CC BY
9
Исследование роли носительства однонуклеотидных вариантов генов Д-10, та, BDNF, М7М-2 в развитии и клинических особенностях височной эпилепсии
Панина Ю.С., Доморацкая Е.А., Парамонова А.И., Дмитренко Д.В.
ФГБОУВО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Минздрава России, Красноярск Россия, 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1
Височная эпилепсия (ВЭ) является самой распространенной формой фокальной эпилепсии у взрослых с высокой частотой фармако-резистентного течения. Исследования вклада носительства однонуклеотидных вариантов (ОНВ) генов, кодирующих белки нейро-воспаления и нейродегенерации, в развитие ВЭ в Российской Федерации ранее не проводились.
Цель исследования — изучение ассоциации ОНВ rs16944 и rs1143634 гена IL-1fi, rs1800629 гена TNFA, rs6265 гена BDNF, rs3780645 гена NTRK-2 с риском развития, клиническими и нейровизуализационными особенностями ВЭ.
Пациенты и методы. В исследование включено 166 пациентов с ВЭ и 203 здоровых добровольца, проживающих в Сибирском федеральном округе. Исследование включало клинические, нейрофизиологические, нейрорадиологические, лабораторные методы исследования. Исследование носительства ОНВ rs16944 (-511T/C) и rs1143634 (+3954C/T) гена IL-10, rs1800629 (G-308A) гена TNFA, rs6265 (G/A) гена BDNF, rs3780645 (C/T) и rs2289656 (C/T) гена NTRK-2 проведено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.
Результаты и обсуждение. Установлена прогностически неблагоприятная роль носительства аллеля А и генотипа GA rs1800629 гена TNFA в развитии ВЭ, генотипа GA rs6265 гена BDNF с развитием ВЭ с гиппокампальным склерозом. Носи-тельство генотипа АА rs1800629 гена TNFA у пациентов с ВЭ снижает риск политерапии противоэпилептическими препаратами.
Заключение. Изучение процессов нейровоспаления и нейродегенерации важно как с физиологической точки зрения, так и с точки зрения поиска маркеров развития ВЭ, позволяющих предсказать и оценить темп прогрессирования заболевания, помочь в определении тактики лечения и оценке его эффективности. В связи с этим в настоящее время выявление потенциальных генетических маркеров остается крайне актуальной задачей.
Ключевые слова: височная эпилепсия; IL-1fi; TNFA; BDNF; NTRK-2; однонуклеотидный полиморфизм; ген; фармакорезистент-ность.
Контакты: Екатерина Алексеевна Доморацкая; e.domorats@yandex.ru
Для ссылки: Панина ЮС, Доморацкая ЕА, Парамонова АИ, Дмитренко ДВ. Исследование роли носительства однонуклеотидных вариантов генов IL-1fi, TNFА, BDNF, NTRK-2 в развитии и клинических особенностях височной эпилепсии. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2022;14(5):28—35. DOI: 10.14412/2074-2711-2022-5-28-35
Study of the role of carriage of single nucleotide variants of the IL-10, TNFA, BDNF, NTRK-2 genes in the development and clinical features of temporal lobe epilepsy Panina Yu.S., Domoratskaya E.A., Paramonova A.I., Dmitrenko D.V.
V.F. Voyno-Yasenetsky Krasnoyarsk Medical State University, Ministry of Health of Russia, Krasnoyarsk 1, Partizana Zheleznyaka St., Krasnoyarsk 660022, Russia
Temporal lobe epilepsy (TE) is the most common form of focal epilepsy in adults with a high rate of drug-resistant course. In the Russian Federation studies of the contribution of the carriage of single nucleotide variants of genes (SNGs) encoding proteins of neuroinflammation and neurodegeneration to the development of TE have not been previously carried out.
Objective: to study the association of SNGs rs16944 and rs1143634 of the IL-ipgene, rs1800629 of the TNFA gene, rs6265 of the BDNF gene, rs3780645 of the NTRK-2 gene with the risk of development, clinical and neuroimaging features of TE.
Patients and methods. The study included 166 patients with TE and 203 healthy volunteers living in the Siberian Federal District. The study included clinical, neurophysiological, neuroradiological, and laboratory work-up. Investigation of the carriage of SNGs rs16944 (-511T/C) and rs1143634 (+3954C/T) of the IL-ip gene, rs1800629 (G-308A) of the TNFA gene, rs6265 (G/A) of the BDNF gene, rs3780645 (C/T) and rs2289656 (C/T) of the NTRK-2 gene was carried out by real-time polymerase chain reaction.
Results and discussion. The prognostically unfavorable role of carriage of the A allele and the GA rs1800629 genotype of the TNFA gene in the development of TE, the GA rs6265 genotype of the BDNF gene in the development of TE with hippocampal sclerosis was established. Carrying the genotype AA rs1800629 of the TNFA gene in patients with TE reduces the risk of polytherapy with antiepileptic
Conclusion. The study of neuroinflammation and neurodegeneration processes is important both from a physiological point of view and from the point of view of searching for the TE development markers, which make it possible to predict and evaluate the rate of disease progression, help to determine the tactics of treatment, and evaluate its effectiveness. In this regard, at present, the identification of potential genetic markers remains a task of high priority.
Keywords: temporal lobe epilepsy; IL-1fi; TNFA; BDNF; NTRK-2; single nucleotide polymorphism; gene; pharmacoresistance. Contact: Ekaterina Alekseevna Domoratskaya; e.domorats@yandex.ru
For reference: Panina YuS, Domoratskaya EA, Paramonova AI, Dmitrenko DV. Study of the role of carriage of single nucleotide variants of the IL-1/3, TNFA, BDNF, NTRK-2 genes in the development and clinical features of temporal lobe epilepsy. Nevrologiya, neiropsikhiatriya, psikhosomatika = Neurology, Neuropsychiatry, Psychosomatics. 2022;14(5):28—35. DOI: 10.14412/2074-2711-2022-5-28-35
Височная эпилепсия (ВЭ) является самой распространенной формой фокальной эпилепсии у взрослых [1, 2]. У 40% пациентов эпилептические приступы рефрактерны к медикаментозной терапии [3—5].
Экспериментальные и клинические данные свидетельствуют о том, что нейровоспалительные и нейродегене-ративные процессы могут усиливать друг друга, способствуя возникновению и хронизации эпилепсии, а также формированию фармакорезистентности [6—9]. Белковые биомаркеры воспаления и нейродегенерации при ВЭ изучены в экспериментальных моделях, в ткани гиппокампов пациентов с резистентными формами ВЭ, крови или ликворе пациентов [10—12].
Исследования вклада носительства однонуклеотид-ных вариантов (ОНВ) генов, кодирующих белки нейровос-паления и нейродегенерации, в развитие ВЭ активно проводятся на протяжении нескольких лет, однако в Российской Федерации подобные исследования ранее не проводились [13, 14].
Цель исследования — изучение ассоциации носительства ОНВ ге16944 и к1143634 гена 1Ь-1р, ге1800629 гена ГтА, к6265 гена ББт, к3780645 гена ШТЯК-2 с риском развития, клиническими и нейровизуализационными особенностями ВЭ.
Пациенты и методы. Исследование одобрено на заседании локального этического комитета ФГБОУ ВО «КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Минздрава России (выписка из протокола № 85/2018 от 27 сентября 2018 г.). Перед включением в исследование все пациенты подписали форму добровольного информированного согласия.
В исследование включено 166 пациентов с мезиальной ВЭ и 203 здоровых добровольца.
Критерии включения в основную группу: пациенты с мезиальной ВЭ; возраст от 16 до 80 лет; жители Сибирского федерального округа; наличие добровольно подписанного информированного согласия. Критерии исключения: пациенты с другими формами эпилепсии; отсутствие добровольно подписанного информированного согласия; повышение температуры тела на момент исследования выше 36,9 °С; перенесенные в течение 1 мес острые заболевания или обострение хронических заболеваний.
Критерии включения в контрольную группу: здоровые люди; возраст от 16 до 80 лет; наличие добровольно подписанного информированного согласия. Критерии исключения: наличие нейропсихических заболеваний; субклинические эпилептиформные изменения на ЭЭГ; повышение температуры тела на момент исследования выше 36,9 °С; перенесенные в течение 1 мес острые заболевания или обост-
рение хронических заболеваний; отсутствие добровольно подписанного информированного согласия.
Исследование включало клинические (анализ анамнеза, исследование неврологического статуса, оценка тяжести эпилептических приступов с использованием Национальной госпитальной шкалы тяжести эпилептических приступов), нейрофизиологические (ЭЭГ-видео-монито-ринг); нейрорадиологические (МРТ головного мозга), лабораторные (биохимические, молекулярно-генетические) методы исследования.
Молекулярно-генетические исследования проведены в лаборатории медицинской генетики с использованием приборной базы Центра коллективного пользования ФГБОУ ВО «КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого».
Исследование носительства ОНВ проведено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ) на аппарате Rotor-Gene 6000 (Corbett Life Science, Австралия) с использованием технологии аллель-ной дискриминации TaqMan и флюоресцентных зондов Applied Biosystems (США) для rs16944 (-511T/C) и rs1143634 (+3954C/T) гена IL-ip, rs1800629 (G-308A) гена TNFA; и «Синтол» (Россия) для rs6265 (G/A) гена BDNF, rs3780645 (C/T) гена NTRK-2.
Забор крови у пациентов производили из кубиталь-ной вены в вакуумные пробирки IMPROVACUTER (Guangzhou Improve Medical Instruments, Китай), содержащие 0,5 М раствор этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА). Выделение геномной ДНК из 0,1 мл взвеси лейкоцитов осуществляли сорбционным методом с помощью набора «ДНК-Сорб-B» (103-20, «АмплиПрайм», Россия) согласно инструкции производителя. Выделенную ДНК хранили при температуре -20 °С. В состав буфера для ПЦР-РВ входила 2,5-кратная реакционная смесь, адаптированная для ПЦР-РВ, 25 мМ MgCl2, ddH2O (M-428, «Синтол», Россия).
Статистические методы. По результатам исследования в программе MS Excel 2013 была сформирована база данных, на основе которой с помощью пакета программ SPSS Statistics (версия 19.0) осуществлялся статистический анализ. Для описания количественных данных с ненормальным распределением использовалась медиана (Ме) и интерквартильный размах [25-й; 75-й перцентили]. Для описания качественных данных использовали 95% доверительный интервал (95% ДИ). Для сравнения нескольких групп по количественному признаку применяли непараметрический дисперсионный анализ (критерий Краскел-ла—Уоллиса) с последующими попарными сравнениями групп между собой; для сравнения двух групп применяли критерий Манна—Уитни. Для определения статистической
значимости различий между качественными признаками применяли критерий хи-квадрат Пирсона (х2) при значениях ожидаемых частот больше 5. Для оценки факторов риска, ассоциирующихся с развитием ВЭ, оценивали показатели отношения шансов (ОШ; 95% ДИ) или отношения рисков (ОР; 95% ДИ). Для оценки связи между количественными признаками, имеющими ненормальное распределение, использовался коэффициент корреляции Спирмена (г). Межгрупповые различия признавались статистически значимыми при значении р<0,05.
Результаты. Возраст пациентов с ВЭ в исследуемой группе на момент исследования варьировал от 16 до 76 лет. Медиана возраста составила 35,0 [29,0; 46,0] года. Распределение пациентов по полу: мужской — 69 (41,6%) человек, женский — 97 (58,4%) человек. Возраст дебюта ВЭ составил 19,0 [13,0; 30,5] года. Длительность заболевания в 54% (89/166) случаев превышала 10 лет, медиана — 11,0 [9,0; 20,0] года.
В 74,7% случаев (124/166) регистрировались билатеральные тонико-клонические приступы с фокальным началом. Тяжесть эпилептических приступов по Национальной госпитальной шкале варьировала от 1 до 23 баллов, медиана - 13,0 [11,0; 16,0] балла.
Структурная этиология ВЭ выявлена в 51,8% случаев. По результатам анализа данных МРТ головного мозга пациенты с ВЭ были разделены на три группы: ВЭ с гиппокам-
Таблица 1.
Table 1.
Частота носительства аллелей ОНВ генов IL-1ß, TNFA, BDNF, NTRK-2
Frequencies of SNGs alleles of IL-1ß, TNFA, BDNF, NTRK-2 genes
IL-1ß
IL-1ß
BDNF
NTRK-2
TNFA
rs16944
rs 1143634
rs6265
rs3780645
rs1800629
-511T/C +3954C/T G/A (C/T) (G-308A)
65,7 24,0 18,9 3,9 16,5
пальным склерозом (ГС) — 62 (37,4%); без структурных изменений головного мозга (МР-негативные) — 40 (24,1%); с другими структурными изменениями — 64 пациента (38,6%; исключены из последующего анализа).
Частота носительства аллелей ОНВ генов IL-1ß, TNFA, BDNF, NTRK-2 среди пациентов с ВЭ, проживающих на территории Красноярского края, и европейской популяции по данным международной базы данных Genome Aggregation Database (gnomAD; доступна по электронному адресу: https://gnomad.broadinstitute.org/) представлена в табл. 1. Распределение частот аллелей и генотипов изучаемых ОНВ генов IL-1ß, TNFA, BDNF, NTRK-2 соответствует равновесию Харди—Вайнберга (РХВ).
При проведении молекулярно-генетического анализа выявлена статистически значимая ассоциация носительства аллеля А rs1800629 гена TNFA с развитием ВЭ (ОШ=8,21; 95% ДИ 1,8-37,51; х2=10,035; р=0,002).
Носительство генотипа GA увеличивает риск развития ВЭ в 2,52 раза (ОР=2,51; 95% ДИ 2,11-3,0; х2=30,137; р<0,001). Также носительство аллеля А и генотипа GA rs1800629 гена TNFA ассоциировано с развитием ВЭ с ГС (ОШ=12,33; 95% ДИ 2,36-64,52; х2=13,283; р<0,001 и ОР=6,38; 95% ДИ 4,31-9,45; х2=45,056; р<0,001 соответственно). Выявлена статистически значимая ассоциация с развитием МР-негативной ВЭ для носителей аллеля A (ОШ=7,57; 95% ДИ 1,19-47,98; х2=6,135; р=0,014) и генотипа GA (ОР=6,38; 95% ДИ 4,31-9,45; Х2=19,265; р<0,001) rs1800629 гена TNFA в сравнении с контрольной группой (рис. 1; табл. 2).
Носительство генотипа AA rs 1800629 гена TNFA ассоциировано с типом фармакотерапии ВЭ (ОР=4,82; 95% ДИ 1,71-13,61; р=0,003), снижает риск политерапии противоэпилептическими препаратами (ПЭП) в 4,82 раза (табл. 3).
Выявлена статистически значимая ассоциация носительства генотипа GA rs6265 гена BDNF с развитием ВЭ с ГС (ОШ=2,22; 95% ДИ 1,17-4,18; х2=6,662; р=0,036) в сравнении с контрольной группой (табл. 4).
67,4 23,7 17,1 4,8 12,9
Рис. 1. Частота носительства аллелей и генотипов rs1800629 гена TNFA у пациентов с ВЭ ив контрольной группе Fig. 1. The frequency of carriage of alleles and genotypes of the rs1800629 of the TNFA gene in patients with TE and in the control group
Таблица 2. Частота носительства генотипов и аллелей rs1800629 гена TNFA в группах сравнения
Table 2. Frequency of carriage of genotypes and alleles of the rs1800629 of the TNFA gene in the groups
of comparison
Аллели, генотипы основная группа (n=97) 1 Число обследованных, n (%) контрольная ВЭ с ГС группа (n=113) (n=33) 2 3 МР-негативная ВЭ (n=25) 4 х2; р ОШ/ОР; 95% ДИ
G 169 (87,1) 111 (98,2) 27 (81,8) 22 (88) X2! 2=10,035; р/ 2=0,002*; X22,3=13,283; р2 3<0,001*; ОШ1 2=0,12; 95% ДИ1 2 0,03-0,56 ОШ1 3=0,08; 95% ДИ2 3 0,02-0,42 ОШ2 4=0,13; 95% ДИ2, 4 0,02-0,84 ОШ^ 4=1,63; 95% ДИ2,4 0,37-7,27
A 25 (12,9) 2(1,8) 6(18,2) 3 (12) X22.4=6,135; Р2 4=0,014*; X23 4=0,415; р3, 4=0,52 ОШ1 2=8,21; 95% ДИ1 21,8-37,51 ОШ2 3=12,33; 95% ДИ2' 3 2,36-64,52 ОШ2 4=7,57; 95% ДИ2 4 1,19-47,98 0Ш3,4=0,61; 95% ДИ3,4 0,14-2,74
GG 73 (75,9) 111 (98,2) 21 (63,6) 20 (80) X21, 2=30,137; р1 2<0,001*; ОШ1 2=0,06; 95% ДИ1 2 0,01-0,4 ОШ2 3=0,03; 95% ДИ2 3 0,01-0,15 ОШ2 4=0,07; 95% ДИ2 4 0,01-0,4 ОШ3, 4=0,23; 95% ДИ3,4 0,04-1,36
GA 23 (22,5) 0 12(36,4) 4 (16) X22 3=45,056; р2' 3<0,001*; X22, 4=19,265; р2, 4<0,001*; ОР1 2=2,51; 95% ДИ1 2 2,11-3,0 ОР2 '3=6,38; 95% ДИ2 3 4,31-9,45 ОР2, 3=6,38; 95% ДИ2, „ 4,31-9,45 ОШ3, 4=2,33; 95% ДИ3, 4 0,45-12,23
AA 1 (1,6) 2(1,8) 0 1 (4) X23.4=2,452; р3, 4=0,294 ОШ1 2=1,23; 95% ДИ1 2 0,05-6,48 ОР2 3=4,36; 95% ДИ2 3 3,23-5,89 ОШ2 4=2,31; 95% ДИ2, 4 0,20-26,55 ОР/4=6,5; 95% ДИ3 4 3,11-13,57
РХВ, х2(р) 0,305 (p=0,58) 113 (p=0) 1,63 (p=0,202) 1,469 (p=0,225)
Примечание. Здесь и в табл. 3 и 4: * — различия статистически значимы.
Статистически значимая взаимосвязь носительства аллелей и генотипов ОНВ ге16944, ге1143634 гена 1Е-1$, а также ге3780645 гена МТБЖ-2 с развитием ВЭ не выявлена (р>0,05; табл. 5).
При анализе концентрации BDNF и TNFa в плазме крови в зависимости от генотипа ге6265 гена ББ^ и генотипа ге1800629 гена Т№Л статистически значимых различий не получено (р>0,05; рис. 2).
Обсуждение. ВЭ является самой распространенной формой фокальной эпилепсии у взрослых, в клинической практике наиболее часто встречаются пациенты с неуточненным этиологическим фактором [1, 2].
В большинстве случаев причиной структурной фокальной ВЭ являются черепно-мозговые травмы, опухоли головного мозга, инсульты, перенесенный эпилептический статус с формированием ГС [15—17]. С течением ВЭ во времени характерно формирование фармакорези-стентности [16]. Доля больных с достижением полной ремиссии составляет от 11 до 25% (из них 48% — при монотерапии и 52% — при политерапии), с уменьшением (на 50% и более) частоты приступов — 60% и с абсолютной резистентностью — 6—40% [3, 18].
Таблица 3.
Table 3.
Одним из приоритетных направлений являются исследования, направленные на изучение клинико-диагностических биомаркеров мезиальной ВЭ, в том числе в разрезе ее генетических, биохимических, нейрорадиологиче-ских, нейрофизиологических и клинических особенностей.
Ген 1Ь-1р (интерлейкина 1|3) локализован в области q14 хромосомы 2. Наибольший интерес вызывают ОНВ, расположенный в промоторной области в положении т-1|3-511СТ (ге16944), и другой - в экзоне 5 ^-1|3-3953 СТ (к1143634) [19]. Для т-1|3-511 обнаружена высокая частота генотипа ТТ в группе с мезиальной ВЭ с ГС по сравнению с контролем [20] и в большей выборке [21]. От-
Ассоциация носительства генотипов rs1800629 гена TNFA с фармакотерапией ВЭ Association of carriage of the genotypes rs1800629 of the TNFA gene with TE pharmacotherapy
Число обследованных, n (%)
Генотип группа монотерапии (n=51) группа политерапии (n=46) X2 p ОР; 95% ДИ
AA 45 (88,2) 28 (60,9) 4,82; 95% ДИ 1,71- 13,61
GA 5 (9,8) 18 (39,1) 12,081 0,003* 0,17; 95% ДИ 0,06- 0,51
GG 1 (2) 0 1,92; 95% ДИ1,59- 2,33
Таблица 4. Частота носительства генотипов и аллелей rs6265 гена BDNF в группах сравнения
Table 4. Frequency of carriage of rs6265 genotypes and alleles of the BDNF gene in the comparison groups
Генотип основная группа (n=158) 1 Число обследованных, n (%) контрольная ВЭ с ГС группа (n=201) (n=58) 2 3 МР-негативная ВЭ (n=39) 4 x2; р ОШ; 95% ДИ
AA 5 (3,2) 8 (4) 3 (5,2) 1 (2,6) x21, 2=2,772; р1 2=0,251; x22,3=6,662; P2 3=0,036*; x22 4=0,77; P2, 4=0,681; ОШ1 2= ОШ12, ,23= ОШ2, 4= ОШ32, ,44= 0,789; 95% ДИ1 2 0,25 = 1,32; 95% ДИ2 '3 0,34-=0,64; 95% ДИ2 4 0,081,17; 95% ДИ3, 4 0,048 -2,46 5,13 5,23 -4,82
GA 44 (27,9) 41 (20,4) 21 (36,3) 6 (15,4) ОООО = 1,51; 95% ДИ1 2 0,92-=2,22; 95% ДИ2' 3 1,17-=0,71; 95% ДИ2, 4 0,28-=0,32; 95% ДИ3, 4 0,12- 2,46 4,18 1,81 0,89
GG 109 (68,9) 152 (75,6) 34 (58,6) 32 (82) x23, 4=5,899; р3, 4=0,053 ОШ1 2= ОШ2, 3= ОШ2 4= ОШ3.4 =0,72; 95% ДИ1 2 0,45-=0,42; 95% ДИ2 30,22-= 1,47; 95% ДИ2 4 0,61-=3,23; 95% ДИ3,41,22- 1,14 0,78 3,55 8,52
РХВ, x2 (р) 0,047 (p=0,828) 5,266 (p=0,022) 0,011 (p=0,917) 1,053 (p=0,305)
Таблица 5. Частота носительства генотипов rs16944, rs1143634, rs1143627 гена IL-1/3, rs3780645 и rs2289656 гена NTRK-2 в группах сравнения
Table 5. Frequency of carriage of the genotypes rs16944, rs1143634, rs1143627 of the IL-1fi gene,
rs3780645 and rs2289656 of the NTRK-2 gene in groups of comparison
Генотип Число обследованных, n (%) основная группа контрольная группа x2; р 1 2 ОШ; 95% ДИ
rs16944 (-511C/T) гена IL-1/3
(n=158) (n=203)
СС 68 (43,1) 79 (38,9) ОШ1, 2= =1,19; 95% ДИ1, 2 0,78- 1,81
СТ 77 (48,7) 99 (48,8) * 22=0'421l; ОШ1, 2= =0,99; 95% ДИ1, 2 0,66- 1,51
ТТ 13 (8,2) 25 (12,3) ОШ1, 2= =0,64; 95% ДИ1, 20,32- 1,29
РХВ, x2 (P) 1,88 (p=0,17) 0,5 (p=0,479)
rs1143634 (+3954C/T) гена IL-1/3
(n=158) (n=203)
СС 89 (56,3) 113 (55,7) ОШ1, 2= = 1,03; 95% ДИ1, 2 0,68- 1,56
СТ 63 (39,9) 78 (38,4) x21, 2= р1, 2= 0,851; 0,654 ОШ1, 2=1,06; 95% ДИ1, 2 0,64- 1,63
ТТ 6 (3,8) 12 (5,9) ОШ1, 2=0,628; 95% ДИ1, 2 0,23 -1,71
РХВ, x2 (р) 1,623 (p=0,202) 0,092 (p=0,762)
rs3780645 (C/T) гена NTRK-2
(n=135) (n=196)
СС 122 (90,4) 180 (91,8) x21, 2= 0,215; ОШ1, 2=0,83; 95% ДИ1, 20,39 -1,8
СТ 13 (9,6) 16 (8,2) р1, 2= 0,643 ОШ1, 2=1,2; 95% ДИ1, 2 0,56- 2,58
ТТ 0 -
РХВ, x2 (P) 0,345 (p=0,557) 0,355 (p=0,551)
220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0
240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 -20
1 2 3
BDNF: 1 - GG, 2 - GA, 3 - AA
Median 25%-75% Non-outlier range Outliers Extremes
*
□ Median
8 □ 25%-75%
I Non-outlier range
т 11,565 26,3 о Outliers
11131 =3= * Extremes
1 2 3
TNF: 1 -GG, 2 - GA, 3 AA
220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0
240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 -20
*
25,87 О
26,0883
^±г1 О
1 2 BDNF: 1 - GG, 2 - GA+AA
1 2 TNF: 1 - GG, 2 - GA+AA
Ie Median
□ 25%—75%
I Non-outlier range
о Outliers
* Extremes
Ie Median
□ 25%—75%
I Non-outlier range
о Outliers
* Extremes
Рис. 2. Влияние носительства ОНВ rs6265 гена BDNF и rs1800629 гена TNFA на концентрацию BDNF и TNFa в плазме крови Fig. 2. Influence of carriage of SNGs rs6265 of the BDNFgene and rs1800629 of the TNFA gene on the concentration of BDNF and TNFa in blood plasma
мечалось, что аллель T rs16944 оказывает умеренное влияние на восприимчивость к мезиальной ВЭ с ГС [19]. По данным исследования B. Leal и соавт. [22], частота носительства генотипа TT rs16944 была выше (p=0,021) у пациентов с мезиальной ВЭ с ГС в сравнении с контрольной группой. Однако эти ассоциации не подтверждались в других исследованиях [23—27]. В нашем исследовании носительство ОНВ rs16944 иге1143634 гена IL-1fi также не показало статистически значимой связи с развитием и течением ВЭ.
Ген BDNF (нейротрофического фактора мозга) локализован в области р14.1 хромосомы 11 [28]. Одним из наиболее исследованных ОНВ в гене BDNF является замена ну-клеотида G/A в 196-м положении в 8-м экзоне (rs6265), которая приводит к снижению активности BDNF-зависимой секреции, резко изменяя внутриклеточный транспорт и упаковку проBDNF [29, 30]. Показано, что полиморфизм rs6265 гена BDNF может быть связан с эпилептогенезом, а аллель А играет защитную роль в развитии эпилепсии [31]. Также выявлено, что полиморфизм rs6265 гена BDNF связан с развитием эпилепсии, в большей степени у азиатского населения [32]. По результатам нашего исследования выявлено, что носительство генотипа GA rs6265 гена BDNF прогностически неблагоприятно связано с развитием ВЭ с ГС, что согласуется с исследованиями N. Shen и соавт. [31] и Xu Yue-Long и соавт. [32].
Ген NTRK-2 нейротрофического тирозинкиназного рецептора 2-го типа) является потенциальной молекулярной мишенью для блокирования эпилептогенеза и ле-
чения эпилепсии [33]. Аллельные варианты гена NTRK-2 впервые были связаны с депрессией и ответом на терапию антидепрессантами [34, 35], уязвимостью к никотиновой зависимости [36], с аутизмом [37], болезнью Альц-геймера [38].
Имеются одиночные исследования вариантов гена NTRK-2 при эпилепсии у человека, где сравнивались частоты вариантов NTRK-2 между пациентами с мезиальной ВЭ и контрольной группой. Аллель Т rs3780645 чаще встречался у пациентов, получавших политерапию, чем у получавших монотерапию, что может свидетельствовать о сложности контроля над приступами в данной группе пациентов [39]. В нашем исследовании ОНВ rs3780645 гена NTRK-2 не показал статистически значимой связи с развитием и течением ВЭ.
В настоящей работе впервые показана статистически значимая ассоциация носительства аллеля А и генотипа GA rs1800629 гена TNFA с развитием ВЭ. Кроме того, выявлено, что носительство генотипа АА rs1800629 гена TNFA у пациентов с ВЭ оказывает протективное действие и снижает вероятность политерапии ПЭП в 4,82 раза (ОР=4,82; 95% ДИ 1,71—13,61; р=0,003). С другой стороны, в исследовании B. Leal и соавт. [22] отсутствовала ассоциация между аллелями и генотипами rs1800629 гена TNFA и восприимчивостью к мезиальной ВЭ с ГС на примере 196 пациентов с ВЭ с ГС в сравнении с контрольной группой из португальской популяции.
По результатам нашего исследования, также отсутствовала статистически значимая корреляция носительства
ОНВ rs6265 гена BDNF и rs1800629 гена TNFA с концентрацией BDNF и TNFa в плазме крови.
Отсутствие положительных генетических ассоциаций с ВЭ, подтвержденных несколькими независимыми исследованиями, может быть обусловлено небольшим размером выборки пациентов с мезиальной ВЭ и/или клинической неоднородностью почти во всех исследованиях.
Заключение. По результатам проведенной работы нами установлена прогностически неблагоприятная роль носительства аллеля А и генотипа GA rs1800629 гена TNFA в развитии ВЭ, генотипа GA rs6265 гена BDNF с развитием ВЭ с ГС. Носительство генотипа АА
ге1800629 гена TNFA у пациентов с ВЭ снижает риск политерапии ПЭП.
Анализ литературы показал, что в настоящее время изучение процессов нейровоспаления и нейродегенерации важно как с физиологической точки зрения, так и с точки зрения поиска маркеров развития ВЭ, позволяющих предсказать и оценить темп прогрессирования заболевания, помочь в определении тактики лечения и оценке его эффективности.
В связи с этим в настоящее время выявление потенциальных генетических маркеров остается крайне актуальной задачей.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Карлов ВА. Эпилепсия у детей и взрослых женщин и мужчин: Руководство
для врачей. 2-е изд. Москва: Бином; 2019. 893 с.
[Karlov VA. Jepilepsija u detej i vzroslyh zhensh-hin i muzhchin. Rukovodstvo dlja vrachej [Epilepsy in children and adult women and men. Manual for physicians]. 2nd ed. Moskow: Binom; 2019. 893 p. (In Russ.)].
2. Tellez-Zenteno JF, Hernandez-Ronquillo L. A review
of the epidemiology of temporal lobe epilepsy. Epilepsy Res Treat. 2012;2012:630853. doi: 10.1155/2012/630853. Epub 2011 Dec 29.
3. Одинак ММ, Базилевич СН, Прокудин МЮ и др. Фармакорезистент-ность при фокальных эпилепсиях у взрослых. В кн.: Гусева ЕИ, Гехт АБ, редакторы. Эпилепсия: фундаментальные, клинические и социальные аспекты. Москва: АПКИП-ПРО; 2013. С. 691-701.
[Odinak MM, Bazilevich SN, Prokudin MYu, et al. Pharmacoresistance in focal epilepsy in adults. In: Guseva EI, Geht AB, editors. Jepilepsija: fundamental 'nye, klinicheskie i social'nye aspekty [Epilepsy: fundamental, clinical and social aspects]. Moskow: APKIPPRO; 2013. P. 691-701 (In Russ.)].
4. De Lanerolle NC, Lee TS. New facets of the neuropathology and molecular profile of human temporal lobe epilepsy. Epilepsy Behav. 2005 Sep;7(2):190-203.
doi: 10.1016/j.yebeh.2005.06.003
5. Panayotopoulos CP. The epilepsies: seizures, syndromes and management. Oxfordshire (UK): Bladon Medical Publishing; 2005. 540 p.
6. Липатова ЛВ, Серебряная НБ, Сивакова НА. Роль нейровоспаления в патогенезе эпилепсии. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2018;10(1):38-45. doi: 10.14412/2074-2711-2018-1S-38-45
[Lipatova LV, Serebrjanaja NB, Sivakova NA. The role of neuroinflammation in the pathogenesis of epilepsy. Nevrologiya, neiropsikhia-triya, psikhosomatika = Neurology, Neuropsychiatry, Psychosomatics. 2018;10(1):38-45. doi: 10.14412/2074-2711-2018-1S-38-45 (In Russ.)].
7. Vezzani A, Maroso M, Balosso S, et al. IL-1 receptor/Toll-like receptor signaling
in infection, inflammation, stress and neurodegeneration couples hyperexcitability and seizures. Brain Behav Immun. 2011 Oct;25(7):1281-9.
doi: 10.1016/j.bbi.2011.03.018. Epub 2011 Apr 5.
8. Vezzani A, Fujinami RS, White HS, et al. Infections, inflammation and epilepsy. Acta Neuropathol. 2016 Feb;131(2):211-34.
doi: 10.1007/s00401-015-1481-5. Epub 2015 Sep 30.
9. Wahab A. Difficulties of treatment
and management of epilepsy and challenges of new drug development. Pharmaceuticals (Basel). 2010 Jul 5;3(7):2090-110. doi: 10.3390/ph3072090
10. Ma L, Li R, Huang H, et al. Up-regulated BAFF and BAFF receptor expression
in patients with intractable temporal lobe epilepsy and a pilocarpine-induced epilepsy rat model. Seizure. 2017 May;48:79-88. doi: 10.1016/j.seizure.2017.03.016. Epub 2017 Apr 8.
11. Yu N, Di Q, Hu Y, et al. A meta-analysis of pro-inflammatory cytokines in the plasma of epileptic patients with recent seizure. Neurosci Lett. 2012 Apr 11;514(1):110-5. doi: 10.1016/j.neulet.2012.02.070. Epub 2012 Mar 3.
12. Chen NC, Chuang YC, Huang CW, et al. Interictal serum brain-derived neurotrophic factor level reflects white matter integrity, epilepsy severity, and cognitive dysfunction in chronic temporal lobe epilepsy. Epilepsy Behav. 2016 Jun;59:147-54.
doi: 10.1016/j.yebeh.2016.02.029. Epub 2016 May 3.
13. Thakran S, Guin D, Singh P, et al. Genetic Landscape of Common Epilepsies: Advancing towards Precision in Treatment. Int J Mol Sci. 2020 Oct 21;21(20):7784.
doi: 10.3390/ijms21207784
14. Salzmann A, Malafosse A. Genetics of temporal lobe epilepsy: a review. Epilepsy Res Treat. 2012;2012:863702. doi: 10.1155/2012/863702. Epub 2012 Feb 19.
15. Котов АС, Рудакова ИГ, Котов СВ. Клиника, диагностика и лечение височной эпилепсии. Эффективная фармакотерапия. Неврология и психиатрия. 2010;(1):52-7. [Kotov AS, Rudakova IG, Kotov SV. Clinic, diagnosis and treatment of temporal lobe epilepsy. Jeffektivnaja farmakoterapija. Nevrologija ipsihiatrija. 2010;(1):52-7
(In Russ.)].
16. Мухин КЮ, Гатауллина СХ, Петрухин АС. Палеокортикальная височная эпилепсия, обусловленная мезиальным височным склерозом: клиника, диагностика и лечение (обзор литературы). Русский журнал детской неврологии. 2008;(3):41-60. [Muhin KYu, Gataullina SKh, Petruhin AS. Paleocortical temporal lobe epilepsy due
to mesial temporal sclerosis: clinic, diagnosis and treatment (literature review). Russkij zhurnal detskoj nevrologii. 2008;(3):41-60 (In Russ.)].
17. Шнайдер НА, Мартынова ГП, Строганова МА и др. Фебрильные приступы
как триггер мезиального височного склероза: клинический случай. Проблемы женского здоровья. 2015;10(1):69-78. [Shnajder NA, Martynova GP, Stroganova MA, et al. Febrile seizures as trigger of mesial temporal sclerosis: case report. Problemy zhenskogo zdorovja. 2015;10(1):69-78 (In Russ.)].
18. Cendes F, Kanane P, Brodie M.
Le syndrome d'epilepsiemesio-temporale. In: Roger J, Bureau M, Dravet, et al, editors. Les syndromes epileptiques de l'enfant et de l'adolescent. Montrouge: John Libbey; 2005. P. 555-67.
19. Kauffman MA, Moron DG, Consalvo D, et al. Association study between interleukin 1 p gene and epileptic disorders: a HuGe review and meta-analysis. Genet Med. 2008 Feb;10(2):83-8.
doi: 10.1097/GIM.0b013e318161317c
20. Kanemoto K, Kawasaki J, Miyamoto T, et al. Interleukin (IL)-1p, IL-1p, and IL-1 receptor antagonist gene polymorphisms in patients with temporal lobe epilepsy. Ann Neurol. 2000 May;47(5):571-4.
21. Kanemoto K, Kawasaki J, Yuasa S, et al. Increased frequency of interleukin-1p-511T
allele in patients with temporal lobe epilepsy, hippocampal sclerosis, and prolonged febrile convulsion. Epilepsia. 2003 Jun;44(6):796-9. doi: 10.1046/j.1528-1157.2003.43302.x
22. Leal B, Chaves J, Carvalho C, et al. Immunogenetic predisposing factors for mesial temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis. Int JNeurosci. 2018 Apr;128(4):305-10. doi: 10.1080/00207454.2017.1349122
23. Jin L, Jia Y, Zhang B, et al. Association analysis of a polymorphism of interleukin 1ß (IL-1ß) gene with temporal lobe epilepsy
in a Chinese population. Epilepsia. 2003 0ct;44(10):1306-9. doi: 10.1046/j.1528-1157.2003.11003.x
24. Heils A, Haug K, Kunz WS, et al. Interleukin-1ß gene polymorphism and susceptibility to temporal lobe epilepsy
with hippocampal sclerosis. Ann Neurol. 2000 Dec;48(6):948-50.
25. Buono RJ, Ferraro TN, O'Connor MJ, et al. Lack of association between
an interleukin 1 beta (IL-1ß) gene variation and refractory temporal lobe epilepsy. Epilepsia. 2001 Jun;42(6):782-4. doi: 10.1046/j.1528-1157.2001.42900.x
27. Yeni SN, Ozkara C, Buyru N, et al. Association between APOE polymorphisms and mesial temporal lobe epilepsy with hip-pocampal sclerosis. Eur J Neurol. 2005 Feb;12(2):103-7. doi: 10.1111/j.1468-1331.2004.00956.x
28. Yang W, Li J, Shang Y, et al. HMGB1-TLR4 axis plays a regulatory role in the pathogenesis of mesial temporal lobe epilepsy
in immature rat model and children via the p38MAPK signaling pathway. Neurochem Res. 2017 Apr;42(4):1179-90. doi: 10.1007/s11064-016-2153-0
29. Martinez-Levy GA, Rocha L, Rodriguez-Pineda F, et al. Increased expression of Brain-Derived Neurotrophic Factor transcripts I and VI, cAMP response element binding, and glucocorticoid receptor in the cortex of patients with temporal lobe epilepsy.
Mol Neurobiol. 2018 May;55(5):3698-708. doi: 10.1007/s12035-017-0597-0
30. Karnik MS, Wang L, Barch DM, et al. BDNF polymorphism rs6265 and hippocampal structure and memory performance in healthy control subjects. Psychiatry Res. 2010 Jul 30;178(2):425-9. doi: 10.1016/j.psy-chres.2009.09.008
31. Shen N, Zhu X, Lin H, et al. Role
of BDNF Val66Met functional polymorphism in temporal lobe epilepsy. Int J Neurosci. 2016;126(5):436-41. doi: 10.3109/00207454.2015.1026967
33. Nakagawara A, Liu XG, Ikegaki N, et al. Cloning and chromosomal localization of the human TRK-B tyrosine kinase receptor gene (NTRK2). Genomics. 1995 Jan 20;25(2):538-46. doi: 10.1016/0888-7543(95)80055-q
34. Dong C, Wong ML, Licinio J. Sequence variations of ABCB1, SLC6A2, SLC6A3, SLC6A4, CREB1, CRHR1 and NTRK2: association with major depression and antide-pressant response in Mexican-Americans. Mol Psychiatry. 2009 Dec;14(12):1105-18. doi: 10.1038/mp.2009.92
35. Hennings JM, Kohli MA, Czamara D, et al. Possible associations of NTRK2 polymorphisms with antidepressant treatment outcome: findings from an extended tag SNP approach. PLoS One. 2013 Jun 4;8(6):e64947.
doi: 10.1371/journal.pone.0064947
36. Beuten J, Ma JZ, Payne TJ, et al. Association of specific haplotypes
of neurotrophic tyrosine kinase receptor 2 gene (NTRK2) with vulnerability to nicotine dependence in African-Americans and European-Americans. Biol Psychiatry. 2007 Jan 1;61(1):48-55. doi: 10.1016/j.biopsych.2006.02.023
37. Correia CT, Coutinho AM, Sequeira AF,
et al. Increased BDNF levels and NTRK2 gene association suggest a disruption of BDNF/TrkB signaling in autism. Genes Brain Behav. 2010 0ct;9(7):841-8. doi: 10.1111/j.1601-183X.2010.00627.x
38. Chen Z, Simmons MS, Perry RT, et al. Genetic association of neurotrophic tyrosine kinase receptor type 2 (NTRK2)
With Alzheimer's disease. Am J Med Genet B Neuropsychiatr Genet. 2008 Apr 5;147(3):363-9. doi: 10.1002/ajmg.b.30607
39. Torres CM, Siebert M, Bock H, et al. NTRK2 (TrkB gene) variants and temporal lobe epilepsy: A genetic association study. Epilepsy Res. 2017 Nov;137:1-8. doi: 10.1016/j.eplep-syres.2017.08.010
26. Ozkara C, Uzan M, Tanriverdi T, et al. Lack of association between IL-1p/a gene polymorphisms and temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis. Seizure. 2006 Jul;15(5):288-91. doi: 10.1016/j.seizure.2006.02.016
32. Xu YL, Li XX, Zhuang SJ, et al. Significant association of BDNF rs6265 G>A polymorphism with susceptibility to epilepsy: a meta-analysis. Neuropsychiatr Dis Treat. 2018 Apr 16;14:1035-46. doi: 10.2147/NDT.S154927
Поступила/отрецензирована/принята к печати
Received/Reviewed/Accepted
23.05.2022/29.09.2022/04.10.2022
Заявление о конфликте интересов/Conflict of Interest Statement
Исследование поддержано внутривузовским грантом для молодых ученых и обучающихся в соответствии с приказом 790-осн. от 14.11.2019. Конфликт интересов отсутствует. Авторы несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать. Все авторы принимали участие в разработке концепции статьи и написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами.
The study was supported by an intra-university grant for young scientists and students in accordance with order 790-осн. dated November 14, 2019. There are no conflicts of interest. The authors are solely responsible for submitting the final version of the manuscript for publication. All the authors have participated in developing the concept of the article and in writing the manuscript. The final version of the manuscript has been approved by all the authors.
Панина Ю.С. http://orcid.org/0000-0001-5204-7482 Доморацкая Е.А. http://orcid.org/0000-0001-9946-2878 Дмитренко Д.В. http://orcid.org/0000-0003-4639-6365
