CC BY
40
УДК 615.454.1-002-078
Д.М. Кадырова, И.И. Ким, Г.С. Смагулова, Ж.А. Абилов, Г.Е. Жусупова, Г.Ш. Бурашева, Г.А. Мун
Казахский Национальный медицинский университет имени С.Д. Асфендиярова,
Кафедра фармакологии КазНУ им. Аль-Фараби, Кафедра химии и технологии органических веществ, природных соединений и полимеров
«ИССЛЕДОВАНИЕ МЕСТНОРАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ КОМБИНАЦИЙ ГЕЛЕЙ АЛХИДИН, ЛИМОНИДИН, РИХЛОКАИН, РАЗРАБОТАННЫХ ТОО «ХИМИЯ И ИННОВАЦИЯ», РК
В статье приводятся данные доклинического скринингового исследования раздражающего действия комбинированных гелей: Алхидин 5 % + Рихлокаин 1 %, Лимонидин 3 % + Рихлокаин 1 % на слизистую оболочку глаза кроликов, а также аппликации их на кожу кроликов. Ключевые слова: раздражающий эффект, гель, комбинация
Акутальность. Перспективным для клинического применения могут считаться только те препараты, местнораздражающее действие которых проявляется в концентрациях, существенно превосходящих их «терапевтические», т.е. рекомендованные к применению в клинике. В связи с этим при проведении доклинического изучения новых соединений совершенно необходимым является специальное исследование их местнораздражающих свойств.
Цели исследования: Изучение раздражающего действия комбинированного геля
Рихлокаин+Алхидин производства «Химия и Инновация», Республика Казахстан на слизистую оболочку глаз и при аппликации на кожу кролика. Задачи исследования:
1.Определить среднюю арифметическую величину раздражающего эффекта представленных для исследования комбинаций гелей. 2.Провести сравнительную оценку исследуемых комбинаций гелей и с аналогом (контроль) гель Диклофенак.
Информация об исследуемых образцах представлена в таблице 1.
Таблица 1 - Информация об исследуемых образцах
Название соединения Испытуемые образцы
Гель Алрикаин
Лекарственная форма, доза Гель Алхидин5% +Рихлокаин 1%
Производитель ТОО «Химия и Инновация»
Страна-производитель Республика Казахстан
Серия лекарственной формы 001-АР
Срок годности 3 года
Описание Гель коричневого цвета
Состав Активное вещество - субстанции Алхидин и Рихлокаин, вспомогательные вещества: поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль, бензоат натрия, агар-агар, глицерин, этиловый спирт, вода
Название соединения Испытуемые образцы
Гель Лимрикаин
Лекарственная форма, доза Гель Лимонидин 3 %+Рихлокаин 1%
Производитель ТОО «Химия и Инновация»
Страна-производитель Республика Казахстан
Серия лекарственной формы 001-ЛР
Срок годности 3 года
Описание Гель коричневого цвета
Состав Активное вещество - субстанции Лимонидин и Рихлокаин, вспомогательные вещества: карбомер 940 пропиленгликоль, натрий бензоат, спирт этиловый, масло мятное, вода
Название препарата Контроль
Лекарственная форма, доза Гель Диклофенак - ратиофарм 1%
Производитель «МерклеГмбХ»
Страна-производитель Германия
Срок годности 4 года
Описание Прозрачный бесцветный гель с характерным запахом изопропанола
Состав 100 г геля содержат активное вещество: диклофенак натрия 1,0г, вспомогательные вещества: диизопропиладипат, гидроксипропилцеллюлоза, кислота молочная
90%, натрия дисульфит, спирт изопропиловый, вода для инъекций_
Материалы и методы. Информация об экспериментальных животных представлена в таблице 2. Животные распределялись по группам случайным образом. В качестве критерия
приемлемой рандомизации считали отсутствие внешних признаков заболевания и гомогенность групп по массе тела (±10%).
Таблица
Вид Кролики
Порода Серой и светлой окраски
Пол Самцы
Вес 2,5-3,0 кг
Общее количество 38
Источник получения Виварий НИИ Б.Атчабарова
Содержание животных Животные содержались в индивидуальных вентилируемых комплексах марки Techniplast производства Италии. Давление и влажность воздуха регулируются автоматически согласно заводским установкам.
Контроль за здоровьем животных Ежедневный ветеринарный осмотр.
Период акклиматизации Согласно положению
Индивидуальная идентификация Метки
Метод распределения по группам Случайный
Количество животных в клетке По 1 особи
Размеры клеток Стандартные
Материал клетки Нержавеющая сталь и пластик
Основной рацион стандартный Согласно приказу №1179 от 10 октября 1983 г.
Контроль качества кормов Согласно положению
Источник воды Система очистки воды для получения воды 2-го класса чистоты
Температура воздуха 20-23°С
Относительная влажность воздуха 40±5%. Обеспечивается программным управлением клеточных комплексов
Режим проветривания Обеспечивает от 45 до 65 объемов замещения в час концентрация СО2 не более 0,15 объемных %, аммиака не более 0,001 мг/л
Исследования проводили в соответствии с руководством по доклиническому исследованию (1, 3) и практической рекомендации (2). Статистическую оценку результатов проводили с использованием критерия Стьюдента.
Таблица 3 - Критерии оценки местнораздражающего действия
Степень раздражения в баллах Признаки раздражения
0 Полное отсутствие проявлений раздражающего действия
1 Слабо выраженная инъекция сосудов конъюнктивы и увеличение капилляров склеры
2 Начальные признаки воспалительной реакции конъюнктивы, сильное покраснение, слезотечение и выделение секрета
3 Сильно выраженные воспалительные явления и повреждение поверхностных клеточных слоев роговицы при отсутствии необратимых изменений
4 Хемоз, резко выраженное раздражение и воспалительная реакция с образованием пустул, возникновением необратимых изменений в виде рубцов, помутнение роговицы, слепота
Критерии оценки местнораздражающего действия испытуемых комбинаций гелей на слизистой оболочке глаза по шкале представлены в таблице 3.
Изучение местнораздражающего действия комбинаций гелей на слизистую оболочку глаза кролика.
Исследуемые вещества (комбинации гелей) наносили в конъюнктивальный мешок глаза в объеме 0,2мл, а
в контрольный - 0,2 мл гель Диклофенака. Степень местнораздражающего действия гелей (средние данные шести исследований) оценивали по четырехбальной шкале через 3 часа и 24 часа после их введения в конъюнктивальный мешок глаза кролика.
Результаты исследования и обсуждение:
Результаты местнораздражающего действия комбинаций гелей на слизистую оболочку глаза кролика представлены в таблице 4.
Таблица 4 - Результаты местнораздражающего действия комбинаций гелей на слизистую оболочку глаза кролика
Время Вещества/препараты Степень раздражения Среднее
регистрации 1 2 3 4 5 6 арифм.
эффекта раздр.
эффекта
Через 3 часа Лимонидин 3% + Рихлокаин 2 1 1 2 1 1 1,33±0,21
1 % р<0,002
Через 24 часа 1 0 1 1 0 0 0,5±0,125
р>0,05
Через 3 часа Алхидин 5% +Рихлокаин 2 2 2 2 2 2 2±0
1% р>0,05
Через 24 часа 1 2 1 0 0 0 0,66±0,25
р>0,05
Через 3 часа Диклофенак гель 1% 2 2 2 3 2 2 2,16±0,16
(контроль)
Через 24 часа 2 2 0 1 1 2 1,33±0,2
Примечание: р - в сравнении с контролем.
При изучении местнораздражающего действия на слизистые оболочки глаза кролика степень выраженности раздражающего эффекта комбинации геля Лимонидин 3 % + Рихлокаин 1 % через 3 часа составляла в 2 случаях 2 балла, а у остальных животных - по 1 баллу. Наблюдение за животными через 24 часа показали, что раздражающий эффект, равный 1 баллу отмечался в 3 случаях, отсутствие его - у 3 животных. При использовании данной комбинации через 3 часа наблюдалось снижение интенсивности раздражающего действия на конъюнктиву глаза кролика в 1,6 раза, по сравнению с контрольным образцом, а через 24 часа это действие проявлялось в меньшей степени (р>0,05). Гель Лимонидин 3 % + Рихлокаин 1% проявил несколько менее выраженное раздражающее действие в сравнении с гелем Диклофенак через 3 часа (1,33±0,21). Через 24 часа его раздражающий эффект был несколько слабее, чем у геля Диклофенак и составил 0,5 баллов.
Гель Лимонидин 3% + Рихлокаин 1% проявляет слабый раздражающий эффект, статический достоверно проявляющийся в меньшей степени в сравнении с гелем Диклофенак на слизистые оболочки глаза кролика. Указанный гель действует в одинаковой степени с Диклофенаком раздражающе на кожу кролика.
Гель Алхидин 5% + Рихлокаин 1% вызывает слабое раздражающее действие, как на слизистые оболочки глаза кролика, так и на кожу кролика.
При сочетании 5 % геля Алхидин с Рихлокаином через 3 часа у всех животных проявлялось раздражающее действие средней степени (2 балла). 5 % гель Алхидин в сочетании с 1% Рихлокаином через 24 часа в 1 случае оказывал раздражающее действие средней степени (2балла), а в двух случаях - легкой степени (1 балл). Комбинация Алхидин с Рихлокаином как через 3, так и через 24 часа оказывала в меньшей степени выраженное раздражающее действие на конъюнктиву глаза кролика в сравнении с гелем Диклофенак (р>0,05).
Исследование раздражающего действия комбинаций гелей при аппликации на кожу кролика.
Изучение раздражающего действия комбинаций гелей при аппликации на кожу проводилось по модифицированной методике (1,2) на кроликах -альбиносах, весом 2,5-3 кг. Количество животных в каждой группе составило 7 особей. Участок аппликации равнялся 7х8см.
За 1 день до эксперимента тщательно выстригалась шерсть на участке аппликации. Шерсть выстригалась на симметричных участках спины по обе стороны от позвоночника, оставляя шерстяной покров между ними в 2 см. Правый бок служил для аппликации комбинаций гелей, левый - для контроля (гель Диклофенак натрия). На время экспозиции животных фиксировали для исключения слизывания гелей с кожи. Исследуемые гели наносили на кожу из расчета 20мг/см2. Время экспозиции составило 4 часа, после
чего кожу аккуратно протирали ватным тампоном, смоченным дистиллированной водой. Реакцию кожи регистрировали по окончании экспозиции, через 1 и 16 часов после однократной аппликации и оценивали
по сравнению с симметричным участком кожи того же животного с учетом функциональных и структурных изменений кожи.
Таблица 5 - Местно-раздражающее действие оценивалось по шкале
Эритема отсутствует 0
• Слабо выраженная 1
• Средне выраженная 2
• Сильно выраженная 3
Отек отсутствует 0
• Слабовыраженный 1
• Слабо выраженная 1
• Средне выраженная 2
• Сильно выраженная 3
Размер реактивных изменений (диаметр): 5 мм или 1
меньше
• От 5 до 10 мм 2
• Более 10 мм 3
Характер эритемы: равномерное покраснение 0
Эритематозное кольцо с ишемическим центром 1
Примечание: максимальный местно раздражающий эффект соответствует 10 баллам шкалы.
Время Вещества/препараты Номера животных Среднее
регистрации арифм.
эффекта Степень раздражения раздр.
эффекта
1 2 3 4 5 6 7
Через 1 час Лимонидин 3% + 0 1 0 0 1 0 0 0,28 ±0,2
Через 16 часов Рихлокаин 1 % р>0,05
0 0 0 1 0 0 0
Через 1 час Алхидин 5% + Рихлокаин 1 1 1 0 0 1 1 0,714±0,2
Через 16 часов 1% р<0,05
0 0 0 0 0 0 0 0
Через 1 час Диклофенак гель 1% 0 0 1 0 0 0 0 0,14±0,15
Через 16 часов (контроль)
0 0 0 0 0 0 0 0
Согласно полученным данным при однократной аппликации на кожные покровы кроликам при плотности нанесения 0,02 на см2 комбинация Лимонидин 3% с Рихлокаином 1% через 1 час после экспозиции вызвала в 2 случаях из 7 слабый раздражающий эффект. Через 16 часов указанная комбинация оказывала аналогичное действие только у 1 животного.
Незначительное раздражающее действие проявила комбинация Алхидин с Рихлокаином. Средняя арифметическая степень раздражающего действия комбинации Алхидин 5% с Рихлокаином 1% из 7 опытов составила 0,714 балла. Этот эффект проявился через 1 час у 5 животных из 7, однако, через 16 часов после экспозиции указанное действие не отмечалось ни у одного животного. Взятый для сравнения гель Диклофенак только через 1 час у одного животного оказывал слабый раздражающий эффект. Заключение.
Проведено доклиническое скрининговое
исследование раздражающего действия
комбинированных гелей: Алхидин 5 % + Рихлокаин 1 %, Лимонидин 3 % + Рихлокаин 1 % на слизистую оболочку глаза кроликов, а также аппликации их на кожу кроликов.
Установлено, что комбинация Алхидин с Рихлокаином проявила средней степени
раздражающий эффект (2 балла) через 3 часа, через 24 часа раздражающее действие было гораздо слабее (0,66). Это действие отмечалось в меньшей степени в сравнении с гелем Диклофенак.
Гель Лимонидин 3 % + Рихлокаин 1% проявил несколько менее выраженное раздражающее действие в сравнении с гелем Диклофенак через 3 часа (1,33±0,21). Через 24 часа его раздражающий эффект был несколько слабее, чем у геля Диклофенак и составил 0,5 баллов.
Комбинация геля Лимонидин 3% с Рихлокаином 1% оказывает слабый раздражающий эффект, проявляющийся в одинаковой степени с контролем. Комбинация геля Алхидин 5% с Рихлокаином 1% оказывает незначительное раздражающее действие сравнительно с контролем. Таким образом, можно заключить:
1.Комбинация геля Лимонидин 3 % + Рихлокаин 1% оказывает статистически достоверное снижение интенсивности раздражающего эффекта на слизистую оболочку глаза кролика в сравнении с Диклофенаком, и примерно одинаково с ним действует на кожу кролика.
2.Комбинация геля Алхидин 5% и Рихлокаин 1% вызывает в несколько меньшей степени выраженное раздражающее действие на слизистую оболочку глаза кролика по сравнению с контролем. Оценка раздражающего действия этой комбинации
на кожу кролика выявила незначительное сравнении с контролем.
(достоверное) усиление раздражающего эффекта в
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Миронова А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств.- М.: Гриф и К, 2012. - Ч.1. - 944 с.
2 Паршина В.И., Абрамов В.Е., Изучение местнораздражающего, кожно-резорбтивного и аллергизирующего действия инъекционной лекарственной формы энрофлоксацина с колистином //ФГОУ ВПО «МГАВМиБ» им. К.И. Скрябина. Журнал Ветеринарная патология. - 2009. - №2. - С. 91-94.
3 Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Медицина, 2005. - 832 с.
Д.М. Кадырова, И.И. Ким, Г.С. Смагулова, Ж.А. Абилов, Г.Е. Жусупова, Г.Ш. Бурашева, Г.А. Мун
«КАЗАХСТАН РЕСПУБЛИКАСЫНЫН, «ХИМИЯ ЖЭНЕ ИННОВАЦИЯ» ЖШС ЖАСАЛFАН АЛХИДИН, ЛИМОНИДИН, РИХЛОКАИННЬЩ Ж¥ПТАСТЫРЫЛFАН ГЕЛДЕР1НЩ Т1Т1РКЕНД1РГ1Ш ЭСЕР1Н ЗЕРТТЕУ»
ТYЙiн: Мак;алада жуптастырылган гелдер: 5 % Алхидин + 1 % Рихлокаин, 3 % Лимонидин + 1 % Рихлокаиннщ кряндардын, кезшщ шырышты ^абыгына, сонымен к;атар тергане тiтiркендiргiш эсерiн клиникага дейiнгi скринингтж зерттеу мэлiмeттepi кеpceтiлгeн. ТYЙiндi сездер: тiтipкeндipгiш эсер, гель, жуптастыру
D.M. Kadyrova, I.I. Kim, G.S. Smagulova, J.A. Abilov, G.E. Zhusupova, G.S. Burasheva, G.A. Moon
"INVESTIGATION OF LOCAL IRRITANT EFFECT OF GELS COMBINATIONS: ALCHIDIN, LIMONIDIN, RICHLOCAIN WHICH ARE DEVELOPED BY LLP"CHEMISTRY AND INNOVATION REPUBLIC OF KAZAKHSTAN
Resume: The article presents the data regarding preclinical screening studies of irritant action of combined gels: Alchidin 5% + Richlocain 1% Limonidin 3% + Richlocain 1% on the mucous membrane of the eyes of rabbits, and their application to the skin of rabbits.
Keywords: irritant effect, gel, combination
