Научная статья на тему 'Исследование чувствительности аттестованных биотестов к загрязнению вод современными гербицидами: модельные эксперименты'

Исследование чувствительности аттестованных биотестов к загрязнению вод современными гербицидами: модельные эксперименты Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
135
37
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
БИОТЕСТИРОВАНИЕ / DAPHNIA MAGNA / CERIODADHNIA AFFINIS / PARAMECIUM CAUDATUM / ESCHERICHIA COLI / ЗАГРЯЗНЕНИЕ ВОДЫ / ИМАЗАМОКС / ИМАЗЕТАПИР / КЛОПИРАЛИД / ПИКЛОРАМ / BIOASSAY / WATER POLLUTION / IMAZAMOX / IMAZETAPIR / CLOPYRALID / PICLORAM

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Олькова Анна Сергеевна, Березин Григорий Иванович

Введение: гербициды имидазолиноны и производные пиридина являются современными препаратами для борьбы с сорняками. К их преимуществам специалисты относят возможность применения как для почвы, так и для растений, широкий спектр действия против нежелательных растений, защиту полей в течение всего вегетационного сезона. Производители заявляют об экологичности использования гербицидов последнего поколения за счет их быстрой деструкции в окружающей среде. Однако в различных исследованиях показано, что применение современных гербицидов воздействует как на микроорганизмы, так и на крупных животных. Следовательно, диагностика гербицидного загрязнения в почве и водных объектах является актуальной задачей. Методы: в работе мы исследовали воздействие на живые организмы имидазолинонов (имазетапир и имазамокс) и производных пиридина (смесь клопиралида и пиклорама). Эти вещества рекомендованы к применению в системе «чистого поля» (Clearfield system). Коммерческие формы препаратов (водные растворы) произведены в России и Республике Беларусь под торговым марками «Родимич» (имазамокс), «Гольф ВК» (имазетапир), «Актеон» (смесь клопиралида и пиклорама). Для расчетов использовали ПДК для воды действующих веществ: для имазетапира 0,01 мг/л, для клопиралида и пиклорама 0,04 мг/л, для имазамокса 0,004 мг/л. Практическая задача состояла в определении чувствительности биотестов, аттестованных в России, к этому специфическому загрязнению. Сравнивали чувствительность биотестов по смертности Daphnia magna, Ceriodadhnia affinis, хемотаксису Paramecium caudatum, изменению биолюминесценции Escherichia coli. Дополнительно оценивали хронические эффекты для D. magna. Результаты: рачки D. magna и C. affinis оказались нечувствительными к исследуемым веществам. Гибель C. affinis наступала в ответ на дозы 350 ПДК, а для D. magna летальными оказались добавки, равные 300 ПДК. Было установлено, что опасность гербицидов для этих гидробионтов увеличивается в ряду Имазетапир < Клопиралид + Пиклорам < Имазамокс. Биотесты по предлетальным реакциям микроорганизмов P. caudatum и E. coli оказались чувствительнее. Смесь клопиралида и пиклорама угнетала тест-функции микроорганизмов в ответ на минимальную дозу 1 ПДК (в расчете на клопиралид). Негативное действие имазетапира на инфузорий начиналось с 10 ПДК, на E. coli с 50 ПДК. Наиболее безопасным оказался имазамокс, оказывающий эффект при дозе 50 ПДК. В итоге для P. caudatum и бактерий тест-системы «Эколюм» справедлив ряд возрастания опасности действующих веществ в препаратах: имазамокс («Родимич») < Имазетапир («Гольф ВК») < Клопиралид + пиклорам («Актеон»). В хронических опытах с D. magna было показано, что современные гербициды вызывают задержку созревания самок D. magna и более позднее появление молоди по сравнению с контролем (на 1-2 дня). В результате за 24 дня эксперимента плодовитость D. magna была достоверно угнетена в ответ на действие доз в диапазоне от 1 до 50 ПДК в 1,3-1,8 раз (p < 0,05). Заключение: опыты показали, что чувствительность четырех биотестов к гербицидам имазетапиру, имазамоксу, смеси клопиралида и пиклорама можно представить следующим рядом: биотест по изменению хемотаксиса P. caudatum > биолюминесцентный биотест с бактериальным препаратом «Эколюм»> биотест по гибели C. affinis > > биотест по гибели D. magna.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

STUDY ON THE SENSITIVITY OF CERTIFIED BIOASSAYS TO WATER POLLUTION WITH MODERN HERBICIDES: MODEL EXPERIMENTS

Introduction: Imidazolinone herbicides and pyridine derivatives are modern weed control products. Experts attribute the possibility of introducing into the soil and on plants, wide spectrum of action against undesirable plants, and protection of fields throughout the growing season to their advantages. Manufacturers claim the environmental friendliness of using the latest generation of herbicides due to their rapid destruction in the environment. But various studies have shown that the use of modern herbicides affects both microorganisms and large animals. Therefore, diagnostics of herbicide contamination in the soil and water bodies is an urgent task. Methods: We studied the effects of imidazolinones (imazetapir and imazamox) and pyridine derivatives (a mixture of clopyralid and picloram) on living organisms. Those substances are recommended for use in the Clearfield system. Commercial forms of preparations (aqueous solutions) were produced in the Russian Federation and the Republic of Belarus under the Rodimich (imazamox), Golf VK (imazetapir), Akteon (a mixture of clopyralid and picloram) trademarks. For the purposes of calculation, the following maximum allowable concentrations (MAC) in water were taken: for imazetapir 0.01 mg/l, for clopyralid and picloram 0.04 mg/l, for imazamox 0.004 mg/l. The practical task was to determine the sensitivity of bioassays certified in Russia to this specific pollution. We compared the sensitivity of bioassays in terms of mortality of Daphnia magna and Ceriodadhnia affinis, Paramecium caudatum chemotaxis, and Escherichia coli bioluminescence changes. Additionally, we rated chronic effects for D. magna. Results: Crustaceans D. magna and C. affinis were not sensitive to the test substances. Death of C. affinis occurred in response to doses of 350 MAC, and for D. magna, supplements equal to 300 MAC were lethal. Experiments showed that the threat of herbicides to these aquatic organisms increased in the following series: imazetapi < < clopyralid + picloram < imazamox. The bioassays for the prelethal reactions of microorganisms P. caudatum and E. coli were more sensitive. A mixture of clopyralid and picloram inhibited the test functions of microorganisms in response to a minimum dose of 1 MAC (using clopyralid). The negative effect of imazetapir on ciliates started with 10 MAC, on E. coli with 50 MAC. Imazamox was the safest. It had an effect only at a dose of 50 MAC. As for P. caudatum and Ecolum test system bacteria, the following series of risk increase regarding the active ingredients in preparations is valid: imazamox (Rodimich) < < imazetapir (Golf VK) < < clopyralid + picloram (Akteon). In chronic experiments with D. magna, it was shown that modern herbicides caused a delay in the maturation of females D. magna and later appearance of the young in comparison with the control (by 1-2 days). As a result, in 24 days of the experiment, the fertility of D. magna was significantly depressed in response to doses in the range from 1 to 50 MPC by 1.31.8 times (p < 0.05). Conclusion: The experiments showed that the sensitivity of the four bioassays for imazetapyr, imazamox, and the mixture of clopyralid + picloram could be represented by the following series: the bioassay for changes in chemotaxis of P. caudatum > the bioassay of bioluminescence reduction in E. coli > the bioassay for the mortality of C. affinis > the bioassay for the mortality of D. magna.

Текст научной работы на тему «Исследование чувствительности аттестованных биотестов к загрязнению вод современными гербицидами: модельные эксперименты»

УДК 57.044 doi: 10.23968/2305-3488.2019.24.2.111-119

ИССЛЕДОВАНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ АТТЕСТОВАННЫХ БИОТЕСТОВ К ЗАГРЯЗНЕНИЮ ВОД СОВРЕМЕННЫМИ ГЕРБИЦИДАМИ: МОДЕЛЬНЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТЫ

Олькова А. С., Березин Г. И.

STUDY ON THE SENSITIVITY OF CERTIFIED BIOASSAYS TO WATER POLLUTION WITH MODERN HERBICIDES: MODEL EXPERIMENTS

Olkova A. S., Berezin G. I.

Аннотация.

Введение: гербициды имидазолиноны и производные пиридина являются современными препаратами для борьбы с сорняками. К их преимуществам специалисты относят возможность применения как для почвы, так и для растений, широкий спектр действия против нежелательных растений, защиту полей в течение всего вегетационного сезона. Производители заявляют об экологичности использования гербицидов последнего поколения за счет их быстрой деструкции в окружающей среде. Однако в различных исследованиях показано, что применение современных гербицидов воздействует как на микроорганизмы, так и на крупных животных. Следовательно, диагностика гербицидного загрязнения в почве и водных объектах является актуальной задачей. Методы: в работе мы исследовали воздействие на живые организмы имидазолинонов (имазетапир и имазамокс) и производных пиридина (смесь клопиралида и пиклорама). Эти вещества рекомендованы к применению в системе «чистого поля» (Clearfield system). Коммерческие формы препаратов (водные растворы) произведены в России и Республике Беларусь под торговым марками «Родимич» (имазамокс), «Гольф ВК» (имазетапир), «Актеон» (смесь клопиралида и пиклорама). Для расчетов использовали ПДК для воды действующих веществ: для имазетапира — 0,01 мг/л, для клопиралида и пиклорама — 0,04 мг/л, для имазамокса — 0,004 мг/л. Практическая задача состояла в определении чувствительности биотестов, аттестованных в России, к этому специфическому загрязнению. Сравнивали чувствительность биотестов по смертности Daphnia magna, Ceriodadhnia affinis, хемотаксису Paramecium caudatum, изменению биолюминесценции Escherichia coli. Дополнительно оценивали хронические эффекты для D. magna. Результаты: рачки D. magna и C. affinis оказались нечувствительными к исследуемым веществам. Гибель C. affinis наступала в ответ на дозы 350 ПДК, а для D. magna летальными оказались добавки, равные 300 ПДК. Было установлено, что опасность гербицидов для этих гидробионтов увеличивается в ряду Имазетапир < Клопиралид + Пиклорам < Имазамокс. Биотесты по предлетальным реакциям микроорганизмов P. caudatum и E. coli оказались чувствительнее. Смесь клопиралида и пиклорама угнетала тест-функции микроорганизмов в от-

Abstract.

Introduction: Imidazolinone herbicides and pyridine derivatives are modern weed control products. Experts attribute the possibility of introducing into the soil and on plants, wide spectrum of action against undesirable plants, and protection of fields throughout the growing season to their advantages. Manufacturers claim the environmental friendliness of using the latest generation of herbicides due to their rapid destruction in the environment. But various studies have shown that the use of modern herbicides affects both microorganisms and large animals. Therefore, diagnostics of herbicide contamination in the soil and water bodies is an urgent task. Methods: We studied the effects of imidazolinones (imazetapir and imazamox) and pyridine derivatives (a mixture of clopyralid and picloram) on living organisms. Those substances are recommended for use in the Clearfield system. Commercial forms of preparations (aqueous solutions) were produced in the Russian Federation and the Republic of Belarus under the Rodimich (imazamox), Golf VK (imazetapir), Akteon (a mixture of clopyralid and picloram) trademarks. For the purposes of calculation, the following maximum allowable concentrations (MAC) in water were taken: for imazetapir — 0.01 mg/l, for clopyralid and picloram — 0.04 mg/l, for imazamox — 0.004 mg/l. The practical task was to determine the sensitivity of bioassays certified in Russia to this specific pollution. We compared the sensitivity of bioassays in terms of mortality of Daphnia magna and Ceriodadhnia affinis, Paramecium caudatum chemotaxis, and Escherichia coli bioluminescence changes. Additionally, we rated chronic effects for D. magna. Results: Crustaceans D. magna and C. affinis were not sensitive to the test substances. Death of C. affinis occurred in response to doses of 350 MAC, and for D. magna, supplements equal to 300 MAC were lethal. Experiments showed that the threat of herbicides to these aquatic organisms increased in the following series: imazetapi < < clopyralid + picloram < imazamox. The bioassays for the pre-lethal reactions of microorganisms P. caudatum and E. coli were more sensitive. A mixture of clopyralid and picloram inhibited the test functions of microorganisms in response to a minimum dose of 1 MAC (using clopyralid). The negative effect of imazetapir on ciliates started with 10 MAC, on E. coli — with 50 MAC. Imazamox was the safest. It had an effect only at a

вет на минимальную дозу 1 ПДК (в расчете на клопиралид). Негативное действие имазетапира на инфузорий начиналось с 10 ПДК, на E. coli — с 50 ПДК. Наиболее безопасным оказался имазамокс, оказывающий эффект при дозе 50 ПДК. В итоге для P. caudatum и бактерий тест-системы «Эколюм» справедлив ряд возрастания опасности действующих веществ в препаратах: имазамокс («Родимич») < Имазе-тапир («Гольф ВК») < Клопиралид + пиклорам («Актеон»). В хронических опытах с D. magna было показано, что современные гербициды вызывают задержку созревания самок D. magna и более позднее появление молоди по сравнению с контролем (на 1-2 дня). В результате за 24 дня эксперимента плодовитость D. magna была достоверно угнетена в ответ на действие доз в диапазоне от 1 до 50 ПДК в 1,3-1,8 раз (p < 0,05). Заключение: опыты показали, что чувствительность четырех биотестов к гербицидам имазетапиру, имаза-моксу, смеси клопиралида и пиклорама можно представить следующим рядом: биотест по изменению хемотаксиса P. caudatum > биолюминесцентный биотест с бактериальным препаратом «Эколюм»> биотест по гибели C. affinis > > биотест по гибели D. magna.

Ключевые слова: биотестирование, Daphnia magna, Ceriodadhnia affinis, Paramecium caudatum, Escherichia coli, загрязнение воды, имазамокс, имазетапир, клопиралид, пи-клорам.

Введение

Промышленность и сельское хозяйство являются главными источниками антропогенного воздействия на окружающую среду [5]. Загрязняющие вещества промышленности связаны со спецификой производства, тогда как сельскому хозяйству всего мира присущи такие приоритетные загрязнители, как минеральные формы фосфора, азота, а также пестициды различного спектра действия. Отказ от химических агроме-роприятий в сельском хозяйстве на сегодняшний день практически невозможен, поэтому ученые уделяют особое внимание разработке новых поколений удобрений, пестицидов и изучению их действия на компоненты природной среды и био-ту [23, 25].

В Федеральном законе РФ «О безопасном обращении с пестицидами и агрохимикатами» [4] определено, что пестициды — это химические или биологические препараты, используемые для борьбы с вредителями и болезнями растений, сорными растениями, вредителями хранящейся сельскохозяйственной продукции, бытовыми вредителями и внешними паразитами животных, а также для регулирования роста растений, предуборочного удаления листьев (дефолианты), предуборочного подсушивания растений (де-

dose of 50 MAC. As for P. caudatum and Ecolum test system bacteria, the following series of risk increase regarding the active ingredients in preparations is valid: imazamox (Rodimich) < < imazetapir (Golf VK) < < clopyralid + picloram (Akteon). In chronic experiments with D. magna, it was shown that modern herbicides caused a delay in the maturation of females D. magna and later appearance of the young in comparison with the control (by 1-2 days). As a result, in 24 days of the experiment, the fertility ofD. magna was significantly depressed in response to doses in the range from 1 to 50 MPC — by 1.31.8 times (p < 0.05). Conclusion: The experiments showed that the sensitivity of the four bioassays for imazetapyr, imazamox, and the mixture of clopyralid + picloram could be represented by the following series: the bioassay for changes in chemotaxis of P. caudatum > the bioassay of bioluminescence reduction in E. coli > the bioassay for the mortality of C. affinis > the bioassay for the mortality of D. magna.

Keywords: bioassay, Daphnia magna, Ceriodadhnia affinis, Paramecium caudatum, Escherichia coli, water pollution, imazamox, imazetapir, clopyralid, picloram.

сиканты). Современные препараты чаще всего имеют относительно невысокий класс опасности для окружающей среды (3 или 4), при этом оказывают искомое действие в низких дозах, а также разрушаются под воздействием естественных факторов (света, влажности, температуры).

Одними из наиболее востребованных классов пестицидов, применяемых во многих видах растениеводства, являются гербициды — препараты для уничтожения сорных растений. Современные гербициды, как заявляют производители, не оказывают губительного действия на насекомых, например, пчел, а также на другие виды животных, то есть действуют избирательно на растения. Тем не менее, существует опасность негативного действия пестицидов на живые организмы агроэкосистемы, например, педобион-тов или гидробионтов ближайших водоёмов. Эта проблема обсуждается в отношении пресноводных экосистем различных стран [12, 16]. При выращивании риса водные объекты становятся источниками вторичного поступления гербицидов и их органических остатков на поля [20]. После применения многих современных гербицидов требуется применять меры рекультивации почв [21].

Действие гербицидов последнего поколения на основе имидазолинонов и производных пиридина, рассматриваемых нами в работе, активно изучаются учеными. В недавнем исследовании показана повышенная стереоселективная биологическая активность R-имидазолинонов в отношении Echinochloa crus-galli и Microcystis aeruginosa [24]. В модельных мезокосмах с фи-топланктонным сообществом группой ученых было показано, что смесь гербицидов имазапир-фимазапик (Kifix®) оказывает более выраженное токсическое действие в первые дни приме-

нения и максимально влияет на микроводоросли Cyanophyceae, Chlamydophyceae и CЫorophyceae [22]. В статье [19] продемонстрировано, что хотя имидазолиноновые гербициды нацелены на отсутствующий у животных фермент AHAS, обнаружены острые токсические эффекты у пятнистой рамдии из отряда Сомообразных (Rhamdia quelen) по его жизненно важным функциям иммунной защиты, обмена веществ, ионо-регуляции и нейротрансмиссии.

В представленной работе нами оценивалась чувствительность четырех методов биотестиро-

Таблица 1

Характеристика исследованных гербицидов

Характеристика препарата Гольф ВК Актеон Родимич

Действующее вещество Имазетапир С15Н19^03 (Имидазолиноны) Клопиралид + пиклорам (производные пиридина) Имазамокс С Н^^ (Имидазолиноны)

Препаративная форма Водорастворимый концентрат Водный раствор Водный раствор

ПДК [3] 0,01 мг/л клопиралид 0,04 мг/л пиклорам 0,04 мг/л 0,004 мг/л

Содержание действующего 100 267 + 67 40

вещества, г/л

Механизм действия Ингибирование синтеза Замещение натуральных гормонов рас- Подавление образования

белка в чувствительных тения, нарушают процессы дыхания незаменимых амино-

растениях, что приводит клеток и блокируют точки роста тканей кислот валина, лейцина

к замедлению и прекра- меристем, что приводит к значительным и изолейцина, нарушение

щению роста их клеток нарушениям ростовых процессов в растениях и их гибели синтеза белка и нуклеиновых кислот. В результате прекращается деление клеток и чувствительные растения отмирают

Класс опасности 3 3 3

Регистрант ООО «Форвард», ООО «Шанс», ООО «АГРОДИМ» (Россия) ООО «Форвард», ООО «АГРОДИМ» (Россия) ООО «Форвард», ООО «Франдеса» (Республика Беларусь)

Регистрационный номер 042(275)-03-737-1 042(275)-03-823-1 297(042)-03-1240-1

Дата окончания срока 13.06.2023 27.10.2025 26.09.2026

регистрации

Преимущества Обладает высокой эф- Эффективная защита посевов от про- Эффективно уничтожает

для сельского хозяйства фективностью как при блемных сорняков, в том числе подма- широкий спектр однолет-

внесении в почву, так и по ренника цепкого в течение всего вегета- них злаковых и двудоль-

вегетирующим растениям. ционного периода. ных сорняков, а также

Одна обработка обеспечи- Широкий диапазон сроков применения некоторых многолетних.

вает эффективную защиту (вплоть до появления цветочных буто- Сдерживает «вторую

посевов в течение всего нов). волну» сорняков за счет

вегетационного периода Уничтожает не только надземные части, но и корневую систему многолетних сорняков, включая почки возобновления и корневые отпрыски. Не снижает эффективности даже в неблагоприятных условиях среды продолжительного экранирующего действия

вания, допущенных для экологического контроля и мониторинга в Российской Федерации, к загрязнению водных сред современными гербицидами.

Методы и материалы

В исследовании были испытаны три герби-цидных препарата, применяемых в настоящее время в сельском хозяйстве. Два препарата (на основе имидазолинонов) в мировой сельскохозяйственной практике рекомендованы в системе «чистого поля» (Clearfield system) [13]. Их особенности приведены в табл. 1.

Оценку чувствительности к выбранным препаратам четырех аттестованных методик биотестирования проводили в модельном эксперименте. В природную подземную воду питьевого качества вводились добавки гербицидных препаратов в диапазоне от 1 до 300 ПДК методом последовательного разбавления маточного раствора. Далее проводили биотестирование свежеприготовленных модельных вод, загрязненных гербицидами. Использовали два экспресс-метода: биотест по изменению хемотаксической реакции инфузорий Paramecium caudatum Ehrenberg (1838) [9] и биолюминесцентный тест с использованием препарата «Эколюм» на основе условно непатогенного штамма Escherichia coli Migula (1895) [6]. Для сравнения чувствительности методов по пред-летальным эффектам применили два «дафние-вых» теста: по смертности Ceriodaphnia affinis Lilljeborg (1900) [1] и по смертности и плодовитости Daphnia magna Straus (1820) [2].

Результаты и обсуждение

Низшие ракообразные D. magna — это тест-организм, используемый для биотестирования во всем мире. Метод определения токсичности по гибели дафний можно считать базовым, результаты которого будут ориентиром для установления действующих доз с помощью других биотестов [8]. В соответствии с этим в первую очередь были установлены нелетальные и летальные дозы гербицидов по смертности D. magna. Параллельно определили чувствительность C. affinis к модельным водным растворам тестируемых веществ (табл. 2).

Чувствительность низших ракообразных к тестируемым веществам оказалась достаточно низкой, что характерно для современных гербицидов, а также является положительным фактом для их активного использования в сельском хозяйстве. Полная гибель D. magna была выявлена только в ответ на добавки гербицидов, равные 300 ПДК. Цериодафнии, в силу биологических особенностей, являются тест-организмами, более чувствительными к органическому загрязнению, поэтому летальные эффекты проявились в ответ на меньшие дозы. Несмотря на низкую чувствительность дафний и цериодафний к гербицидам, удалось определить, что их опасность для данных гидробионтов увеличивается в ряду Имазетапир < Клопиралид + пиклорам < Имаза-мокс.

Далее модельные растворы были протестированы с помощью инфузорий и бактериального препарата «Эколюм». Действующие дозы для двух видов рачков оказывали максимальное токсическое действие на микроорганизмы, поэтому для сравнения их чувствительности к гербицид-ному загрязнению водной среды испытывались добавки 1, 10 и 50 ПДК действующих веществ (табл. 3).

В тестируемом диапазоне концентраций для большинства проб наблюдалось закономерное увеличение индексов токсичности в ответ на повышение дозы действующего вещества. Только при испытании растворов с добавками имаза-мокса («Родимич») наблюдали снижение токсичности от 1 к 10 ПДК. Это может быть связано как с нелинейными токсикологическими эффектами [18], так и с временной стимуляцией двигатель-

Таблица2

Результаты определения острого токсического действия гербицидов в биотестах по смертности D. magna и C. affinis

Вариант Доза Смертность ракообразных, %

мг/л Кратность ПДК D. magna C. affinis

Имазетапир («Гольф ВК») 0,5 50 0 25±10

1,5 150 0 100

3 300 100 100

Клопиралид + пиклорам («Актеон») 2 50 0 40±16

6 150 46,6±18,4 100

12 300 100 100

Имазамокс («Родимич») 0,2 50 0 65±26

0,6 150 63,3±25,3 100

1,2 300 100 100

Таблица 3

Ответные реакции P. caudatum и тест-системы «Эколюм» на гербициды

Вариант Доза В биотесте по P. caudatum В биотесте по «Эколюм»

ПДК мг/л Индекс токсичности, у. е. Группа токсичности Индекс токсичности, у. е. Группа токсичности

Имазетапир («Гольф ВК») 1 0,01 0,24±0,02 I 6,5±1,5 I

10 0,1 0,68±0,06 II 8,4±1,6 I

50 0,5 0,94±0,01 III 32,5±0,9 II

Клопиралид + пиклорам («Актеон») 1 0,04 0,52±0,05 II 0 (-56,9±13,7) I

10 0,4 0,60±0,07 II 0 (-23,2±6,0) I

50 2 0,94±0,02 III 41,2±3,1 III

Имазамокс («Родимич») 1 0,004 0,29±0,05 I 0 (-19,9±4,5) I

10 0,04 0,04±0,01 I 0 (-12,7±6,5) I

50 0,2 0,92±0,02 III 20,4±6,5 II

Примечание: обозначение групп токсичности для теста по P. cаudаtum: I — допустимая степень токсичности, II — умеренная степень токсичности, III — высокая степень токсичности; обозначение групп токсичности для биолюминесцентного теста: I — проба нетоксична, II — проба среднетоксична, III — проба сильнотоксична.

ной активности инфузорий при добавке относительно невысокой дозы в 10 ПДК.

В целом инфузории P. caudatum оказались более чувствительными тест-организмами к герби-цидному загрязнению, чем бактерии «Эколюм». Добавки всех веществ, равные 50 ПДК, приводили к угнетению хемотаксиса инфузорий до уровня III группы токсичности (высокая степень токсичности). Аналогичные дозы токсикантов в биотесте по тест-системе «Эколюм» привели к подобной характеристике только в варианте с препаратом, содержащим клопиралид и пикло-рам («Актеон»). Однако условный порог между II и III группами токсичности (Т = 20,0 у. е.) был преодолен в незначительной мере. Также результаты, полученные в биолюминесцентном тесте для вариантов Клопиралид + пиклорам («Актеон») и имазамокс («Родимич») 1 и 10 ПДК, свидетельствуют о стимуляции оцениваемой тест-функции. В тесте с инфузориями для всех анализируемых вариантов наблюдали угнетение ответной реакции организмов.

Отметим, что наблюдались отличия и в степени опасности тестируемых гербицидов для низших ракообразных и микроорганизмов. Для P. caudatum и бактерий тест-системы «Эколюм» справедлив ряд возрастания опасности действующих веществ в препаратах: имазамокс («Роди-

мич») < Имазетапир («Гольф ВК») < Клопиралид + пиклорам («Актеон»).

Дополнительно были установлены хронические токсические эффекты нелетальных доз гербицидов для D. magna (табл. 4).

Воздействие нелетальных доз гербицидных препаратов начало проявляться с момента созревания рачков: большинство модельных проб вызывали задержку появления выводковых камер у дафний, а затем и появление первой молоди. Обычно такое действие веществ приводит впоследствии к отклонению плодовитости от контрольных значений [7]. Эта гипотеза подтвердилась. В конце эксперимента удельная плодовитость на одну подопытную самку была снижена во всех пробах с добавками (p < 0,05). Также была отмечена незначительная гибель взрослых особей на 24 день эксперимента, не превышающая критических 20 % по сравнению с контрольными данными.

Отметим, что в большинстве вариантов хроническое действие доз гербицидов в диапазоне от 1 до 50 ПДК значимо не различается между собой. Это косвенно свидетельствует о том, что обнаруженное воздействие произвели не только добавленные в воду вещества, но и продукты их деструкции, что еще предстоит изучить.

Полученные результаты дополняют научный банк данных о влиянии современных гербицидов

Таблица 4

Влияние гербицидов на тест-функции D. magna

Доза Показатели

Вариант Появление выводковых Появление первой Плодовитость за 24 дня, Смертность** в конце

ПДК мг/л камер,сутки молоди, сутки шт./взрослую самку эксперимента, %

Контроль 0 0 7 9 12,4±1,2 0

Имазетапир («Гольф ВК») 1 0,04 7 10 9,0±1,7* 3,3

10 0,4 8 10 8,1±0,5* 0

50 2 8 11 10,7±1,0 0

Клопиралид + 1 0,004 9 11 6,8±0,1* 3,3

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

пиклорам 10 0,04 9 11 10,3±1,8 6,7

(«Актеон») 50 0,2 9 11 7,1±0,8* 0

Имазамокс («Родимич») 1 0,04 9 11 9,0±0,9* 0

10 0,4 9 11 11,4±2,1 16,7

50 2 9 11 9,3±0,3* 6,7

* Отличия от контрольных значений достоверны (р<0,05); ** погрешность в пределах норматива методики [2].

на организмы различной систематики. В исследовании [10] авторы также пришли к заключению, что действующие на гидробионтов дозы во много раз выше установленных нормативов. Отмечена высокая чувствительность элодеи Elodea canadensis: сублетальное действие имазетапи-ра по замедлению роста боковых и основного побегов проявилось в ответ на концентрацию 10 мг/ дм3 и выше. В отличие от наших данных, авторы работы [10] приводят сведения о хроническом токсическом действии имазетапира для D. magna, начиная с дозы 300 мг/л. Можно предположить, что несогласованность данных вызвана различиями в химическом составе воды для моделирования загрязнения.

За рубежом также ведется поиск гидробионтов, способных сигнализировать о пестицидных, в том числе гербицидных угрозах водным объектам. На примере нильской тиляпии Oreochromis niloticus показана опасность производных пиридина, которые в нашем исследовании представлены смесью клопиралида и пиклорама, для ихтиофауны даже при применении в соответствии с рекомендуемыми нормами [11]. Макрофиты Lemna minor и Azolla caroliniana предлагаются в качестве биоиндикаторов гербицидного загрязнения водных объектов. Ряска L. minor оказалась чувствительнее к атразину, смеси бентазона и имазамокса, кломазону. Действующие дозы для ряски лежали в диапазоне 0,1-118 мг/дм3 для разных веществ [17]. Чувствительность L. minor к имазапиру подтверждается данными биотестирования: в 7-дневном тесте LD50 составила все-

го 1,06 мг/дм3 [15]. Такую эффективность има-запира предлагается использовать для борьбы с водными макрофитами там, где их разрастание способствует эвтрофикации водоема.

Исходя из анализа данных научных источников, большинство исследователей занимаются вопросом риска попадания гербицидов в водные экосистемы. При этом в работе [14] показано, что наземные нецелевые виды (на примере Tripleurospermum inodorum (L.) и Stellaria media (L.) более уязвимы для современных гербицидов по сравнению с водными видами.

Заключение

Полученные в острых и хронических экспериментах результаты подтверждают литературные сведения о том, что несмотря на быстрое разрушение в окружающей среде современных гербицидов их попадание в экосистемы даже на уровне предельно допустимых концентраций будет приводить к деформации почвенных и водных сообществ организмов. В этой ситуации экспериментально полученные нами выводы будут способствовать диагностике специфического загрязнения окружающей среды:

- исследованные гербицидные препараты производных пиридина (клопиралид и пикло-рам) и имидазолиноны (имазетапир и имазамокс) в дозах до 50 ПКД включительно оказывают значимое воздействие в первую очередь на микроорганизмы, используемые в экспресс-биотестах — инфузории и бактерии;

- концентрации 1, 10 и 50 ПДК оказывают негативное действие на рачков D. magna и C. affinis

по показателям хронического воздействия. Для проявления воздействия на низших ракообразных в краткосрочных опытах (96 часов) требуются концентрации свыше 150 ПДК;

- в итоге чувствительность испытанных аттестованных биотестов к современным гербицидам имазетапиру («Гольф ВК»), смеси клопиралида и пиклорама («Актеон») и имазамокса («Родимич») можно представить следующим рядом: биотест по изменению хемотаксиса P. caudatum > биолюминесцентный биотест с бактериальным препаратом «Эколюм» > биотест по гибели C. affinis > > биотест по гибели D. magna.

Литература

1. Акварос (2007). ФР 1.39.2007.03221. Биологические методы контроля. Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из почв, осадков сточных вод, отходов по смертности и изменению плодовитости цериодафний. М.: Акварос, 56 с.

2. Акварос (2007). ФР 1.39.2007.03222. Биологические методы контроля. Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из почв, осадков сточных вод, отходов по смертности и изменению плодовитости дафний. М.: Аква-рос, 51 с.

3. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации (2018). Постановление от 10 мая 2018 г. № 33 «Об утверждении гигиенических нормативов ГН 1.2.3539-18 «Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень)» [online] Доступно по ссылке: http://docs.cntd.ru/document/557532326 [Дата обращения: 26.02.2019].

4. Государственная дума (2017). Федеральный закон «О безопасном обращении с пестицидами и агрохими-катами (с изменениями на 17 апреля 2017 года)» [online] Доступно по ссылке: http://docs.cntd.ru/document/9045962 [Дата обращения: 26.02.2019].

5. Данилов-Данильян, В. И. и Пискулова, Н. А. (ред.) (2015). Устойчивое развитие: новые вызовы М.: Аспект Пресс, 336 с.

6. Министерство природных ресурсов Российской Федерации (2010). ПНД Ф Т 14.1:2:3:4.11-04. Т.16.1:2:3:3.8-04. Методика определения интегральной токсичности поверхностных, в том числе морских, грунтовых, питьевых, сточных вод, водных экстрактов почв, отходов, осадков сточных вод по изменению бактериальной биолюминесценции тест-системой «Эколюм». М.: ФБУ «ФЦАО», 26 с.

7. Олькова, А. С. (2017). Условия культивирования и многообразие тест-функций Daphnia Magna Straus при биотестировании. Вода и экология: проблемы и решения, № 1, сс. 63-82. DOI: 10.23968/2305-3488.2017.19.1.63-82.

8. Олькова, А. С. (2018) Актуальные направления развития методологии биотестирования водных сред. Вода и экология: проблемы и решения, № 2 (74), сс. 40-50. DOI: 10.23968/2305-3488.2018.20.2.40-50.

9. Спектр-М (2015). ФР 1.39.2015.19242. ПНД Ф Т 16.2:2.2-98 Методика определения токсичности проб при-

родных, питьевых, хозяйственно-питьевых, хозяйственно-бытовых сточных, очищенных сточных, сточных, талых, технологических вод экспресс-методом с применением прибора серии «Биотестер». СПб.: ООО «СПЕКТР-М», 21 с.

10. Федорова, Е. А., Зинчук, О. А., Бессчетнова, Л. М. и Сороколетова, Г. В. (2016). Хроническая токсичность има-дазолинонового гербицида имазетапир для пресноводных организмов разных систематических групп. Научный журнал Кубанского государственного аграрного университета, № 123 (9), сс. 90-101.

11. Botelho, R. G., Santos, J. B., Oliveira, T. A., Braga, R. R. and Byrro, E. C. M. (2009). Acute toxicity to herbicides to Oreochromis niloticus. PlantaDaninha, vol. 27 (3), pp. 621-626. DOI: 10.1590/S0100-83582009000300024.

12. Brock, T. C. M., Arts, G. H. P., Maltby, L. and Van den Brink, P. J. (2006). Aquatic risks of pesticides, ecological protection goals, and common aims in European Union legislation. Integrated Environmental Assessment and Management, vol. 2, issue 4, pp. e20-e46. DOI: 002/ ieam.5630020402.

13. Bzour, M. I., Zuki, F. M. and Mispan, M. Sh. (2018). Introduction of imidazolinone herbicide and Clearfield® rice between weedy rice—control efficiency and environmental concerns. Environmental Reviews, vol. 26, No. 2, pp. 181-198. DOI: 10.1139/er-2017-0096.

14. Cedergreen, N., Kudsk, P., Mathiassen, S. K. and Streibig, J. C. (2007). Combination effects of herbicides on plants and algae: do species and test systems matter? Pest Management Science, vol. 63, issue 3, pp. 282-295. DOI: 10.1002/ps.1353.

15. Cruz, C., Silva, A. F., Shiogiri, N. S., Garlich, N. and Pitelli, R. A. (2015). Imazapyr herbicide efficacy on floating macrophytes control and ecotoxicology for non-target organisms. Planta Daninha, vol. 33, No. 1, pp. 103-108. DOI: 10.1590/S0100-83582015000100012.

16. Daam, M. A. and Van den Brink, P. J. (2010). Implications of differences between temperate and tropical freshwater ecosystems for the ecological risk assessment of pesticides. Ecotoxicology, vol. 19, issue 1, pp. 24-37. DOI: 10.1007/s10646-009-0402-6.

17. Della Vechia, J. F., Cruz, C., Silva, A. F., Cerveira Jr., W. R. and Garlich, N. (2016). Macrophyte bioassay applications for monitoring pesticides in the aquatic environment. Planta Daninha, vol. 34, No. 3, pp. 597-603. DOI: 10.1590/S0100-83582016340300021.

18. Erofeeva, E. A. (2014). Hormesis and paradoxical effects of wheat seedling (Triticum aestivum l.) parameters upon exposure to different pollutants in a wide range of doses. Dose-Response, vol. 12, issue 1, pp. 121-135. DOI: 10.2203/dose-response.13-017.Erofeeva.

19. Golombieski, J. I., Sutili, F. J., Salbego, J., Seben, D., Gressler, L. T., da Cunha, J. A., Gressler, L. T., Zanella, R., de Almeida Vaucher, R., Marchesan, E. and Baldisserotto, B. (2016). Imazapyr+imazapic herbicide determines acute toxicity in silver catfish Rhamdia quelen. Ecotoxicology and Environmental Safely, vol. 128, pp. 91-99. DOI: 10.1016/j. ecoenv.2016.02.010.

20. Kasamesiri, P. and Thaimuangphol, W. (2019). Effects of agrochemical residues on aquatic invertebrates in semi-organic rice fields. International Journal of GEOMATE, vol. 16, issue 56, pp. 54-58. DOI: 10.21660/2019.56.4567.

21. Lopez-Vizcaino, R., dos Santos, E. V., Yustres, A., Rodrigo, M. A., Navarro, V. and Martinez-Huitle, C. A. (2019). Calcite buffer effects in electrokinetic remediation of clopyralid-polluted soils. Separation and Purification Technology, vol. 212, pp. 376-387. DOI: 10.1016/j.seppur.2018.11.034.

22. Reck, L., Reimche, G. B. Alves, C. R., Abreu, K. do V., Oliveita, M. A. and de Oliveira Machado, S. L. (2018). Effect of herbicides imazapyr and imazapicon in the phytoplanktonic community of rice paddy fields. Iheringia Serie Botanica, vol. 73, issue 3, pp. 298-307. DOI: 10.21826/2446-8231201873307.

23. Saldivar, R. H. L, Arguello, B. M., Reyes, I. V. and de los Santos Villarreal, G. (2018). Agronanotechnology: a new tool for modern agriculture. Revista de la Facultad de Ciencias Agrarias, vol. 50, issue 2, pp. 395-411.

24. Xie, J., Zhao, L., Liu, K., Guo, F., Gao, L. and Liu, W. (2018). Activity, toxicity, molecular docking, and environmental effects of three imidazolinone herbicides enantiomers. Science of the Total Environment, vol. 622-623, pp. 594-602. DOI: 10.1016/j.scitotenv.2017.11.333.

25. Zhang, Y., Lorsbach, B. A., Castetter, S., Lambert, W. T., Kister, J., Wang, N. X., Klittich, C. J. R., Roth, J. Sparks, T. C. and Loso, M. R. (2018). Physicochemical property guidelines for modern agrochemicals. Pest Management Science, vol. 74, issue 9, pp. 1979-1991. DOI: 10.1002/ps.5037.

References

1. Akvaros (2007). Federal Register FR 1.39.2007.03221. Biological control methods. Methodology for determining the toxicity of water and water extracts from soils, sewage sludge, and waste by mortality and changes in fertility of Ceriodaphnias. Moscow: Akvaros, 56 p.

2. Akvaros (2007). Federal Register FR 1.39.2007.03222. Biological control methods. Methodology for determining the toxicity of water and water extracts from soils, sewage sludge, and waste by mortality and changes in fertility of daphnias. Moscow: Akvaros. 51 p.

3. Chief Public Health Officer of the Russian Federation (2018). Resolution No. 33 dd. May 10, 2018 "On approval of hygienic standards GN 1. 2.3539-18 "Hygienic standards for the content of pesticides in environmental objects (list)". [online] Available at: http://docs.cntd.ru/document/557532326 [Date accessed 26.02.2019].

4. State Duma (2017). Federal Law "Concerning safe handling of pesticides and agrochemicals (as amended on April 17, 2017)". [online] Available at: http://docs.cntd.ru/ document/9045962 [Date accessed 26.02.2019].

5. Danilov-Danilyan, V. I. and Piskulova, N. A. (eds.) (2015). Sustainable development: new challenges. Moscow: Aspect Press, 336 p.

6. Ministry of Mineral Resources of the Russian Federation (2010). Environmental Regulatory Document PND F T 14.1:2:3:4.11-04. T.16.1:2:3:3.8-04. Method for determining the integrated toxicity of surface waters, including marine, ground, drinking, waste waters, water extracts from soils, waste, sewage sludge by changes in bacterial bioluminescence using the Ecolum test-system. Moscow: Federal State-Financed Institution "Federal Center for Analysis and Estimation of Technogenic Impact", 26 p.

7. Olkova, A. S. (2017). The conditions of cultivation and the variety of test functions of Daphnia Magna Straus in bioassay.

Water and Ecology, No. 1, pp. 64-82. DOI: 10.23968/23053488.2017.19.1.63-82.

8. Olkova, A. S. (2018). Current trends in the development of the methodology of bioassay aquatic environments. Water and Ecology, No. 2 (74), pp. 40-50. DOI: 10.23968/23053488.2018.20.2.40-50.

9. Spektr-M (2015). Federal Register FR 1.39.2015.19242. Environmental Regulatory Document PND F T 16.2:2.298. Methodology for determining the toxicity of samples of natural, drinking, domestic and drinking, household waste, treated sewage, waste, thawed, technological water by the express method using the Biotester device. Sainte Petersburg: SPEKTR-M, 21 p.

10. Fedorova, E. A., Zinchuk, O. A., Besschetnova, L. M. and Sorokoletova, G. V. (2016). Chronic toxicity of imidazolinone herbicide called imazethapyr to freshwater organisms of various systematic groups. Scientific Journal of Kuban State Agrarian University, No. 123 (9), pp. 90-101.

11. Botelho, R. G., Santos, J. B., Oliveira, T. A., Braga, R. R. and Byrro, E. C. M. (2009). Acute toxicity to herbicides to Oreochromis niloticus. Planta Daninha. vol. 27 (3), pp. 621-626. DOI: 10.1590/S0100-83582009000300024.

12. Brock, T. C. M., Arts, G. H. P., Maltby, L. and Van den Brink, P. J. (2006). Aquatic risks of pesticides, ecological protection goals, and common aims in European Union legislation. Integrated Environmental Assessment and Management, vol. 2, issue 4, pp. e20-e46. DOI: 002/ ieam.5630020402.

13. Bzour, M. I., Zuki, F. M. and Mispan, M. Sh. (2018). Introduction of imidazolinone herbicide and Clearfield® rice between weedy rice—control efficiency and environmental concerns. Environmental Reviews, vol. 26, No. 2, pp. 181-198. DOI: 10.1139/er-2017-0096.

14. Cedergreen, N., Kudsk, P., Mathiassen, S. K. and Streibig, J. C. (2007). Combination effects of herbicides on plants and algae: do species and test systems matter? Pest Management Science, vol. 63, issue 3, pp. 282-295. DOI: 10.1002/ps.1353.

15. Cruz, C., Silva, A. F., Shiogiri, N. S., Garlich, N. and Pitelli, R. A. (2015). Imazapyr herbicide efficacy on floating macrophytes control and ecotoxicology for non-target organisms. Planta Daninha, vol. 33, No. 1, pp. 103-108. DOI: 10.1590/S0100-83582015000100012.

16. Daam, M. A. and Van den Brink, P. J. (2010). Implications of differences between temperate and tropical freshwater ecosystems for the ecological risk assessment of pesticides. Ecotoxicology, vol. 19, issue 1, pp. 24-37. DOI: 10.1007/s10646-009-0402-6.

17. Della Vechia, J. F., Cruz, C., Silva, A. F., Cerveira Jr., W. R. and Garlich, N. (2016). Macrophyte bioassay applications for monitoring pesticides in the aquatic environment. Planta Daninha, vol. 34, No. 3, pp. 597-603. DOI: 10.1590/S0100-83582016340300021.

18. Erofeeva, E. A. (2014). Hormesis and paradoxical effects of wheat seedling (Triticum aestivum l.) parameters upon exposure to different pollutants in a wide range of doses. Dose-Response, vol. 12, issue 1, pp. 121-135. DOI: 10.2203/dose-response.13-017.Erofeeva.

19. Golombieski, J. I., Sutili, F. J., Salbego, J., Seben, D., Gressler, L. T., da Cunha, J. A., Gressler, L. T., Zanella, R., de Almeida Vaucher, R., Marchesan, E. and Baldisserotto,

B. (2016). Imazapyr+imazapic herbicide determines acute toxicity in silver catfish Rhamdia quelen. Ecotoxicology and Environmental Safety, V. 128, pp. 91-99. DOI: 10.1016/j. ecoenv.2016.02.010.

20. Kasamesiri, P. and Thaimuangphol, W. (2019). Effects of agrochemical residues on aquatic invertebrates in semi-organic rice fields. International Journal of GEOMATE, vol. 16, issue 56, pp. 54-58. DOI: 10.21660/2019.56.4567.

21. Lôpez-Vizcalno, R., dos Santos, E. V., Yustres, A., Rodrigo, M. A., Navarro, V. and Martinez-Huitle, C. A. (2019). Calcite buffer effects in electrokinetic remediation of clopyralid-polluted soils. Separation and Purification Technology, vol. 212, pp. 376-387. DOI: 10.1016/j.seppur.2018.11.034.

22. Reck, L., Reimche, G. B. Alves, C. R., Abreu, K. do V., Oliveita, M. A. and de Oliveira Machado, S. L. (2018). Effect of herbicides imazapyr and imazapicon in the phytoplanktonic community of rice paddy fields. Iheringia, Serie Botanica, vol. 73, issue 3, pp. 298-307. DOI: 10.21826/2446-8231201873307.

23. Saldivar, R. H. L, Arguello, B. M., Reyes, I. V. and de los Santos Villarreal, G. (2018). Agronanotechnology: a new tool for modern agriculture. Revista de la Facultad de Ciencias Agrarias, vol. 50, issue 2, pp. 395-411.

24. Xie, J., Zhao, L., Liu, K., Guo, F., Gao, L. and Liu, W.. (2018). Activity, toxicity, molecular docking, and environmental effects of three imidazolinone herbicides enantiomers. Science of the Total Environment, vol. 622-623, pp. 594-602. DOI: 10.1016/j.scitotenv.2017.11.333.

25. Zhang, Y., Lorsbach, B. A., Castetter, S., Lambert, W. T., Kister, J., Wang, N. X., Klittich, C. J. R., Roth, J. Sparks, T. C. and Loso, M. R. (2018). Physicochemical property guidelines for modern agrochemicals. Pest Management Science, vol. 74, issue 9, pp. 1979-1991. DOI: 10.1002/ps.5037.

Авторы

Олькова Анна Сергеевна, канд. техн. наук, доцент Вятский государственный университет E-mail: morgan-abend@mail.ru

Березин Григорий Иванович, канд. биол. наук, доцент Вятский государственный университет E-mail: grigoory1987@gmail.com

Authors

Anna Sergeevna Olkova, Dr. of Engineering, Associate Professor

Vyatka State University E-mail: morgan-abend@mail.ru

Grigoriy Ivanovich Berezin, Dr. of Biological Sciences, Associate Professor

Vyatka State University E-mail: grigoory1987@gmail.com

Подписано к печати 7.06.2019. Формат 60 * 9078. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 15,0. Тираж 1000 экз. Заказ 83. «С» 33. Отпечатано на МФУ 198095, Санкт-Петербург, ул. Розенштейна, д. 32, лит. А

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.