CC BY
20
дованных образцах и представлены всеми четырьмя подклассами с преобладанием ^04. Практически во всех сыворотках обнаружены аАТг класса ^М. В шести образцах выявлены аА1 г класса ^А.
При исследовании конкуренции МКАТ с аАТг было установлено, что только одно из пятнадцати МКАТ (продукт гибридомного клона 1И10) интерферировало с аАТг сывороток пациентов, страдающих АИТ или ДТЗ.
Конкурирующие с МКАТ 1Р10 аАТг были обнаружены в сыворотках 44% обследованных пациентов. Среди аАТг, направленных к эпитопу 1Р10, обнаружены молекулы, относящиеся к 1§А и ко всем четырем подклассам 1цО, но не к 1«М.
Полученные данные указывают на то, что при аутоиммунных заболеваниях ЩЖ популяция синтезируемых аАТг не рестриктирована по изо- и субизотипу. Преобладание аАТг подкласса 1цС4, как известно, является следствием длительной антигенной стимуляции и не может рассматриваться как признак ограничения продукции субизотипа. В то же время, при АИТ и ДТЗ аАТг, по крайней мере, частично рестриктироваиы поэпитопной специфичности.
Исследование парапротеионов с помощью моноклональных антител (МКАТ)
Самойлович М.П., Грязева И.В., Крутецкал И.Ю., Климович В.Б., Баратова Д.А.'
Центральный научно-исследовательский рентгенорадиологический институт М3 РФ, г. Санкт-Петербург, 'Национальный госпиталь Киргизской Республики, г. Бишкек
Традиционные методы исследования сыворотки при диагностике парапротеинемнй включают иммунодиффузию, электрофорез и иммунофиксацию. Эти методы требуют высокоактивных, стандартных и специфичных антисывороток, занимают много времени, а получаемая информация носит качественный или полуколиче-ственный характер.
Цель работы состояла в разработке, на основе МКАТ, методов иммупохимическон диагностики парапротеи-немий. Панель МКАТ против типов, изотипов и субизотипов иммуноглобулинов (^) человека создана в лаборатории гибридомной технологии ЦНИРРИ и включает реагенты, которые распознают консервативные детерминанты, присутствующие как на молекулах нормальных 1ц, так и на парапротеинах.
Материалом исследования служили образцы сыворотки крови пациентов, у которых предполагали наличие парапротеинемии. Дополнительно исследовали образцы мочи. Контролем служил материал от здоровых доноров.
На первом этапе обследования в сыворотках определяли концентрации 1§0, ^М, ^А методом двухцентрового ИФА, а также соотношения ^ каппа- и лямб-да-гипов. Во многих случаях этого было достаточно,
чтобы выявить клональное преобладание в пределах одного из классов I”. При неопределенности результата на втором этапе с помощью двухцент рового ИФА оценивали концентрации 1цО 1. 1ц02. [цОЗ. 1ц04 и соотношение каппа/лямбда [ц в пределах каждого подкласса. По результатам этого исследования выявляли клональное преобладание 1ц минорных подклассов, которое не сказывалось существенно на обшей концентрации 1§0, а также устанавливали дефицит остальных подклассов 1цС. Редкие варианты |^Е- и 1цП-пара-протеинемий могут быть выявлены также с помотыо двухцентрового ИФА.
Концентрации свободных легких цепей в сыворотке крови и в моче определяли методом двухцентрового ИФА на основе МКАТ, который не требует концентрирования образцов мочи или освобождения сыворотки от целостных молекул 1ц. Метод позволял выявить парапротеинемии Бене-Джонса, получить информацию об уровне дифференцировки клеток доминирующего клона, а также оценить сохранность фильтрующей функции почек.
Описанные выше методы могут быть неэффективными, если парапротеин представлен тяжелыми цепями или мутантными молекулами, утратившими эпитоп, распознаваемый одним из МКАТ. В таком случае проводят прямой ИФА. Парапротепны адсорбируют из разбавленных сывороток на твердой фазе и затем выявляют с помощью меченых МКАТ. При этом можно использовать смешанный конъюгат, содержащий МКАТ против разных эпитопов молекулы 1” одного класса.
Разработанные на основе МКАТ приемы иммуно-химического исследования позволяют выявить парапротеин, определить составляющие его легкие и тяжелые цепи, а также оценить степень вторичного иммунодефицита.
Иммунологические аспекты развития осложнений реконструктивных вмешательств на абдоминальной аорте и магистральных артериях
Светликов А. В., Барсуков А.Е., Гайкова и Л.Б., Крапивка Н.А.
Государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Санкт-Петербург, Россия
Цель н задачи: Цель работы заключалась в сравнительной оценке состояния иммунологической реакгив-ности оперированных пациентов с возникшими в различные сроки ложными аневризмами анастомозов, а также больных с поздними (после 1 года) реокклюзиями и благополучным течением послеоперационного периода.
Материалы и методы. Обследовано 3 группы пациентов. I фуппу составили 35 больных с реокклюзиями в аор-топодвздошно-бедренном и бедренно-подколенном сег-
