CC BY
24
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛАЗЕРОТЕРАПИИ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ХЛАМИДИЙНОГО ЦЕРВИЦИТА
ИМ Долгушин, О.А. Гизингер*, О.Л. Колесников*
ЧГМА, г. Челябинск ГКВД*, г. Челябинск
Исследован положительный клинический эффект местного использования низкоинтенсивного лазера в терапии хламидийных цервицитов, который сопровождается достоверными положительными изменениями иммунологических показателей цервикального секрета (концентрация изучаемых ци-токинов в цервикальном секрете, количество и функции нейтрофилов).
Хламидиоз - одно из наиболее распространенных заболеваний, передающихся половым путем. Его частым проявлением у женщин является хламидийный цервицит [1, 5]. Большинство специалистов полагает, что в настоящее время им страдают до 70 % женщин, инфицированных хла-мидиями [12]. Учитывая развитие заболевания в репродуктивном возрасте, хроническое течение и возможность развития осложнений, проблема его лечения является чрезвычайно актуальной.
За последние десятилетия появилось много данных о биологии хламидийной инфекции, разработаны новые методы терапии, однако данное направление медицинской деятельности по-прежнему имеет множество нерешённых проблем: недостаточная эффективность антибактериальных препаратов, снижение колонизационной резистентности репродуктивного тракта женщин, инфицированных С. trachomatis [7].
Исследованиями последних лет доказано, что эффективность лечения хламидиоза во многом зависят от состояния местной противоинфекцион-ной защиты репродуктивного тракта женщин [8, 19]. Установлено, что течение хламидийного цервицита сопровождается снижением неспецифической резистентности организма. Вследствие этого изучение механизмов местной противоин-фекционной защиты имеет важное значение для лечения воспалительных заболеваний половой системы женщин [13].
Традиционно используемые при этом заболевании методы иммунокорекции нередко недостаточно эффективны: наблюдаются случаи неудач терапии, непереносимости лекарственных средств, побочных действий препаратов [2, 3, 21]. Эти обстоятельства требуют поиска новых способов лечебного воздействия на организм больных, как на системном, так и на местном уровнях. Одним из перспективных направлений в этой области явилось местное применение иммунокоррегирующих средств, одним из которых может являться низкоинтенсивный лазер (НИЛИ). Его высокая терапевтическая эффективность уже известна [4, 11, 14]. Согласно исследованиям последних лет показано [8, 11], что НИЛИ оказывает комплексное воздей-
ствие на все составляющие иммунопатологического процесса, как на локальном, так и на местном уровнях [13, 18]. Но, несмотря на большое число теоретических, экспериментальных и клинических работ, его воздействие на механизмы антимикробной резистентности половой системы практически не изучены.
Для комплексной терапии больных с хла-мидийными цервицитами нами был использован лазер низкой интенсивности, генерируемы! аппаратом «УРАЛ-ИМ». Применялся непрерывный режим излучения, длина волны 0,85 мкм, частота излучения лазера - 150 Гц, мощность лазерного излучения 30 мВт. Лечение проводили с помощью полостной насадки, на которую предварительно надевался презерватив, длительность облучения цервикального канала составила 5 мин. Курс лечения составил 10 процедур [10]. Базисный курс лечения проводился согласно рекомендациям, изложенным в методических материалах по диагностике и лечению наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путём [16].
Цель работы
Цель работы заключалась в проверке клинико-иммунологической эффективности лечения хламидийного цервицита комплексным методом с использованием лазера низкой интенсивности.
Материалы и методы
Обследовано 184 женщины с хламидий-ным цервицитом. Контрольную группу составили 50 здоровых женщин. Возраст обследованных колебался от 18 до 36 лет, 80 % женщин были в возрасте до 27 лет.
Критериями включения в группу обследования было наличие хламидийного цервицита, у 29,9 %, кроме того, диагностирован эндометрит и/или сальпингоофорит. Учитывая, что на состояние иммунитета оказывает существенное влияние любой патологический процесс [24], из числа обследованных были исключены женщины с экстраге-нитальной патологией. На момент обследования у всех изучаемых больных была клинико-
лабораторная ремиссия заболеваний верхнего отдела гениталий.
Диагноз генитального хламидиоза ставился на основании выявления возбудителей в цервикальном канале методами прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) и полимеразной цепной реакции (ГЩР).
Больные одной группы (84 женщины) получали антибактериальную терапию по общепринятым схемам лечения. Пациенткам другой группы (100 женщин) кроме аналогичного лечения в комплекс лечебных мероприятий был включён лазер низкой интенсивности. Контрольной группой служили 50 здоровых женщин.
Материалом для исследования местного иммунитета служила цервикальная слизь, так как шейка матки, по данным многих авторов [9,20, 21, 22], служит местом наибольшей иммунологической активности репродуктивного тракта женщин и наиболее частым местом локализации хлами-дийной инфекции. В цервикальном секрете исследовался клеточный состав, было определено число нейтрофилов, мононуклеаров, процент жизнеспособных клеток. Функциональный статус нейтрофилов секрета изучался по содержанию лизосом, на основании спонтанной и индуцироаванной латексом НСТ-восстанавливающей способности, фагоцитарной активности [15,17].
Система цитокинов и комплемента была изучена по содержанию уровней интерлейкинов (ИЛ-1а, ИЛ-1)3, ФНО-а, ИЛ-8) и ИФН-7 в цервикальной слизи иммуноферментным методом. Для этой цели использовали моноклональные антитела, полученные из ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург).
Цифровой материал обрабатывался методом вариационной статистики с помощью пакета прикладных программ «Statistica for Windows».
Результаты и обсуждение
В группе больных, в комплекс лечебных мероприятий которым был включён лазер низкой интенсивности, клиническое выздоровление и полная эрадикация хламидий наступила у 98,1 % женщин, тогда как у пациенток, пролеченных по базисной схеме, клиническое выздоровление наступило в 91 % случаев. Положительные клинические результаты у больных, получавших лазеротерапию по сравнению с теми, кто получал базисную терапию, были достоверными.
Оценка иммунного статуса пациенток, проведённая после комплексного лечения с использованием НИЛИ, показала отчётливую тенденцию к нормализации показателей местного иммунитета репродуктивного тракта женщин.
Так, в цервикальном секрете больных после лечения НИЛИ заметно уменьшилось общее число лейкоцитов. После лечения по базисной схеме также отмечено достоверное уменьшение, однако степень нормализации содержания лейкоцитов в цервикальном секрете была менее выраженной.
После курса лазеротерапии существенно уменьшилось число жизнеспособных лейкоцитов как по сравнению с исходным уровнем, так и с показателями пациенток, пролеченных по базисной схеме. После лечения по базисной схеме также отмечено снижение количества жизнеспособных лейкоцитов, однако такая динамика была не столь выраженной.
Важным индикатором воспалительного процесса репродуктивного тракта является содержание нейтрофилов в биологических жидкостях. В цервикальном секрете здоровых женщин оно невелико, хотя и сопоставимо с их содержанием в крови [22], однако с появлением воспалительного процесса увеличивается. Так у больных с хламидийным цер-вицитом нейтрофилы составили 95,5 % общего числа клеток. После лечения с применением лазера низкой интенсивности их количество достигало 98,1 %, после лечения по базисной схеме 99,2 % общего числа клеток. Мононуклеарные лейкоциты, составляющие 4,5 % у больных с хламидийными цервицитами уменьшались как после терапии с использованием лазера низкой интенсивности, так и при лечении по базисной схеме. Количество лейкоцитов в цервикальной слизи и данные о жизнеспособности лейкоцитов могут служить показателем наличия воспалительного процесса в больных с хламидийным цервицитом и быть использованы для оценки эффективности проводимой терапии (табл. 1).
Поскольку лейкоциты цервикальной слизи представлены, в основном, нейтрофилами, которые играют, по мнению многих авторов, важную роль в защите репродуктивного тракта от инфекции, нами была подробно изучена их функциональная активность [13,20,21].
При изучении фагоцитарной активности нейтрофилов цервикального секрета по их способности поглощать микросферы латекса было установлено, что у больных с хламидийным цервицитом активность и интенсивность фагоцитоза были значительно снижены и статистически достоверно (Р < 0,005) отличались от результатов здоровых женщин.
После проведённой терапии с использованием лазера низкой интенсивности отмечена положительная динамика и восстановление этих показателей, в то время как после лечения по базисной схеме, хотя и наблюдалась тенденция к улучшению, она не была такой значительной.
Нами была исследована лизосомальная активность нейтрофилов цервикального секрета у здоровых женщин и женщин с хламидийным цервицитом. По результатам проведённого исследования выявилось снижение этого показателя у женщин с хламидийным цервицитом (Р < 0,005). Иммунологический эффект воздействия НИЛИ по сравнению с традиционными методами лечения заключается в резком стремлении к увеличению активности лизосом в цервикальном секрете.
Таблица 1
Иммунологические показатели цервикального секрета у больных с хламидийным цервицитом до и после лечения (М + т)
Показатели Здоровые, п = 50 Больные с хламидийным цервицитом Достоверность различий, Р< 0,005
До лечения, п= 184 После лечения лазеротерапия п= 100 После лечения базисная терапия п = 84
1 2 3 4
Лейкоциты в 1 л секрета 109 7,06 ±0,68 7,50 ±0,71 7,10 ±0,91 7,30 ± 1,10 1-2,4; 2-3,4; 3-4
Жизнеспособные лейкоциты, % 62,09 ± 1,35 68,20 ± 1,51 61,45 ± 1,23 63,69 ± 1,78 1-2,4; 2-3,4; 3^
Нейтрофилы, % 93,20 ± 1,20 95,50 ±0,96 98,50 ± 1,11 99,20 ±0,77 1-2,4; 2-3,4
Мононуклеары, % 6,80 ±0,91 4,50 ±0,77 1,50 ±0,32 0,80 ±0,12 1-2,4; 2-3,4
Активность лизосом, % 25,17 ± 0,95 20,19 ±1,73 29,90 ± 1,23 21,19 ± 1,52 1-2,4; 2-3,4; 3-4
НСТ-спонтанная, % 29,83 ± 0,97 45,61 ± 0,95 50,91 ±0,95 35,61 ± 0,95 1-2,4; 2-3,4; 3-4
НСТ-спонтанная, уел. ед. 0,35 ± 0,01 0,65 ± 0,02 0,73 ± 0,06 0,59 ±0,03 1-2,4; 2-3,4; 3-4
НСТ-индуцированная, % 57,11 ±0,82 60,39 ±0,97 89,32 ± 0,27 55,30 ±0,90 1-2,4; 2-3,4; 3-4
НСТ-индуцированная, усл.ед. 0,69 ±0,02 0,83 ±0,01 0,99 ±0,11 0,63 ± 0,002 1-2,4; 2-3,4; 3-4
ФРН, % 1,91 ± 0,04 1,38 ±0,22 1,78 ±0,15 1,57 ±0,11 1-2,4; 2-3*4; 3-4
Акивность фагоцитоза 55,37 ± 1,02 45,65 ± 0,77 55,21 ± 1,16 47,63 ± 0,90 1-2,4; 2-3; 3-4
Р1-2,2-3,3-4- вероятность ошибки рассчитана между соответствующими группами.
При анализе данных, отражающих спонтанную НСТ-восстанавливающую способность ней-трофилов у цервикального секрета, было отмечено, что у больных с хламидийным цервицитом в сравнении со здоровыми имеет место увеличение таких клеток.
Исследование НСТ-реакции нейтрофилов слизи на добавление частиц латекса не выявило нарушений способности этих клеток к восстановлению НСТ у здоровых. Одновременно мы изучали действие лазерного излучения на активность полиморфноядерных лейкоцитов цервикального секрета. Одним из самых ранних и универсальных признаков активации фагоцитирующих клеток является «респираторный взрыв», который оценивался нами с помощью теста на восстановление НСТ. Лазерное облучение нейтрофильных лейкоцитов in vitro, приводило к значительному повышению НСТ-теста. Этот показатель нарастает за счет увеличения как количества гранул восстановленного фор-мазана в цитоплазме клеток, в результате чего повышается процент нейтрофилов, полностью заполненных гранулами, так и общего числа фар-мазанпозитивных клеток.
При анализе данных, отражающих спонтанную НСТ-восстанавливающую способность нейтрофилов у цервикального секрета, было отмечено, что у больных с хламидийным цервицитом в
сравнении со здоровыми имеет место увеличение таких клеток.
Исследование НСТ-реакции нейтрофилов слизи на добавление частиц латекса не выявило нарушений способности этих клеток к восстановлению НСТ у здоровых. Одновременно мы изучали действие лазерного излучения на активность полиморфноядерных лейкоцитов цервикального секрета. Одним из самых ранних и универсальных признаков активации фагоцитирующих клеток является «респираторный взрыв», который оценивался нами с помощью теста на восстановление НСТ. Лазерное облучение нейтрофильных лейкоцитов in vitro, приводило к значительному повышению НСТ-теста. Этот показатель нарастает за счет увеличения как количества гранул восстановленного формазана в цитоплазме клеток, в результате чего повышается процент нейтрофилов, полностью заполненных гранулами, так и общего числа фармазанпозитив-ных клеток.
Можно предположить, что это связано со стимуляцией локализованных в гранулах цитоплазмы ферментов гексозомонофосфатного шунта, в частности NADPH-оксидазы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы или иных энзимов, отвечающих за редукцию нитросинего тетразолия. Кроме того, это обстоятельство может свидетельствовать и об изменении функциональной активности
мембранного аппарата фагоцитов под действием низкоинтенсивного лазера [9,14,23,25].
Функциональный резерв нейтрофилов инфицированных женщин был значительно ниже, чем у здоровых женщин. Восстановление резерва нейтрофилов в группе женщин, пролеченных без использования лазера происходила значительно медленнее. Полной нормализации функции клеток к моменту окончания лечения в обследуемой группе женщин не наступало.
Данные клинико-иммунологического наблюдения за больными с хламидийным цервицитом свидетельствуют о совпадении клинического улучшения течения заболевания с нормализацией иммунологических показателей. По нашим предположениям это связано с тем, что по мере освобождения организма от патогена остаётся больше возможностей для активации системы местного иммунитета репродуктивного тракта.
Мы проанализировали влияние лазеротерапии на состояние системы цитокинов у женщин с хла-
В результате проведенного лечения женщин с хламидийным цервицитом с использованием НИЛИ концентрации вышеперечисленных цитокинов не отличались от показателей здоровых доноров, в то время как после лечения по базисной методике эти показатели имели те же величины, что и до начала лечения.
В целом влияние низкоинтенсивного лазера на состояние факторов местного иммунитета заключалось в иммунокорригирующем воздействии на клеточные элементы, участвующие в фагоцитозе, воспалении и регенерации. Показано, что применение низкоинтенсивного лазера усиливает защитные реакции в очаге поражения за счёт активации функций нейтрофильных гранулоцитов и индуцирует синтез провоспалительных цитокинов клетками воспалительного очага.
Выводы
1. Использование низкоинтенсивного лазера в комплексной терапии хламидийного цервицита повышает эффективность лечения.
мидийным цервицитом (табл. 2). При анализе результатов исследования пациенток до лечения было выявлено, что из изучаемых медиаторов воспаления в цервикальной слизи увеличивалось содержание ИЛ-8, концентрация ИЛ-1а, ИЛ-1/3, ФНО-а, ИФН-7 напротив оставалась достоверно сниженной, по отношению к показателям здоровых женщин. У женщин с хламидийным цервицитом в процессе терапии с использованием НИЛИ заметно возрастал уровень провоспалительных цитокинов в слизи, а к окончанию лечения соответствовал показателям здоровых женщин. Аналогичные изменения были отмечены нами при анализе содержания в слизи ИФН-7 и динамики этого интерферона в процессе лечения с использованием НИЛИ. Эти цитокины являются медиаторами местной воспалительной реакции и острофазового ответа на уровне как всего организма в целом, так и репродуктивного тракта в частности. Они, стимулируя целый комплекс защитных реакций, играют роль регуляторных компонентов иммунной системы [6,22].
2. Положительный клинический эффект использования низкоинтенсивного лазера в терапии больных с хламидийным цервицитами сопровождается достоверными положительными изменениями иммунологических показателей цервикального секрета: концентрации изучаемых цитокинов в цервикальном секрете вернулись к нормальным значениям, восстановились количество и функции нейтрофилов.
Литература
1. Антрская АС. Проблемы хронической (персистирующей) хламидийной инфекции // Акушерство и гинекология. -1999. -№3. -С. 8-10.
2. Анчупане И.С., Андерсоне Д.П., Мил-тинъш А.П. Патогенетическое обоснование корригирующей терапии больных хламидийно-трихомонадной инфекцией // Всесоюзный 9-й съезд дерматовенерологов. - М., 1991. - С. 6-7.
3. Бартенева Н.С. Вопросы иммунитета при хламидийных инфекциях // Хламидийные инфекции: Сб. науч. тр. — М., 1986. - С. 14-20.
Таблица 2
Уровни цитокинов цервикального секрета у больных с хламидийным цервицитом до и после лечения (М ± т)
Показатели Здоровые, п = 50 Больные с хламидийным цервицитом Достоверность различий, Р< 0,005
До лечения, п= 184 После лечения лазеротерапия п = 100 После лечения базисная терапия п = 84
1 2 3 4
ИЛ-1 а, нг/мл 3,32 ±0,30 2,37 ±0,05 3,1 ± 0,91 2,57 ± 0,04 1-4; 2-3,4; 3-4
ИЛ-1 /8, нг/мл 2,11 ±0,35 1,26 ±0,08 2,05 ± 0,03 1,37 ±0,03 1-4; 2-3,4; 3^1
ФНО-а, нг/мл 2,87 ±0,56 2,47 ±0,24 2,95 ±0,11 2,56 ±0,18 1-4; 2-3,4
ИЛ-8, нг/мл 0,45 ±0,12 1,01 ± 0,09 0,50 ±0,22 0,83 ± 0,03 1-4; 2-3,4
ИФН-7, нг/мл 0,032 ±0,002 0,018 ± 0,007 0,028 ± 0,002 0,020 ±0,006 1-4; 2-3
Р1-2,2-з, 3-4- вероятность ошибки рассчитана между соответствующими группами
4. Бутин В.А., Москвин С.В. Низкоинтенсивные лазеры в терапии различных заболеваний. -М., 2001.-216 с.
5. Бурова А.А., Абдуллаева С. А., Торганова КН. Основные свойства возбудителя хламидиоза и его роль в развитии инфекции урогенитального тракта // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -1999. -№4.—С. 107.
6. Василенко А.М., Захарова Л.А. Цитокины в сочетанной регуляции боли и гшмунитета // Успехи соврем, биологии. — 2000. -№ 5.- С. 11—17.
7. Герасимова Н.М. Состояние универсальных защитных и регуляторных систем организма женщин, больных урогенитальным хламидиозом, и роль их нарушений в патогенезе постхламидиозных осложнений: Автореф. дис. ... д-ра биол. наук. — М.,
1997. - 41 с.
8. Гомберг М.А., Соловьев А.М., Черноусое А.Д. Обоснование иммунотерапии при лечении рецидивирующего урогенитального хламидиоза // Инфекции, передаваемые половым путем. — 2000. -№2. -С. 30-33.
9. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз. - Екатеринбург, 2001. - 258 с.
10. Ионин А.П. Методики лазерной терапии для красных и инфракрасных лазеров, работающих в непрерывном и импульсном режимах излучения // Методические материалы УГМАДО. — Челябинск, 1995. — 80 с.
11. Каплан М.А., Жаворонков Л.П., Криво-шеев Я.В. Биологические эффекты низкоинтенсивного лазерного излучения ближнего инфракрасного диапазона / /Радиационная биология. Радио-экология. -1999. - Т. 39. -№ 6. - С. 701-706.
12. Козель А.И., Попов Г.К. Механизм действия лазерного облучения на тканевом и клеточном уровнях // Вестн. РАМН. - 2000. — № 2. -С. 41-43.
13. Курносенко И. В. Клинико-иммунологические аспекты цервицитов хлаимидийной этиологии: Автореф. ...канд. мед. наук. — Челябинск, 2001. - 22 с.
14. Лазерная биостимуляция как самоорганизующийся неравновесный процесс/ Ю.А. Владимиров, В.И. Оленев, Т.Б. Суслова, Я.А. Потапенко // Итоги науки и техники. Сер. биофизика. - М.: ВИНИТИ, 1988.-Т.4.-Ч.2.-С. 63-66.
15. Маянский А.Н., Виксман М.Е. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов
человека по реакции восстановления нитрасинего тетразолия: Метод, рекомендации - Казань, 1979. -11 с.
16. Методические материалы по диагностике и лечению наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путём (протоколы ведения больных) / ГУ ЦНИКВИ М3 РФ. - М:, 2001.-80 с.
17. Методы изучения фагоцитарных клеток при оценке иммунологического статуса человека: Учеб-метод, пособие /Подред. И.С. Фредлин - М., 1986.-37 с.
18. Микусев Ю.Е., Яушева MB., Матвеева Т.В. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунологическую реактивность // Физиотерапия, бальнеология и реабилитация. - 2003. -№ 3. - С. 39-43.
19. О роли нарушений иммунологических механизмов защиты в развитии бесплодия у женщин с урогенитальной хламидийной инфекцией / И.В. Зорина, А.Б. Мелещенко, Н.П. Чеснокова, А.В. Михайлов / Пробл. репродукции. - 1996. -№2. -С. 24-27.
20. Субпопуляционный состав слизи цервикального канала у женщин с острыми воспалительными заболеваниями матки и придатков в процессе лечения / Т.И. Дергачева, Н.В. Юкляева, А.А. Радионченко, А.В. Шурлыгина //Акушерство и гинекология. -1999. -№ 4.- С. 30-32.
21. Телешева Л. Ф. Иммунологические факторы секретов репродуктивного тракта женщины: Дис... д-ра мед. наук. - Челябинск, 2000. - 324 с.
22. Телешева Л.Ф., Долгушина В.Ф., Долгушин И.И. Механизмы противоинфекционной защиты репродуктивного тракта женщин // Журн. микробиолгии, эпидемиологии и иммунобиологии. -
1998.-№4. -С. 85-90.
23. Функциональная активность лейкоцитов человека под влиянием инфракрасного лазерного облучения /ИМ Горяйнов, Л.В. Ковальчук, АИ. Конопля и др. //Иммунология. -1998. -№ 2. -С. 12.
24. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидоро-вич ИГ. Иммунология: Учебник. - М.: Медицина, 2000.-432 с.
25. Чичук Т.В., Страшевич И.А., Клебанов Г.И. Свободнорадикальные механизмы стимулирующего действия низкоинтенсивного лазерного излучения: Обзор // Вестн. РАМН. - 1999. — № 2. — С. 27-32.
