CC BY
93
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vассшит тугШ1ш I.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
УДК 338.439.4
DOI: 10.18413/2408-9346-2016-2-4-53-59
Фрум А.1 Жеоржеску Ч.2 Быркэ А. Г.3 Глигор Ф. Г.4 Тицэ О.5
ИССЛЕДОВАНИЕ КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ЧЕРНИКИ (VACCINIUM MYRTILLUS L.) КАК СЫРЬЯ ДЛЯ ПИЩЕВОЙ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
1) аспирант, Университет «Лучиан Блага» Сибиу, факультет сельскохозяйственных наук, пищевой инженерии и защиты окружающей среды, ул. И. Рациу, 7-9, г. Сибиу, Румыния. E-mail: [email protected] 2) кандидат химических наук, доцент, Университет «Лучиан Блага» Сибиу, факультет сельскохозяйственных наук, пищевой инженерии и защиты окружающей среды, ул. И. Рациу, 7-9, г. Сибиу, Румыния.
E-mail: [email protected] 3) кандидат экономических наук, доцент, Технический Университет Молдовы, факультет технологии и менеджмента пищевых производств, ул. Штефан чел Маре, 168, Кишинев, МД-2004, Республика Молдова.
E-mail: birca. adriana1@gmail. com 4) профессор, кандидат фармацевтических наук, Университет «Лучиан Блага» Сибиу, медицинский факультет ул. Лучиан Блага, 2А, г. Сибиу, Румыния. E-mail: [email protected] 5) профессор, кандидат технических наук, Университет «Лучиан Блага» Сибиу, факультет сельскохозяйственных наук, пищевой инженерии и защиты окружающей среды, ул. И. Рациу, 7-9, г. Сибиу, Румыния.
E-mail: ovidiu. [email protected]
Аннотация. Черника традиционно используется как сырье в пищевой и фармацевтической промышленности. Регулярное употребление этих ягод уменьшает количество хронических заболеваний благодаря высокому содержанию полифенолов. В настоящем исследовании спектрофотометрический метод использован для количественного определения общего количества полифенолов в чернике и метод HPLC для идентификации и определения некоторых фенольных соединений. В результате были обнаружены галловая, сиреневая, коричная, кофейная, феруловая и хлорогеновая кислоты, ресвератрол, катехин, рутин и кверцетин. Установлено, что из выделенных идентифицированных фенольных соединений хлорогеновая кислота находится в наибольшей концентрации - 85,42 мг/100 г растительного продукта, а ресвератрол в наименьшей концентрации - 0,25 мг/100 г растительного продукта. Ключевые слова: черника; фенольные соединения; фенольные кислоты; ВЭЖХ
UDK 338.439.4
Frum A.1 STUDY QUALITY AND QUANTITY OF PHENOLIC COMPOUNDS
Georgescu C.2 BILBERRY (VACCINIUM MYRTILLUS L.) AS RAW MATERIALS FOR
Birca A. G.3 FOOD AND PHARMACEUTICAL INDUSTRY
Gligor F. G.4
Tita O.5
1) Graduate Student, Lucian Blaga University of Sibiu, Faculty of Agricultural Sciences, Food Engineering and the Environment, 7-9, St. I. Ratsiu, Sibiu, Romania. E-mail: [email protected] 2) PhD in Chemistry, Associate Professor, Lucian Blaga University of Sibiu, Faculty of Agricultural Sciences, Food Engineering and the Environment, 7-9, St. I. Ratsiu, Sibiu, Romania. E-mail: [email protected] 3) PhD in Economic Sciences, Associate Professor, Technical University of Moldova, Faculty of Technology and Management of Food Production, 168, st.Stefan cel Mare, Chisinau, MD-2004, Republic of Moldova. E-mail: birca. adriana1@gmail. com 4) Professor, Candidate of Pharmaceutical Sciences, Lucian Blaga University of Sibiu, Faculty of Medicine, 7-9, St. I. Ratsiu, Sibiu, Romania. E-mail: [email protected] 5) Professor, Candidate of Technical Sciences, Lucian Blaga University of Sibiu, Faculty of Agricultural Sciences, Food Engineering and the Environmen, 7-9, St. I. Ratsiu, Sibiu, Romania. E-mail: [email protected]
Abstract. Bilberry is traditionally used as a raw material in the food and pharmaceutical industries. Regular consumption of these berries reduces the number of chronic diseases due to the high content of polyphenols. In the present study, a spectrophotometry method used to quantify the total amounts of polyphenols in blueberries and HPLC method for identification and determination of some phenolic
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vассшит тугШ1ш I.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
compounds. The result was discovered Gallic, lilac, cinnamon, coffee, ferulic, and chlorogenic acid, resveratrol, catechin, rutin and quercetin. It is established that of the selected identified phenolic compounds chlorogenic acid is found in greatest concentration - 85,42 mg/100 g vegetal product, and resveratrol in the lowest concentration - 0,25 mg/100 g plant product. Keywords: blueberries; phenolic compounds; phenolic acids; HPLC
Введение. На национальном и международном уровне в настоящее время отмечается повышенное внимание к применению лесных ягод. Исследование натуральных химических соединений растительных продуктов является важной темой современной химии, которая не прекращает привлекать во многих странах живой интерес, как теоретический, так и практический.
Для полноценного использования лесных ягод необходимо использование современных методов экстракции и очистки, изучение содержания биологически активных веществ в растительных материалах, их локализация на уровне органов и тканей, а также наиболее эффективное применение этих соединений в различных областях деятельности, например, в пищевой или фармацевтической промышленности.
Черника (Vaccinium myrtШus Ь) - это лесная ягода, традиционно используемая в Европе в питании и как медицинский продукт [12]. Вследствие накопления большого числа биологически активных веществ,
макронутриентов и микронутриентов она обладает рядом функциональных свойств. В первую очередь это обусловлено антиоксидантной активностью биологически активных веществ, способных нейтрализовать свободные радикалы [7]. Среди биологически активных веществ с сильными антиоксидантными свойствами присутствуют полифенолы, в первую очередь антоцианы [3]. Это - ответственные за красный, голубой или фиолетовый цвет поверхности фруктов, семян, цветов и некоторых листьев красящие вещества, обладающие рядом положительных биологических эффектов [6], как и некоторые другие компоненты растительных источников - каротиноиды, токоферолы, микроэлементы, полиненасыщенные жирные кислоты [11]. Синтез полифенолов в клетках животных и человека невозможен, поэтому они поступают в организм преимущественно с растительной пищей, оказывая при этом на него в целом благоприятное воздействие.
Лесные ягоды, например черника, ежевика и клюква, богаты полифенольными соединениями (флавоноидами); это, в первую очередь, антоцианы, флавоны, флаванолы, проантоцианиды, фенольные кислоты (гидроксибензойные и
гидроксикоричные) и элагитанины, которые накапливаются в различных концентрациях в зависимости от внутренних (генетических) факторов, а также от окружающей среды [5]. Черника является одной из ягод с повышенной антиоксидантной активностью, благодаря присутствию фенольных соединений в значительных количествах [8]. Она имеет антиокислительные, сосудозащитные,
противодерматитные и противовоспалительные свойства. Черника используется в основном в офтальмологии, а также как вспомогательное средство при лечении заболеваний сосудов, например, капиллярной хрупкости, венозной недостаточности или геморроя [9].
Исследования показали, что регулярное потребление лесных ягод может уменьшить риск появления некоторых хронических заболеваний, например, сердечно-сосудистых, раковых, легочных заболеваний, артрита или диабета. Также был доказан и их омолаживающий эффект [8].
Антиоксиданты известны как важные биологически активные вещества, оказывающие положительное влияние на здоровье. Они широко используются в пищевой промышленности как потенциальные ингибиторы окисления липидов [10]. По этой причине внимание ученых направлено на натуральные, нетоксичные антиоксиданты, защищающие человеческий организм от воздействия свободных радикалов, которые могут обусловливать появление хронических дегенеративных заболеваний.
Учитывая известные свойства черники, в настоящей работе была поставлена цель экстрагировать, отделить и идентифицировать полифенольные соединения этих лесных ягод.
Материалы и методы.
Подготовка пробы. Черника была собрана в окрестностях г. Сибиу (Румыния), заморожена и хранилась при температуре -20°C. Для проведения анализов ягоды высушивались при 50°С в свободном потоке теплого воздуха.
500 мг порошка растительного продукта подвергали экстракции в 10 мл растворителя: метанол/вода в пропорции 70:30 (V/V). Экстракция проводилась в колбе Эрленмейера, закрытой шлифованной пробкой. Колбу выдерживали в ультразвуковой ванне в течение
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vассшит тугШ1ш I.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
30 мин. при температуре 40°С. Смесь центрифугировали при 5000 об/мин в течение 10 мин. и полученный экстракт декантировали с осадка и высушивали. Сухой остаток растворяли в 10 мл растворителя, фильтровали и доводили до объема 10 мл этим же растворителем.
Анализ общих полифенолов.
Спектрофотометрический анализ общих полифенолов проводили по методу Фолина -Чокальтеу, адаптированному по действующему изданию Европейской Фармакопеи 8.0.
К 1 мл анализируемого раствора, разбавленного в соотношении 1:10, добавляли 1 мл реактива Фолина, 15 мл дистиллированной воды и 2 мл раствора карбоната натрия 290 г/л. Приготовленную смесь встряхивали 10 минут, затем выдерживали в водяной бане при температуре 40 °С в течение 20 минут. Раствор охлаждали и измеряли оптическую плотность полученного раствора при 760 нм.
Пересчет выполняли на галловую кислоту по калибровочной кривой, которую строили, в аналогичных условиях, заменяя анализируемый раствор на раствор галловой кислоты различной концентрации в метаноле. Растворы галловой кислоты готовились следующим образом. В 5 мерных колб объемом 25 мл вводили соответственно 1, 2, 3, 4 и 5 мл раствора галловой кислоты 1 мг/мл и доводили до метки метанолом. Полученные растворы обрабатываются аналогично анализируемой пробе. Концентрацию общих полифенолов в анализируемой пробе выражали в мг галловой кислоты на 100 мг растительного продукта.
Анализ некоторых фенольных соединений. Качественный и количественный анализ проводился методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием хроматографической колонки 250^4,6 мм Zorbax Eclipse Plus C18, 5 мкм при температуре термостата колонок 25 °С. Элюирование проводилось в градиентном режиме с использованием трех растворителей: А -дистиллированная вода степени очистки Milli-Q, В - абсолютный метанол и С - смесь очищенной воды и ледяной уксусной кислоты в пропорции 96:4 (по объему). Программа градиента: 0 мин: 15% В и 85% С, 15 мин - 75% А и 25% В, 20 мин: 15% А и 85% В, 40 мин: 40% А и 60% В, 45 мин: 5% А и 95% В, 55 мин: 5% A и 95% B, 60 мин: 85% A и 15% B и 70 мин: 85% A и 15% B. При этом скорость подачи элюента составляла: 0 мин: 0.5 мл/мин. и от 15 до 70 мин: 0,8 мл/мин. Объем вводимой пробы 5 мкл. Детектирование осуществляли при 280, 303, 330 и 360 нм; указанные длины волн были предварительно выбраны по спектрофотометрическим
параметрам определяемых компонентов [4].
Результаты и обсуждение. В чернике было обнаружено общее количество полифенольных соединений - 56,31 мг/100 мг растительного продукта (в пересчете на галловую кислоту). Результат был получен с использованием калибровочной кривой, представленной на рис. 1, и пересчитан на 100 мг исходного растительного продукта.
Рис. 1. Калибровочная кривая общих полифенолов в методе Фолина-Чокальтеу Fig. 1. Total polyphenols the calibration curve in the method Polina-Ciocalteu
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vассшит тугШ1ш I.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
Эти результаты указывают на общее количество присутствовавших в экстракте полифенолов, чувствительных к реактиву Фолина-Чокальтеу.
Путем использования метода ВЭЖХ были получены иные результаты: общее количество фенольных веществ было определено в количестве 217,35 мг/100 г растительного
продукта. При этом вещества определяли при длинах волн, соответствующих максимумам абсорбции соединений: при 280 нм детектировали галловую кислоту, (+)-катехин, сиреневую и коричную кислоты, при 303 нм - ресвератрол, при 330 нм хлорогеновую, кофейную и феруловую кислоты, а при 360 нм - рутин и кверцетин (рис. 2, 3).
Рис. 2. Хроматограмма смеси стандартов фенольных соединений: A - 280 nm, B - 303 nm, C - 330 nm, D - 360 nm 1 - галловая кислота, 2 - (+)-катехин, 3 - сиреневая кислота, 4 - коричная кислота, 5 - ресвератрол, 6 - хлорогеновая кислота, 7 - кофейная кислота, 8 - феруловая кислота, 9 - рутин, 10 - кверцетин Fig. 2. Chromatogram of mixture of standards ofphenolic compounds: A - 280 nm, B - nm 303, C - 330 nm, D - 360 nm 1 - gallic acid, 2 - (+)-catechin, 3 - lilac acid, 4 - cinnamic acid, 5 - resveratrol, 6 - chlorogenic acid, 7 - coffee acid, 8 - ferulic acid, 9 - rutin, 10 - quercetin
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vассшит тугШ1ш I.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
DAD1 A, Sig=280,4 Ref=36D, 10D (DOCTORATAEXTRACTIM 2016-06-03 11-06-45\E3-A.D)
mAU
175
DAD1 C, Sig=330,4 Ref=480,1[)0 {DOCTORATIEXTRACTII1 2016-06-03 11-06-451E3 - A.D)
mAU 175 г
150125100 t 7550250
.-Нт-учу
n-
6
DAD1 D, Sig—360,4 Ref-480,100 {DOCTORATVEXTRACTII1 2016-06-03 11-06-45^E3 - A.D)
I
18
20
22
24 mir
mAU 1751501251007550 t 250 -
~~i— 10
i
12
I
14
I
16
~~l
18
20
« I II f, 10 ,y ^-fr-'-.-tv Ц-Ч-",-
1—I—1—1—
22
24 mir
Рис. 3. Хроматограмма фенольных компонентов экстракта черники Запись экстракта при: A - 280 нм, B - 303 нм,
C - 330 нм, D - 360 нм 1 - галловая кислота, 2 - (+)-катехин, 3 - сиреневая кислота, 4 - коричная кислота, 5 - ресвератрол, 6 - хлорогеновая кислота, 7 - кофейная кислота, 8 - феруловая кислота, 9 - рутин, 10 - кверцетин Fig. 3. Chromatogram of the phenolic components of blueberry extract Record extract at A - 280 nm, B - nm 303, C - 330 nm, D - 360 nm 1 - gallic acid, 2 - (+)-catechin, 3 - lilac acid, 4 - cinnamic acid, 5 - resveratrol, 6 - chlorogenic acid, 7 - coffee acid, 8 - ferulic acid, 9 - rutin, 10 - quercetin
Идентификация фенольных соединений проводилась путем сравнения времен удерживания (табл. 1) фенольных соединений в смеси стандартов (рис. 2) с веществами из экстракта черники (рис. 3).
Для количественных расчетов использовали площади пиков и градуировочные зависимости, построенные по стандартным веществам.
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vассшит тугШ1ш I.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
Время удержания фенольных соединений The retention time of phenolic compounds
Таблица 1 Table 1
Фенольное соединение Времяудержания (мин) Фенольное соединение Время удержания (мин)
Галловая кислота 6,7 Хлорогеновая кислота 13,9
(+)-Катехин 10,9 Кофеиновая кислота 19,5
Сиринговая кислота 20,8 Феруловая кислота 22,4
Коричная кислота 24,2 Рутин 22,7
Ресвератрол 22,8 Кверцетин 23,8
Наибольшее количество из определенных в экстрате веществ пришлось на хлорогеновую кислоту 85,42 мг /100 г, затем следует феруловая кислота и рутин, содержание которых составило, соответственно 38,30 мг /100 г и 33,37 мг/100 г. Галловая кислота, (+)-катехин и кофейная
кислота найдены в количестве между 10 и 20 мг/100 г. Наименьшим оказалось содержание в растительном продукте кверцетина, сиреневой и коричной кислот и ресвератрола. Последний находится в количестве менее 1 мл/100 г (табл. 2).
Количественный анализ фенольных соединений Quantitative analysis of phenolic compounds
Таблица 2 Table 2
Стандарт Площадь пика в образце, mAU-с Площадь пика стандарта, mAU-с Масса навески, мг Масса стандарта, мг Содержание веществ в стандартах, % Содержание веществ в образце, г/100 г
Кверцетин 36,11794 371,7557 530,47 5,19 95 3,61
Рутин 167,716 225,8515 6,34 94 33,37
Галловая кислота 177,1212 467,3984 5,79 98,5 16,30
Сиреневая кислота 82,75699 392,7161 5,45 95 8,23
Кофейная кислота 277,4025 773,6238 5,21 98 13,81
Коричная кислота 60,89871 1117,151 5,68 99 2,31
Феруловая кислота 683,80505 673,0148 5,05 99 38,30
Катехин 41,38238 100,7379 5,19 98 15,75
Ресвератрол 7,23756 1058,129 5,04 99 0,26
Хлорогеновая кислота 826,18671 356,8267 5,15 95 85,42
Всего 217,35
Выводы. Исследования последних лет отмечают способность черники снижать риск возникновения определенных хронических заболеваний. Это можно объяснить значительным количеством полифенольных соединений, содержащихся в этих ягодах. Количество таких соединений в чернике, собранной в окрестностях г. Сибиу (Румыния), было определено спектрофотометрическим методом с
использованием реактива Фолина-Чокальтеу, и было выражено в эквивалентах галловой кислоты в мг на 100 г продукта. В чернике было найдено 56,31 мг полифенолов на 100 г растительного продукта.
Качественный и количественный анализ фенольных соединений, выполненный методом ВЭЖХ, показал, что в этих ягодах имеется
значительное количество хлорогеновой кислоты, феруловой кислоты и рутина. Меньше всего в чернике обнаружено сиреневой кислоты, ресвератрола и кверцетина.
Список литературы
1. Farmacopeea Europenä [Text]. 2014, Editia 8.0.
2. Arevstrom, L., Landberg, R., Waldenborg, M., Blanc, S., Frobert, O. Bilberry as a dietary supplement after myocardial infarction: The Bear Smart Trial [Text] / L. Arevstrom, R. Landberg, M. Waldenborg, S. Blanc, O. Frobert // Journal of the American College of Cardiology, № 67(13_S). 2016. 539 р.
3. Babova, O., Occhipinti, A., Capuzzo, A., Maffei, M. E. Extraction of bilberry (Vaccinium myrtillus) antioxidants using supercritical/subcritical CO2 and ethanol as co-solvent [Text] / O. Babova, A. Occhipinti,
Фрум А., Жеоржеску Ч., Быркэ А.Г., Глигор Ф.Г., Тицэ О. Исследование качественного и количественного состава фенольных соединений черники (Vaccinium myrtillus l.) как сырья для пищевой и фармацевтической промышленности// Научный результат. Технологии бизнеса и сервиса. - Т.2, №4, 2016.
A. Capuzzo, M. E. Maffei // The Journal of Supercritical Fluids, № 107. 2016. Pp. 358-363.
4. Frum, A., Lengyel, E., Georgescu, C., Gligor, F., Tita, O. Analysis of phenolic compounds extracted from three types of berries [Text] / A. Frum, E. Lengyel, C. Georgescu, F. Gligor, O. Tita // Journal of EcoAgroTourism, № 1. 2016.
5. Häkkinen, S. H., Törrönen, A. R. Content of flavonols and selected phenolic acids in strawberries and Vaccinium species: influence of cultivar, cultivation site and technique [Text] / S. H. Häkkinen, A. R. Törrönen // Food Res. Int., № 33. 2000. 517 p.
6. Kong, J. M., Chia, L. S., Goh, N. K. Analysis and biological activities of anthocyanins [Text] / J. M. Kong, L. S. Chia, N. K. Goh // Phytochem., № 64. 2003. Pp. 923-933.
7. Lobo, V., Patil, A., Phatak, A., Chandra, N. Free radicals, antioxidants andfunctional foods: Impact on human health [Text] / V. Lobo, A. Patil, A. Phatak, N. Chandra // Pharmacognosy Reviews, №4. 2010. Pp. 118-126.
8. Padmanabhan, P., Coreea-Betanzo, J., Paliyath, G., Berries and Related Fruits [Text] / P. Padmanabhan, J. Coreea-Betanzo, G. Paliyath, // Encyclopedia of Food and Health, Reference Module in Food Science, 2016. Pp. 364-371.
9. Pietta, P., Gardana, C., Pietta, A. Chapter 2-Flavonoids in Herbs, Flavonoids in Health and Disease [Text] / P. Pietta, C. Gardana, A. Pietta, // Marcel Dekker Inc., 2003. Pp. 53-54.
10. Scherer, R., Godoy, H. T. Antioxidant activity index (AAI) by the 2,2-diphenyl-picrylhydrazyl method [Text] / R. Scherer, H. T. Godoy // Food chemistry № 112. 2009. Pp. 654-658.
11. Thompson, A. K. Fruit and vegetables: Harvesting, Handling and Storage [Text] / A. K. Thompson // John Wiley and Sons, Ltd. №1, 2015. Pp. 237-240.
12. Zoratti, L., Jaakola, L. Bilberry (Vaccinium myrtillus L.) Ecotypes [Text] / L. Zoratti, L. Jaakola, // Composition of Fruit Cultivars, Academic Press. 2016. Pp. 83-99.
References
1. Farmacopeea Europenä [Text]. 2014, Editia 8.0.
2. Arevstrom, L., Landberg, R., Waldenborg, M., Blanc, S., Frobert, O. Bilberry as a dietary supplement after myocardial infarction: The Bear Smart Trial [Text] / L. Arevstrom, R. Landberg, M. Waldenborg, S. Blanc, O. Frobert // Journal of the American College of Cardiology, № 67(13_S). 2016. 539 p.
3. Babova, O., Occhipinti, A., Capuzzo, A., Maffei, M. E. Extraction of bilberry (Vaccinium myrtillus) antioxidants using supercritical/subcritical CO2 and ethanol as co-solvent [Text] / O. Babova, A. Occhipinti, A. Capuzzo, M. E. Maffei // The Journal of Supercritical Fluids, № 107. 2016. Рр. 358-363.
4. Frum, A., Lengyel, E., Georgescu, C., Gligor, F., Tita, O. Analysis of phenolic compounds extracted from three types of berries [Text] / A. Frum, E. Lengyel, C. Georgescu, F. Gligor, O. Tita, // Journal of EcoAgroTourism, № 1. 2016.
5. Häkkinen, S. H., Törrönen, A. R. Content of flavonols and selected phenolic acids in strawberries and Vaccinium species: influence of cultivar, cultivation site and technique [Text] / S. H. Häkkinen, A. R. Törrönen // Food Res. Int., № 33. 2000. 517 р.
6. Kong, J. M., Chia, L. S., Goh, N. K. Analysis and biological activities of anthocyanins [Text] / J. M. Kong, L. S. Chia, N. K. Goh // Phytochem., № 64. 2003. Рр. 923-933.
7. Lobo, V., Patil, A., Phatak, A., Chandra, N. Free radicals, antioxidants andfunctional foods: Impact on human health [Text] / V. Lobo, A. Patil, A. Phatak, N. Chandra // Pharmacognosy Reviews, №4. 2010. Рр. 118-126.
8. Padmanabhan, P., Coreea-Betanzo, J., Paliyath, G., Berries and Related Fruits [Text] / P. Padmanabhan, J. Coreea-Betanzo, G. Paliyath, // Encyclopedia of Food and Health, Reference Module in Food Science, 2016. Рр. 364-371.
9. Pietta, P., Gardana, C., Pietta, A. Chapter 2-Flavonoids in Herbs, Flavonoids in Health and Disease [Text] / P. Pietta, C. Gardana, A. Pietta, // Marcel Dekker Inc., 2003. Рр. 53-54.
10. Scherer, R., Godoy, H. T. Antioxidant activity index (AAI) by the 2,2-diphenyl-picrylhydrazyl method [Text] / R Scherer, H. T. Godoy // Food chemistry № 112. 2009. Рр. 654-658.
11. Thompson, A. K. Fruit and vegetables: Harvesting, Handling and Storage [Text] / A. K. Thompson // John Wiley and Sons, Ltd. №1, 2015. Рр. 237-240.
12. Zoratti, L., Jaakola, L. Bilberry (Vaccinium myrtillus L.) Ecotypes [Text] / L. Zoratti, L. Jaakola, // Composition of Fruit Cultivars, Academic Press. 2016. Рр. 83-99.
Рецензент:
Якуба А.Р., профессор, доктор технических наук
Сумской национальный аграрный университет
