CC BY
149
УДК 582.594-152.24(470-25)
А. Н. Швецов, Р. З. Саодатова, Т. Ю. Коновалова, Н. А. Шевырева, М. А. Галкина
ИНТРОДУКЦИЯ DACTYLORHIZA FUCHSII (DRUCE) SO0 В ГЛАВНОМ БОТАНИЧЕСКОМ САДУ (ГБС) РАН
В природе резко сокращается численность Dactylorhiza fuchsii из-за нарушений местообитаний, сбора в букеты и заготовки клубней. Учитывая это обстоятельство, актуально создание резервного фонда для дальнейшего его использования в целях реинтродукции. Цель исследования - создать интродукционную популяцию, используя сеянцы, полученные в культуре in vitro. Задачи исследования: подбор оптимальной схемы стерилизации и питательной среды для проращивания; выявление оптимальной для пересадки в грунт стадии развития сеянцев; подбор участка на территории Главного ботанического сада РАН (ГБС) для проведения экспериментальной работы по созданию интродукционной популяции D. fuchsii; изучение онтогенеза; ежегодный учет особей; анализ динамики численности и онтогенетической структуры популяции. В ГБС РАН создана интродукционная популяция D. Fuchsia из сеянцев, полученных в культуре in vitro. Апробирован
ШВЕЦОВ Александр Николаевич - к. б. н., зам. директора ФГБУН Главный ботанический сад им. Н. В. Цицина РАН.
E-mail: floramoscow@mail.ru
SHVETSOVAlexander Nikolaevich - Candidate of Biological Sciences, Vice Director in Tsytsin Main Moscow Botanical Garden of Academy of Sciences.
E-mail: floramoscow@mail.ru
САОДАТОВА Рано Зубайдуллоевна - к. б. н., с. н. с. отдела флоры ФГБУН Главный ботанический сад им. Н. В. Цицина РАН.
E-mail: rsaodatova@mail.ru
SAODATOVA Rano Zubaidulloevna - Candidate of Biological Sciences, Senior Research Associate of the Department of Flora in Tsytsin Main Moscow Botanical Garden of Academy of Sciences.
E-mail: rsaodatova@mail.ru
КОНОВАЛОВА Татьяна Юрьевна - н. с. отдела флоры ФГБУН Главный ботанический сад им. Н. В. Цицина РАН.
E-mail: konovtat@mail.ru
KONOVALOVA Tatiyana Yurievna - Research Scientist at the Department of Flora in Tsytsin Main Moscow Botanical Garden of Academy of Sciences.
E-mail: konovtat@mail.ru
ШЕВЫРЕВА Наталья Александровна - м. н. с. отдела флоры ФГБУН Главный ботанический сад им. Н. В. Цицина РАН.
E-mail: konovtat@mail.ru
SHEVYREVA Nataliya Alexandrovna - Junior Research Scientist at the Department of Flora in Tsytsin Main Moscow Botanical Garden of Academy of Sciences.
E-mail: konovtat@mail.ru
ГАЛКИНА Мария Андреевна - к. б. н., м. н. с. отдела флоры ФГБУН Главный ботанический сад им. Н. В. Цицина РАН.
E-mail: mawa.galkina@gmail.com
GALKINA Mariya Andreevna - Candidate of Biological Sciences, Junior Research Scientist at the Department of Flora in Tsytsin Main Moscow Botanical Garden of Academy of Sciences.
E-mail: mawa.galkina@gmail.com
метод асимбиотического проращивания зрелых семян. Наиболее результативным при адаптации к нестерильным условиям является использование нормально сформированных растений. Всего высажено 46 особей на площади 3 м2. Интродуцируемые растения были этикетированы и закарти-рованы для последующих наблюдений. В течение пяти лет ведется мониторинг за состоянием ин-тродукционной популяции. В 2014 г. отмечен рост численности популяции в результате активного выхода особей из состояния вторичного покоя.
Ключевые слова: интродукция растений, культура in vitro, асимбиотический метод проращивания семян, онтогенез, динамика популяций, Dactylorhiza fuchsii.
A. N. Shvetsov, R. Z. Saodatova, T. Yu. Konovalova, N. A. Shevyreva, M. A. Galkina
Introduction of Dactylorhiza fuchsii (Druce) Soo in MBG RAS
In nature the incidence of population of species Dactylorhiza fuchsii has drastically reduced due to disturbed habitats, collecting in bouquets and harvesting of the tubers. Considering this circumstance, the objective of establishing a reserve fund of the species for its further use for reintroduction has proved to be urgent live issue. Objective of the research project is to create the population for introduction, using seedlings obtained in culture in vitro. Goals of the study: selection of the optimal scheme and sterilization method of the nutrient medium for germination; identification of best sites for grafting seedlings into soil at the growth-development stage; selection of the site in the Garden for experimental work on the providing introduction population of D. fuchsii; study of ontogenesis; annual account of individuals; analysis of population dynamics and of ontogenetic structure of the population. In the Main Botanical Garden introduction population of D. fuchsii has been founded and preserved, by using seedlings obtained in culture in vitro. The method of asymbiotic germination of mature seeds has been tested. Normally formed plants have proved to be the most effective in adapting to the use for propagation in non-sterile conditions. In total, 46 individuals of the species per area of 3 m2 were planted.
The introduced plants were labeled and mapped for the subsequent observations. Within five years, the introduction population has been monitored for its status. In 2014, the population' growth as a result of active individuals output from the state of secondary dormancy was marked.
Keywords: plant introduction, culture in vitro, asimbiotic method of seed germination, ontogenesis, population dynamics, Dactylorhiza fuchsii.
Введение
Dactylorhiza fuchsii (Druce) Soo - вид из семейства Orhidaceae Juss. Встречается на территории России в европейской части, на Урале, в Западной Сибири, на Алтае, в Республике Тыва, доходит до Байкала в Иркутской обл. и Бурятии [1-3].
Многолетнее травянистое растение 20-65 (80) см высотой с пальчато-лопастным клубнем. Нижние листья сизовато-зеленые, пятнистые, широколанцетные или обратнояйце-видные. Цветки лилово-розовые, собранные в густое соцветие; губа глубоко-трехлопастная, боковые лопасти ромбические, средняя лопасть сильно выдается вперед. Плод - вытянутая коробочка [2-3].
Вид приурочен к местообитаниям с влажно-лесолуговым увлажнением, в зависимости от освещенности растет как на открытых пространствах, так и в тенистых лесах, по отношению к кислотности почв предпочитает нейтральные, а по отношению к трофности - богатые почвы [4].
D. fuchsii - лугово-лесное растение, обычное в зарослях кустарников и по опушкам лесов. Зацветает в середине июня, заканчивает цветение в начале-середине июля. Плоды созревают в первой половине августа. В природных условиях размножается в основном
семенами [1-3]. Численность пальчатокоренника Фукса сокращается из-за нарушений биотопов и сбора генеративных побегов в букеты. Вид внесён в Приложение 1 к Красной книге Московской области [5]. В 25 регионах России вид занесен в Красные книги [2].
D. fuchsii успешно выращивается в ботанических садах Москвы, Санкт-Петербурга, Екатеринбурга и др. [2, 6]. Интродукция данного вида в условиях Центрального сибирского ботанического сада оказалась малоперспективной [7].
Пальчатокоренник Фукса хорошо растет в культуре (в полутени и на открытых участках), не требуя специальных субстратов. Данный вид легко сеется в культуре in vitro зрелыми семенами, сеянцы хорошо развиваются. Особи легко адаптируются при высадке в нестерильные условия. Зацветают на 5-6 год после посева [8]. Есть сведения случайного опыта по реинтродукции этого вида. Единственная особь была высажена в Подольском районе Московской области на участок сенокоса с сухой суглинистой почвой. В течение 8 лет растение распространилось в радиусе 15 м в нетипичных условиях обитания вида благодаря самосеву. Всего обнаружено 23 особи, из них 7 - цветущих [9]. Сеянцы, полученные в культуре in vitro, могут быть использованы при реинтродукции редких видов орхидных умеренной зоны. Например, Е. В. Андронова и Ж. В. Ивасенко провели серию экспериментов по реинтродукции сеянцев D. maculata s. l., выращенных в культуре in vitro, в природных условиях Ленинградской и Московской областей [10].
Первые опыты по созданию интродукционной популяции D. fuchsii в ГБС РАН проводились в 1958 г., когда из Московской области были привезены и высажены на участок широколиственного леса 20 особей [11]. С 1959 по 1970 г. проводились наблюдения за сезонным ритмом развития одной особи, а с 1971 по 1978 гг. - трех. Единичные особи данного образца существуют до сих пор.
В 2010 г. работа по созданию интродукционной популяции D. fuchsii была продолжена на иных методических подходах. Цель работы - создать интродукционную популяцию, используя сеянцы, полученные в культуре in vitro; проследить динамику численности и изменения онтогенетической структуры популяции.
Искусственное семенное размножение in vitro
Основой для культивирования и сохранения редких видов орхидных является разработка эффективных методов их размножения. Это особенно важно для орхидей со стеблекорне-выми тубероидами, размножающихся преимущественно семенами [12-13]. При этом для сохранения и размножения одним из наиболее перспективных является метод асимбиоти-ческого проращивания семян орхидных in vitro.
Для посева использовали зрелые семена, собранные в природе в Московской области, где D. fuchsii довольно обычное растение полян и опушек сыроватых смешанных лесов. Для стерилизации и химической скарификации семян применяли обработку 1,5 % и 2 % растворами серной кислоты в течение 10 мин. с последующей стерилизацией от 15 до 90 мин. 25 % раствором бытового отбеливателя «Белизна» или только обработку «Белизной». Семена высевали на стерильные питательные среды по общепринятым методикам [13-14].
Апробированы следующие варианты питательных сред: Harvais c добавлением кусочков картофеля (56 г/л); Chu and Mudge (1/3 MS с добавлением кокосовой воды 100 мл/л, 15 г/л сахарозы), Malmgren с заменой вамина на аминостерил (все макросоли по 80 мг, сахароза 15 г, аминостерил 3 мл, витамины по MS 1 мл/л) с ананасовым соком 15 мл/л; Malmgren с заменой ананасового сока на картофель - 56 г/л; S Norstog, MS [12-13, 15]. Использовали варианты сред без гормонов, с кинетином, НУК, 2,4-Д в различных концентрациях и сочетаниях. В частности Harvais и Chu and Mudge как без кинетина, так и с кинетином 1,2 и 2,4 мг/л.
Наиболее эффективной оказалась стерилизация серной кислотой (концентрация 1,5 %, экспозиция 10 мин.) и «Белизной» (концентрация 25 %, экспозиция 10-15 мин.). Семена большинства образцов начинали прорастать через 5-6 месяцев после посева.
Семена пальчатокоренника Фукса прорастали на всех вариантах питательных сред. Однако наибольшее количество проростков было получено на среде Harvais и Chu and Mudge как без кинетина, так и с кинетином (1,2 и 2,4 мг/л).
Результаты настоящего исследования подтверждают полученные ранее данные по успешному применению среды Harvais для проращивания орхидных [13, 16].
Посев выполнялся в ноябре-декабре. Растительный материал инкубировали в темноте при температуре 3-4 °С в течение 3 месяцев, а затем переносили в помещение с температурой 20-23 °С. Прорастание начинается еще в холодильнике, а при комнатной температуре протокормы растут активно. Однако при выращивании пальчатокоренников при постоянной (+20 °С) температуре они не формируют тубероиды, образуя только листья. Необходимым условием нормального развития сеянцев является наличие периода покоя в течение 3 месяцев при пониженных температурах, поэтому после 3-4 месяцев доращивания прото-кормов при комнатной температуре сеянцы помещали в холодильник при 4 °С на 3 месяца для прохождения периода покоя. К концу этого периода у сеянцев наблюдали активацию ростовых процессов и появление первого листа. Крупные сеянцы, с хорошо развитым зеленым листом и корнями, высаживали в открытый грунт, как правило, в начале июня следующего за посевом года. Из-за несинхронного развития сеянцев в ряде случаев вместе с крупными высаживали сеянцы с недифференцированным побегом. В качестве субстрата использовали смесь дерновой земли, торфа, песка, сфагнового мха и перлита.
Сеянцы высаживались в открытый грунт ежегодно с 2001-2008 гг., растения зацветали на 4-5 год после высадки. Данные о развитии пальчатокоренника в природных условиях свидетельствуют о том, что это очень длительный процесс. D. fuchsii зацветает на 8-11 год [12, 17]. При этом в данном исследовании растения образовывали первый зеленый лист через 10-11 месяцев и были готовы к пересадке в грунт весной следующего года. Следовательно, онтогенез D. fuchsii значительно ускоряется в случае использования биотехнологических методов (срок развития до цветения сократился до 4-5 лет, т. е. в два раза). При этом отмечено повышение всхожести и ускорение прорастания семян [14, 18, 19]. Ускорить прохождение начальных стадий онтогенеза сеянцев позволяет также использование для посева незрелых семян, прорастающих в течение недели после посева. Такие семена не требуют холодной стратификации, но их невозможно хранить и пересылать.
Важным моментом при высадке в грунт является выбор стадии развития сеянцев. Использование нормально сформированных растений для адаптации к нестерильным условиям является, по нашему мнению, наиболее результативным.
Создание интродукционной популяции и мониторинг состояния растений
На площади 3 м2 (рис. 1) на территории ГБС РАН было высажено 2 группы из 46 особей. Первая группа из 24 особей (посев 2002 г.) была представлена 6 генеративными особями и 18 особями прегенеративного периода. Вторая группа из 22 особей (посев 2004 г.) преге-неративного периода.
1-- 2 г^ртэ 1
1И П> ■п »V V
г*
V ч V ил
«1 V т ? ¥ * V V
V V •п ¡ГТЪ»д Ш *- V # V
Рис. 1. Схема посадки особей в интродукционной популяции Dactylorhizaикап на территории ГБС. Условные обозначения: g - генеративные особи, V - прегенеративные
Исследования проводились с учетом методов наблюдений за ценопопуляциями видов растений Красной книги СССР [20]. После посадки все особи были этикетированы и закар-тированы для последующих наблюдений. Интродукционная популяция расположена под пологом широколиственных деревьев (сомкнутость крон 0,4). В засушливые годы осуществлялся полив растений, а также регулярно проводилась прополка сорняков.
Онтогенетические состояния D. fuchsii определены по морфологическим признакам надземных органов: число листьев, размеры нижнего листа и число жилок в нем (табл. 1). Временно не цветущие особи мы относили к генеративным.
Учет особей в 2011 г. показал (рис. 2), что численность 1-й группы составила 15 особей (63 % от высаженных). Возрастной состав этой группы был представлен тремя онтогенетическими состояниями: 2 (13 %) имматурные (im) особи, 9 (60 %) виргинильные (v) и 4 (27 %) генеративные (g), из них лишь 1 особь цвела, а 3 особи имели перерыв в цветении. Численность 2-й группы составила 14 особей (64 %). Здесь возрастной состав представлен двумя онтогенетическими состояниями: 9 (64 %) im и 5 (36 %) v. Мы не можем оценить приживаемость растений в первые годы, поскольку орхидные способны переходить в состояние вторичного покоя, вызванное различными факторами. По данным М. Г. Вахрамеевой [21], продолжительность состояния вторичного покоя для im, v и g особей D. fuchsii составляет 1-3 года, в отдельных случаях 4 года.
Таблица 1
Диагностические признаки возрастных групп интродукционной популяции Dactylorhiza fuchsia
Признак Возрастные группы
im v g
Число листьев 1-2 2(1)-3 4(3)-6
Ширина листа, см 1,0±0,16 2,1±0,08 2,0±0,15
Длина листа, см 8,9±0,98 11,7±0,48 12,5±0,71
Число жилок 5-9 9-13 9-13
■-< Ю(Н
V *v *V 4
'V * ч Ч
V
"V *v
■* -4 •v
'Ч '9
■1 'V "V
■v -v
*v 'ч
'V ■9 4
*v *v
'V *v
'9
V
•v
•v
'V v*9 "v
Рис. 2. Пространственное размещение особей интродукционной популяции Dactylorhiza/искан в 2011 г Условные обозначения: т - имматурные особи, V - виргинильные, v-g - генеративные особи с перерывом в цветении, g -генеративные
В 2012 г. (рис. 3) учет растений проводили во 2-й декаде августа (в фазу плодоношения). На всей площади было обнаружено 5 особей, из них 1 V и 4 g. В 1-й группе одна особь перешла в генеративное состояние, а у другой g особи перерыв в цветении прерван. Во 2-й группе 2 особи перешли в генеративное состояние.
В 2013 г. (рис. 4) обнаружено 8 особей 1-й группы (Нт^^), из них 3 особи появились после однолетнего и 1 особь - после двулетнего состояния вторичного покоя. Также отмечен перерыв в цветении у одной g особи и, наоборот, цветение у другой g особи. Во 2-й группе выявлено 7 особей из них 5 особей появились после однолетнего
состояния вторичного покоя. У одной g особи отмечен перерыв в цветении. Листья 6 особей в популяции повреждены листогрызущими насекомыми.
,_, 2грутга (Осм 1 гр."пд
3
I
г
$
э
Рис. 3. Пространственное размещение особей интродукционной популяции Dactylorhiza fuchsii в 2012 г
Рис. 4. Пространственное размещение особей интродукционной популяции Dactylorhiza^^п в 2013 г
В 2014 г. (рис. 5) численность 1-й группы составила 12 особей (1im:5v:6g), из них 4 особи появились после двулетнего состояния вторичного покоя, причем 1 особь перешла в генеративное состояние. Перерыв в цветении отмечен у 3 g особей, у 2 из них - уже второй год. Численность 2-й группы составила 8 особей (2im:1v:5g), из которых одна появилась после однолетнего состояния вторичного покоя и перешла в генеративное состояние, 1 im особь перешла в виргинильное состояние, а 1 v - в генеративное состояние. У одной g особи закончен перерыв в цветении. В этот год были повреждены листогрызущими насекомыми листья только одного растения.
При «суммировании» результатов наблюдений обеих групп за пять лет получаем динамику интродукционной популяции D. fuchsii (рис. 6). Резкий спад численности в 2011 г. и дальнейшее ее снижение в 2012 г. могли быть вызваны как и последствиями сильной засухи
Рис. 5. Пространственное размещение особей интродукционной популяции Dactylorhiza fuchsii в 2014 г.
4
Рис. 6. Динамика интродукционной популяции Dactylorhiza fuchsii за 2010-2014 гг. 1 - особи прегенеративного периода, 2 - особи генеративного периода, 3 - особи в состоянии вторичного покоя, - общее число особей (за исключением особей, находящихся во вторичном покое)
2010 г., так и адаптацией растений, выращенных in vitro, к новым условиям интродукции. В результате активного выхода особей из состояния вторичного покоя в 2014 г. нами был отмечен рост численности популяции по сравнению с двумя предыдущими годами.
В результате наблюдений за фиксированными особями (табл. 2) установлено, что наиболее высокой приживаемостью обладают виргинильные особи. Три имматурные и четыре виргинильные особи находятся в инертном состоянии, т. е. в течение 5 лет особь сохраняет одно и то же возрастное состояние.
Таблица 2
Возрастные состояния особей интродукционной популяции Dactylorhiza fuchsii
1 группа 2 группа
№ годы № годы
2011 2012 2013 2014 2011 2012 2013 2014
1 v-g v-g 25 im im im
2 im im im 26 im im v
3 g 27 v v g
4 28
5 v-g v-g 29 im
6 v-g g g 30 im im im
7 v-g g g g 31
8 v g v-g v-g 32
9 v v v 33
10 v 34 v g g g
11 v g 35 v v g
12 v v 36
13 37 im
14 v 38
15 v v v 39 v g v-g g
16 40 im
17 41 v v g
18 v v 42 im
19 v v v 43 im
20 im 44 im
21 45
22 46
23
24
Условные обозначения:
- особь не обнаружена, im - имматурные особи, v - виргинильные, v-g - генеративные особи с перерывом в цветении, g -генеративные
Заключение
Метод асимбиотического проращивания семян и культивирования растений in vitro дает возможность искусственно размножить D. fuchsii для создания живой коллекции, использо -вать этот вид в садоводстве, а также в целях реинтродукции.
Установлено, что питательная среда Harvais с добавлением картофеля является универсальной для проращивания зрелых семян и дальнейшего развития всходов пальчатокорен-ника Фукса. Для нормального развития сеянцев необходимо обеспечение периода покоя в течение 3 месяцев. Наиболее результативным при адаптации к нестерильным условиям в летний период является использование сеянцев с хорошо развитым зеленым листом и корнями. Показано, что применение метода асимбиотического проращивания семян позволяет ускорить вступление растений в фазу генеративного развития.
В результате пятилетнего мониторинга состояния растений интродукционной популяции D. fuchsii установлено, что данная популяция характеризуется средней приживаемостью особей прегенеративного периода. Наиболее высокой приживаемостью обладают вирги-нильные особи. Выявлено инертное состояние у некоторых имматурных и виргинильных особей.
Учет особей в 2014 г. показал, что численность популяции составила 20 особей (44 % от высаженных). Возрастной состав представлен тремя онтогенетическими состояниями: 3im:6v:11g.
Таким образом, по результатам наших наблюдений можно прогнозировать нормальное существование интродукционной популяции на данном участке в дальнейшие годы. Относительно роста численности за счет появления молодых особей данные появятся лишь через несколько лет, поскольку если семена и проросли, первое время новые особи существуют в виде протокорма в верхнем слое почвы, и ювенильные растения смогут быть обнаружены нами только через несколько лет.
Л и т е р а т у р а
1. Невский С. А. Сем. Ятрышниковые - Orchidaceae Lindl // Флора СССР. - Т. IV. - Л.: АН СССР, 1935. - С. 589-730.
2. Варлыгина Т. И., Вахрамеева М. Г., Татаренко И. В. Орхидные России (биология, экология и охрана). - М.: Т-во научных изданий КМК, 2014. - 437 с.
3. Вахрамеева М. Г. Род Пальчатокоренник // Биологическая флора Московской области. - М.: Изд-во «Гриф и К°», 2000. - Вып. 14. - С. 55-86.
4. Цыганов Д. Н. Фитоиндикация экологических режимов в подзоне хвойно-широколиственных лесов. - М.: Наука, 1983. - 200 с.
5. Список редких и уязвимых таксонов, не включенных в Красную книгу Московской обл., но нуждающихся на территории области в постоянном контроле и наблюдении // Красная книга Московской обл. 2-е изд. - М.: Т-во научных изданий КМК, 2008. - С. 804-809.
6. Мамаев С. А., Князев М. С., Куликов П. В., Филиппов Е. Г. Орхидные Урала: систематика, биология, охрана. - Екатеринбург: УрО РАН, 2004. - 123 с.
7. Семенова Г. П. Интродукция редких и исчезающих растений Сибири. - Новосибирск: Наука, 2001. - 142 с.
8. Растения природной флоры в Главном ботаническом саду им. Н. В. Цицина Российской академии наук: 65 лет интродукции. - М.: Т-во научных изданий КМК, 2013. - С. 118-119.
9. Коновалова Т. Ю., Шевырева Н. А. Опыт выращивания видов орхидных флоры Московской области в открытом грунте // Восстановление и мониторинг природной флоры. - М.: Т-во науч. изд-й КМК, 2010. - С. 32-39.
10. Жизнеспособность семенного потомства редких видов орхидных умеренной зоны, выращенных в культуре in vitro, после реинтродукции в природные условия // Интродукция, сохранение и использование биологического разнообразия мировой флоры: Материалы Международной конференции,
посвященной 80-летию Центрального ботанического сада Национальной академии наук Беларуси. (19-22 июня 2012, Минск, Беларусь). Ч. 2. - Минск, 2012. - С. 370-374.
11. Ботанико-географические экспозиции растений природной флоры. Итоги сохранения биоресурсов ex situ. - М.: ГЕОС, 2007. - 226 с.
12. Вахрамеева М. Г., Денисова Л. В. Особенности онтогенеза и динамика численности ценопо-пуляций двух видов рода Dactylorhiza // Охрана и культивирование орхидей. Тезисы докладов III всесоюзного совещания. - Москва. - 1987. - С. 22-24.
13. North American terrestrial orchids. Propagation and production. Conference proceedings. - German-town, Maryland. - 1996. - 116 p.
14. Широков А. И., Коломейцева Г. Л., Буров А. В., Каменева Е. В. Культивирование орхидей европейской России. - Нижний Новгород. - 2005. - 64 с.
15. Вахрамеева М. Г., Денисова Л. Б., Никитина С. В., Самсонов С. К. Орхидеи нашей страны. - М.: Наука. - 1991. - 222 с.
16. Коновалова Т. Ю., Шевырева Н. А. Семенное размножение некоторых природных орхидей in vitro // Ботанические сады как центры сохранения биоразнообразия и рационального использования растительных ресурсов. Материалы международной конференции, посвященной 60-летию Главного ботанического сада им. Н. В. Цицина РАН, 5-7 июля 2005 г., Москва. - М.: ГБС РАН, 2005. - С. 257-259.
17. Rasmussen H. N. Terrestrial orchids from seed to mycotrophic plant. - Cambridge University Press, 1995. - 444 p.
18. Андронова Е. В. Культивування in vitro насшня i зародюв видiв роду Dactylorhiza Nevski (Orchidaceae) // Украшський боташчний журнал. - 1986. - Т. 43, № 6. - С. 79-81.
19. Андронова Е. В. Особенности развития проростков некоторых видов рода Dactylorhiza (Orchidaceae) после их пересадки из культуры in vitro в природу // Ботан. журн. - 2003. - Т. 88, № 9.
- С. 105-109.
20. Денисова В. Л., Никитина С. В., Заугольнова Л. Б. Программа и методика наблюдений за ценопопуляциями видов растений Красной книги СССР. - М.: ВНИИ охраны природы, 1986. - 34 с.
21. Вахрамеева М. Г. Онтогенез и динамика популяций Dactylorhiza fuchsii (Orchidaceae) // Бот. журн. - 2006. - Т. 91, № 11. - С. 1683-1695.
R e f e r e n c e s
1. Nevskii S. A. Sem. Iatryshnikovye - Orchidaceae Lindl // Flora SSSR. - T. IV. - L.: AN SSSR, 1935.
- S. 589-730.
2. Varlygina T. I., Vakhrameeva M. G., Tatarenko I. V. Orkhidnye Rossii (biologiia, ekologiia i okhrana).
- M.: T-vo nauchnykh izdanii KMK, 2014. - 437 s.
3. Vakhrameeva M. G. Rod Pal'chatokorennik // Biologicheskaia flora Moskovskoi oblasti. - M.: Izd-vo «Grif i K°», 2000. - Vyp. 14. - S. 55-86.
4. Tsyganov D. N. Fitoindikatsiia ekologicheskikh rezhimov v podzone khvoino-shirokolistvennykh lesov. - M.: Nauka, 1983. - 200 s.
5. Spisok redkikh i uiazvimykh taksonov, ne vkliuchennykh v Krasnuiu knigu Moskovskoi obl., no nuzhdaiushchikhsia na territorii oblasti v postoiannom kontrole i nabliudenii // Krasnaia kniga Moskovskoi obl. 2-e izd. - M.: T-vo nauchnykh izdanii KMK, 2008. - S. 804-809.
6. Mamaev S. A., Kniazev M. S., Kulikov P. V., Filippov E. G. Orkhidnye Urala: sistematika, biologiia, okhrana. - Ekaterinburg: UrO RAN, 2004. - 123 s.
7. Semenova G. P. Introduktsiia redkikh i ischezaiushchikh rastenii Sibiri. - Novosibirsk: Nauka, 2001.
- 142 s.
8. Rasteniia prirodnoi flory v Glavnom botanicheskom sadu im. N. V. Tsitsina Rossiiskoi akademii nauk: 65 let introduktsii. - M.: T-vo nauchnykh izdanii KMK, 2013. - S. 118-119.
9. Konovalova T. Iu., Shevyreva N. A. Opyt vyrashchivaniia vidov orkhidnykh flory Moskovskoi oblasti v otkrytom grunte // Vosstanovlenie i monitoring prirodnoi flory. - M.: T-vo nauch. izd-i KMK, 2010. - S. 32-39.
10. Zhiznesposobnost' semennogo potomstva redkikh vidov orkhidnykh umerennoi zony, vyrashchennykh v kul'ture in vitro, posle reintroduktsii v prirodnye usloviia // Introduktsiia, sokhranenie i ispol'zovanie biologicheskogo raznoobraziia mirovoi flory: Materialy Mezhdunarodnoi konferentsii, posviashchennoi 80-letiiu Tsentral'nogo botanicheskogo sada Natsional'noi akademii nauk Belarusi. (19-22 iiunia 2012, Minsk, Belarus'). Ch. 2. - Minsk, 2012. - 370-374 s.
11. Botaniko-geograficheskie ekspozitsii rastenii prirodnoi flory. Itogi sokhraneniia bioresursov ex situ. - M.: GEOS, 2007. - 226 s.
12. Vakhrameeva M. G., Denisova L. V. Osobennosti ontogeneza i dinamika chislennosti tsenopopuliatsii dvukh vidov roda Dactylorhiza // Okhrana i kul'tivirovanie orkhidei. Tezisy dokladov III vsesoiuznogo soveshchaniia. - Moskva. - 1987. - S. 22-24.
13. North American terrestrial orchids. Propagation and production. Conference proceedings. - German-town, Maryland. - 1996. - 116 p.
14. Shirokov A. I., Kolomeitseva G. L., Burov A. V., Kameneva E. V. Kul'tivirovanie orkhidei evropeiskoi Rossii. - Nizhnii Novgorod. - 2005. - 64 s.
15. Vakhrameeva M. G., Denisova L. B., Nikitina S. V., Samsonov S. K. Orkhidei nashei strany. - M.: Nauka. - 1991. - 222 s.
16. Konovalova T. Iu., Shevyreva N. A. Semennoe razmnozhenie nekotorykh prirodnykh orkhidei in vitro // Botanicheskie sady kak tsentry sokhraneniia bioraznoobraziia i ratsional'nogo ispol'zovaniia rastitel'nykh resursov. Materialy mezhdunarodnoi konferentsii, posviashchennoi 60-letiiu Glavnogo botanicheskogo sada im. N. V. Tsitsina RAN, 5-7 iiulia 2005 g., Moskva. - M.: GBS RAN, 2005. - S. 257-259.
17. Rasmussen H. N. Terrestrial orchids from seed to mycotrophic plant. - Cambridge University Press, 1995. - 444 p.
18. Andronova E. V. Kul'tivuvannia in vitro nasinnia i zarodkiv vidiv rodu Dactylorhiza Nevski (Orchidaceae) // Ukrains'kii botanichnii zhurnal. - 1986. - T. 43, № 6. - S. 79-81.
19. Andronova E. V. Osobennosti razvitiia prorostkov nekotorykh vidov roda Dactylorhiza (Orchidaceae) posle ikh peresadki iz kul'tury in vitro v prirodu // Botan. zhurn. - 2003. - T. 88, № 9. - S. 105-109.
20. Denisova V. L., Nikitina S. V., Zaugol'nova L. B. Programma i metodika nabliudenii za tsenopo-puliatsiiami vidov rastenii Krasnoi knigi SSSR. - M.: VNII okhrany prirody, 1986. - 34 s.
21. Vakhrameeva M. G. Ontogenez i dinamika populiatsii Dactylorhiza fuchsii (Orchidaceae) // Bot. zhurn. - 2006. - T. 91, № 11. - S. 1683-1695.
