CC BY
7
ляром составляла 15±0,4 мл/мин. Из диффузионника с помощью шприца типа Хирана на 1 мл смесь паров бензола с гелием вводили в хроматограф.
Диффузионный метод получения малых концентраций обеспечивал надежный контроль чувствительности хроматографа и количественной • оценки определяемых компонентов. На основании анализа хроматограмм, полученных при различных температурах колонок, для всех ловушек
строили зависимости lgV^от которые сравнивали с подобными же прямыми, полученными для чистых веществ. Ряд веществ идентифицировали по графику зависимости lg (ДОФ) от \g\/rg (полярной фазы). Органические кислоты определяли методом бумажной хроматографии.
В результате определения примесей в воздухе жилого помещения обнаружены предельные углеводороды (н-пентан, н-гексан, н-гептан, н-ок-тан, н-нонан, н-декан), ароматические углеводороды (бензол, толуол, о-ксилол, этилбензол), ацетон, альдегиды (ацетальдегид, пропионовый ф альдегид), спирты (метанол, этанол, н-пропанол, н-бутанол, бутанол-2, изо-бутанол, н-амиловый спирт), органические кислоты (муравьиная, уксусная, себациновая), простые эфиры (диэтиловый эфир, диизопропило-вый эфир), сложные эфиры (этилацетат, бутилацетат, амилацетат, диок-сан), дихлорэтан. Идентифицировано 30 веществ. Ряд веществ не идентифицирован.
Чувствительность описанной методики определения примесей в атмосфере жилого помещения находится на уровне 10~в—Ю-7 мг/л.
Таким образом, использование газовой хроматографии для исследования примесей в воздухе обитаемого помещения позволило выявить сложный комплекс различных классов органических веществ; некоторые из них могут оказывать токсическое воздействие на человека. Полная экспресная идентификация примесей возможна при сочетании газовой хроматографии с масс-спектрометрией и электронно-вычислительной техникой. ^
Выводы
1. Разработана двухэтапная методика определения микропримесей в атмосфере обитаемых помещений, включающая избирательное отделение и концентрирование отдельных групп соединений и хроматографнческое идентифицирование индивидуальных веществ.
2. Использование метода охлаждаемых ловушек позволяет произвести многократный анализ микропримесей на различных жидких фазах и адсорбентах и при различных температурах.
ЛИТЕРАТУРА. Жуховицкий A.A., Туркельтауб Н. М., Шляхов А. Ф. Нефтехимия, 1964, т. 4, с. 645. — Кайзер Р. В кн.: Успехи хроматографии. М., 1972, с. 193. — Серпионова E.H. Промышленная адсорбция газов и паров. М., 1969, с. 87. — Я н а к Я. В кн.: Успехи хроматографии. М., 1972, с. 268.
Поступила 8/VIII 1972 г. Ч
УДК 57«.8.077:М
Канд. мед. наук Н. Р. Поляк
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ КАК АНТИГЕНОВ ДЛЯ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Для успешной диагностики аллергических заболеваний и, 6 частности, аллергозов химической этиологии изучение клинической картины должно дополняться специфическим исследованием. При выяснении иммунологи- ^
ческой стадии аллергического процесса аллергены используются как in vivo, так и in vitro. Разработка методов аллергологической диагностики in vitro чрезвычайно важна, так как методы диагностики in vivo требуют присутствия больного и не всегда безраличны для организма. Значительный интерес представляла возможность использования химических веществ для проведения реакции дегрануляции тучных клеток и определения чувствительности ретракции кровяного сгустка у лиц с аллергическими заболеваниями химической этиологии.
Многочисленными исследованиями показано, что тучные клетки содержат вещества с резко выраженной биологической активностью, играющие большую роль в процессе аллергических реакций (Н. П. Евсеева; Л. М. Ишимова, 1968, 1971; Holmgren и Wilander; Stwart; Rocha и Silva; Mota). При сенсибилизации и анафилактическом шоке под воздействием реакции антиген — антитело тучные клетки повреждаются с выделением отдельных гранул и освобождением биологически активных веществ (ги-стамина, серотонина, фактора Фельдберга). Тест дегрануляции рассматривают как метод обнаружения циркулирующих сывороточных антител.
Доказательством участия тучных клеток в аллергических реакциях служили морфологические изменения в них —дегрануляция. Для проведения исследований мы использовали следующую методику дегрануляции тучных клеток (Л. М. Зеличенко). На предметное стекло, окрашенное 0,3% спиртовым раствором нейтрального красного, наносили 0,05 мл исследуемой сыворотки, 0,05 мл перитонеальной взвеси крысы и столько же испытуемого раствора химического вещества. Предметное стекло накрывали покровным стеклом. Смесь помещали в термостат при 37°. Параллельно ставили 2 контроля — только с сывороткой или только с аллергеном. Реакцию читали через 10—15 мин. Подсчитывали число дегранулирован-ных тучных клеток. Результаты подсчета выражали в процентах. Условно выделяли три степени реакции дегрануляции: слабую (+) — дегрануляция более той, которая оказалась в контроле, на 10%; умеренную (Н—Ь) — на 15%; резко положительную (+++) — на 20% и более.
Изучали чувствительность подавления ретракции кровяного сгустка химическими веществами (И. Е. Сосонкин).
Реакция состояла в следующем. В 1 из 2 стерильных пробирок вносили 1 мл стерильного физиологического раствора (контроль). Во вторую пробирку добавляли такое же количество химического аллергена. В качестве химических аллергенов использовали растворы: 0,005% ги-громицина, 0,0007% цирама, 2,5% капролактама, 0,2% формальдегида, 0,1% монохлорамина и 0,05% фнтобактериомицина. Медицинские антибиотики вводили в реакцию из расчета 1000 ед. на пробу. Брали также 0,33% раствор ДДТ на петролейном эфире. Эти растворы использовали после тщательного подбора указанных концентраций химических веществ. В каждую из пробирок прибавляли по 3 мл крови. Результаты оценивали через 24 часа путем измерения количества отстоявшейся сыворотки (в миллилитрах) и подсчета индекса ретракции.
Изучение указанных Быше реакций проведено у 40 лиц (32 женщин и 8 мужчин), контактировавших с различными химическими веществами. У 39 человек отмечен производственный контакт и у 1 — бытовой. У значительной части обследованных (24 человека) профессиональный контакт с химическими веществами не превышал 5 лет. Лишь у 6 человек он был свыше 20 лет. Почти половина (18) обследованных были в возрасте 19— 30 лет, 2 человека — старше 50 лет.
У всех обследованных доказана химическая этиология аллергического процесса. Среди 40 лиц с аллергозами положительные результаты реакции дегрануляции тучных клеток отмечаны в 28 случаях, причем слабая степень дегрануляции была у 10 человек, умеренная—у 16 и резко положительная — у 3. Положительная реакция дегрануляции тучных клеток выявлена у 16 из 20 больных, сенсибилизированных к гигромицину, у 5
из 6 лиц с сенсибилизацией к капролактаму, у 1 из 3 лиц — к цираму, у 2 из 4 лиц — к медицинским антибиотикам, у каждого из больных, сенсибилизированных к монохлорамину, ДДТ, ноксерону, фитобактерио-мицину.
Положительная реакция подавления ретракции кровяного сгустка зарегистрирована у 23 больных аллергическими заболеваниями химической этиологии. У больных, сенсибилизированных к гигромицину, реакция подавления ретракции сгустка была выражена почти в половине случаев (9 из 20), к капролактаму — в 5 из 6, к формальдегиду — в 2, к цираму — в 3 случаях, к йодистому калию, монохлорамину, ДДТ и фито-бактериомицину — у каждого из больных. Ни у одного из 4 больных с сенсибилизацией к медицинским антибиотикам реакция подавления ретракции кровяного сгустка не была выражена.
Следует отметить высокий процент корреляции показателей изученных реакций с результатами скарификационных проб с аллергенами из тех же химических веществ, что были введены в реакции. Так, реакция деграну-ляции тучных клеток коррелировала с результатами кожных проб в 72,5% случаев, а чувствительность подавления ретракции кровяного сгустка—в 58,9%.
Наши исследования являются поисковыми и, естественно, мы не можем претендовать на какие-либо окончательные выводы. Однако результаты первых наблюдений дают основание считать, что использование химических веществ для проведения иммунологических исследований in vitro правомочно.
ЛИТЕРАТУРА. Евсеева Н. П. Вести, оторинолар., 1964, № 5, с. 114.— Зеличенко Л. М. Тучные клетки крыс в аллергических реакциях немедленного типа. Автореф. дисс. канд. М., 1969, с. 17. — И ш и м о в а Л. М. В кн.: Проблемы реактивности в патологии. М., 1968, с. 101.—Она же. В кн.: Проблемы аллергии. М., 1971, с. 99.—Сосонкин И. Е. Материалы к диагностике и десенсибилизирующей терапии аллергических контактных дерматозов химической этиологии. Автореф. дисс. докт. Алма-Ата, 1970. — Holmgren Н., W i 1 а п о 1 е г О., Z. mikr.-anat. Forsch., 1937, Bd 42, S. 242. —Mota J., Immunology, 1964, v. 7, p. 684. — Rocha eSil-v a M., Histamine. Its Role in Anaphylaxis and Allergy. Springfield, 1955. — Stuart E.G., Anat. Ree., 1952, v. 112, p. 394.
Поступила 21/11 1972 г.
УДК «14.771 :Юг.в5]-074
Канд. биол. наук Е. Г. Моложанова, Л. Б. Ремизова
МЕТОД ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ В ПОЧВЕ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП
Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс. Киев
Использование пестицидов в системе мероприятий по химической защите растений обусловливает проникновение в почву различных препаратов. При этом существенное значение приобретает возможность их определения при совместном присутствии. Описаны специфические методы определения севина в объектах внешней среды (Е. Г. Моложанова и М. А. Клисенко), фозалона (М. В. Письменная и М. А. Клисенко) и ротора (Л. Г. Адейшвили и М. А. Клисенко) в продуктах растительного происхождения, гардоны в воде, овощах и фруктах (3. Ф. Юркова и М. А. Клисенко).
В настоящей работе предлагается метод одновременного определения пестицидов различных классов соединений: производных карбаминовой кислоты — севина и его метаболитов (1- и 2-нафтол), а также фосфорорга-нических соединений — фозалона, бензофосфата, рогора, гордоны. Метод основан на хроматографии в тонком слое окиси алюминия, закрепленного гипсом (Е. Г. Моложанова и М. А. Клисенко).
