CC BY
104
Медицинская Иммунология 2004, Т. 6, № 6, стр 551-556 ©2004, СПбРОРААКИ
Оригинальные статьи
ИССЛЕДОВАНИЕ СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОЙ ПРОДУКЦИИ ЦИТОКИНОВ IN vrmoy БОЛЬНЫХ С АЛЛЕРГОПАТОЛОГИЕЙ В ФАЗУ КЛИНИЧЕСКОЙ РЕМИССИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ И У УСЛОВНО-ЗДОРОВЫХ ЛИЦ С ЛАТЕНТНОЙ СЕНСИТИЗАЦИЕЙ
Зурочка А.В., Квятковская С.В., Дворник Е.Е., Шестакова Е.В., Бастрон А.С.
НИИ Иммунологии ГОУ ВПО Челябинская Государственная Медицинская Академия, Россия
Резюме. Проведено исследование in vitro спонтанной и индуцированной стандартными митогенами (фитогемагглютинин и липополисахарид Esherihia сой) продукции цитокинов IFNy, IL-4, IL-1(3, IL-10 в цельной крови у больных аллергическим ринитом (АР), у больных бронхиальной астмой в сочетании с АР в фазу клинической ремиссии заболевания (БА) и у условно-здоровых лиц с латентной сенситизацией с отягощенным и неотягощенным семейным аллергоанамнезом по сравнению с условно-здоровыми лицами, у которых аллергенспецифические IgE-антитела в сыворотке крови отсутствовали. Показано, что у больных АР и у больных БА в фазу клинической ремиссии отмечаются однотипные изменения в продукции как «провоспалительных» и «противовоспалительных», так и основных регуляторных цитокинов IL-4 и IFNy, отвечающих за девиацию Thl/Th2 иммунного ответа, при этом у больных Б А эти изменения более выражены. У лиц, не имеющих отягощенный семейный аллергологический анамнез, отмечаются иные механизмы регуляции иммунного ответа в ответ на наличие сенситизации, чем у лиц с отягощенным аллергоанамнезом. Полученные данные свидетельствуют о том, что механизмы развития аллергического процесса зависят не только от уровня девиации иммунного ответа, но и от состояния системы регуляции, принимающей участие в активации систем утилизации антигенной (аллергенной) нагрузки.
Ключевые слова: цитокины, in vitro, латентная сенситизация, регуляция.
Zurochka A.V., Kvyatkovskaya S.V., Dvorchyk Е.Е., Shestakova E.V., Bastron A.S.
SPONTANEOUS AND INDUCED CYTOKINE PRODUCTION IN VITRO IN PATIENTS WITH
ALLERGY IN CLINICAL REMISSION AND IN HEALTHY PERSONS WITH LATENT SENSITIZATION
Abstract. We performed an investigation of spontaneous and standard mytogen (phytohemagglutinin and E.coli li-popolysaccharide) induced production of such cytokines as IFNy, IL-4, IL-1(3, IL-10, assessing the blood cytokines levels of the patient with allergic rhinitis , bronchial asthma combined with allergic rhinitis in clinical remission and relatively healthy persons with latent sensitization, with and without burdened family allergic history, comparing the findings with the group of relatively healthy persons, that had no allergen specific IgE-antibodies in serum. It was found that in patients with allergic rhinitis and bronchial asthma in clinical remission there were similar-type changes of the production of the basic regulatory cytokines (i.e. IL-4 and IFNy), responsible for the deviation of Thl/Th2 immune response, noting that patients with bronchial asthma had those changes more intensively expressed. Persons without burdened family allergic history showed the other mechanisms of immune response regulation in response to sensitization, than the ones with
__________________________________________ burdened family allergic history. On the whole, the data tes-
Адрес для переписки: tii'y to the fact that the mechanisms of immune response
Зурочка A.B. 454092, г. Челябинск, ул. Воровского, д. 64. regulation depend not only on the level of immune response Тел.: (3512) 34-16-86,34-02-36,34-03-56. deviation, but also on the condition of the regulation sys-
Факс: (3512) 34-02-26.www.vita.chel.su tem that takes part in the antigen elimination.
E-mail: postmaster@vita.chel.su (MedJmmunol., 2004, vol.6, № 6, pp 551-556)
Введение
Согласно современным представлениям, наиболее значимым эндогенным компонентом патогенеза при атопических заболеваниях является аномалия конституции (атопия) - генетически обусловленная склонность организма к гиперпродукции специфического IgE в ответ на контакт с широко распространенными экзоаллергенами [1]. С другой стороны, известно, что атопия, как иммунобиологический феномен, чрезвычайно широко распространена в человеческой популяции. При этом наличие положительных кожных проб и/или обнаружение аллергенспецифических IgE-антител (АС IgE-антител) при отсутствии анамнестических данных о появлении клинических признаков аллергических заболеваний на воздействие аллергена расценивается как состояние «латентной» сенситиза-ции [3,6,10]. По данным исследователей, распространенность ее, подтвержденная кожными пробами хотя бы к одному из аэроаллергенов, отмечается у 40-45% клинически здорового населения [2,6,10]. В то же время, распространенность атопических заболеваний, то есть клинической манифестации атопии, значительно ниже. Факт возможности гиперпродукции IgE, как иммунного дефекта, без наличия клинических проявлений, определяет вероятность наличия суммы других патогенетических факторов, приводящих к реализации иммунологических нарушений [8] Основную роль в нарушении регуляции иммунного ответа при атопических заболеваниях отводят способности отвечать синтезом IgE в результате преимущественной диффе-ренцировки Th2, в ответ на контакт с определенными антигенами, которые у других людей вызывают обычный иммунный ответ при относительно нормальном равновесии Thl/Th2 [9]. В определенном смысле считается, что бронхиальная астма - болезнь Th2 лимфоцитов, так как все ключевые патофизиологические проявления, определяющие аллергическое воспаление, опосредуются цитокинами этих клеток, а именно: синтез IgE (IL-4 и IL-13); эозинофилия в бронхах и в периферической крови (IL-4 и IL-5; GM CSF); гиперплазия тучных клеток (IL-3 и IL-4) [ 12]. У больных хроническими аллергическими заболеваниями обычно выявляется недостаточность клеточного иммунитета: снижение реакции ГЗТ, сниженный синтез IFNy на фоне гиперпродукции IL-4, IL-10 [11]. При этом считается, что, недостаточность Thl/IFNy -ответа нередко является результатом дефекта макрофагов, не способных продуцировать цитокины, необходимые для запуска вторичного иммунного ответа на аллерген [9].
Определение AC IgE -антител в сыворотке крови к наиболее широко распространенным аллергенам показало, что у условно-здоровых лиц, жителей г. Челябинска, не имеющих клинических признаков аллергических заболеваний, специфические IgE-ан-титела хотя бы к одному аллергену, обнаруживаются в 66,6% случаев [4]. С этой целью, для изучения состояния системы регуляции нами было проведено исследование спонтанной и индуцированной стандартными митогенами (фитогемагглютинин (ФГА) и липополисахарид Esherihia coli (ЛПС Е. Coli)) in vitro продукции цитокинов IFNy, IL-4, IL-ip, IL-10 в цельной крови [5] и рассчитаны коэф-
фициенты соотношения их продукции у больных аллергическим (БА) ринитом (АР), у больных бронхиальной астмой в сочетании с АР и у условно-здоровых лиц с латентной сенситизацией с отягощенным и неотягощенным семейным аллергоанамнезом по сравнению с условно-здоровыми лицами, у которых АС IgE-антитела на изучаемую панель аллергенов не были обнаружены.
Материалы и методы
Группа условно-здоровых лиц была сформирована врачом-терапевтом после углубленного профилактического осмотра, включавшего консультацию врача аллерголога-иммунолога. Определение AC IgE в сыворотке крови было проведено с помощью иммунофер-ментной тест-системы (ФГУП «Аллерген» г. Ставрополь) к следующим аллергенам: клещ Dermatofagoidus pteronissimus, Dermatofagoidusfarinae, домашняя пыль, библиотечная пыль, микст сорных трав, микст пыльцы деревьев, микст пыльцы луговых трав, шерсть кошки, шерсть собаки, молоко коровье. Положительным считался результат с 1,2,3, и 4 степенью реакции. Соответственно, первую группу составили 12 человек с латентной сенситизацией, указавших на наличие аллергических заболеваний среди ближайших родственников, вторую -12 человек также с латентной сенситизацией, но отрицавших наличие отягощенного семейного аллергологического анамнеза. В третью и четвертую группу вошли 12 больных АР и 12 больных Б А в сочетании с АР в фазу клинической ремиссии заболевания соответственно. Контрольную группу составили 12 условно-здоровых лиц, у которых АС IgE-антитела в сыворотке крови на изучаемую панель аллергенов не были обнаружены.
Для индукции цитокинов свежую гепаринизиро-ванную кровь разводили в 5 раз средой RPMI 1640 («Sigma», USA) с добавлением 2мМ L-глутамина («Sigma»,USA) и 80 мкг/мл гентамицина. Для спонтанной продукции цитокинов в лунки 24-луночного планшета вносились по 1 мл среды RPMI 1640 с добавлением 2мМ L-глутамина и 80 мкг/мл гентамицина и 1 мл разведенной в 5 раз крови. Для ФГА-индуци-рованной продукции цитокинов в лунки планшета вносились по 1 мл рабочего раствора ФГА («DIFCO», USA) и 1 мл разведенной в 5 раз крови (конечная концентрация ФГА 50 мкг/мл). Для ЛПС-индуцирован-ной продукции цитокинов в лунки планшета вносились по 1 мл рабочего раствора ЛПС E.coli («Sigma», USA) и 1 мл разведенной в 5 раз крови (конечная концентрация ЛПС E.coli 30 мкг/мл). Планшеты с исследуемыми образцами культивировали в течение 72 часов при 37°С и 5% С02 в СО -инкубаторе. По прошествии времени инкубации супернатанты отбирали для исследования на наличие цитокинов.
Для определения спонтанной и митоген-индуци-рованной продукции цитокинов в супернатантах были использованы тест-системы для иммунофер-ментного анализа «ИФА-IFN гамма», «ИФА-4П_,» (ЗАО «Вектор-Бест-Балтика», г. Санкт-Петербург); «ИФА-IL-ip» (ООО « Цитокин», г. Санкт-Петербург), «CytELISA, Human IL-Ю» (CYTIMMUNE SCIENCES INC., USA).
Табл.1. СПОНТАННАЯ И ИНДУЦИРОВАННАЯ ПРОДУКЦИЯ ЦИТОКИНОВ IFNy И IL-4 IN VITRO В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ У УСЛОВНОЗДОРОВЫХ ЛИЦ, У БОЛЬНЫХ АР И У БОЛЬНЫХ БА(М±т)
Показатели Группа К Группа 1 Группа 2 Группа 3 Группа 4
п=12 п=12 п=12 п=12 п=12
IFNy сп., пг/мл 434,38±142,05 679,25*61,65 564,22*226,44 798,68*267,86 566,85*144,10
IFNy+ФГА, пг/мл 7349,81 ±1003,33 7616,47*306,82 7296,13*543,36 7583,40*224,62 6619,55±728,20*
IFNy+ЛПС, пг/мл 5132,82±1102,04 1698,47*95,85 884,92±203,78* 1951,52±511,5* 1726*831,94*
IFNy +ФГА/ IFNy сп. 36,21 ±9,72 12,237*12,24 89,97*40,35 33,24*7,25 41,91*15,63
IFNy +ЛПС/ IFNy сп. 14,47*8,17 2,67*0,21 4,25*0,72 12,40*6,63 1,98*0,58*
IL-4 сп., пг/мл 20,12±5,65 38,69±7,34**‘ 11,57±1,96*** 63,50*2,92* 59,16*3,96*
IL-4+ФГА, пг/мл 35,38*7,58 31,43±6,26*** 11,63*1,63**** 59,64*7,58 85,52*11,03*
IL-4+ЛПС, пг/мл 24,83*6,86 53,16±8,62* 8,53*0,20* *** 50,25*5,59 68,44*6,76*
IL-4+ФГА/ И-4сп. 2,37±0,49 1,09±0,17* 1,05±0,08* 0,93±0,10*** 1,40±0,13**
IL-4+ЛПС/ И-4сп. 1,69*0,45 1,72±0,33*** 0,91*0,09 0,80*0,09* 1,23*0,19
IFNy cn./l-L4 сп. 53,76±20,66 40,90±12,76*** 63,41 ±25,84 13,41*6,93 8,62*1,81
IFNy+ФГА/І L-4+ ФҐА 304,28*98,46 367,52±65,88*** 764,88±107,86*'*** 169,66*48,81 100,88*21,34
IFNy +ЛПС/И-4+ ЛПС 474,59±138,88 59,42±19,02* 101,78±22,52* 41,83*13,95* 20,69±8,87*
Примечание:
*- достоверные отличия с контрольной группой:
р< 0,05, р< 0,025, р< 0,0125, р< 0,006 при повторных сравнениях.
**- достоверные отличия между 3-й и 4-й группами.
*** - достоверные отличия с 3-й группой:
К - контрольная группа; 1 - условно-здоровые лица с латентной сенситизацией и отягощенным семейным аллергоанамнезом; 2 - условноздоровые лица с латентной сенситизацией и неотягощенным семейным аллергоанамнезом; 3 - больные АР; 4 - больные БА в сочетании с АР.
Статистическая обработка полученных результатов проводилась на персональном компьютере с применением пакета прикладных программ “Statistica 6.0 for Windows”, статистическую значимость различий при сравнении двух несвязанных выборок анализировали с помощью критерия Манна-Уитни (U) с введением поправки Бонферрони для множественных сравнений.
Результаты
1. Показатели цитокинового статуса у больных АР, у больных БА в сочетании сАР,уусловно-здоро-выхлиц с латентной сенситизацией с отягощенным и неотягощенным семейным аллергоанамнезом.
Наши исследования показали, что больные Б А по сравнению с контрольной группой имеют статистически значимое повышение спонтанной, ФГА-и JIПС-индуциро-
ванной продукции 1Ь-4. Одновременно у этих больных отмечалось достоверное снижение уровней ФГА-и ЛПС-индуцированной продукции 1КЫу и снижение коэффициента соотношения уровня ИТ^у при индукции ЛПС к его спонтанной продукции. Коэффициент соотношения уровней 1Шу и 1Ь-4, характеризующий ТЫ/ ТЬ2 девиацию иммунного ответа, был ниже как при спонтанной, так и при индуцированной продукции, но статистическая значимость снижения этого соотношения имела место только в случае стимуляции ЛПС.
Достоверных изменений уровня 1Ь-1Р, спонтанного и при стимуляции стандартными митогенами, у больных БА нами не было получено, кроме снижения коэффициента соотношения его ЛПС-индуцирован-ной продукции к спонтанному уровню, что может свидетельствовать о нарушении стандартного ответа иммунной системы на дополнительную антигенную на-
Табл. 2. СПОНТАННАЯ И ИНДУЦИРОВАННАЯ ПРОДУКЦИЯ ЦИТОКИНОВ IL-1 (3 И IL-10 IN VITRO В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ У УСЛОВНО-ЗДОРОВЫХ ЛИЦ, У БОЛЬНЫХ АР И У БОЛЬНЫХ БА (М±т)
Показатель Группа К Группа 1 Группа 2 Группа 3 Группа 4
п=12 п=12 п=12 п=12 п=12
IL-1p сп., пг/мл 377,17±77,44 812,30±6,99* 358,21 ±81,92*** 681,95±69,53*’ *** 480,58±81,22
IL-1P +ФГА, пг/мл 442,54±101,81 742,06±39,53 551,90±92,06 693,83±71,58 496,91±103,81
IL-1 р + ЛПС , пг/мл 616,50*82,86 800,00±0,16 588,23±91,26 704,60±64,32 569,16±98,29
IL-1 р +ФГА / IL-1 р сп. 1,22±0,34 0,92±0,06 1,70±0,25*** 1,00±0,03*** 3,45±1,68
IL-ip+ЛПС / IL-ір сп. 2,11 ±0,41 0,99±0,01* 2,22 ±0,24*** 1,07±0,03*' *** 1,29±0,09*
IL-10 сп., пг/мл 43,97±9,86 20,98±2,16 25,63±3,96 26,05±5,35 40,18±6,89
IL-10+ФГА , пг/мл 136,10*26,91 133,38±25,15 136,47±14,87*** 96,81 ±8,34**'*** 45,83±15,27*’ **
IL-10+ЛПС, пг/мл 83,35±11,42 59,30±7,75* 65,67±6,99 64,72±15,20 112,58±20,93
IL-10+ФГА / IL-1 Осп. 4,64±1,09 6,23±0,8 13,05±3,21 5,88±1,07** 1,6±0,57**
IL-10+ЛПС / IL-10cn. 3,24±0,99 3,04 ±3,04 3,30±0,56 3,75±1,55 5,98±1,91
IL-ip сп / IL-10 сп 12,81 ±2,77 45,37±6,16* 15,14±4,15*** 40,01 ±13,04*'*** 14,21 ±3,71
IL-ip+ФГА/IL-10+ФГА 4,56±1,52 8,03±1,51 4,27±0,75 7,33±1,28 21,90 ±5,16*
11_-1(^ЛПС/11_-10+ЛПС 9,08±1,69 16,85±2,44 8,42±1,15*** 21,92±5,36*** 7,55±1,93
Примечание:
*- достоверные отличия с контрольной группой: р< 0,05, р< 0,025, р< 0,0125, при повторных сравнениях.
**- достоверные отличия между 3-й и 4-й группами.
*** - достоверные отличия с 3-й группой:
К - контрольная группа; 1 - условно-здоровые лица с латентной сенситизацией и отягощенным семейным аллергоанамнезом; 2 - условноздоровые лица с латентной сенситизацией и неотягощенным семейным аллергоанамнезом; 3 - больные АР; 4 - больные БА в сочетании с АР.
грузку, сохраняющегося в ремиссию заболевания. При анализе продукции 1Ь-10 у больных БА по сравнению с контрольной группой нами не обнаружено достоверных отличий его уровней при спонтанной и ЛПС-индуцированной продукции, в то же время выявлено статистически значимое снижение его уровня при стимуляции ФГА, что может являться проявлением нарушений в системе регуляции, выражающихся в недостаточности механизмов торможения воспалительного процесса у больных БА. Коэффициент соотношения продукции цитокинов IЬ-1 (3 к IЬ-10 при стимуляции ФГА также был достоверно повышен.
Больные АР отличались от контрольной группы повышением уровней 1Ь-4, достоверно при спонтанной и недостоверно при введении поправки Бонфер-рони при стимуляции ФГА и ЛПС. При этом за счет более выраженного повышения именно спонтанной продукции выявлено статистически значимое сни-
жение коэффициента соотношения продукции 1Ь-4 при индукции ФГА и ЛПС к его спонтанному уровню. Спонтанная и ФГА-индуцированная продукция 1РЫу у больных АР достоверно не отличались от таковой у условно-здоровых лиц, в то же время при стимуляции ЛПС было выявлено статистически значимое снижение как самого уровня №N7, так и снижение коэффициента 1РМу/1Ё-4.
При анализе продукции цитокинов 1Ь-1(3 и 1Ь-10 у больных АР по сравнению с контрольной группой, достоверных отличий продукции 1Ь-10 нами получено не было. Также не обнаружено достоверных отличий продукции 1ЫЗ при стимуляции ФГА и ЛПС. В то же время, отмечается статистически значимое повышение спонтанного уровня 1Ь-1|3 и снижение коэффициента соотношения его ЛПС-индуцированной продукции к спонтанной. При этом коэффициент соотношения уровней 1Ь-1(3 к 1Ь-10 был
достоверное выше при спонтанной продукции, но не при индукции ФГА, что отмечалось у больных Б А.
У условно-здоровых лиц с латентной сенситиза-цией без отягощенного семейного аллергологического анамнеза по сравнению с контрольной группой отмечается как достоверное снижение Л ПС-индуци-рованной продукции 1Р№/, так и ФГА-и ЛПС-инду-цированной продукции П.-4 с достоверным снижением коэффициента ФГА-индуцированной продукции 1Ь-4 к спонтанной. При этом коэффициент 1Р1Чу/ 1Ь-4 был статистически значимо выше при индукции ФГА и достоверно ниже при стимуляции ЛПС.
У условно-здоровых лиц с отягощенным семейным аллергологическим анамнезом по сравнению с контрольной группой отмечается недостоверно более высокий спонтанный уровень 1Ь-4, отсутствие изменений при его ФГА-стимулированной продукции и достоверное снижение коэффициента соотношения его ФГА-индуцированной продукции к спонтанной. Повышение продукция 1Ь-4 при стимуляции ЛПС при введении поправки Бонферрони также не было достоверно. Уровень ЛПС-индуцированной продукции 1РЙу и коэффициент соотношения ЛПС-индуцированной продукции 1РЫук 1Ь-4 в этой группе достоверно ниже, чем в контрольной.
Одновременно у лиц с отягощенным семейным аллергологическим анамнезом отмечается достоверное повышение спонтанной продукции 1Ь-1Р, снижение коэффициента соотношения уровня IЬ-1 (3 при стимуляции ЛПС к его спонтанной продукции, снижение уровня 1Ь-10 при стимуляции ЛПС, достоверное повышение коэффициента соотношения 1Ь-1Р к 1Ь-10 при спонтанной продукции и недостоверное при стимуляции ЛПС.
2. Показатели цитокинового статуса у условно-здоровых лиц с латентной сенситизацией по сравнению с больными АР и у больных АР по сравнению с больными БА. Как показали наши исследования, у больных БА по сравнению с больными АР при отсутствии статистически значимых отличий в спонтанной и индуцированной продукции 1Ь-4, при стимуляции ФГА отмечается достоверно более высокий коэффициент соотношения уровня 1Ь-4 к его спонтанной продукции, более низкое значение 1Ь-10 и коэффициента соотношения его ФГА-индуци-рованной продукции к спонтанной, что в целом свидетельствует о более выраженной направленности иммунного ответа по ТЪ2-типу у больных БА по сравнению с больными АР, сохраняющейся даже в фазу клинической ремиссии заболевания.
При сравнении с больными АР у условно-здоровых лиц с латентной лабораторно верифицированной сенситизацией и отягощенным семейным аллергологическим анамнезом выявляются достоверно более низкие значения уровней спонтанной и ФГА-индуцированной продукции 1Ь-4, достоверно более высокие значения коэффициента соотношения ЛПС-индуцированной продукции 1Ь-4 к спонтанной и коэффициента 1РКу/1Ь-4 при спонтанной и ФГА-индуцированной продукции.
У лиц с отсутствием генетической предрасположенности по сравнению с больными АР выявлены: досто-
верно более низкая спонтанная и индуцированная продукция 1Г-4, достоверно более высокое значение коэффициента 1РМу/1Ь-4 при стимуляции ФГА, достоверно более низкое значение спонтанной продукции 1Ь-1Р при более высоких значениях коэффициента соотношения его ЛПС-и ФГА-индуцированной продукции к спонтанной, более высокая ФГА-индуцирован-ная продукция 1Ь-10 и достоверно более низкие значения коэффициента соотношения уровня 1Ь-1р к 1Ь-10 при спонтанной и ФГА-индуцированной продукции.
Обсуждение
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что и у больных АР, и у больных БА в ремиссию заболевания отмечаются однотипные изменения в продукции как «провоспалительных» и «противовоспалительных», так и основных регуляторных цитоки-нов 1Ь-4 и 1РЫу, отвечающих за девиацию ТЫ/ТН2 иммунного ответа. При этом у больных БА эти изменения более выражены, и по сравнению с контрольной группой выявляется большее число достоверных отличий, что в целом свидетельствует о более выраженной направленности иммунного ответа по ТЪ2 типу у больных БА по сравнению с больными АР, сохраняющейся даже в фазу клинической ремиссии заболевания.
Кроме того, следует отметить, что у всех больных, и АР, и БА, по сравнению с контрольной группой отмечается четкая тенденция к нарушению регуляции иммунного ответа на обычную антигенную нагрузку при стимуляции ЛПС, что проявлялось достоверным снижением продукции 1РЫу, повышением уровня 1Ь-
4, снижением соотношения ЛПС-индуцированных уровней 1Ь-1р, 1РЫу и 1Ь-4 к их спонтанной продукции, и снижением коэффициента 1РЫу /1Ь-4. В целом эти данные согласуются с имеющимися представлениями о формировании иммунной девиации при аллергическом процессе [9, 7, И, 12], с другой стороны выявлена четкая тенденция к повреждению в системе, ответственной за регуляцию воспалительных реакций на другие антигены (не аллергены).
У условно-здоровых лиц с латентной сенситизацией без отягощенного семейного аллергологического анамнеза мы не только не видим повышения продукции П.-4, отмечаемого у больных АР и БА, а даже отмечаем достоверное снижение его стимулированной продукции и повышение коэффициента соотношения продукции 1РЫу к 1Ь-4 при стимуляции ФГА, характеризующих девиацию иммунного ответа в сторону ТЫ. Полученные данные свидетельствуют о том, что даже при наличии высокой степени сенситизации, выражающейся в обнаружении АС высокого уровня к нескольким аллергенам в сыворотке крови [4], у этих лиц отсутствует цитокиновая регуляция по аллергическому типу, что, возможно, является одной из причин развития у них аллергического заболевания. С другой стороны, имеющееся у них снижение ЛПС-индуцированной продукции 1РКу, ставит их на грань группы риска по формированию у них других воспалительных процессов, а выявляемое повышение коэффициента соотноше-
ния продукции ШЫу к IЬ-4 при стимуляции ФГА и его снижение при стимуляции ЛПС, свидетельствуют о формировании дисрегуляции иммунной системы уже на уровне клинического здоровья, в отличие от лиц с отсутствием сенситизации.
У лиц с отягощенным семейным аллергоанамнезом, в отличие от лиц контрольной группы и лиц, не имеющих отягощенный аллергологический анамнез, имеется определенная направленность иммунного ответа в сторону преобладания ТЬ2, что проявляется в повышении 1Ё-4 и снижении №N7 при стимуляции ЛПС. При этом спонтанная и ФГА-индуцированная продукция 1РКу по сравнению с контрольной группой не изменяется, хотя и достоверного повышения коэффициента соотношения уровней П-Иу к 1Ь-4 при стимуляции ФГА, имеющегося у здоровых лиц без отягощенного семейного аллергоанамнеза, мы не выявили. Но в этой группе обследованных отмечается статистически значимое повышение уровня спонтанной продукции 1Ь-1(3, что, по всей видимости, также может быть одним из механизмов регуляторной компенсации формирования аллергического процесса у таких лиц, несмотря на имеющуюся девиацию в сторону ТЬ2. Соотношение провоспалительных цитоки-нов к противовоспалительным у них достоверно повышается в сторону провоспалительных по сравнению с контрольной группой, что, по всей видимости, и позволяет им компенсировать имеющиеся генетически опосредованные нарушения. В целом полученные данные свидетельствуют о том, что, у лиц, не имеющих отягощенный семейный аллергологический анамнез, отмечаются иные механизмы регуляции иммунного ответа в ответ на наличие сенситизации, чем у лиц с отягощенным аллергоанамнезом.
Таким образом, по сравнению с больными АР, у лиц с отсутствием отягощенного семейного аллергологического анамнеза отмечается сохранение иммунного ответа по ТЫ-типу, что выражается в снижении продукции 1Ь-4, и более высоком значении коэффициента 1РНу/1Ь-4 при стимуляции ФГА, при этом отмечается сохранение «про»-и «противовоспалительного» потенциала клеток.
У здоровых лиц, имеющих отягощенный семейный аллергоанамнез и лабораторно-верифицированную сенситизацию, обнаруживается девиация иммунного ответа в сторону преобладания ТЬ2, но выраженность ее достоверно ниже, чем у больных АР, что, возможно, является одним из механизмов сдерживания клинической манифестации заболевания, при этом достоверных отличий в продукции про- и противовоспалительных цитокинов по сравнению с больными АР нами не выявлено. Близость показателей про- и антивоспалительной регуляции у условно-здоровых лиц с отягощенным семейным аллергоанамнезом и у больных АР в фазу клинической ремиссии заболевания, возможно, свидетельствует о том, что состояние ремиссии у больных АР также достигается за счет активации системы регуляции про- и антивоспалительных цитокинов. Это выража-
ется в сохранении способности к повышению продукции провоспалительного цитокина IL-1P, что коррелирует с данными об усилении им фагоцитарных реакций, и сохранении способности к усилению продукции противовоспалительного цитокина IL-10, позволяющих тормозить воспалительные реакции, о чем косвенно свидетельствует тот факт, что у больных БА в фазу клинической ремиссии заболевания такого не наблюдается.
В целом полученные данные свидетельствуют о том, что механизмы развития аллергического процесса зависят не только от уровня девиации иммунного ответа, но и от состояния системы регуляции, принимающей участие в активации систем утилизации антигенной (аллергенной) нагрузки.
Список литературы
1. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы / Под ред. А.Г. Чучалина,-М.: Атмосфера, 2002. - 160 с.
2. Гущин И.С. Достижения в лечении аллергических заболеваний дыхательного тракта // Аллергия, астма и клиническая иммунология. - М., 1998. - С.5-32.
3. Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология: Пер. с нем.: в 3-х т. - М.: Медицина, 1986. -Т. 2.-512 с.
4. Квятковская С.В., Зурочка А.В., Абрамова Н.Н., Рябова Л.В., Лукина Я.В., Хакимова Е.А., Никуш-кина К.В. Выявление аллергенспецифических IgE-антител у клинически - здоровых лиц // Russian Journal of Immunology.- 2004. - Vol. 9. - С. 112.
5. Кетлинский C.A., Калинина Н.М. Иммунология для врача. ■> СПб: Гиппократ, 1998.- 156 с.
6. Паттерсон Р., Грэммер Л.К., Гринберг П.А. Аллергические болезни: диагностика и лечение: Пер. с англ. / М.: Медицина, 2000,- 768 с.
7. Суровенко Т.Н., Шелудько Я.С., Овчинникова О. В. Прогностическое значение исследования IL-4, IFNy и IgE в конденсате выдыхаемого воздуха при бронхиальной астме и аллергическом рините у детей. Цитокины и воспаление. - 2002. -Т.1, - № 4. -С.38-42.
8. Терещенко С.Ю. Клинико-патогенетическая роль структурной организации плазматических мембран при атопических заболеваниях у детей: Авто-реф. дис.... д-ра мед. наук. - Красноярск, 2002,- 29 с.
9. Тотолян А.А., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы. - СПб.: Наука, 2000.- Т.1-2. - 231 с.
10. Федосеев Г.Б. Общая аллергология: В 2 т. -СПб: Нормедиздат, 2001. - 816 с.
11. Lester М., Hofer М., Gately М. Down-regulating effects of IL-4 and IL-10 on the IFNy response in atopic dermatitis / M. Lester, J. Immunol.- 1995,- Vol. 154- P.6174-6181.
12. Savelkoul H., R. van Ommen. Role of IL-4 in persistent IgE formation // Eur. Respir. J. -1996. - Vol. 22.-P. 67-71.
поступила в редакцию 30.09.2004 принята к печати 05.10.2004
