CC BY
144
вого желудочка, при этом позитивный эффект милдроната сохранялся спустя 2 месяца после отмены препарата.
На основании проведенного исследования можно сделать следующие выводы.
Использование милдроната в сочетании с традиционной гипотензивной терапией ингибитором ангиотензинпревращающего фермента эналаприлом способствует нормализации эндотелиальной функции, более эффективной коррекции суточного профиля АД, улучшает морфофункциональное состояние левого желудочка, что свидетельствуют о перспективности использования милдроната в комплексном лечении гипертонической болезни.
ЛИТЕРАТУРА
1. Воеводина Е.С., МельникМ.В., Шилов А.М. Комплексные антиоксиданты (каротино) в практике лечения сердечно-сосудистых заболеваний. - Русский медицинский журнал. -2007. - № 22. - С. 1609-1613.
2. ГлезерМ.Г. Комбинированная терапия - современная стратегия лечения пациентов с артериальной гипертонией // Русский медицинский журнал. - 2008. - № 11. - С. 1579-1586.
3. Голиков А.П., Голиков П.П., Давыдов Б.В. и др. Влияние мексидола на состояние окислительного стресса у больных гипертонической болезнью, осложненной гипертоническим кризом по церебральному варианту // Кардиология. - 2002. - № 3. - С. 25-29.
4. Голиков А.П., Полумисков В.Ю., Бойцов С.А. и др. Антиоксиданты в терапии острого инфаркта миокарда и гипертонического криза // ЦЭМПИНФОРМ. - 2002. - Т. 54, № 6. -С.14-23.
5. Голиков А.П., Бойцов С.А., Михин В.П., Полу-мисков В.Ю. Свободнорадикальное окисление
и сердечно-сосудистая патология: коррекция антиоксидантами // Леч. врач. - 2003. - № 4. -С.70-74.
6. Голиков А.П., Лукьянов М.М., Рябинин В.А. и др. Мексикор в комплексном лечении и профилактике кризов у больных гипертонической болезнью // Клинические исследования лекарственных средств в России. - 2003. - № 3-4. -С.56-59.
7. Калвиньш И.Я. Милдронат и триметазидин: сходство и различие в их действии. - Рига: ПАО "Grindex", 2001. - 5 с.
8. Карпов Р.С., Кошельская О.А., Врублевский А.В. и др. Клиническая эффективность и безопасность милдроната при лечении хронической сердечной недостаточности у больных ишемической болезнью сердца // Кардиология. -2000. - № 6. - С. 69-74.
9. Профилактика, диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские рекомендации (второй пересмотр) // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2004. - Приложение. - С. 1-19.
10. Сисецкий А.П., Артюх В.П., Сахарчук И.И.,
Стародуб Н.Ф. Особенности действия
милдроната (дигидрат 3-(2,2,2-
триметилгидра-
зиний) пропионат) на некоторые параметры красной крови при сердечной недостаточности // Эксперим. и клин. фармакол. - 1992. -Т. 55, № 3. - С. 20-21.
11. Chobanian A.V., Bakris G.L., Black H.R. et al. Seventh report of the joint national committee on prevention, detection, evaluation, and treatment of high blood pressure // Hypertension. - 2003. -N 42. - P. 1206-1252.
12. The Task Force for the management of arterial hypertension of the European Society of Hypertension and of the European Society of Cardiology. 2007 Guidelines for the management of arterial hypertension // J Hypertens. - 2007. - N 25. - P.1105-1187.
УДК 615.214.454.2
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ВЭЖХ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИННАРИЗИНА И КИСЛОТЫ ЯНТАРНОЙ ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ
© Воробьев А.Н., Петров А.Ю.
Кафедра технологии лекарств Пятигорской государственной фармацевтической академии,
Пятигорск, Ставропольский край
E-mail: alexvorobyev@yandex.ru
Была предложена методика для количественного определения циннаризина и кислоты янтарной при совместном присутствии методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Для разработанной методики была проведена валидация. Разработанная методика анализа характеризуется удовлетворительными линейностью, сходимостью, правильностью и может быть использована для совместного количественного определения.
Ключевые слова: ВЭЖХ анализ, циннаризин, янтарная кислота.
ASSAY OF CINNARIZINE AND SUCCINIC ACID IN A COMBINED MIXTURE BY HPLC METHOD
Vorobyev A.N., Petrov A. Yu.
Drugs Technology Department of the Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy,
Pyatigorsk, Stavropol Region
The HPLC method for assay of Cinnarizine and succinic acid in a combined mixture was developed. Validation of analytical procedure was carried out and this method is characterized by satisfactory parameters of linearity, precision and accuracy. Thereby HPLC method can be used for assay of Cinnarizine and succinic acid in a combined mixture.
Keywords: the HPLC method, Cinnarizine, succinic acid.
Использование комбинированных препаратов во внебольничной практике при относительно лёгких формах нарушений мозгового кровообращения широко в современной медицине [1, 2, 3]. Ранее показана целесообразность комбинированного применения циннаризина и янтарной кислоты. Для удобства такой терапии имеет смысл создавать лекарственные средства, содержащие активные компоненты в одной лекарственной форме. Однако методика количественного определения этих входящих компонентов ранее не была известна.
Поэтому целью нашей работы была разработка методики количественного определения циннаризина и янтарной кислоты при совместном их присутствии в одной лекарственной форме.
Среди современных методов анализа, используемых для количественного определения циннаризина или янтарной кислоты, наиболее удобным является метод ВЭЖХ. Поэтому выбор методики количественного определения циннаризина и янтарной кисло-
ты при совместном их присутствии основывался на этом методе.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектами исследования являлись модельные смеси, полученные путем тщательного растирания кислоты янтарной и цин-наризина в соотношении 4:1.
Исследования проводили на жидкостном хроматографе высокого давления Agilent 1100, оснащенном колонкой Zorbax SB-Aq размером 150 х 4,6 мм (размер частиц сорбента 3,5 мкм). Длина волны детектирования составляла 210 нм, температура анализа 400С. Скорость потока подвижной фазы равнялась 1 мл/мин.
Первым этапом исследований явился выбор оптимальных условий проведения хроматографического анализа. С учетом кислотноосновных свойств циннаризина и кислоты янтарной в качестве подвижной фазы использовали смеси 0,272% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного рН 2,0 с ацето-
Условия хроматографического анализа
Таблица 1
Время, мин Подвижная фаза А, % Подвижная фаза Б, %
0 100 0
8 100 0
18 0 100
25 0 100
Таблица 2
Результаты хроматографического анализа модельных смесей
Концентрация кислоты янтарной, мг/мл Площадь пика кислоты янтарной, мВ-с Концентрация Площадь пика
циннаризина, мг/мл циннаризина, мВ-с
0,08 64,49 0,02 2898,49
0,16 128,24 0,04 5736,191
0,24 191,98 0,06 8573,89
0,32 255,73 0,08 11411,59
0,40 319,47 0,10 14249,29
0,48 383,22 0,12 17086,99
нитрилом (100:1, подвижная фаза А) и 0,544% раствора калия фосфорнокислого од-нозамещенного (рН 2,0) с ацетонитрилом (1:1, подвижная фаза Б). В качестве растворителя для навески модельной смеси служил метанол. Параллельно осуществляли инжек-цию "холостой" пробы, содержащей 10% метанола в подвижной фазе А. Методом пробного градиента найдены оптимальные условия проведения хроматографического анализа (табл. 1).
Проведение хроматографического анализа в указанных условиях адекватно отвечало задаче достоверного разделения компонентов модельной смеси. Времена удерживания кислоты янтарной и циннаризина составляли соответственно 20,9±0,7 и 2,9±0,2 мин. Удовлетворительными являлись и другие показатели анализа: эффективность составляла не менее 5000 теоретических тарелок, коэффициент асимметрии находился в пределах от 1,3 до
1,5.
В выбранных условиях проводили хроматографирование изучаемых модельных смесей при 6 уровнях концентраций. Содержание кислоты янтарной варьировало в пределах от 0,08 до 0,48 мг/мл, концентрация циннаризи-на находилась в пределах 0,02 - 0,12 мг/мл. Результаты представлены в табл. 2.
Полученные данные подвергали линейному регрессионному анализу методом наименьших квадратов. В результате установлено, что графики зависимости площади пика от концентрации кислоты янтарной и циннаризина носят линейный характер (коэффициенты корреляции равны соответственно 0,9999 и 0,9993). Это свидетельствует о пригодности методики для аналитических целей.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Проведенные исследования позволили обосновать методику количественного определения циннаризина и кислоты янтарной при совместном присутствии. Навеску 0,081 препарата, соответствующую 20 мг циннари-зина и 80 мг кислоты янтарной, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 40 мл спирта метилового и растворяют на ультразвуковой бане в течение 5 мин. Доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора подвижной фазой А до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с раз-
.'Л'Н Дл. *в н.і ■ Е:.НP_D FЕЕРU1 I.TUffi.I.D-
Рис. Хроматограмма циннаризина и янтарной кислоты при совместном присутствии.
Таблица 3
Результаты количественного определения кислоты янтарной и циннаризина в модельных смесях
Взято на анализ МС, г Площадь пика кислоты янтарной, мВ-с Площадь пика циннаризина, мВ-с Найдено кислоты янтарной, % Найдено циннаризина, % Метрологические характеристики
0,10140 129,8 5864,2 102,86 96,52 Циннаризин: *=98,69% S = 2,2411 S2 = 5,0226 5г = 0,9149 ^ = ±2,38% 98,69±2,35% Кислота янтарная: *=99,43% S = 2,43298 S2 = 5,91939 % - 0,99326 ^ = ±2,57% 99,43±2,55%
0,09850 124,7 5843,5 101,73 99,09
0,11200 137,8 6712,6 98,85 95,70
0,10985 133,5 5541,6 97,62 100,18
0,09355 115,2 5912,3 99,02 98,98
0,10245 123,0 6235,8 96,47 101,69
Примечание: навески РСО кислоты янтарной и циннаризина составляли соответственно 0,04000 г и 0,16000 г; площадь пиков РСО кислоты янтарной и циннаризина равнялись соответственно 124,6 и 5956,3 мВх (среднее из трех параллельных определений).
мером пор 0,2-0,45 мкм, отбрасывая первые порции фильтрата.
В жидкостный хроматограф после уравновешивания колонки последовательно вводят по 20 мкл раствора холостой пробы, испытуемого раствора и раствора рабочего стандартного образца (РСО) и записывают их хроматограммы.
Раствор РСО готовят следующим образом: около 0,16 г (точная навеска) кислоты
янтарной и около 0,04 г (точная навеска) циннаризина, отвечающих требованиям действующих ФС, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 80 мл спирта метилового и растворяют на ультразвуковой бане в течение 5 мин. Объём раствора доводят тем же растворителем до метки, перемешивают. Помещают 5 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора подвижной
