CC BY
38
УДК 636.32/.38:611.3
Морфогенез стенки сетки овец в пренатальном онтогенезе
Т.И.Лапина, О.В. Дилекова, Ст. ГАУ
Одной из основных задач современной биологии является овладение и управление жизненными процессами в клетках, органах и организме в целом. Вопросы морфогенеза сетки в многокамерном желудке являются частью данной проблемы, они необходимы для понимания структурно-функциональной организации пищеварительной системы, при решении которой необходимо выяснить принципы развития органов и организма, его строения, адаптационных перестроек, с тем чтобы на этой основе разработать эффективные способы целенаправленного вмешательства в онтогенез для повышения устойчивости животных к заболеваниям, стрессам и изменившейся экологической обстановке.
Материалом для исследований служили сетки многокамерных желудков, взятые у плодов овец ставропольской породы от раннеплодного периода развития (45 дней) и до рождения (150 дней). Из
о
дорсальной части сеток вырезали кусочки размером 1 см3, которые фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине и жидкости Карнуа. Проводку и заливку отобранных кусочков проводили по общепринятой методике. Для изучения общей структуры стенки сетки окраска срезов проводилась гематоксилином и эозином. Для выявления нуклеиновых кислот использовали реакцию Эйнарсона. Реакцию на общий белок проводили сулема-бромфеноловым синим. Гликоген и другие ШИК-положительные вещества выявляли по методу А.Л.Шабадаша. Кислые углеводсодержащие биополимеры выявляли альциановым синим по Стидмену. Липиды определяли в парафиновых срезах по Мак-Манусу.
В раннеплодный период развития плода (45 дней) в сетке сформированы: слизистая оболочка, подслизистая основа, мышечная и серозная оболочки. Толщина стенки сетки в этот период составляет 0,185±0,005 мм. Слизистая оболочка равна 0,094±0,0034 мм, а мышечная - 0,06±0,0033 мм.
Эпителий слизистой оболочки многослойный плоский неороговевающий. В клетках базального слоя эпителия видны фигуры митоза.
Суммарное содержание нуклеиновых кислот в этот период (+ + + +). Общий белок содержится в ядрах и цитоплазме клеток базального слоя эпителия.
Эпителий слизистой оболочки сетки в раннеплодный период развития богат гликогеном, который располагается по всем клеткам в виде крупных глыбок. Нейтральные и кислые углеводсодержащие биополимеры в эпителии слизистой оболочки у плодов на 45 день развития не выявляются.
Липиды содержатся в цитоплазме клеток в виде крупных капель.
Мышечная оболочка состоит из двух слоев. Первый слой циркулярный, внутренний, второй слой продольный, наружный.
В конце среднеплодного периода (90 дней) стенка сетки увеличилась на 71,4%. При этом толщина слизистой оболочки возросла на 77,7%, а мышечной - на 266,6%. Следовательно, в среднеплодный период развития стенки сетки наиболее интенсивным ростом характеризуется мышечная оболочка, составляя 69,4% от всей стенки.
Нуклеиновые кислоты дают реакцию (+ +) в базальном слое, в остальных слоях - (+), общий белок содержится перинуклеарно.
Гликоген в большом количестве выявляется в плоском слое эпителия. В шиповатом и базальном слоях гликоген содержится в оболочке клеток и межклеточном веществе, но встречаются клетки, полностью заполненные им.
Кислые и нейтральные углеводсодержащие биополимеры чаще выявляются в плоском слое эпителия. Изредка кислые углеводсодержащие биополимеры содержатся в цитоплазме базального слоя эпителия.
На 90 день развития плода в стенке сетки видны соединительнотканные гребни ячеек I и II генерации, а гребни ячеек III генерации только начинают свое формирование. Возникают гребни путем врастания подлежащей соединительной ткани в эпителий слизистой оболочки. Гребни I генерации чаще всего имеют тонкое основание и широкую закругленную верхушку. У гребней II порядка основание и верхушка одинаковой толщины. У основания ячеек I генерации сформированы по одному, а иногда и по два сосочка. Внутри ячеек I и II генерации проходят мышечные тяжи, состоящие из 2 - 4 слоев гладкомышечных клеток, плотно прилегающих друг к другу. По бокам от мышечного тяжа проходит рыхлая неоформленная соединительная ткань, идущая из подслизистой основы и состоящая из тонких коротких коллагеновых волокон. Внутри гребней проходит сеть кровеносных сосудов.
В мышечной оболочке циркулярный мышечный слой внутренний, мощный, в 2 раза больше продольного. Между мышечными слоями проходит сеть кровеносных сосудов, а также межмышечное нервное сплетение.
В начале позднеплодного периода развития (105 дней) общая толщина стенки увеличивается на 164%, при этом толщина слизистой оболочки возрастает на 157,5%, а мышечная уменьшается на 10,9% по сравнению со стенкой 90-дневного плода. При этом видно, что в начале позднеплодного периода развития более интенсивно развивается слизистая оболочка, составляя 51,3% от толщины всей стенки.
На 105-день развития плода продолжается формирование специфических структур слизистой оболочки стенки сетки.
Клетки базального слоя в местах формирования ячеек III генерации и сосочков в ячейках I и II генерации находятся в состоянии
активного митотического деления.
Содержание нуклеиновых кислот в базальном слое (+ + +), в шиповатом - (+). Цитоплазма базальных клеток содержит много общего белка, в шиповатом слое общий белок содержится вокруг ядерной оболочки.
Цитоплазма шиповатого слоя эпителия в начале позднеплодного периода развития богата гликогеном. В базальных клетках гликоген расположен в виде пылевидной зернистости по всей цитоплазме. В плоском эпителии цитоплазма полностью заполнена гликогеном, в клетках шиповатого слоя он заполняет половину или третью часть клетки. Изредка встречаются клетки, в которых гликоген представлен единичными гранулами (верх слоя). Для всего эпителиального пласта характерна тенденция преимущественной концентрации гликогена в базальной части клеток, а также локализация у клеточных мембран. Можно предположить, что гликоген здесь не только синтезируется, но и активно расходуется.
Нейтральные углеводсодержащие биополимеры в незначительном количестве содержатся в плоском слое эпителиального пласта, а также встречаются гранулы в верхних слоях шиповатого слоя. Кислые углеводсодержащие биополимеры находятся в плоском слое эпителия.
На ячейках I генерации имеются несколько сосочков. Внутри гребней проходит сеть кровеносных сосудов.
Во всех оболочках стенки сетки липиды содержатся в мембранах клеток. В эпителиальном пласте имеются единичные пылевидные включения липидов. В мышечной оболочке - включения липидов в виде больших гранул.
Нейтральные углеводсодержащие биополимеры в малом количестве выявлены в подслизистой основе и мышечной оболочке.
В позднеплодном периоде (120 дней) стенка сетки увеличивается на 36,7%, в 135 дней уменьшается на 52,5%, а перед рождением повышается на 96,3% по сравнению с началом позднеплодного периода развития стенки сетки. Слизистая оболочка на 120 день развития плода увеличивается на 34,4%, внутри стенки она составляет до 50,5% по сравнению с мышечной оболочкой, которая вырастает на 78,1%, а содержание ее внутри стенки равно 30,5% от толщины стенки сетки 105дневного плода. На 135 день развития плода вместе со стенкой сетки происходит уменьшение слизистой оболочки на 33,9%, от всей стенки сетки она составляет 70,3%, тогда как мышечная оболочка падает на 73,6% по сравнению с внутристеночным содержанием, равным 16,9%. Перед рождением слизистая оболочка начинает увеличиваться на 9,7%, а мышечная - на 245,7%, внутри стенки их процентное соотношение равно 29,8 и 39,3%.
В позднеплодном периоде развития и до самого рождения плода стенка сетки продолжает утолщаться, и вместе с ней происходит увеличение как слизистой, так и мышечной оболочек.
В 120 дней гребни ячеек I генерации доходят почти до верха эпителиального пласта, от их стенок продолжают врастать в эпителий соединительнотканные сосочки, которые располагаются по всей поверхности. К рождению гребни ячеек I генерации достигают плоского слоя эпителия. Гребни ячеек II и III генерации не имеют сосочков.
Суммарное количество нуклеиновых кислот в эпителии стенки сетки 120-дневного плода составляет (+ +), перед рождением повышается до (+ + + +). Клетки эпителиального пласта содержат общий белок, количество которого с возрастом увеличивается. Локализуется общий белок в цитоплазме, ядре, по ходу клеточных оболочек. Наиболее богата общим белком цитоплазма базальных клеток.
Локализация гликогена в эпителии сетки поздних плодов аналогична описанной выше в начале позднеплодного периода. К концу поздне-плодного периода намечается тенденция уменьшения количества гликогена в эпителии слизистой оболочки сетки. Однако вплоть до рождения количество его остается значительным.
Нейтральные углеводсодержащие биополимеры локализуются в цитоплазме клеток плоского слоя эпителия и в верхних 3 - 4 рядах шиповатого слоя. Из них 1 - 2 ряда полностью заполнены нейтральными углеводсодержащими биополимерами и при малом увеличении микроскопа имеют вид интенсивно окрашенной полоски. Содержат нейтральные углеводсодержащие биополимеры базальная мембрана и подлежащая соединительная ткань, в особенности у основания сосочков.
Кислые углеводсодержащие биополимеры содержатся в плоском слое эпителия.
В мышечной оболочке циркулярный слой довольно мощный и по толщине превышает продольный в два раза.
На 120 день развития плода количество липидов в стенке сетки незначительное. К рождению в слизистой оболочке они появляются в виде крупных гранул.
Таким образом, из вышеописанного можно сделать следующие выводы:
- слизистая и мышечная оболочки сетки плодов овец формируются к 45-дневному возрасту;
- мышечная оболочка интенсивно растет на протяжении всего пренатального онтогенеза и перед рождением достигает наибольшей толщины и сложности расположения мышечных пучков, что обеспечивает ее многообразную моторику;
- в стенке сетки, к концу среднеплодного периода развития плода, сформированы соединительнотканные ячейки I и II генерации, а ячейки III генерации только начинают свое формирование, к началу позднеплодного периода развития они заканчивают свое формирование;
- эпителий сетки во все периоды пренатального онтогенеза активно участвует в углеводном обмене, выполняя функцию синтеза и
депонирования гликогена;
- защитная функция слизистой оболочки сетки обеспечивается накоплением в поверхностных клетках эпителиального пласта кислых и нейтральных углеводсодержащих биополимеров.
