CC BY
25
© Хижняк А. А. 1, Kpacнoceльcький M. В. 2, Шyльгa M. В. 1 2
УДK 618. 19-006. 55-08-039. 74:612. 015. 11
Хижняк А. А.1, Красносельський M. В.2, Шульга M. В.12
IHTEH^BHA IHTPAOПEPAЦIЙHATEPAПIЯ XBOPИX HA PAK
ГPУДHOÏ ЗAЛOЗИ: CTAH O^CHOI MOДИФIKAЦIÏБIЛKIB ПЛAЗMИ ßK
IHДИKATOP EФEKTИBHOCTI AHTИOKCИДAHTHOÏ ПPOTEKЦIÏ
^ap^^^é нaцioнaльний мeдичний yнiвepcитeт MOЗ У^зши
(м. Xapкiв)
2ДУ «^титут мeдичнoï paдioлoгГГ iмeнi C. П. Гpигop'eвa HAMH У^зши» (м. Xapкiв)
Дocлiджeння викoнaнo y мeжax нayкoвo-дocлiд-ниx poбiт «Iнтeнcивнa тepaпiя cиндpoмy пoлioгpaннoÏ диcфyнкцiÏ y xвopиx iз ceпcиcoм" (№ дepж. peeCTpa-цп 0112U002383, 2012-2014 p.)» кaфeдpи мeдицини нeвiдклaдниx cтaнiв, aнecтeзioлoгiÏ тa iнтeнcивнoÏ тepaпiÏ (зaв. кaф. - пpoф. А. А. Хижняк) Xapкiвcькoгo нaцioнaльнoгo мeдичнoгo yнiвepcитeтy MOЗ УкpaÏни (peicrop - чл. -rap. HАMH УкpaÏни, пpoф. В. M. Ëico-вий) тa HДP ДУ «Iнcтитyт мeдичнoÏ paдioлoгiÏ iмeнi C. П. Гpигop'eвa HАMH УкpaÏни» (диpeктop -пpoф. M. В. Kpacнoceльcький).
Bciyn. Eфeктивнicть лiкyвaння xвopиx нa злoякicнi нoвoyтвopeння знaчнoю мipoю зaлeжить в1д бioлoгiч-ниx ocoбливocтeй нeoплaзiй i cтaнy зaxиcниx cил op-гaнiзмy пyxлинoнociя [1]. Oкиcнo-вiднoвний мeтaбo-л1зм (OBM) пpи oнкoлoгiчнiй пaтoлoгiÏ дocлiджyeтьcя дocтaтньo aктивнo, ocкiльки йoгo пopyшeння з oднo-гo бoкy, poзглядaютьcя y я^ст! oднoгo 1з мexaнiзмiв фopмyвaння тa poзвиткy oнкoлoгiчниx зaxвopювaнь, з Minora - пpoвeдeння нeoaд'ювaнтнoÏ тepaпiÏ тa paди-кaльниx xipypгiчниx втpyчaнь пo co6í мoжyть 6ути тpиггepними фaктopaми. Дocлiджyючи мeтaбoлiчнi мexaнiзми пpи oнкoлoгiчниx зaxвopювaнняx з вига-pиcтaнням нoвiтнix бioxiмiчниx тa iмyнoлoгiчниx мeтo-д1в дoвeдeнo, ùo oкиcнa мoдифiкaцiя 61лк1в (OMБ) тa нyкJleÏнoвиx киагют (HK) плaзми кpoвi мoжe пpизвo-дити дo нaкoпичeння aльдeгiдниx (АП) тa кapбoнiль-ниx (KП) пpoдyктiв, виявлeння якиx y cпoнтaнниx (C) тa iндyкoвaниx (I) peaкцiяx мoжe cвiдчити пpo eфeк-тивнicть iнтeнcивнoÏ тepaпiÏ [14].
Meтa дocлiджeння пoлягaлa y вивчeннi oco-бливocтeй oкиcнo-вiднoвнoгo мeтaбoлiзмy, зoкpeмa aктивнocтi oкиcнoÏ мoдицiкaцiÏ тa cтyпeня дecтpyкцiÏ 61лк1в плaзми кpoвi y xвopиx нa Pre з piзними вapiaн-тaми iнтpaoпepaцiйнoÏ iнтeнcивнoÏ тepaпiÏ (IIT).
Сб'ект i мвтоди дocлiджeння. У дocлiджeннi зa-дiянo 126 xвopиx нa Pre (в^м 44,6 ± 3,5 p.) з xipyp-г1чним втpyчaнням y вигляд1 квaдpaнтeктoмiÏ гpyднoÏ зaлoзи з лiмфoдiceкцieю, якиx бyлo cтpaтифiкoвaнo зa oзнaкoю дoдaткoвoгo викopиcтaння в cиcтeмi IIT aнтиoкcидaнтниx зacoбiв: гpyпa «А» (n = 57 ocí6 -кoнтpoльнa) тa гpyпa «Б» (n2 = 69 ocoби, яким викoнa-нo aнтиoкcидaнтнy пpoтeкцiю). Антиoкcидaнтнi зaco-би: «Глyтapгiн» (40,0 % внyтpiшньocyдиннo, 10,0 мл) тa «Tioтpиaзoлiн» (2,5 % внyтpiшньocyдиннo, 4,0 мл)
зacтocoвaнo в cиcтeмi IIT пpи aнecтeзioлoгiчнoмy зa-бeзпeчeннi викoнaння paдикaльниx xipypгiчниx втpy-чaнь пpи PГЖ нa кл1н1чн1й бaзi ДУ «Iнcтитyт мeдичнoÏ paдioлoгiÏ iмeнi C. П. Гpигop'eвa HАMH УкpaÏни».
Фopмyвaння peпpeзeнтaтивнoгo oб'eмy вибipкo-вoÏ cyкyпнocтi для вивчeння cтaнy OBM бaзyвaлocя нa кJliнiкo-cтaтиcтичнoмy oбфyнтyвaннi кiлькicнoÏ дo-cтaтнocтi oб'eктiв cпocтepeжeння в зaлeжнocтi в1д мш-ливocтi oкpeмиx вимipювaниx пoкaзникiв. Poзpaxyнoк oб'eмy вибipкoвoÏ cyкyпнocтi (мiнiмaльнo нeoбxiднa кiлькicть oб'eктiв дocлiджeння) викoнaнo зa ^e^-aльнoю фopмyлoю [4, 11] визнaчeння poзмipy oб'eмy вибipкoвoÏ cyкyпнocтi, ùo y вiдпoвiднocтi з бaзoвими тeopeтичними пpинципaми мeдичнoÏ cтaтиcтики [6, 12] rapaK^e peпpeзeнтaтивнicть виcнoвкiв. Дeoнтo-лoгiчнi acпeкти дocлiджeння виpiшeнo y мeжax юную-чиx Miжнapoдниx кoнвeнцiй тa зaкoнoдaвcтвa УкpaÏ-ни, пpинципiв бioeтики в мeдичниx дocлiджeнняx. Poбoтa викoнaнa вiдпoвiднo дo вимoг 6вpoпeйcькoÏ кoнвeнцiÏ (Cтpacбypг, 18.03.1986 p.), диpeктиви Paди 6вpoпeйcькoгo eкoнoмiчнoгo тoвapиcтвa (Cтpacбypг, 21.11.1986 p.), Cтaтyтy УкpaÏнcькoÏ aco^a^'i з 6ío-eтики тa нopмaми GLP (1992 p.), вiдпoвiднo дo вимoг тa нopмaм ICH C8P (2002 p.) i типoвoгo Пoлoжeння з питaнь eтики MOЗ УкpaÏни №281 в1д 01.11.2000 p. тa poзглянyтa i пoзитивнo oцiнeнa кoмicieю з б^ти-ки XHMY Пpи oбcтeжeннi xвopиx (y дooпepaцiйнoмy, paнньoмy тa вiддiлeнoмy пicляoпepaцiйниx пepioдax), oкpiм зaгaльнoкJliнiчниx мeтoдiв, викoнaнo cиcтeмa-тизoвaнe дocлiджeння cтaнy OBM нa piвнi тpьox бa-зoвиx пiдcиcтeм: OMБ тa HK, бioeнepгeтики ктлтин, фepмeнтaтивнoгo лaнцюгa тa ПOЛ мeмбpaн ктмтин i NO-зaлeжниx мeтaбoлiтiв. Дocлiджeння зaкoнoмip-нocтeй OMБ тa HK y xвopиx нa PГЗ викoнaнo нa eтaпax IIT зa пoкaзникaми вмюту бiлкoвиx кoмпoнeнтiв y c^ poвaтцi кpoвi - 2,4 - динiтpoфeнiлгiдpoзoнiв (ДHФГ) тa aльдeгiдниx i кapбoнiльниx пpoдyктiв OMБ y ^o^ тaнниx (C) тa iндyкoвaниx (I) зaлiзoм peaкцiяx. Oцiнкa OMБ бaзyвaлacя нa вивчeннi peaкцiÏ oкиcлeниx aмi-нoкиcлoтниx ocтaнкiв з 2,4-динiтpoфeнiлгiдpaзинoм i yтвopeннi ДФHГ [7]. Пpи цьoмy для oцiнки cтyпeня oкиcнoÏ дecтpyкцiÏ визнaчaли (зaлeжнo в1д дoвжи-ни xвилi cпeктpoфoтoмeтpa) дpiбнi (X = 254 нм) OMБ, виявлeнi в iндyкoвaниx peaкцiяx (IД), cepeднi (X = 270 нм) OMБ, виявлeнi в iндyкoвaниx peaкцiяx (IC), кpyпнi
Taблиця
Iндикaтopи aктивнocтi o^^oT мoдифiкaцГГ тэ cтyпeня o^^oT дecтpyкцГГ бтюв i ну^^^вих киcлoт нэ eтaпax iнтeнcивнoГ тepaпГГ xвopиx нэ paк гpyднoГ зaлoзи
Iндикaтopи aктивнocтi oкиcнoï мoдифiкaцiï тa cтyпeня oкиcнol дecтpyкцiï бiлкiв тa нyклeÏнoвиx киcлoт Пepioди oцiнки eфeктивнocтi iнтeнcивнoÏ тepaпiï тa aнecтeзioлoгiчнoгo cyпpoвoдy
дooпepa-цмний пicляoпepaцiйнi
paннiй вiддaлeний
Cдп, y. o. /мг бтга n1 = 57 8,,44 ± 1,14 80,95 ± 1,57 76,83 ± ,,67 6
n, = 69 8,,18 ± 0,34 74,13 ± 0,96 a, 6 68,07 ± 1,43 a, 6
CKП, y. o. /мг бтга n1 = 57 100,0 ± 1, 94,69 ± 1,63 6 85,77 ± 3,44 6
n, = 69 1003 ± 0,68 85,51 ± 0,88 a, 6 813 ± ,,5, 6
Сд , y. o. /мг бтга n1 = 57 1,904 ± 0,019 1,863 ± 0,013 6 1,760 ± 0,039 6
n, = 69 1,875 ± 0,0,5 1,748 ± 0,0,0 a, 6 1,710 ± 0,030
Сс , y. o. /мг бiлкa n1 = 57 0,,35 ± 0,014 0^38 ± 0,005 0^49 ± 0,010
n, = 69 0^31 ± 0,010 0,191 ± 0,009 a, 6 031 ± 0,010 a
CK , y. o. /мг бтга n1 = 57 0,115 ± 0,004 0,109 ± 0,00, 0,099 ± 0,010
n, = 69 0,11, ± 0,003 0,089 ± 0,001 a, 6 0,09, ± 0,001
Iдп, y. o. /мг бтга n1 = 57 769,9 ± 19,90 764,0 ± 5,60 760,7 ± 13,1,
n, = 69 741,6 ± ,1,54 687,0 ± 13,11 a, 6 617,9 ± 14,47 a, 6
IKП, y. o. /мг бтга n1 = 57 705,, ± 15,01 697,11 ± 6,71 704,7 ± 10,4,
n, = 69 681^ ± 18,51 578,6 ± 10,86 a, 6 585,1 ± ,0,40 a
Iд, y. o. /мг бтга n1 = 57 ,,,34 ± 0,016 ,,188 ± 0,01, 6 ,,,,4 ± 0,015
n, = 69 ,,161 ± 0,054 1,9,7 ± 0,017 a, 6 1,918 ± 0,031 a
IC , y. o. /мг бтга n1 = 57 0,399 ± 0,011 0,365 ± 0,004 6 0,348 ± 0,008 6
n, = 69 0,373 ± 0,0,4 0,309 ± 0,008 a, 6 0^ ± 0,016 a
IK , y. o. /мг бтга n1 = 57 0,307 ± 0,011 0,,94 ± 0,004 0,31, ± 0,005 6
n, = 69 0,314 ± 0,004 0,,51 ± 0,004 a 0,,43 ± 0,007 a
HK, нмoль/л n1 = 57 0,570 ± 0,0,1 0,538 ± 0,005 6 0,541 ± 0,014
n, = 69 0,540 ± 0,0,9 0,330 ± 0,0,0 a, 6 0^ ± 0,0,0 a, 6
Пpимiткa: OMБ - oкиcнa ^юдиф^^я бiлкiв плaзми кpoвi; HK - нyклeÏнoвi киcлoти; дП -aльдeгiднi пpoдyкти; Kп - кapбoнiльнi пpoдyкти; I - в iндyкoвaниx peaкцiяx; C - в cпoнтaнниx peaкцiяx; a - дocтoвipнi вiдмiннocтi м1ж гpyпaми пopiвняння y мeжax aнaлiзoвaнoгo пepioдy, пpи p < 0,05; 6 - дocтoвipнi вiдмiннocтi змЫ пoкaзникa y пopiвнннi з пoпepeднiм пepioдoм, пpи p < 0,05.
(X=,80 нм) OMБ, виявлeнi в iндyкoвaниx peaкцiяx (IK) тa aнaлoгiчнi пoкaзники y cпoнтaнниx peaкцiяx (CK, Cc, Сд). Для oцiнки cтyпeня дeфpaгмeнтaцiï ora/ione-ниx бiлкiв викopиcтoвyвaли нaдoпaдoвy piдинy, в яюй cпeктpoфoтoмeтpичнo виявляли пeптиди пpи визнa-чeниx дoвжинax xвиль [1, 3]. Iндyкoвaнy OMБ зaбeз-пeчeнo шляxoм викopиcтaння cepeдoвищa Фeнтoнa (0,1M фocфaтний бyфep, pH = 7,4, який мютить ммoль FeSO4 тa 40,3 ммoль H,O,) з пoдaльшoю cпeктpoфo-тoмeтpieю нaдocaдoвoÏ piдини [5]. СтупЫь OMБ виpa-жaли в oдиницяx oптичнoÏ гycтини нa мг бтга. Piвeнь вмicтy oкиcнo мoдифiкoвaниx HK oцiнювaли зa ïx ero-кpeтopним iндикaтopoм - зa вмютом 8-гiдpoкcигya-нiнy y дoбoвiй ceчi мeтoдoм xpoмaтoгpaфiï нa плac-тинкax "Cилyфoл" [,, 13]; y якocтi xpoмaтoгpaфiчнoгo cтaндapтy зacтocoвaнo 8-гiдpoкcигyaнiн з пepepaxyн-кoм peзyльтaтy y нмoль/л. Пpи викoнaннi дocлiджeн-ня зacтocoвaнo вiдoмi мeтoди мeдичнoÏ cтaтиcтики тa клiнiчнoÏ iнфopмaтики: кiлькicний aнaлiз, мaтeмaти-кo-cтaтиcтичнi, зoкpeмa: вapiaцiйнy cтaтиcтикy [10, 11], ймoвipнicний poзпoдiл клiнiчниx тa бioxiмiчниx i
бioфiзичниx oзнaк з oцiнкoю дocтo-вipнocтi oдepжaниx peзyльтaтiв [1,].
Peзyльтaти дocлiджeнь тэ ïx oбгoвopeння. Пpи дocлiджeннi cпoнтaннoÏ OMБ нa дo- тa пicляoпe-paцiйниx eтaпax з'яcoвaнo, щo вмicт aльдeгiдниx пpoдyктiв cпoнтaннoÏ o^^oí мoдифiкaцiï бтга (Сдп) в пopiвнювaниx гpyпax пaцieнтiв нa дooпepaцiйнoмy eтaпi кoливaвcя y мeжax (78,0-83,0) y. o. /мг бтга тa дocтoвipнo нe вiдpiзнявcя (вiдпo-вiднo 8,,44 ± 1,14 y. o. /мг бтга тa 8,,18± 0,34 y. o. /мг бтга, p>0,05). Oднaк, y вжe y paнньoмy пicляoпe-paцiйнoмy пepioдi, cepeд пaцieнтiв гpyпи n, зapeecтpoвaнo дocтoвipнe змeншeння aльдeгiдниx пpoдyктiв OMБ i в пopiвняннi з oпepaцiйним пepioдoм (вiдпoвiднo 8,,18 ± 0,34 y. o. /мг бтга тa 74,13 ± 0,96 y. o. / мг бшта), i в пopiвняннi з пaцieнтa-ми, як нe oтpимyвaли yдocкoнaлeнy IIT (вiдпoвiднo 80,95 ± 1,57 y. o. /мг бтга тa 74,13 ± 0,96 y. o. /мг бтга). У вiддaлeнoмy пicляoпepaцiйнoмy пepioдi мaлo мicцe пoдaльшe дo-cтoвipнe змeншeння piвня вмicтy aльдeгiдниx пpoдyктiв OMБ cepeд пaцieнтiв пopiвнювaниx фуп, oднaк бiльш виpaзним цe змeншeння зa-peecтpoвaнo cepeд пaцieнтiв з a^ тиoкcидaнтнoю iнтpaoпepaцiйнoю пpoтeкцieю (тэ6л.). Зaзнaчимo, щo piвeнь вмicтy ДП y iндyкoвaниx pe-aкцiя (!дп), нa вiдмiнy вiд пaцieнтiв кoнтpoльнoï гpyпи, cepeд пaцieнтiв з iнтpaoпepaцiйнoю aнтиoкcидaнт-нoю пpoтeкцieю дocтoвipнo змeн-шyвaвcя (дooпepaцiйний пepioд -741,6 ± ,1,54 y. o. /мг бтга; paннiй пicляoпepaцiйний - 687,0 ± 13,11 y. o. /мг бтга; вiддa-лeний - 617,9 ± 14,47 y. o. /мг 6mra).
Пpи дocлiджeннi cпoнтaннoÏ OMБ нa дo- тa пюля-oпepaцiйниx eтaпax з'яcoвaнo, щo вмicт кapбoнiльниx пpoдyктiв cпoнтaннoÏ o^^oí мoдифiкaцiï бтга (CKП) в пopiвнювaниx гpyпax пaцieнтiв нa дooпepaцiйнoмy eтaпi кoливaвcя y мeжax (98,0-106,0) y. o. /мг бтга тa дocтoвipнo нe вiдpiзнявcя (вiдпoвiднo 100,0 ± 1^6 y. o. /мг бтга тa 100^0 ± 0,68 y. o. /мг бтга, p>0,05). У paнньoмy пicляoпepaцiйнoмy пepioдi, cepeд пaцi-eнтiв фупи n, зapeecтpoвaнo дocтoвipнe змeншeння кapбoнiльниx пpoдyктiв OMБ i в пopiвняннi з дooпe-paцiйним пepioдoм (вiдпoвiднo 100^0 ± 0,68 y. o. /мг бтга тa 85,51 ± 0,88 y. o. /мг бшта), i в пopiвняннi з пa-цieнтaми, якi нe oтpимyвaли yдocкoнaлeнy IIT (вiдпo-вiднo 94,69 ± 1,63 y. o. /мг бтга тa 85,51 ± 0,88 y. o. /мг бшта). У вiддaлeнoмy пicляoпepaцiйнoмy пepioдi мaлo мicцe пoдaльшe дocтoвipнe змeншeння piвня вмicтy кapбoнiльниx пpoдyктiв OMБ cepeд пaцieнтiв пopiв-нювaниx гpyп, oднaк бiльш виpaзним цe змeншeння
1,10
1,00
0,90
0,80
У у У у
\\ \ ^Ч^ "ч \\ \
\\ >> 4 *
\ V ■
"""""""--Л
-О- АПдо —О- АП теля —Д- КП до —Д— КП шсля -•- Д до —•— Д шсля -О- С до —О— С шсля К до К шсля
дооперац1инии раннш В1ддалении
перюд тсляоперацшний
Рис. 1. Стандартизован! (рГвень до лГкування прийнято за 1,0) показники спонтанно'Г окисноУ модифГкацп б!лк!в плазми кров! та етапах контролю ефективност! ¡нтраоперацГйноУ ¡нтенсивноУ терапм хворих на рак грудноУ залози.
1,10
1,00
0,90
0,80
у у У У
\\ \ ^^ \\ \ %
\\ 4
\ ■ ' '-УЙ-г: •.V ■1 ■ \о
-О- АП: трупа А —О— АП: рупа Б —Д- КП: трупа А —Д— КП: трупа Б —Д: трупа А —•— Д: трупа Б —о— С: трупа А —°— С: трупа Б
-К:трупа А
К: трупа Б
дооперацшнии раннш В1ддалении
перюд тсляоперацшний
Рис. 2. Стандартизован! (р!вень до л!кування прийнято за 1,0) показники ¡ндукованоУ окисноУ модиф!кацГГ б!лк!в плазми кров! та етапах контролю ефективност! ГнтраоперацГйноУ ГнтенсивноУ терапГГ хворих на рак грудноУ залози.
зареестровано серед пац1ен"пв з антиоксидантною ¡нтраопера-цмною протекшею (табл.).
Зазначимо, що р1вень вмюту КП у ¡ндукованих реак^я (1кп), на вщмшу вщ пац1ент1в контрольно! групи, серед пац1ент1в з ¡н-траоперацмною антиоксидантною протекцieю достовiрно змен-шувався (дооперацiйний перiод - 681,2 ± 18,51 у. о. /мг бтка; раннiй пiсляоперацiйний - 578,6 ± 10,8 у. о. /мг бтка; вщдалений - 585,1 ± 20,40 у. о. /мг бтка).
Таким чином, 11Т ¡з застосуванням АЗ впливае на актив-нють ОМБ, що проявляеться насамперед сталим зменшенням
накопичення альдегiдних та карбонтьних продуктiв. Тодi як, вiдсутнiсть штраопера-цiйноi антиоксидантно! протекцii тимчасо-во зменшуе рiвень вмiсту АП у спонтанних реак^ях, транзиторно зменшуе рiвень КП та не впливае на зменшення резервiв ОМБ (рис. 1).
Аналiз ступеня деструкцii бiлкiв виявив, що ИТ з використанням АЗ у ранньому пю-ляоперацмному перiодi достовiрно зменшуе кiлькiсть дрiбних бiлкових фрагментiв, як у спонтанних (Сд) реакцiях (вiдповiдно 1,875 ± 0,025 у. о. /мг бтка до 1,748 ± 0,020 у. о. /мг бтка, р < 0,05), так i при шдукова-них станах (вщповщно з 2,161 ± 0,054 у. о. /мг бтка до 1,927 ± 0,017 у. о. /мг бтка, р < 0,05).
Виконання ИТ з використанням АЗ, у ранньому пюляоперацмному перiодi також достовiрно зменшуе кiлькiсть круп-них бткових фрагментiв, як у спонтанних (СК) реакцiях (вiдповiдно з 0,112 ± 0,003 у.о. мг бiлка до 0,089 ± 0,001 у. о. /мг бтка, р < 0,05), так i при шдукованих (1К) станах (вiдповiдно з 0,314 ± 0,004 у. о. /мг бтка до 0,251 ± 0,004 у. о. /мг бiлка, р < 0,05); чого не зареестровано серед пащен™ контрольно! групи (рис. 2).
Piвень вмюту 8-гщроксигуаншу, як ¡нди-катора окисно модифiкованих нукле'шових кислот на дооперацiйному етапi серед па-цieнтiв порiвнюваних груп не в^^знявся (вiдповiдно становив 0,570 ± 0,021 нмоль/л та 0,540 ± 0,029 нмоль/л, р>0,05) та пщ впливом ИТ з застосуванням АЗ достовiрно i стабiльно зменшувався (в ранньому пюля-операцiйному - до 0,330 ± 0,020 нмоль/л; у вщдаленому - до 0,262 ± 0,020 нмоль/л). За вiдсутностi АЗ в системi 11Т змiни вмюту НК мали транзиторний характер та у вщдаленому пюляоперацмному перiодi не вiдрiзнялись вiд дооперацiйного (вщповщно 0,570 ± 0,021 нмоль/л та 0,541 ± 0,014 нмоль/л, р>0,05).
Висновки.
1. Ефективнють застосування АЗ в системi 11Т характеризуеться досягненням меншо! активностi окисно! модифкацп бiлкiв плазми кровi у ранньому пюляопе-рацiйному перiодi та збереженням такого метаболiчного стану i в вiддаленому пюля-операцiйному перюдк
2. Застосування 11Т з використанням антиоксидантних засобiв достовiрно (р < 0,05) зменшуе активнють утворення АП в результатi ОМБ плазми кровi не тiльки в спонтанних, але i в iндукованих реак^ях, що свiдчить на користь зменшення мета-болiчних резервiв для реалiзацii оксида-тивного стресу та детермЫацп патогене-тичного механiзму ОМБ.
3. Застосування 11Т з використанням антиоксидантних засобiв (АЗ) достовiрно
(р < 0,05) зменшуе активнють утворення КП в резуль- 4. Вплив ИТ з використанням A3 зменшуе стуглнь
TaTi ОМБ плазми кров1 не ттьки в спонтанних, але i окисноУ деструкцп бтюв плазми кров1 та активнють
в iнду кован их реакциях. При цьому, мае мiсце вд окисноУ модиф^ац" нуклеУнових кислот.
Перспективою подальших дослщжень з цieï сутнють достовiрного зменшення L_ в контрольна „
КП проблематики е вивчення та узагальнении aнaлiз
груп пaцiGнтiв, а в групi гащен™ з удосконаленою впливу ИТ з використанням A3 на стан бюенергетики
11Т змен0ення зареестровано (транзиторне) ли0е у клiтин, aктивнiсть анаеробного глiколiзу та окислення
ранньому пiсляоперaцiИному перюдк (у циклi Кребса) серед хворих на РГ3.
ËiTepaTypa
1. AôaKyMOBa O. B. Ôè3èo.norèHecKoe è naTOëorèHecKoe câoôoAHopaAèKaëbHoe OKècëeHèe: cyùHocTb, MeTOAèKa pacno3Ha-BaHMH, TeopeTènecKoe è npaKTèHecKoe 3HaneHne. BpaHeBaHèe è ero MeTOAOëorèfl / IO. B. AôaKyMOBa. - CapaTOB 1996 - 33 c.
2. ApAaMaTcKèé H. A. MeTOAèKa onpeAeëeHèfl ôè3èo.norèHecKoro è naTOëorèHecKoro nepeKècHoro OKèaneHèfl / H. A. ApAa-MaTcKèé, O. B. AôaKyMOBa, E. H. KopcyHOBa // 3KoreH. - 1994 - № 4 - C. 9.
3. BeëeHiHeB I. Ô. ripoAyKTè BiëbHopaAèKaëbHoro nepeKècHoro OKèaneHHfl Ta MeTOAè ïx iAeHTèôiKauiÏ / I. Ô. BeëeHiHeB, 6. Ë. ËeBèUbKèé, C. I. ÊOBaëeHKO // CoBpeMeHHbie npoôëeMb TOKcèKOëorèè. - 2002. - № 4. -C. 9-18.
4. BeëoôopoAOB C. M. ÏnaHèpoBaHèe KëèHèHecKoro èconeAOBaHèfl / C. M. BeëoôopoAOB // Ïpo6.neMb penpoAyKUèè. - 2003. - H. I, № 2. - C. 6-10.
5. TyHcbKèé O. I., flyHaeB B. B., BeëeHiHeB I. Ô. Ta iH. MeTOAè ouiHKè aHTèOKcèAaHTHèx BëacTèBocTeé ôi3ioëoriHHO aKTèB-Hèx cnoëyK npè ¡HiuiioBaHHi BiëbHopaAèKaëbHèx npoueciB y AocëiAax in vitro. MeTOA. peKOM. / O. I. TyHcbKèé, B. B. flyHaeB, I. Ô. BeëeHiHeB [Ta iH.]. - KèÏB : flÔU, 2002. - 26 c.
6. flyôèKaéTèc T. A. CëyHaéHbe è cècTeMaTèHecKèe owèÔKè b ècconeAOBaHèax / T. A. flyôèKaéTèc // Pocc. ceMeéH. BpaH. -
2003. - № 2. - C. 32-37.
7. flyôèHèHa E. E. OKècëèTeëbHafl MOAèôèKauèfl 6eëKOB cbBopoTKè KpoBè HeëOBeKa. MeTOAb ee onpeAeëeHèfl / E. E. flyôèHè-Ha, C. O. BypMècTpoB, fl. A. Xoaob // Bonpocb MeAèUèHcKoé xèMèè. - 1995. - T. 42, № 1. - C. 24-26.
8. EniAeMioëoriHHi MeTOAè BèBHeHHH HeiHôeKuiéHèx 3axBopiBaHb (HaBHaëbHèé nociÔHèK) / B. M. ËexaH, O. B. BopoHeHKO, O. Ï. MaKcèMeHKO. - fl.: APT-ÏPEC, 2004. - 184 c.
9. XMypoB B. O. O6po6Ka AaHèx Ta aHaëi3 pe3yëbTaTiB KëiHiHHèx BènpoôyBaHb ëiKapcbKèx 3aco6iB / B. O. XMypoB, B. I. Maëb-ueB, T. K. GôiMueBa // YKpaÏHcbKèé MeAèHHèé Haconèc. - 2001. - № 6. - C. 34-38.
10. ËèùyK B. A. ÈHôopMaTè3auèH b KëèHèHecKoé MeAèUèHe / B. A. ËèùyK // KëèHèHecKaa èHôopMaTèKa è TeëeMeAèUèHa. -
2004. - № 1. - C. 7-13.
11. CouiaëbHa MeAèUèHa Ta opraHi3aum oxopoHè 3AopoB'n / 3ar. peA. MocKaëeHKO B. M., BopoHeHKO O. B. / ÏiApyHHèK. -TepHoniëb, 2002. - C. 50-75.
12. UbiôèH A. K. KëèHèHecKan 3HaHèMocTb AèarHocTèHecKoro èconeAOBaHèn c no3èuèé AOKa3aTeëbHoé MeAèUèHb / A. K. UbôèH, A. A. floueHKO / 3ApaBOoxpaHeHèe Beëapycè. - 2002. - № 8. - C. 52-55.
13. Sarsunova M. Chromatografia na tenrych vrstvach vo farmacii a v klinicrej biochemii / M. Sarsunova, V. Schwarz, C. Michalec. -Pragha : Vydavatelstvo Osveta, 1980. - 621 p.
14. Shulga N. V. Intraoperative intensive therapy in correction of oxidative homeostasis system of the patient with breast cancer / N. V. Shulga // HayKOBO-npaKTèHHa KOHôepeHium 3 MiœHapoAHOi yHacTi «3HaHeHHH MopôoëoriHHèx HayK Ha cyHacHOMy eTani po3BèTKy MeAèUèHè» (26-27. 11. 2014 p.). - TepHoniëb : ByKOBèHcbKèé AepœaBHèé MeAèHHèé yHiBepcèTeT, 2014. - C. 78-83.
УДК 618. 19-006. 55-08-039. 74:612. 015. 11
1НТЕНСИВНА 1НТРАОПЕРАЦ1ЙНА ТЕРАП1Я ХВОРИХ НА РАК ГРУДНО1 ЗАЛОЗИ: СТАН ОКИСНОГ МО-ДИФ1КАЦМ Б1ЛК1В ПЛАЗМИ ЯК 1НДИКАТОР ЕФЕКТИВНОСТ1 АНТИОКСИДАНТНОГ ПРОТЕКЦЙ
Хижняк А. А., Красносельський М. В., Шульга М. В.
Резюме. Aнaлiз ефективностi удосконаленоУ iнтрaоперaцiИноï iнтенсивноï терапп виявив, що застосуван-ня A3 в системi ИТ характеризуеться досягненням меншоУ aктивностi окисноУ модифiкaцiï бтюв плазми кровi у ранньому пюляоперацмному перiодi та збереженням такого метaболiчного стану i в вiддaленому пюляопера-цiИному перiодi та достовiрно (р < 0,05) зменшуе активнють утворення альдегщних та кaрбонiльних продуктiв окисноУ модифiкaцiï бiлкiв плазми кровi не ттьки в спонтанних, але i в Ыдукованих реак^ях, що свщчить на користь зменшення метaболiчних резервiв для реaлiзaцiï оксислювального стресу.
Ключов1 слова: iнтрaоперaцiИнa iнтенсивнa терaпiя, окислювальниИ гомеостаз, рак грудноУ залози.
УДК 618. 19-006. 55-08-039. 74:612. 015. 11
ИНТЕНСИВНАЯ ИНТРАОПЕРАЦИОННАЯ ТЕРАПИЯ БОЛЬНЫХ НА РАК ГРУДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ: ОКИСЛИТЕЛЬНАЯ ИМОДИФИКАЦИЯ БЕЛКОВ ПЛАЗМЫ КРОВИ КАК ИНДИКАТОР ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИОК-СИДАНТНОЙ ПРОТЕКЦИИ
Хижняк А. А., Красносельський М. В., Шульга М. В.
Резюме. Анализ эффективности усовершенствованноИ интраоперационноИ интенсивноИ терапии (ИИТ) выявил, что применение антиоксиданта в системе ИИТ характеризуется достижением меньшеИ активности окислительноИ модификации белков плазмы крови в раннем послеоперационном периоде с дальнеИшим сохранением такого метаболического состояния в отдалённом переиоде и достоверно (р < 0,05) угнетает активность образования альдегидных и карбонильных продуктов окислительноИ модификации не только в
cnoHTaHHNX, ho m b MHAyUMpoBaHHbix peaKUM^x, hto o6ecneHMBaeT yMeHbineHi/ie MeTa6o.ni/iHecKi/ix pe3epBOB A.™ pea/ii/raaui/ii/i oKcizic.nl/iTe.nbHoro cTpecca.
KnwHeBue c.oBa: i/iHTpaonepaui/ioHHaa 1/iHTeHci/iBHaa Tepani/m, oKi/ic.ni/iTe.nbHbii/1 roMeocTa3, paK rpyAHoi/i xe.ne3bi.
UDC 618. 19-006. 55-08-039. 74:612. 015. 11
Intraoperative Intensive Therapy for Patients with Breast Cancer: State of Oxidative Modification of Plasma Proteins as an Indicator of the Effectiveness of Antioxidant Protection
Khizhnyak A. A., Krasnoselskii N. V., Shulga N. V.
Abstract. Introduction. The effectiveness of treatment of patients with malignant neoplasms depends on the biological characteristics of neoplasms and condition of protective forces of an organism. Redox metabolism (RM) at the oncopathology is investigated quite actively, because its violation on the one hand, regarded as one of the mechanisms of formation and development of cancer, and with the other hand neoadjuvant therapy and radical surgical interventions can be a trigger factors. Exploring the metabolic mechanisms of cancer using the latest biochemical and immunological methods it is proved that oxidative modification of proteins (OMP) and nucleic acids (NA) of plasma can lead to the accumulation of aldehyde (AP) and carbonyl (PC) products, which identification in spontaneous (S) and induced (I) reactions may reflect the effectiveness of intensive therapy.
The aim of the research was to study peculiarities of redox metabolism, in particular the activity of oxidative modification and the degree of degradation of proteins of blood plasma in patients with BC at various intraoperative intensive therapy (IIT).
Materials and methods of the study. The study involved 126 patients with BC (aged 44,6 ± 3,5) with surgical intervention as breast quadrantectomy with lymphodissection, which was stratified on the basis of additional use in the system of IIT antioxidant agents: group "a" (n1 = 57 people - control) and group B (n2 = 69 individuals who were with antioxidant protection). Antioxidants: "Glutelin" (40,0 % intravenously, 10. 0 ml) and "Thiotriazoline" (2,5 % intravenously, 4,0 ml) used in the system of IIT of the anesthetic measures of the radical surgical interventions for BC on the basis of clinic of the Institute of medical radiology named C. P. Grigoriev of NAMS of Ukraine. For examination of patients in pre-operative, early and remote postoperative periods), in addition to clinical methods, a systematic study of the state of RM is performed at the level of three basic subsystems: the OMP and NA, cells bioenergy, enzymatic chain and the POL of the cell membranes and NO-dependent metabolites Study of regularities of OMP and NA in patients with BC performed on the stages of IIT in terms of content of protein components in serum - 2,4-dintervention (DPG) and aldehyde and carbonyl OMP products in spontaneous (S) and induced (I) by iron reactions. Evaluation of OMP were based on a study of the reaction of the oxidized amino acid remains with 2,4-dintervention and formation of DFG. To assess the extent of oxidative degradation was determined (depending on the wavelength of the spectrophotometer) small (X=254 nm) OMB identified in induced reactions (Is), medium (X=270 nm) OMB identified in induced reactions (Ia), large (X=280 nm) OMB identified in induced reactions (Il) and similar rates of spontaneous reactions (Ss, Sa, Sl).
Research results and their discussion. In the study of spontaneous OMP on pre - and postoperative stages revealed that the content of aldehydic products of spontaneous oxidative modification of protein (SAP) in the compared groups of patients at the preoperative stage ranged 78,0-83,0 SU/mg of protein and was not significantly different (according 82,44 ± 1,14 SU/mg of protein and 82,18 ± 0,34 SU/mg of protein, p>0.05). However, already in the early postoperative period in patients of group n2 registered a significant decrease in aldehyde OMP products compared to the operational period (respectively 82,18 ± 0,34 SU/mg of protein and 74,13 ± 0,96 SU/mg of protein) and also compared with patients who did not receive advanced IIT (80,95 ± 1,57 SU/mg of protein and 74,13 ± 0,96 SU/mg of protein). In the late postoperative period was a further significant decrease in levels of aldehyde OMP products among the patients in the comparison groups, but more expressive this decrease is registered among patients with antioxidant intraoperative protection. It is noted that the levels of AP in induced reaction (IAP), in contrast to the patients in the control group among patients with intraoperative antioxidant protection was significantly reduced (pre-operative period 741,6 ± 21,54 SU/mg of protein; early postoperative - 687,0 ± 13,11 SU/mg of protein; remote - 617,9 ± 14,47 SU/mg of protein).
In the study of spontaneous OMP on pre - and postoperative stages we revealed that the content of carbonyl products of spontaneous oxidative modification of protein (SCP) in the compared groups of patients at the preoperative stage ranged 98,0-to 106.0 SU/mg of protein and was not significantly different (respectively 100,0 ± 1,26 SU/ mg of protein and 100,20 ± 0,68 SU/mg of protein, p>0.05). In the early postoperative period in patients of group n2 we registered a significant decrease in carbonyl OMP products compared with the preoperative period (respectively 100,20 ± 0,68 SU/mg of protein and 85,51 ± 0,88 SU/mg of protein) and also compared with patients who did not receive advanced IIT (94. 69 ± 1,63 SU/mg of protein and 85,51 ± 0,88 SU/mg of protein). In the late postoperative period was a further significant decrease in the levels of carbonyl OMP products among the patients in the comparison groups, but more expressive this decrease is registered among patients with antioxidant intraoperative protection.
We need to note that the levels of CP in induced reaction (ICP), in contrast to the patients in the control group among patients with intraoperative antioxidant protection was significantly reduced (preoperative period 681,2 ± 18,51 SU/mg of protein; early postoperative - 578,6 ± 10,8 SU/mg of protein; remote - 585,1 ± 20,40 SU/mg of protein). Thus, IIT using the AO affects the activity of OMP, which is primarily manifested by a permanent decrease in the accumulation of aldehyde and carbonyl products. Whereas, the absence of intraoperative antioxidant protection temporarily reduces the levels of AP in spontaneous reactions, reduces the level of CP and does not affect the decrease in reserves of OMP.
Analysis of the degree of degradation of proteins found that IIT using the AO in the early postoperative period significantly reduces the number of small protein fragments, as in the spontaneous (SD) reactions (in accordance 1,875 ± 0,025 SU/mg of protein to 1,748 ± 0,020 SU/mg of protein, p < 0.05) and at induced conditions (2,161 ± 0,054 SU/mg of protein to 1,927 ± 0,017 SU/mg of protein, p < 0.05).
IIT using the AO in the early postoperative period also significantly reduces the number of large protein fragments, as in the spontaneous (SC) reactions (in accordance with 0,112 ± 0,003 SU/mg of protein to 0,089 ± 0,001 SU/mg of protein, p < 0.05) and at induced (IC) states (0,314 ± 0,004 SU/mg of protein to 0,251 ± 0,004 SU/mg of protein, p < 0.05); which is not registered among the patients in the control group. The levels of 8-medroxypro as indicator of oxidative modified nucleic acids on pre-operative stage among patients compared groups did not differ (respectively was 0,570 ± 0,021 nmol/l and 0,540 ± 0,029 nmol/l, p>0.05) and under the influence of IIT with the use of AO significantly and consistently decreased in the early postoperative - to 0,330 ± 0,020 nmol/l; in the remote period - to 0,262 ± 0,020 nmol/l). In the absence of the AO in the IIT system changes of levels of NA were transient and in the late postoperative period did not differ from pre-operative (in accordance 0,570 ± 0,021 nmol/l and 0,541 ± 0.014 nmol/l, p>0.05).
Conclusions. The effectiveness of the AO in the IIT system is characterized by the achievement of the lower activity of the oxidative modification of proteins of blood plasma in the early postoperative period and maintaining of this metabolic state in the late postoperative period.
Prospective IIT with the use of antioxidant agents significantly (p < 0.05) reduces the activity of formation of AP in the OMP of blood plasma not only spontaneous, but in induced reactions, which gives evidence of the reduction of metabolic reserves for the implementation of oxidative stress and determination of pathogenetic mechanism of OMP.
Prospective IIT with the use of antioxidant agents significantly (p < 0.05) reduces the activity of formation of CP in the OMP of blood plasma not only spontaneous, but in induced reactions. However, there is no significant reduction in ICP in the control group of patients and in patients with advanced IIT ICP decrease registered (transient) only in the early postoperative period.
The influence of IIT with AO reduces the degree of oxidative degradation of proteins of blood plasma and the activity of oxidative modification of nucleic acids.
Further research on this topic is the study and pooled analysis of the impact of IIT with AO on the status of bioenergy of cells, the activity of anaerobic glycolysis and oxidation (the Krebs cycle) among patients with BC.
Keywords: intraoperative intensive therapy, oxidative modification, breast cancer.
Рецензент - д. мед. н. Шкурупй Д. А.
Стаття надшшла 9. 09. 2014 р.
