CC BY
39
УДК 636.09:616.99
Стибель В. В., д.вет.н., професор, Прийма О. Б., к.вет.н., асистент © Лъв\всъкий нацюнальнийутеерситет ветеринарногмедицини та бютехнологт iMeni С. 3. Гжицького, м. Лъвгв, Украта Пономар С. I., д.вет.н., професор Бтоцертвський нацюнальний аграрнийутверситет, м. Быа Церква, Украта
ДОСЛЩЖЕННЯ К1ЛЬКОСТ1 Т- I В-Л1МФОЦИТ1В ЗА Д11 IHBA3II TOXOCARA CANIS
Уpoöomi наведено дат дослгдження iмунолог1чних процеав у сироватщ Kpoei собак, iнвазованих збудником токсокарозу.
У результатi проведених iмунолог1чних дослгдженъ сироватки Kpoei дослгдних та контрольных груп тварин встановлено, що у собак, уражених збудником токсокарозу, eiposidno зменшуетъся кглъкгстъ Т-лгмфоцитгв на 7, 14, 21 та 28 добу ¡нвазИ, eidnoeidno, у 1,1, 1,2, 1,3 i 1,3 раза та тлъкостг Т-хелпер1в у 1,7 раза на 28 добу iнвазИ'. Згодом в1дбувалося eiposidne зростання тлъкостг T-cynpecopie на 21 та 28 добу iнвазИ у 1,3 раза, eidnoeidno до показните у тварин контрольног групи. При до^дженш млbKoemi B-лiмфoцumiв встановлена тенденщя, яка проявлялася у зменшенш ix KWbKoemi, починаючи з 14 доби, у 1,3, 1,2 та 1,4 раза nopiвнянo з контролем. Отже, паразитування гeлъмiнmiв в opsani3Mi собак спричинило cmiÜKy iMynocynpecm, яка проявилася зниженням KWbKoemi Т- i B-лiмфoцumiв, T-xeлnepiв, збыъшенням T-cynpecopie, nopieнянo з собаками контролъноггрупи.
Таким чином, у peзyлъmami проведених до^дженъ природи esaeMoeidnocuH у cucmeMi «паразит-хазят» на iмyнoлoгiчнoмy piem за токсокарозног твазп у собак встановлено, що продукти жummeдiялънocmi токсокар суттево впливаютъ на кровотворну функцт, а саме на iMynnuu статус оргатзму тварин.
Ключов1 слова: собаки, токсокароз, Toxocara canis, кров, Т- i В^мфоцити, iMynimem.
УДК 636.09:616.99
Стибель В. В., д.вет.н., профессор, Прийма О. Б., к.вет.н., ассистент
Львовский националъныйуниверситет ветеринарноймедицины и биотехнологий имени С. 3. Гжицкого, г. Львов, Украина
Пономарь С. И., д.вет.н., профессор Белоцерковский национальный аграрныйуниверситет, г. Белая Церковь, Украина
ИССЛЕДОВАНИЕ КОЛИЧЕСТВА Т- И В-ЛИМФОЦИТОВ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ИНВАЗИИ TOXOCARA CANIS
Вработе приведены данные исследования иммунологических процессов в сыворотке крови собак инвазированных возбудителем токсокароза.
В результате проведенных иммунологических исследований сыворотки
© Стибель В. В., Прийма О. Б., Пономар С. I., 2014
330
крови опытных и контрольных групп животных установлено, что у собак пораженных возбудителем токсокароза установлено достоверное уменьшение количества Т-лимфоцитов на 7, 14, 21 и 28 сутки инвазии, соответственно, в 1,1, 1,2, 1,3 и 1,3 раза и количества Т-хелперов в 1,7 раза на 28 сутки инвазии. Впоследствии происходил рост Т-супрессоров на 21 и 28 сутки инвазии в 1,3 раза, в соответствии с показателями контроля. При исследовании В-лимфоцитов установлена тенденция, которая проявлялась в уменьшении их количества, начиная с 14 суток, в 1,3, 1,2 и 1,4 раза по сравнению с контролем. Итак, паразиты живущие в организме собак способны вызывать стойкую иммуносупрессию, которая проявляется угнетением образования Т- и В-лимфоцитов, Т-хелперов, увеличением Т-супрессоров, по сравнению с контрольной группой.
Таким образом, по результатам проведенных исследований природы взаимоотношений в системе «паразит-хозяин» на иммунологическом уровне при токсокарозной инвазии у собак установлено, что продукты жизнедеятельности токсокар существенно влияют на кровотворную функцию, а именно на иммунный статус организма животного.
Ключевые слова: собаки, токсокароз, Toxocara canis, кровь, Т- и В-лимфоциты, иммунитет.
UDC 636.09:616.99
Stybel V., Doc. Sc. (Vet. Med.), professor, Prijma O., cand. vet. sc., assistant Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after
S. Z. Gzhytskyj, Lviv, Ukraine Ponomar S., Doc. Sc. (Vet. Med.), professor White Church National Agrarian University, White Church, Ukraine
STUDIES QUANTITIES OF T- AND B-LYMPHOCYTES UNDER THE INFLUENCE FOR ACTION INVASION TOXOCARA CANIS
In the science work presents from a study of immunological processes in the serum of dogs infested of toxocariasis invasion.
As a result of immunoassays studies of serum of experimental and control groups of animals toxocariasis invasion causes significant decrease in the number of T-lymphocytes, 7, 14, 21 and 28 day infestation, respectively, 1.1, 1.2, 1.3 and 1.3 times the number of T-helper cells by 1.7 times at 28 day infestation. As a result of immunological studies of blood serum of experimental and control groups of animals found that in affected toxocariasis is a decrease of T-lymphocytes cells at 7, 14, 21 and 28 day invasion, respectively, 1.1, 1.2, 1.3 and 1.3 times and the number of T-helper cells by 1.7 times at 28 day invasion. Subsequently, there was an increase of T-suppressors 21 and 28 day of invasion by 1.3 times, compared with dogs in the control group. In the study the number of B-lymphocytes set of reduction from 14 days of infestation, 1.3, 1.2 and 1.4 times compared with the control. So, parasite what lives in the body of dogs can cause persistent immunosuppression, what manifested a decrease in the number of T-and B-lymphocytes, T-helper cells, increased T-suppressor cells, compared with dogs in the control group.
331
Thus, the were made investigations of relationships in the system «parasite-host» on immunological levels under conditions of toxocarosis. There was stated that products of vital activity of toxocara affect blood-forming function, immune status of animal bodies.
Key words: dogs, toxocarosis, Toxocara canis, blood, T-and B-lymphocytes, the immune system.
Вступ. 1мунолопчна реакщя e невщ'емною частиною бшьшосп ф1зюлопчних процеав оргашзму. I саме, врахування регуляторних функцш ¿муштету - системи захисних реакцш оргашзму проти фактор1в зовшшнього середовища - дозволять л1карям ветеринарно! медицини по-новому пщшти до виршення багатьох проблем у цш галузг
Гельмшти впливають на ¿мунну систему оргашзму хазяша. Вони видшяють ¿мунодепресанти, у вщповщь на яю в оргашзм1 хазяша стимулюеться розвиток ¿муштету, р1зних форм i ступешв прояву [1, 2]. Не Bci форми прояву ¿муштету при гельмштозах ушверсальш. У деяких випадках вони е специф1чними для тих чи шших гельмштоз1в i обумовлеш ступенем взаемно! адаптаци паразита та хазяша [3, 4].
Значну роль в захист1 цитогенетичних порушень вдаграють Т- i В- ланки ¿муштету, як1 забезпечують специф1чш та неспециф1чш ¿мунш реакци, спрямоваш на пщтримання ¿мунного статусу оргашзму i становления захисних сил. Рядом дослщжень встановлено, що ¿мунна вщповщь при гельмштозах формуеться у вщповщност1 i3 загальними законом1рностями ¿мунного процесу, однак мае свою специфжу, яка зумовлена особливостями морфологи i бюлоги аскаридат [5, 6, 7].
Метою дослщжень було встановити змши Т- i В-ланки ¿муштету у собак, швазованих збудником токсокарозу.
Матер1али i методи. Клшжо-експериментальш дослщження проведен! на дванадцяти собаках дво-чотиримкячного в1ку, i3 них шкть дослщних тварин -теля експериментального заражения збудником токсокарозу та шкть контрольних - клмчно здорових собак. Для дослщження використовували перифершну кров собак, яку вщбирали з латерально! пщшюрно! вени гомшки зранку перед год1влею на 7-у, 14-у, 21-у та 28-у добу вщ часу заражения.
Кшькють Т- i В-розеткоутворюючих л1мфоцит1в у перифершнш кров1 швазованих токсокарозом собак визначали за методом Д. К. Новикова та В. И. Новиково! [8]. Метод базуеться на здатносп Т-л1мфоцит1в утворювати спонтанш розетки i3 еритроцитами барана та В-л1мфоцит1в - утворювати розетки завдяки наявност1 на них поверхневих ¿муноглобулшових i антикомплементарних рецептор1в до еритроцит1в барана, сенсибшзованих антиеритроцитарними антитшами i комплементом.
Результати дослщжень. Результата дослщжень кшькост1 Т- i В-л1мфоцит1в у перифершнш кров1 швазованих токсокарозом собак наведен! у таблиц! 1.
332
Таблиця 1
Динамжа вмкту Т- 1 В-.^мфоцнтчв, ¡нвазованих збудником токсокарозу собак, % (М±ш, п=6)_
Показ ники До заражения Шсля заражения
7 доба 14 доба 21 доба 28 доба
Т- л1мфо-цити к 40,2±1,51 41,9±1,13 42,1±1,60 43,4±1,42 42,5±1,3
д 39,4±1,73 38,7±1,30* 36,1±1,12** 34,3±1,41*** 32,5±1,70***
т- хелпери К 18,6±1,51 19,1±1,31 20,4±1,81 21,3±1,61 21,4±1,43
д 19,2±1,72 17,6±0,99 15,3±1,11 13,7±1,13 12,9±0,54*
Т- супре-сори к 12,6±1,21 12,3±1,72 13,8±1,54 12,9±0,91 13,2±1,31
Д 14,2±0,70 16,0±0,83 16,5±0,82 16,9±0,72** 17,0±0,60***
В- л1мфо-цити к 17,4±1,33 16,8±1,21 17,3±1,13 16,9±1,03 17,1±1,13
Д 18,8±1,12 16,9±1,32 13,4±1,21* 14,2±1,12* 12,1±0,91***
Примита: *р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001 - вщносно контрольно1груии тварин
Анал1зуючи даш вищенаведено! таблиц!, бачимо що вщносний вмкт Т-л1мфоцит1в у кров! собак контрольно! групи з 7-1 по 28-у добу становив 40,243,4 %. При ураженш собак збудником токсокарозу у кров! встановлено в!рогщне зниження кщькост! Т-л1мфоцит1в на 7-у, 14-у, 21-у та 28-у добу швази, у 1,1 (р<0,05), 1,2 (р<0,01), 1,3 (р<0,001) та 1,3 раза (р<0,001), пор1вняно з тваринами контрольно! групи. Кшьюсть Т-хелпер1в до закшчення дослщу знизилася до 12,9±0,5 %, що пор1вняно з контролем було нижним у 1,7 раза (р<0,05). Водночас спостер1галося збщьшення кщькост! Т-супресор1в. На початку швазшного процесу вмют Т-супресор1в постшно пщвищувався { на 7-у та 14-у добу швази перевищував у 1,3 та 1,2 раза, вщповщно до показниюв у тварин контрольно! групи. У подальшому вщбувалося в!рогщне зростання вмкту Т-супресор1в на 21-у добу 16,9±0,72 % (р<0,01) та на28-у - 17,0±0,60 % (р<0,001).
При дослщженш юлькосп В-л1мфоцит1в, (табл. 1) у контрольнш груш собак вщносний вмют В-л1мфоципв становив у середньому 16,8-17,4 %. Анал1зуючи вмют В-л1мфоцит1в у кров! собак дослщно! групи, ми встановили тенденцш, яка проявлялася у зниженш кщькост! В-л1мфоцит1в, пор1вняно з тваринами контрольно! групи. На 14-у \ 21-у добу досл1ду виявлено тенденцш до зниження кщькост! В-л1мфоцит1в у кров!, пор1вняно з тваринами контрольно! групи, р1зниця була нижчою вщповщно у 1,3 ¿у 1,2 раза (р<0,05). На 28-у добу встановлено високов1рогщне зниження В-л1мфоцш1в у 1,4 раза (р<0,001).
Таким чином, у результат! проведеного етапу досл!джень встановлена ст!йка ¿муносупреЫя, яка проявилася зниженням к!лькост! Т- ! В-л!мфоцит!в, Т-хелпер!в, зб!льшенням Т-супресор!в.
Отже, за токсокарозно! швази у собак виникае ¿мунодифщитний стан, який характеризуеться порушенням кл!тинних (Т-л!мфоцит!в) та гуморальних (В-л!мфоцит!в) механ!зм!в ¿муштету, шгенсившсть якого залежить в!д стад!! розвитку паразит!в. Очевидно, що, м!груючи до м!сця постшно! локал!зац!! ! вступаючи у контакт ¿з тканинами ! органами хазяша, швазшш личинки, долаючи
333
чинники захисту, впливають на ¿мунолопчш процеси та !х напруженють, сво!ми продуктами життед1яльносп пригшчують захисш мехашзми, яю взаемопов'язаш у СВ01Х функщях.
Висновки.
1. Проведен! дослщження природи взаемовщносин у систем! «паразит-хазяш» на ¿мунолопчному р1вш показали, що продукти життед1яльносп токсокар суттево впливають на ¿мунний статус оргашзму тварин.
2. Паразитування гельмшив в оргашзм1 собак спричинило зменшення кшькост1 Т- 1 В-л1мфоцит1в (у 1,1-1,3 та 1,2-1,4 раза вщповщно), Т-хелпер1в у 1,7 раза та збшьшенням Т-супресор1в у 1,3 раза, пор1вняно з собаками контрольно! групи.
3. За токсокарозно! швази у собак виникае ¿мунодифщитний стан, який характеризуемся порушенням клпинних (Т-л1мфоцит1в) та гуморальних (В-л1мфоцит1в) механ1зм1в ¿мун1тету.
Л1тература
1. Методичш рекомендац1! для оц1нки та контролю ¿мунного статусу тварин: визначення фактор1в неспециф1чно! резистентност1, кл1тинних I гуморальних мехашзм1в ¿мун1тету проти шфекцшних захворювань / [Р. П. Маслянко, I. I. Олексюк, А. I. Садовський та ¿н. ]. - Льв1вська держав. академ. ветер. медиц. ¿м. С. 3. Гжицького. - Льв1в, 2001. - 87 с.
2. Новиков Д. К. Клеточные методы иммунодиагностики / Д. К. Новиков, В. И. Новикова. - Минск: Здоровье, 1979. - 286 с.
3. 1муно-молекулярш технологи в д1агностищ швазшних хвороб тварин / [Шендрик Л. I., Короленко Л. С., Шульга О. В., Маценко О. О. ] // ДДАУ, Дшпропетровськ, 2003. - 32 с.
4. Ратникова И. Н. Иммунобиологические показатели при токсокарозе собак и методы его коррекции: / И. Н. Ратникова // Автореф. дис. на соискание уч. степени канд. вет. наук: спец. 03.00.19 - паразитология. - Н. Новгород, 2002.
- 16 с.
5. ЛейкинаЕ. С. Стимулирующие и супрессивное воздействие гельминтов на иммунный ответ хозяина к антителам других индицирующих агентов / Е. С. Лейкина // Работы по гельминтологии. - М., 1981. - С. 104-111.
6. Осипова О. О. Морфофункциональное исследование иммунокомпетентных органов собак при токсокарозе / О. О. Осипова, Ю. Ф. Петров, А. А. Буянов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины. - 1997.
- С. 49-50.
7. Даугалиева Э. X. Иммунный статус и пути его корреляции при гельминтозах сельскохозяйственных животных / Э. X Даугалиева, В.В. Филиппов // Агропромиздат. - М., 1991. - 188 с.
8. Новиков Д. К. Клеточные методы иммунодиагностики / Д. К. Новиков, В. И. Новикова. - Минск: Здоровье, 1979. - 286 с.
Рецензент - д. вет. н., професор Сорока Н. М.
334
