Научная статья на тему 'Исследование сыворотки крови больных мышечной дистрофии Дюшенна в органотипической культуре'

Исследование сыворотки крови больных мышечной дистрофии Дюшенна в органотипической культуре Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
144
27
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
МЫШЕЧНАЯ ДИСТРОФИЯ ДЮШЕННА / ОРГАНОТИПИЧЕСКАЯ КУЛЬТУРА / СЫВОРОТКА КРОВИ / НЕЙРИТИНГИБИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ / DUCHENNE MUSCULAR DYSTROPHY / ORGANOTYPIC TISSUE CULTURE / BLOOD SERUM / NEURITE INHIBITORY EFFECT
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Соколова М. Г., Пеннияйнен В. А., Никишина О. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Исследование сыворотки крови больных мышечной дистрофии Дюшенна в органотипической культуре»

Ключевые слова: адаптация, артериальная гипертензия, коррелирующая ритмо-графия, гипоксия, импеданс плетизмография, альпинизм, глобальный эволюционизм, кинин-калликреиновая система, резистентность, реактивность, ренин-ан-гиотензин-альдостероновая система, стресс.

Keywords: adaptation, arterial hypertension, correlated rhythmography, hypoxia, impedance plethysmography, mountain climbing, global evolutionism, kinin-kallikrein system, resistance, reactivity, renin-angiotensin-aldosterone system, stress.

УДК 616-092.4

М.Г. Соколова, В.А. Пеннияйнен, О.А. Никишина

ИССЛЕДОВАНИЕ СЫВОРОТКИ КРОВИ БОЛЬНЫХ МЫШЕЧНОЙ ДИСТРОФИИ ДЮШЕННА В ОРГАНОТИПИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЕ8

Северо-западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, г. Санкт-петербург, [email protected]

Введение. Мышечная дистрофия Дюшенна (МДД) относится к наиболее часто встречающимся формам наследственной нервно-мышечной патологии, характеризуется прогрессирующей мышечной слабостью, атрофией и псевдогипертрофией проксимальных мышц конечностей, нередко сопровождается кардиомио-патией и развитием когнитивных расстройств, что приводит к инвалидизации в детском возрасте [1]. Лечение данной патологии носит симптоматический характер. Исследование сыворотки крови больных МДД в органотипической культуре ткани может уточнить патогенез данного заболевания.

Материал и методы. Исследовано 600 эксплантатов сенсорных ганглиев 10-12-дневных куриных эмбрионов, культивируемых в СО2-инкубаторе (Sanyo) в течение 3-х суток на подложках из коллагена в чашках Петри при 36,5°С и 5% СО2. Питательная среда содержала 45% раствора Хенкса, 40% среды Игла с добавлением инсулина (0.5 ед./мл), глюкозы (0.6%), глютамина (2 мл), гентомицина (100 ед/мл), 5% куриного эмбрионального экстракта и 10% фетальной сыворотки коровы. Контрольные эксплантаты культивировали в условиях питательной среды. В экспериментальных чашках в культуральную среду добавляли сыворотку

8 M. Sokolova, V. Penniyaynen, O. Nikishina The study of blood serum of patients with duchenne muscular dystrophy in organotypic culture / North-West State Medical University namen after I.I. Mechnikov,Saint-Petersburg, [email protected]

крови больных СМА 2 типа. Для визуализации объектов использовали микроскоп «Axiostar Plus» («Carl Zeiss», Германия). Полученные изображения анализировали программой ImageJ. Работа выполнена на оборудовании ЦКП "Конфокальная микроскопия" Института физиологии им. И.П. Павлова РАН. Для количественной оценки роста эксплантатов применяли морфометрический метод. Индекс площади (ИП) рассчитывали, как отношение площади зоны роста эксплантата к исходной площади. Контрольное значение ИП принимали за 100%. Статистический анализ проводили с помощью программы STATISTICA 6.0 с применением t-критерия Стьюдента.

Результаты и обсуждение: Изучение с использованием конфокального микроскопа проводилось на третьи сутки культивирования в контрольных и экспериментальных эксплантатах. В зоне роста эксплантатов сенсорных ганглиев преобладает рост нейритов (отростков нервных клеток), в меньшей степени мигрируют и пролиферируют фибробластоподобные клетки и глия [2]. Сыворотка крови 10 больных МДД была исследована в широком диапазоне разведений (1:100-1:2). В разведениях 1:2, 1:10, 1:50 сыворотка больных полностью блокировала рост нейритов сенсорных ганглиев. При добавлении в культуральную среду сыворотки крови в разведении 1:70 наблюдали достоверное нейрит-инги-бирующее действие (р<0,05) в 70% случаев. ИП исследуемых эксплантатов был ниже контрольных значений в среднем на 25%. При дальнейшем разведении сыворотка крови на рост нейритов не имела влияния. В серии подобных опытов с сывороткой крови больных СМА 2 типа мы наблюдали ингибирование роста нейритов в 100% случаев [3]. У больных с МДД в 30% случаев эксплантаты сенсорных ганглиев 10-12-дневных куриных эмбрионов в питательной среде имели рост нейритов сенсорных ганглиев соответствующих контрольным эксплантатам. В случае с сывороткой крови больных СМА 2 типа нами было выявлено, что в сыворотке находится в несколько раз превышающее содержание нейротрофи-нов (NGF, BDNF) и было сделано предположение, что эти факторы препятствуют реиннервационным процессам у больных СМА 2 типа [4]. Полученные данные можно объяснить различным патогенезом данных нервно-мышечных заболеваний и возможно различным состоянием нейротрофической регуляции. Выводы: Проведенные исследования показали, что сыворотка крови больных МДД в 70% случаев ингибирует рост нейритов сенсорных нейронов спинальных ганглиев. Результаты исследования диктуют необходимость дальнейшего научного поиска для уточнения патогенеза МДД.

Литература

1. Неврология: национальное руководство / Под ред. акад. РАМН Е. И. Гусева. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 936 с.

2. Пеннияйнен В.А. Влияние оуабаина на рост нейритов чувствительных нейронов в органотипической культуре ткани / В.А. Пеннияйнен, Б.В. Крылов // Цитология. - 2003. - Т. 45. - №4. - С. 377-379.

3. Морфологические основы патологии: монография; [под ред. В.П. Волкова]. Новосибирск: Изд. «СибАК», 2015. - 176 с.

4. Соколова М.Г. Оценка реиннервационного процесса у больных спиналь-ной мышечной атрофией 2 типа в комплексном клинико-экспериментальном исследование // М.Г. Соколова, В.А. Пеннияйнен, М.В. Резванцев, С.В. Лобзин, Н.Ю. Александров / Вестник СЗГМУ. - 2014. - Т.6. - №4. - С. 45 -52.

Ключевые слова: мышечная дистрофия Дюшенна, органотипическая культура, сыворотка крови, нейритингибирующий эффект.

Keywords: Duchenne muscular dystrophy, organotypic tissue culture, blood serum, neurite inhibitory effect.

УДК 57.043

Ю.А. Чилигина1'2, Д.Н. Берлов2, А.В. Аладов2

СОЗДАНИЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО КАБИНЕТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СВЕТОДИОДНОГО ДИНАМИЧЕСКИ УПРАВЛЯЕМОГО ИСТОЧНИКА СВЕТА9

1 Национальный государственный университет физической культуры, спорта

и здоровья им. П.Ф. Лесгафта, Санкт-Петербург, Россия, _julchil@mail. ru;

2 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Научно-технологический центр микроэлектроники и субмикронных гетероструктур РАН,

Санкт-Петербург

Для современной системы школьного образования характерно постоянное наращивание учебной нагрузки в условиях дефицита времени. Одной из задач,

9 Yu.A. Chiligina, D. N. Berlov, A.V. Aladov The design of therapy room with dinamically controlled light sources.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.