и оббесмоленной нафталановой нефти. - Тезисы докладов 4-ых межинститутских научных сессий институтов курортологии и физических методов Азербайджана, Армении и Грузии, Баку, 1957, с.58; 5. Самедов С.И. Характер изменения в уровне содержания альфа-аминоазота, белка, его фракций и некоторых минеральных веществ в крови экспериментальных животных при применении обессмоленной нафталановой нефти внутрь с отдаленными результатами. - Тематический сборник научных трудов, Баку, 1981, с.42.
SUMMARY
Studying of toxicity of "Haftalan oil" preparation on rabbits in subacute experiment H.Kazimov, T.Savinova
Research has been conducted over 20 male rabbits of Shinshilla breed. Results of studying of biochemical indicators have revealed significant increasing of common level of albumen and reducing of cholesterol, glucose and creatine. Data received may certify on unspecific action of by applications in a dose of 0.5 ml two times a day of Naphthalan oil", which is oriented on strengthening of metabolism processes in organism of experimental animals.
Поступила 05.10.2005
Развитие современной реаниматологии требует концентрации особого внимания на постреанимационной патологии мозга, так как последняя в большинстве случаев затрудняет возможность полноценного восстановления жизненных функций, так как если функции мозга, включая его кору, не восстанавливаются полностью и своевременно, оживление человека теряет смысл [1, 5, 6]. С другой стороны, оживленный мозг, особенно высшие его отделы, способен коренным образом улучшить начавшийся процесс восстановления всех остальных физиологических систем [13, 2, 14]. Всё это свидетель-
ствует о необходимости анализа природы патологических изменений, возникающих в мозге при умирании и оживлении. Как следует из литературных сведений, восстановление функции ЦНС в постреанимационном периоде во многом зависит от состояния транспорта интерстициаль-ной мозговой жидкости, содержащей в себе большое количестве токсичных продуктов нарушенного метоболизма [6, 7, 18]. В то же время, известно, что более 50% интерстициальной мозговой жидкости оттекает по лимфатическим путям [3, 15, 17]. Однако, состояние лимфодрена-жа на уровне шейного лимфатического ствола
Механизмы нарушения свертываемости лимфы и лимфодренажа на уровне шейного лимфатического ствола в постреанимационном периоде
М. X. Алиев
Азербайджанский Медицинский Университет, г. Баку
