CC BY
75
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДк 578.825.11.083.2
Андронова В.Л.1, Ясько М.В.2, Куханова М.К.2, Скоблов Ю.С.3, Дерябин П.Г.1, Галегов Г.А.1
Исследование подавления репродукции вируса простого герпеса с лекарственной устойчивостью сочетанием фосфита ациклогуанозина с некоторыми противогерпетическими
препаратами
1ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского» Минздрава России, 123098, г. Москва; 2ГУ РАН НИИ молекулярной биологии им. В.А.Энгельгардта РАН, 119991, г. Москва; 3ГУ РАН «НИИ биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова» РАН,
117997, г. Москва
С использованием микрометода ингибирования развития вирусиндуцированного цитопатического эффекта в культуре клеток Vero Е6 изучена активность фосфита ациклогуанозина (Ф-АЦГ) и шести противовирусных соединений отдельно и в составе двойных и тройных комбинаций в отношении двух штаммов вируса простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1), чувствительного и резистентного к ацикловиру. Исследовали комбинации Ф-АЦГ, APa-A, цидофовира (ЦДВ), рибавирина (Rib), фосфономуравьиной кислоты (ФМК), глицирризиновой кислоты (ГЛН) и а-интерферона (а-ИФН). Все исследованные двойные и тройные комбинации, включающие Ф-АЦГ, ингибировали репликацию обоих штаммов ВПГ более эффективно, чем любое из соединений по отдельности. На обеих вирусных моделях обнаружены различные типы взаимодействия: синергидный (двойные комбинации Ф-АЦГ с ФМК, ЦДВ, Rib, а-ИФН и тройные комбинации Ф-АЦГ с а-ИФН + ФМК, а-ИФН + APaA, а-ИФН + ЦДВ, ФМК + ЦДВ, ФМК + Rbv, ЦДВ APaA, ЦДВ + Rib, ЦДВ + ГЛН, ФМК + AraA]; аддитивный (Ф-АЦГ с APaA и ФМК + ГЛН). Ни одна из комбинаций не проявила антагонизма или интерференции. Полученные результаты указывают, что рассмотренные комбинации могли бы быть использованы в клинической практике для лечения тяжелых инфекций, вызванных ВПГ-1.
Ключевые слова: вирус простого герпеса; противовирусная активность in vitro; комбинированный эффект; лекарственная резистентность.
Для цитирования: Вопросы вирусологии . 2014; 59(6): 32-35.
Research of suppression of the herpes simplex virus reproduction with drug resistance by combination phosphite of acycloguanosine with some antiherpetic
drugs
Andronova V. L.1, Jasko M. V.2, Kukhanova M. K.2, Skoblov Yu. S.3, Deryabin P. G.1, Galegov G. A.1
1 D.I. Ivanovsky Institute of Virology, Ministry of Health of the Russian Federation, 123098, Moscow, Russia; 2 Engelhardt Institute of Molecular Biology, Russian Academy of Sciences, 119991, Moscow, Russia; 3 Shemyakin and Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of Sciences, 117997, Moscow, Russia
The activity of the phosphite of acycloguanosine (P-ACG) and six antivirals was tested individually and in double and triple combinations on two strains of the herpes simplex virus (HSV) type 1 (sensitive to acyclovir and resistant to acyclovir) using the CPE inhibition method in the Vero Е6 cell microcultures. These are: phosphite of acycloguanosine (P-ACG), Ara-A, cidofovir (CDV), ribavirin (Rib), phosphonoformate (PFA), glycyrrhizic acid (GLN) and а-interferon (а-iFN). All studied double combinations and triple combinations including P-ACV inhibited replication of both HSV strains more effectively than any drug alone. Various types of interactions depending on the virus type were observed in both viral models: synergistic (double combinations P-ACG with PFA, CDV, Rib, а-iFN and triple combinations P-ACG with а-iFN +PFA, а-iFN +AraA, а-iFN +CDV, PFA+CDV, PFA+Rib, CDV+AraA, CDV+Rib, CDV+GLN,PFA+AraA) and additive (P-ACG with AraA and PFA+GLN). Neither antagonism nor interference was noted for any combinations. Adduced results suggest that these combinations might be clinically useful for the treatment of certain herpes simplex virus type 1 infections.
Key words: herpes .simplex virus; antiviral activity in vitro; combined effect; drug resistance. Citation: Voprosy virusologii. 2014; 59(6): 32-35. (In Russ.)
Введение
Для лечения и предотвращения рецидивов инфекций, вызываемых вирусом простого герпеса 1-го и 2-го типов (ВПГ-1 и ВПГ-2) и вирусом варицелла зостер (ВЗВ), используют высокоэффективные этиотропные лекарственные средства, относящиеся к классу модифицированных нуклеозидов (препараты ацикловира (АЦВ), ва-лацикловир, пенцикловир, фамцикловир) [1]. Развитие лекарственной резистентности вирусов к этой группе ингибиторов главным образом у иммунокомпромисс-ных пациентов может существенно снижать эффективность антивирусной химиотерапии [2-4]. Лечение кате-
гории пациентов с данной патологией осложняется тем, что резистентность ВПГ/ВЗВ к модифицированным ну-клеозидам в подавляющем большинстве случаев носит перекрестный характер, т. е. развитие резистентности к одному из препаратов приводит к резистентности к остальным ингибиторам этой группы [5, 6]. Единственным препаратом выбора в этом случае является фоскар-нет (препарат фосфономуравьиной кислоты - ФМК) [2, 3], высокотоксичный для макроорганизма. Кроме того, следует учитывать возможность перекрестной резистентности у ВПГ/ВЗВ к модифицированным нуклео-зидам и ФМК одновременно. Такие клинические изо-
Для корреспонденции: Андронова Валерия Львовна, канд.биол.наук, вед.науч. сотр., e-mail: [email protected] Correspondence to: Valeriya Andronova, PhD, a leading researcher, e-mail: [email protected]
ляты были описаны [7, 8]. В связи с вышеизложенным поиск эффективных и безвредных соединений, которые способны эффективно ингибировать репродукцию вариантов ВПГ и ВЗВ, резистентных к АЦВ и родственным ему соединениям, сохраняет актуальность.
Ранее мы показали, что фосфит ациклогуанозина (Ф-АЦГ) одинаково эффективно ингибирует репродукцию как чувствительного, так и резистентных к АЦВ штаммов ВПГ, включая клинические изоляты ВПГ, циркулирующие в человеческой популяции в настоящее время [9, 10].
Использование комбинаций противовирусных агентов с различным механизмом действия позволяет не только ингибировать репродукцию ВПГ с лекарственной резистентностью, но и предотвратить или существенно снизить скорость формирования подобных штаммов [11]. Такая стратегия хорошо зарекомендовала себя при проведении антиретровируной химиотерапии [12-14].
Цель исследования - поиск комбинаций противогерпе-тических агентов, включающих Ф-АЦГ, характеризующихся взаимоусиливающим характером воздействия на герпетическую инфекцию и сохраняющих активность в отношении штаммов ВПГ-1, резистентных к АЦВ. Изучали комбинации Ф-АЦГ с традиционными, имеющими практическое значение соединениями, активными в отношении резистентных к АЦВ штаммов ВПГ-1.
Материалы и методы
Препараты. В работе использовали следующие препараты: Ф-АЦГ (Н-фосфонат 9-(2-гидроксиэтоксиметил) гуанина) синтезирован в Институте молекулярной био-
логии. a-интерферон (а-ИФН, Реаферон-ЕС для инъекций сухой ЗАО «Вектор-Медика» лиофильный препарат а-ИФН со специфической активностью 3 000 000 МЕ/амп. (п. Кольцово Новосибирской обл.); ФМК производства Sigma Aldrich (США); АраА (9-р^-аденинарабинозид, видаробин) производства Calbiochem (США); цидофовир (ЦДВ, ^)-1-(3-гидрокси-2-фосфонилметоксипропил) цитозин производства Sigma Aldrich (США); глицир-ризинат аммония однозамещенный (ГЛН, глицирам, Glycyram, производства «Химфарм ОАО», Казахстан); рибавирин (Rib; 1-Р^-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид) производства iCN Switzerland AG, Швейцария.
Вирусы. ВПГ-1, штамм L2 (ВПГ-1/L) получен из Государственной коллекции вирусов НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского. ВПГ-1/Ц/АЦВк, резистентный к АЦВ (ИД50 > 100 мкг/мл), получен нами путем серийного пассирования ВПГ-1/Ц в присутствии АЦВ и подробно охарактеризован ранее [9].
Цитотоксичность оценивали методом окрашивания клеток трипановым голубым. За величину ЦД50 принимали концентрацию, в присутствии которой погибает 50% клеток при продолжительности инкубации 72 ч [9, 10].
Противовирусную активность соединений и их комбинаций оценивали микрометодом по их способности защищать инфицированные клетки от гибели путем предотвращения развития вирусиндуцированного цито-патического эффекта (ЦПЭ) в соответствии с методом E. De Clercq и соавт. [15], как описано нами ранее [9, 10]. Монослойную культуру клеток Vero Е6, выращенную в пластиковых 96-луночных планшетах (Linbro, Flow lab-
Таблица 1
Противогерпетическая активность ряда соединений, а также их комбинаций на модели ВПГ-1 c различной лекарственной
чувствительностью в культуре клеток Vero E6
№ Соединение ЦД50, мкг/мл ИД50, мкг/мл ИД95, мкг/мл FIC Эффект
1 Ф-АЦГ > 1000 15,8731,22 31,251/62,52 - -
2 ФМК > 62,5 31,2й 62,51,2 - -
3 АраА > 62,5 15,6731,22 62,51д - -
4 ЦДВ > 62,5 3,9!, 2 15,612 - -
5 Rib > 125 2501, 2 5001,2 -
6 ГЛН > 1000 5001, 2 > 10001, 2 - -
7 а-ИФН > 1000 2501, 2 > 10001, 2 - -
8 Ф-АЦГ + ФМК > 15,6 + 31,25 7,8 + 7,8715,6 + 7,82 15,6 + 15,61/31,25 + 15,62 0,751/0,752 Синергидный
9 Ф-АЦГ +АраА > 15,6 + 15,6 7,8 + 7,8715,6 + 15,62 15,6 + 15,61/31,25 + 31,252 1,01/1,02 Аддитивный
10 Ф-АЦГ + ЦДВ > 62,5 + 7,8 7,8 + 0,97715,6 + 0,782 15,6 + 1,951/31,25 + 1,952 0,751/0,702 Синергидный
11 Ф-АЦГ + Rib > 31,25 + 125 7,8 + 31,25715,6 + 31,252 15,6 + 62,51/31,25 + 62,52 0,751/0,752 Синергидный
12 Ф-АЦГ + ГЛН > 31,2+1000 3,9 + 250715,6 + 2502 15,6 + 5001/31,25 + 5002 0,751/1,02 Синергидный/аддитивный
13 Ф-АЦГ + а-ИФН > 40 + 500 10 + 12,5715,6 + 502 40 + 501/31,25 + 1002 0,701/0,702 Синергидный
14 а-ИФН + ФМК > 1000 + 62,5 62,5 + 15,6', 2 62,5 + 31,251, 2 0,751, 2 Синергидный
15 а-ИФН + АраА > 1000 + 31,2 100 + 7,87100 + 15,62 100 + 15,67100 + 31,252 0,901/0,902 Синергидный
16 а-ИФН + ЦДВ > 7,8 + 500 31,25 + 0,48*, 2 125 + 1,951, 2 0,251,2 Выраженный синергидный
17 ФМК + ГЛН > 62,5 + 1000 15,6 + 2501, 2 31,25 + 5001, 2 1,01,2 Аддитивный
18 ФМК + ЦДВ > 62,5 + 7,8 7,8 + 0,971, 2 31,25 + 3,91, 2 0,501, 2 Синергидный
19 ФМК + АраА > 62,5 + 31,25 15,6 + 7,8715,6 + 15,62 31,25 + 15,6731,25 + 31,252 1,0 Аддитивный
20 ФМК + Rib > 62,5 + 125 15,6 + 31,251, 2 31,325 + 62,51, 2 0,751, 2 Синергидный
21 ЦДВ + АраА > 7,8+15,6 1,95 + 7,8^ 2 7,8 + 15,61, 2 1,01/0,752 Аддитивный/Синергидный
22 ЦДВ + Rib > 15,6 + 125 1,95 + 15,6^ 2 7,8 + 62,512 0,621, 2 Синергидный
23 ЦДВ + ГЛН > 7,8 + 1000 1,95 + 2501, 2 3,9 + 5001,2 1,01,2 Аддитивный
Примечание. Здесь и в табл. 2: концентрация а-ИФН в МЕ/мл. Показатели противовирусной эффективности соединений и их комбинаций: 1 - на модели ВПГ-1^2; 2 - на модели ВПГ-1^2/АЦВк.
Таблица 2
Противогерпетическая активность тройных комбинаций ряда соединений на модели ВПГ-1 c различной лекарственной чувствительностью в культуре клеток Vero E6
Соединение ЦД50, мкг/мл ИД50, мкг/мл ИД95, мкг/мл FIC Эффект
24 Ф-АЦГ + а-ИФН + ФМК > 15,6 + 31,25 + 7,8 7,8 + 15,6 + 3,9V7,8 + 31,25 + 7,82 15,6 + 31,2 + 7,8715,6 + 62,5 + 7,82 0,6870,682 Синергидный/синер-гидный
25 Ф-АЦГ + а-ИФН + АраА > 31,2 + 250 + 15,6 7,8 + 62,5 + 1,9575,6 + 62,5 + 3,92 15,6 + 125 + 3,9731,25 + 125+ 3,92 0,871/0,872 Синергидный/си-нергидный
26 Ф-АЦГ + а-ИФН + ЦДВ > 125 + 250 + 7,8 7,8 + 15,6 + 0,48715,6 + 15,6 + 0,482 15,6 + 31,2 + 0,95731,25 + 31,2 + 0,952 0,6870,682 Синергидный/синер-гидный
27 Ф-АЦГ + ФМК + ГЛН > 125 + 1000 + 125 7,8 + 7,8 + 125715,6 + 6,25 + 125 15,6 + 15,6 + 250731,25 + 15,6 + 250 1,01/0,952 Аддитивный/склонность к аддитивному
28 Ф-АЦГ + ФМК + ЦДВ > 15,6 + 15,6 + 31,25 3,9 + 3,9 + 1,9577,8 + 3,9 + 1,56 7,8 + 7,8 + 3,9715,6 + 7,8 + 3,92 0,871/0,772 Синергидный/си-нергидный
29 Ф-АЦГ + ФМК+ Rib > 31,25 + 62,5 + 250 3,9 + 7,8 + 31,2577,8 + 7,8 + 31,252 7,8 + 15,6 + 62,5715,6 + 15,6 + 62,51 0,751/0,752 Синергидный
30 Ф-АЦГ + ЦДВ + АраА >15,6 + 1,95 + 3,9 7,8 + 0,97 + 1,95715,6 + 0,97 + 3,92 15,6 + 1,95 + 3,9731,25 + 1,95 + 7,8 0,871/0,872 Синергидный/си-нергидный
31 Ф-АЦГ +ЦДВ + Rib > 62,5 + 31,25 + 500 3,9 + 1,95 + 31,2577,8 + 1,95 + 31,252 7,8 + 3,9 + 62,5715,6 + 3,9 + 62,52 0,871/0,872 Синергидный/си-нергидный
32 Ф-АЦГ +ЦДВ +ГЛН > 31,25 + 7,8 + 1000 3,9 + 0,97 + 12577,8 + 0,97 + 1252 15,6 + 3,9 + 500731,25 + 3,9 + 5002 0,751/0,752 Синергидный/си-нергидный
33 Ф-АЦГ + ФМК + АраА > 7,8 + 15,6 + 3,9 3,9 + 7,8 + 1,9577,8 + 7,8 + 1,952 7,8 + 15,6 + 3,9715,6 + 15,6 + 3,92 0,621/0,622 Синергидный/си-нергидный
oratories, Соединенное Королевство Великобритании и Северной Ирландии), инфицировали с множественностью 0,1 БОЕ/кл; продолжительность инкубации составила 48 ч при 370C, при этом в контроле ВПГ развивался 95-100% ЦПЭ, т. е. ЦПЭ охватывал весь монослой клеток. Эффективность препарата количественно выражали как ИД50 и ИД95 - концентрации соединения, ингиби-рующие развитие вирусиндуцированного ЦПЭ на 50% и практически полностью.
При изучении комбинированного действия препаратов определяли их концентрации, которые в сочетании обеспечивают эффекты, соответствующие ИД50 и ИД95. Антигерпетическое действие комбинаций препаратов оценивали путем вычисления индекса FIC (fractional inhibitory concentration) [16]:
ИДп соединения А в комбинации
F1C=---+
ИД50 соединения А
ИД50 соединения В в комбинации +---.
ИД50 соединения В
Результаты и обсуждение
Механизм противогерпетического действия АЦВ и родственных ему соединений связан с двумя вирус-специфическими ферментами - тимидинкиназой (ТК) и ДНК-полимеразой [17]. Соответственно формирование резистентности к этим ингибиторам в большинстве случаев связано с мутациями в гене ТК и гораздо реже в гене ДНК-полимеразы [18]. Мы исследовали комбинации соединений, обладающих противогерпетической активностью и не нуждающихся в активации вирусной ТК, а следовательно, в большинстве случаев одинаково эффективных в отношении как чувствительных, так и резистентных к АЦВ штаммов ВПГ-1.
Как видно из данных, приведенных в табл. 1, использование Ф-АЦГ в составе двойных комбинаций с АраА или ГЛН обеспечивает суммирование эффектов противовирусных соединений - при сочетанном использовании минимальная активная доза (ИД50) каждого из соединений равна У ИД50, установленной при их раздельном ис-
пользовании: FIC, являющийся критерием эффективности сочетанного действия препаратов, равен 1. При использовании Ф-АЦГ в комбинации с а-ИФН, ФМК, или Rib наблюдали взаимоусиливающий эффект. FIC, равный 0,7, 0,75 и 0,75, указывает на то, что при сочетанном использовании этих ингибиторов в меньших концентрациях можно получить более выраженный противовирусный эффект на обеих вирусных моделях (ВПГ-1/Ц и ВПГ-1/Ц/АЦВк) независимо от чувствительности ВПГ к АЦВ. Взаимоусиливающий эффект Ф-АЦГ и ЦДВ в комбинации был более выражен на модели ВПГ-1/L^ АЦВК (FIC = 0,7 по сравнению с FIC = 0,75).
Из представленных в табл. 2 результатов следует, что введение в двойные комбинации Ф-АЦГ + ФМК и Ф - АЦГ+ ЦДВ третьего компонента а-ИФН приводит к снижению FIC c 0,75/0,7 до 0,68. При этом становится возможным существенно снизить концентрации ФМК и ЦДВ, высокотоксичных для макроорганизма, при сохранении противовирусной активности комбинации по сравнению с отдельно взятыми соединениями. Величина ИД достигается при использовании Ф-АЦГ+ ФМК + а-ИФН и Ф-АЦГ+ ЦДВ + а-ИФН в концентрациях, равных У, 1/8 и 1/16 ИД50 каждого из соединений на обеих вирусных моделях.
Эффект комбинации Ф-АЦГ+АраА+а-ИФН также носит синергидный характер (0,87), превосходящий взаимо-усиливающий эффект двойных комбинаций Ф-АЦГ + АраА (1) и АраА + а-ИФН (0,9). Поэтому, несмотря на то, что величина FIC тройной комбинации была выше, чем FIC Ф-АЦГ + а-ИФН (0,7), тройная комбинация представляет интерес, так как благодаря сочетанному использованию этих соединений удается снизить концентрацию наиболее токсичного компонента комбинации - АраА.
Сочетанное применение препаратов Ф-АЦГ + ФМК + АраА также способствовало усилению противовирусного эффекта относительно индивидуальных соединений и их соответствующих двойных комбинаций.
Выраженность потенцирования противовирусной активности Ф-АЦГ + ЦДВ + ГЛН (FIC = 0,75) была аналогична потенцирующему эффекту двойных ком-
бинаций Ф-АЦГ + ЦДВ (0,75) и Ф-АЦГ + ГЛН (0,75) и превосходила эффект комбинации ЦДВ + ГЛН (1) на модели эталонного штамма ВПГ-1/L На модели резистентного к АЦГ штамма ВПГ-1/Ц/АцВк эффект двойной комбинации Ф-АЦГ + ЦДВ (0,7) незначительно превосходил таковой тройной комбинации (0,75). Комбинации ГЛН с Ф-АЦГ и ЦДВ характеризовались только аддитивным характером взаимодействия (1) на этой вирусной модели.
При сопоставлении данных, представленных в табл. 1-2, видно, что комбинация Ф-АЦГ + ФМК + ГЛН также способна ингибировать развитие ЦПЭ, индуцированного АЦВ-резистентным штаммом ВПГ-1. Однако в этом случае полученный эффект соответствовал аддитивному, тогда как эффект Ф-АЦГ в сочетании с ФМК или ГЛН был оценен как синергидный. Лишь в отношении АЦВ-резистентного штамма ВПГ комбинация Ф-АЦГ + ГЛН оказалась менее активной (FIC = 1).
Для тройных комбинаций Ф-АЦГ + ФМК + ЦДВ и Ф-АЦГ + ЦДВ + Rib также установлено ослабление взаимоусиливающего эффекта относительно соответствующих двойных комбинаций.
Сочетанное применение АраА с Ф-АЦГ или ЦДВ обеспечивает суммирование противовирусного эффекта индивидуальных соединений (FIC = 1) в отношении ВПГ-1/ L2. Выраженность потенцирующего эффекта тройной комбинации Ф-АЦГ + ЦДВ + АраА (FIC = 0,87) превосходила аддитивный, но была ниже эффекта комбинации Ф-АЦГ+ ЦДВ (FIC = 0,75). На модели ВПГ-1/Ц/АЦВ11 противовирусный эффект двух двойных комбинаций (АраА + ЦДВ и Ф-АЦГ + ЦДВ) был выражен в большей степени по сравнению с таковым тройной комбинации.
Эффект комбинаций Ф-АЦГ + ФМК, Ф-АЦГ + Rib и ФМК + Rib был оценен как синергидный (FIC = 0,75 во всех трех случаях). При анализе данных табл. 1, 2 видно, что если величина ИД50 одного из компонентов комбинации снижена в 4 раза, то для сохранения эффекта 50% ингибирования развития вирусиндуцированного ЦПЭ концентрацию второго компонента можно снизить не более, чем в 2 раза. При объединении этих соединений в тройную комбинацию выраженность синергидного эффекта сохраняется (FIC = 0,75). При этом концентрации всех трех соединений можно было снизить в 4 раза.
Представленные в данном исследовании результаты комбинированного использования противогерпетиче-ских агентов на модели ВПГ-1 дают возможность разработки оптимальных схем химиотерапии герпеса в случаях неэффективности АЦВ и других модифицированных нуклеозидов.
Работа выполнена при финансовой поддержке гранта Российского фонда фундаментальных исследований 11-04-00384.
ЛИТЕРАТУРА [REFERENCES]
1. Kimberlin D.W., Whitley R.J. Antiviral therapy of HSV-1 and -2.
In: Arvin A., Campadelli-Fiume G., Mocarski E., Moore P.S., Roiz-man B., Whitley R., Yamanishi K., eds. Human herpesviruses: biology, therapy, and immuno-prophylaxis. Cambridge, UK: Cambridge University Press; 2007: 1141-60.
2. Dekker A.W., Rozenberg-Arska M. Successful foscarnet therapy for acyclovir-resistant mucocutaneous infection with herpes simplex virus in a recipient of allogeneic BMT. Bone Marrow Transplant. 1993; 11(2): 177-9.
3. Erlich K.S., Jacobson M.A., Koehler J.E., Follansbee S.E., Drennan
D.P., Gooze L. et al. Foscarnet therapy for severe acyclovir-resistant herpes simplex virus type-2 infections in patients with the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). An uncontrolled trial. Ann. Intern. Med. 1989; 110(9): 710-3.
4. Safrin S., Ashley R., Houlihan ., Cusick P.S., Mills J. Clinical and serologic features of herpes simplex virus infection in patients with AIDS. AIDS. 1991; 5(1): 107-10.
5. Andrei G., De Clercq E., Snoeck R. In vitro selection of drug-resistant varicella-zoster (VZV) mutants (OKA strain): differences between acyclovir and penciclovir? Antiviral Res. 2004; 61(3): 181-7.
6. Sauerbrei A., Bohn K., Heim A., Hofmann J., Weissbrich B., Schnitzler P. et al. Novel resistance-associated mutations of thymidine kinase and DNA polymerase genes of herpes simplex virus type 1 and type 2. Antivirol. Ther. 2011; 16(8): 1297-308.
7. Frobert E., Cortay J.C., Ooka T., Najioullah F., Thouvenot D., Lina B. et al. Genotypic detection of acyclovir-resistant HSV-1: characterization of 67 ACV-sensitive and 14 ACV-resistant viruses. Antiviral Res. 2008; 79(1): 28-36.
8. Saijo M., Yasuda Y., Yabe H., Kato S., Suzutani T., De Clercq E. et al. Bone marrow transplantation in a child with Wiskott-Aldrich syndrome latently infected with acyclovir-resistant (ACV(r)) herpes simplex virus type 1: emergence of foscarnet-resistant virus originating from the ACV(r) virus. J. Med. Virol. 2002; 68(1): 99-104.
9. Korovina A.N., Gus'kova A.A., Skoblov M.Yu., Andronova V.L., Galegov G.A., Kochetkov S.N. et al. Analysis of mutations in DNA polymerase and thymidine kinase genes of herpes simplex virus clinical isolates resistant to antiherpetic drugs. Molekulyarnaya bi-ologiya. 2010; 44(3): 488-96. (in Russian)
[Коровина А.Н., Гуськова А.А., Скоблов М.Ю., Андронова В.Л., Галегов Г.А., Кочетков С.Н., и др. Анализ мутаций в генах ДНК-полимеразы и тимидинкиназы клинических изолятов вируса герпеса простого, резистентных к противовирусным лекарственным препаратам.Молекулярная биология. 2010; 44(3): 488-96].
10. Karpenko I.L., Jasko M.V., Andronova V.L., Ivanov A.V., Kukha-nova M.K., Galegov G.A. et al. Synthesis and antiherpetic activity of acyclovir phosphonates. Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2003; 22(3): 319-28.
11. Schinazi R.F., Nahmias A.J. Different in vitro effects of dual combinations of anti-herpes simplex virus compounds. Am. J. Med. 1982; 73(1A): 40-8.
12. Arts E.J., Hazuda D.J. HIV-1 Antiretroviral Drug Therapy. Cold SpringHarb. Perspect. Med. 2012; (4): 1-23.
13. Chowers M., Gottesman B.S., Leibovici L., Schapiro J.M., Paul M. Nucleoside reverse transcriptase inhibitors in combination therapy for HIV patients: systematic review and meta-analysis. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2010; 29(7): 779-86.
14. Ibbotson T., Perry C.M. Lamivudine/zidovudine/abacavir: triple combination tablet. Drugs. 2003; 63(11): 1089-98.
15. De Clercq E., Descamps J., Verheist G., Walker R.T., Jones A.S, Tor-rence P.F., et al. Comparative efficacy of antiherpes drugs against different strains of herpes simplex virus. J. Infect. Dis. 1980; 141(5): 563-73.
16. Allen L.B., Vanderslice L.K., Fingal C.M., McCright F.H., Harris
E.F., Cook P.D. Evaluation of the anti-herpesvirus drug combinations: virazole plus arabinofuranosylhypoxanthine and virazole plus arabinofuranosyladenine. Antiviral Res. 1982; 2(4): 203-6.
17. Elion G.B. Mechanism of action and selectivity of acyclovir. Am. J. Med. 1982; 73(1A): 7-13.
18. Morfin F., Thouvenot D. Herpes simplex virus resistance to antiviral drugs. Clin. Virol. 2003; 26(1): 29-37.
Поступила 24.01.13 Received 24.01.13
