CC BY
107
Оригинальная статья
Г.Ф. Семенова, Е.В. Комарова, А.С. Потапов, А.В. Петрова, В.М. Шищенко, С.В. Петричук
Научный центр здоровья детей РАМН, Москва
Информативность основного энергообмена митохондрий лимфоцитов периферической крови у детей с хроническими запорами
СТАТЬЯ ПОСВЯЩЕНА ИЗУЧЕНИЮ СОСТОЯНИЯ КЛЕТОЧНОГО МЕТАБОЛИЗМА У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ЗАПОРОМ, ПО АКТИВНОСТИ ДВУХ МИТОХОНДРИАЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ: СУКЦИНАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ (СДГ) И а-ГЛИЦЕРОФОСФАТДЕ-ГИДРОГЕНАЗЫ (а-ГФДГ), ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ ПРИ ЦИТОХИМИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ В СВЕТОВОМ МИКРОСКОПЕ. ПРОВЕДЕНО ОБСЛЕДОВАНИЕ 79 ДЕТЕЙ, НА ОСНОВАНИИ КОТОРОГО ВЫЯВЛЕНО, ЧТО У ВСЕХ ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ЗАПОРОМ ОТМЕЧАЕТСЯ ВЫРАЖЕННОЕ СНИЖЕНИЕ АКТИВНОСТИ ОБЕИХ ДЕГИДРОГЕНАЗ, УКАЗЫВАЮЩЕЕ НА СНИЖЕНИЕ ОСНОВНОГО ЭНЕРГООБМЕНА МИТОХОНДРИЙ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ. ПРОВЕДЕННЫЙ КОРРЕЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ ПОКАЗАЛ, ЧТО ДЛИТЕЛЬНОСТЬ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАПОРОВ И ВОЗНИКАЮЩИЕ ПРИ ЭТОМ ИЗМЕНЕНИЯ В ТОЛСТОЙ КИШКЕ ОТРИЦАТЕЛЬНО СКАЗЫВАЮТСЯ НА АКТИВНОСТИ ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ В КЛЕТКЕ. ТАКИМ ОБРАЗОМ, ЧЕМ ДОЛЬШЕ СУЩЕСТВУЕТ ПАТОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС В ОРГАНИЗМЕ, ТЕМ БОЛЬШЕ СНИЖЕН ЭНЕРГООБМЕН В МИТОХОНДРИЯХ, ПРИВОДЯЩИЙ К СНИЖЕНИЮ КОМПЕНСАТОРНЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ОРГАНИЗМА В ЦЕЛОМ.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ДЕТИ, ХРОНИЧЕСКИЕ ЗАПОРЫ, СУКЦИНАТДЕГИДРОГЕНАЗА ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ, ДИАГНОСТИКА.
В последнее время исследование нарушений клеточного энергообмена, участвующих в развитии различных патологических состояний привлекает внимание врачей различных специальностей. Клиническая цитохимия рассматривает клетку как самостоятельную структуру, отражающую свойства целого организма. Подавляющее большинство цитохимических методик выполняется на лимфоцитах и нейтрофилах, при этом лимфоциты рассматриваются не только как клетки иммунной защиты, но и как элементы единой информационной системы, отражающей состояние здоровья организма и процесс его развития, поскольку клетки крови принимают непосредственное участие в процессах морфогенеза, защитных, трофических, регуляторных и других реакциях [1]. В клетках крови происходит весь основной комплекс химических превращений, свойственных человеческому организму [2, 3]. Интенсивность метаболических (обменных) процессов в клетках характеризуется активностью ферментов. В клинических работах исследуется активность различных ферментов лимфоцитов и нейтрофилов: сукцинатдегидрогеназы (СДГ), митохондриальной а-глицерофосфатдегидрогеназы (а-ГФДГ), гиалоплазматичес-кой а-ГФДГ (а-ГФДГ, НАД), дигидрооротатдегидрогеназы (ДДГ), глутаматдегид-рогеназы (ГДГ), щелочной фосфатазы, кислой фосфатазы, миелопероксидазы и др. В настоящее время в качестве основного теста для оценки состояния ор-
Контактная информация:
Потапов Александр Сергеевич, доктор медицинских наук, заведующий гастроэнтерологическим отделением с гепатологической группой
Научного центра здоровья детей РАМН Адрес: 119991, Москва,
Ломоносовский проспект, д. 2/62, тел. (495) 134-15-82 Статья поступила 01.12.2006 г., принята к печати 08.06.2007 г.
G.F. Semionova, Ye.V. Komarova, A.S. Potapov,
A.V. Petrova, V.M. Shishchenko, S.V. Petrichuk
Scientific Center of Children's Health, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow
Informative energy exchange of peripheral lymphocyte blood mitochondria in children with chronic constipation
THE ARTICLE DISCUSSES THE STUDY OF CELL METABOLISM CONDITION IN CHRONIC CONSTIPATION CHILDREN BASED ON THE ACTIVITIES OF THE TWO MITOCHONDRION ENZYMES, SUCCINATE DEHYDROGENASE AND a-GLYC-EROPHOSPHATE DEHYDROGENASE DETECTED IN CYTOCHEMICAL ANALYSIS OF BLOOD LYMPHOCYTES OVER THE LIGHT MICROSCOPE. THE STUDY INVOLVED 79 CHILDREN AND PROVED THAT IN CHILDREN WITH CHRONIC CONSTIPATION THE ACTIVITY OF BOTH DEHYDROGENASES GOES DOWN, WHICH DEMONSTRATES THE APPARENT REDUCTION OF ENERGY EXCHANGE OF BLOOD LYMPHOCYTE MITOCHONDRIA. THE CORRELATION ANALYSIS SHOWED THAT THE DURATION OF CHRONIC CONSTIPATION AND THE ASSOCIATED CHANGES IN THE LARGE INTESTINE NEGATIVELY AFFECT THE ENERGY PROCESSES IN CELLS. THUS THE LONGER THE PATHOLOGY GOES ON, THE SMALLER THE ENERGY EXCHANGE IN MITOCHONDRIA IS RESULTING IN REDUCED COMPENSATORY ABILITIES IN THE BODY.
KEY WORDS: CHILDREN, CHRONIC CONSTIPATION, SUCCINATE DEHYDROGENASE OF BLOOD LYMPHOCYTES, DIAGNOSTICS.
ганизма наиболее часто используют показатели ферментного статуса лимфоцитов по активности СДГ, а-ГФДГ и кислой фосфатазы.
Многочисленными работами показано, что при действии патогенных агентов или факторов «риска» изменяется энергетический обмен клеток. Так, например, контакт с возбудителем инфекции у практически здоровых людей вызывает, как правило, кратковременную активацию дегидрогеназ с последующим возвращением показателей к исходному состоянию. Более длительное или повторное воздействие вызывает гиперактивацию дегидрогеназ значительной части лимфоцитов с последующим снижением активности дегидрогеназ ниже показателей здорового индивида в спокойном состоянии. Депрессия СДГ, в свою очередь, способствует несостоятельности последующего ответа лимфоцитов на многие внешние воздействия. В экспериментальных и клинических исследованиях показаны корреляции активности дегидрогеназ лимфоцитов крови с функциональным состоянием клеток внутренних органов. В частности, ферментный статус СДГ лимфоцитов крови коррелирует с активностью этого фермента в клетках слизистой кишечника при болезни Гиршпрунга и слизистой оболочки желудка при хронических гастритах у детей [4, 5]. Цель настоящей работы — изучить активность СДГ и а-ГФДГ у детей, страдающих хроническими запорами.
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
Под наблюдением находилось 79 детей в возрасте от 3 до 15 лет с хроническими запорами разной степени тяжести. Всем детям проведено клиническое обследование включающее: сбор анамнеза, физикальное обследование, общеклинические методы, ультразвуковое исследование кишечника, ирригографию.
При поступлении жалобы на задержку стула свыше трех дней предъявляли 62% детей, из них длительность заболевания до 3 лет была у 10,3% , 4-6 лет — у 41,7% и свыше 6 лет — у 9,3 % детей. У 36% детей отмечалось каломаза-ние. При ректальном обследовании у 31% детей был повышен тонус анальных сфинктеров. У всех детей определялось расширение ампулы прямой кишки разной степени выраженности. Позыв на дефекацию был сохранен лишь у 21% больных.
При исследовании нижних отделов толстой кишки по данным УЗИ наблюдалось умеренное расширение прямой кишки в 73% случаев, в 26% — значительное. У 67% детей выявлено утолщение стенки прямой кишки за счет мышечного слоя и у 19,7% детей его неоднородность. Выявлена прямая корреляционная зависимость изменений в мышечном слое стенки прямой кишки и длительности течения хронических запоров (Р = 0,81; р < 0,01). При давности заболевания до 3 лет на эхограммах определялось умеренное расширение прямой кишки без утолщения ее стенки; более трех лет — выраженное расширение ампулы прямой кишки с утолщением ее стенки за счет гипертрофии мышечного слоя; при сроке более 5 лет регистрировались как функциональные, так и структурные изменения: гипертрофия мышечного слоя с участками склероза, значительное расширение ампулы прямой кишки. При проведении рентгенологического исследования толстой кишки отмечались изменения в виде расширения ампулы прямой кишки в 87% случаев, снижение гаустрации — в 37%, в 58% — провисание поперечно-ободочной кишки, в 63% — недостаточное опорожнение кишечника. В 64% случаев отмечался толсто-тонкокишечный рефлюкс, долихосигма выявлялась у 75% больных.
Цитохимическое исследование лимфоцитов крови в световом микроскопе было выполнено всем обследованным детям и включало определение активности двух митохондриальных ферментов: СДГ — маркера цикла Кребса митохондрий и основного энергообмена клетки, а-ГФДГ — челночного шунта, соединяющего гликолиз и цикл Кребса для полного окисления пирувата в митохондриях, а также отражающего обмен фосфолипидов. Дегидрогеназы изучали по методу Р.П. Нарциссова [6]. Анализ активности дегидрогеназ включал расчет параметров распределения: средней активности, коэффициентов вариации, асси-метрии и эксцесса, а также относительной энтропии информации.
Кроме светового микроскопирования продукты реакции при выявлении активности СДГ исследовали в анализаторе изображения клетки «ДиаМорф» цитоморфоденсито-метрическим методом. Если в световом микроскопе подсчитывали количество гранул продукта реакции — формазана независимо от их размера и интенсивности ферментной реакции, то в анализаторе исследовали размеры митохондрий (больше размер митохондрий, больше количество ферментов), их оптическая плотность (больше плотность, больше активность фермента), разнородность митохондрий по оптической плотности, размеры и оптическую плотность зон цитоплазмы, окружающих митохондрии — зоны регуляции. Измеряли отдельно параметры свободно лежащих гранул и гранул, объединенных в кластеры, энергетическая мощь которых в норме превышает отдельно лежащие митохондрии. Рассчитывали интегральные показатели и общий продукт реакций СДГ в каждой анализируемой клетке.
Результаты исследований обработаны методами стандартной статистики с использованием прикладных пакетов программ БТАИБИС 6.0, «STATGРAPH-2.6. Взаимосвязь между признаками оценивали с помощью метода множественной пошаговой регрессией.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Данные цитохимических исследований исходного состояния клеточного метаболизма у детей с хроническими запорами сопоставляли с показателями метаболической активности лимфоцитов периферической крови условно здоровых детей (рис. 1). За нормативные показатели принимали данные, полученные в лаборатории цитохимии Научного центра здоровья детей РАМН при обследовании здоровых детей [7].
На основании полученных результатов установлено, что у 54% детей с хроническими запорами средняя активность СДГ статистически достоверно ниже уровня условно здоровых детей (р < 0,05). У 46% детей снижена активность а-ГФДГ (р < 0,05) (рис. 1). Анализ параметров распределения лимфоцитов по активности ферментов выявил небольшие сдвиги в структуре популяции клеток (табл. 1). У детей с хроническими запорами на фоне сниженной средней активности обеих дегидрогеназ наблюдали небольшой пул активированных клеток, о чем свидетельствовало достоверное увеличение коэффициента асимметрии (А > 0,5; р < 0,05). Появление этого пула свидетельствует о некоторой компенсации процесса. В популяции лимфоцитов отмечали снижение клеточного разнообразия (снижение относительной энтропии информации), которое происходит в условиях гипоксии.
По данным, представленным в табл. 1 видно, что у детей с хроническими запорами отмечается достоверное снижение уровня показателей основного энергообмена в лимфоцитах крови. Снижена средняя активность СДГ с
ВОПРОСЫ СОВРЕМЕННОЙ ПЕДИАТРИИ/ 2007/ ТОМ 6/ № 3
Оригинальная статья
но количество молекул СДГ), а так же интенсивность ферментного катализа (оптическая плотность). В табл. 2 представлены данные цитоморфоденситометрического анализа.
У детей с хроническим запором снижена общая оптическая плотность в клетке, оптическая плотность в кластерах, интегральная оптическая плотность как свободно лежащих митохондрий, так и объединенных в кластеры. Общая активность свободных митохондрий снижена на 27%, в кластерах — на 43% (рис. 3), суммарная активность всех митохондрий снижена на 33% по сравнению с показателями здоровых детей. Патологический процесс приводит к снижению общей активности митохондрий, но в большей степени затрагивает наиболее интенсивно работающие митохондрии-кластеры, обеспечивающие компенсацию нарушенного энергообмена при развитии напряжения или при патологических состояниях.
При проведении множественной пошаговой регрессии между данными проведенного обследования и показателями ферментного статуса лимфоцитов у детей, страдающих хроническим запором, установлено, что изменения ферментного статуса лимфоцитов по активности СДГ коррелируют с длительностью и тяжестью заболевания (чем продолжительнее заболевание, тем глубже депрессия основного фермента энергетического обмена). Хронический запор, осложненный энкопрезом, в еще большей степени сопровождается снижением активности основного энергообмена (множественный коэффициент корреляции Р = 0,75, р < 0,01). Данная зависимость справедлива как для свободных митохондрий (Р = 0,72, р < 0,01), так и для митохондрий в кластерах (Р = 0,63, р < 0,01). Так, если продолжительность заболевания составляет 3 года, то активность энергетических процессов снижается на 12%. Если заболевание осложняется энкопрезом, то активность СДГ снижается еще на 24%. Если продолжительность заболевания составляет 5 лет, то активность энергетических процессов снижается на 19 и на 43,4% соответственно. Таким образом, можно сказать, что каждый год заболевания приводит к снижению активности энергетических процессов в организме ребенка, особенно при наличии энкопреза.
Выраженность изменений по эхографической картине толстой кишки за счет утолщения мышечного слоя у больных с хроническими запорами коррелирует с уровнем
Таблица 1. Показатели ферментного статуса лимфоцитов периферической крови у детей с хроническими запорами
Показатели Дети с хроническими запорами (М ± т) п = 79 Здоровые дети [7] (М ± т) п = 50
Средняя активность СДГ (SQ) 17,932 ± 0,268* 21,00 ± 0,24
Коэффициент асимметрии ^А) 0,569 ± 0,051** 0,40 ± 0,05
Коэффициент эксцесса ^Е) -0,173 ± 0,095* -0,70 ± 0,09
Коэффициент вариации ^) 24,377± 0,708 22,81 ± 0,75
Коэффициент относительной энтропии информации ^Н) 0,715 ± 0,006* 0,751 ± 0,006
Средняя активность а-ГФДГ (GQ) 5,707 ± 0,281* 8,12 ± 0,35
Коэффициент асимметрии (GQ) 0,859 ± 0,055* 0,37 ± 0,06
Коэффициент эксцесса ^Е) 0,542 ± 0,175* -0,46 ± 0,09
Коэффициент вариации (GV) 68,837 ± 1,857* 47,01 ± 1,86
Коэффициент относительной энтропии информации ^Н) 0,654 ± 0,008* 0,701 ± 0,07
Примечание:
* — р < 0,05; ** — р < 0,01, между группами.
Рис. 1. Гистограммы распределения активности дегидрогеназ лимфоцитов у детей с хроническими запорами (световая микроскопия)
Активность СДГ (гр/лф) Дети с хронически ми запорами ■ ■
Здоровые дети [7]
Активность а-ГФДГ (гр/лф)
Дети с хроническими запорами
Здоровые дети [7]
21,0 гр/лф. (гранулы на лимфоцит) до 17,9 гр/лф. и а-ГФДГ с 8,0 до 5,7 гр/лф.
Изображения клеток у детей с хроническими запорами при выявлении активности СДГ отличались от клеток условно здоровых по организации популяций митохондрий. На рис. 2. видно уменьшение числа гранул и интенсивности их окрашивания у детей, страдающих хроническим запором в сравнении с условно здоровыми детьми.
В клетках детей с хроническими запорами снижено не только количество митохондрий, но и их размеры (сниже-
50
Клетки ребенка с хроническими запорами
Клетки здорового ребенка [7]
Si
Таблица 2. Цитоморфоденситометрические показатели митохондриальной активности лимфоцитов у детей с хроническими запорами (по активности СДГ)
Цитоморфоденситометрические показатели Дети с хроническими запорами (М ± m) п = 79 Здоровые дети [7] (M ± m) n = SC
Активность отдельных митохондрий
Число митохондрий (АА1М) 14,04 і 0,22** 15,5 і 0,3
Площадь митохондрий (АА) 120,79 і 2,41** 154,6 і 3,2
Оптическая плотность (АО) 21,01 і 0,14** 22,23 і 0,15
Расстояние между митохондриями (ЕА) 17,23 і 0,62 19,0 і 0,65
Площадь зон регулирования митохондрий (РА) 582,33 і 22,18 682,5 і 11,1
Интегральная оптическая плотность митохондрий (А1) 2845,34 і 69,2** 3871 і 98
Общий продукт реакции в отдельных митохондриях (Ь1окА) 39973 і 619 ** 54520 і 1039
Активность объединенных митохондрий (кластеров)
Число митохондрий в кластере (GAN) 5,12 і 0,12* 7,16 і 0,18
Площадь митохондрий в кластере (GA) 148,30 і 4,66 181,10 і 8,26
Оптическая плотность митохондрий в кластере (GO) 30,28 і 0,26 * 32,15 і 0,25
Интегральная оптическая плотность (GI) 4456 і 154* 5838 і 273
Общий продукт реакции (blokG) 17856 і 869 * 31284 і 653
Общий продукт реакции всех митохондрий (Prod) 57829 і 763* 85805 і 1477
Примечание:
* — р < 0,01 между группами.
снижения активности СДГ в лимфоцитах периферической крови (множественный коэффициент корреляции Р = 0,81, р < 0,01).
Регистрируется статистически достоверная корреляционная зависимость между снижением уровня активности СДГ и суммарным индексом изменений на ирригограммах у обследованных детей: расширение ампулы прямой кишки, усиление гаустрации, дополнительные петли сигмовидной кишки, спазмированность нижних отделов толстой
кишки, неполное опорожнение кишки (множественный коэффициент корреляции Р = 0,69, р < 0,05).
Дети с хроническими запорами по цитохимической картине крови, характеризуются снижением основного энергообмена митохондрий в лимфоцитах периферической крови по активности СДГ и а-ГФДГ. Снижение а-ГФДГ может свидетельствовать об усилении процессов гликолиза с образованием лактата и гипоксемии. Уменьшение активности СДГ отражает снижение энергообеспе-
ВОПРОСЫ СОВРЕМЕННОЙ ПЕДИАТРИИ/ 2007/ ТОМ 6/ № 3
Оригинальная статья
Рис. 3. Соотношение активности отдельных митохондрий и кластеров у детей с хроническими запорами и здоровых детей
чения, активности синтетических, антигипоксических и ан-тиоксидантных процессов. Наибольшие изменения затрагивают кластерные образования митохондрий, которые призваны обеспечивать компенсацию нарушенного энергообмена при патологических состояниях. Очевидно, именно оптимизация кластеров будет в наибольшей степени способствовать выздоровлению больного. Корреляционный анализ показал, что длительность хронических запоров и возникающие при этом изменения в толстой кишке отрицательно сказываются на активности энергетических процессов в клетках. Чем дольше существует патологический процесс в организме и чем более выражены изменения в структуре и функции толстой кишки, тем больше снижен энергообмен в митохондриях, приводящий к снижению компенсаторных возможностей организма в целом.
Таким образом, исследование ферментного статуса лимфоцитов периферической крови по активности СДГ и а-ГФДГ является самостоятельным тестом оценки степени тяжести патологического процесса. Чем ниже активность митохондриальных ферментов, тем тяжелее клиническая картина заболевания.
10000080000 -60000 -40000 -20000 -
Дети с хроническими Здоровые дети [7]
запорами
Кластеры
□ Отдельные митохондрии
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Нарциссов Р.П. Диагностические и прогностические возможности клинической цитохимии в педиатрии // Вестник Гиппократа. — Ростов-на-Дону. — 1998. — № 1. — С. 10-26.
2. Бабаева А.Г. Лимфоидная ткань и восстановление органов. Условия регенерации органов млекопитающих. — М.: Медицина, 1972. — С. 35-41.
3. Бабаева А.Г., Шахламов В.А., Алтухова В.И., Гиммельфарб Е.И. Лимфоцитарно-эпителиальные контакты в компенсаторно гипертрофирующейся почке у мышей. Актуальные проблемы общей и частной патологии. Сб.научных трудов. — М., 1998. — С. 146-148.
4. Суслова Г.Ф., Атакулов О.Д., Ленюшкин А.И. и др. Патогенетическое лечение болезни Гиршпрунга у детей // Педиатрия. — 1991. — № 2. — С. 60-65.
5. Суслова Г.Ф. Динамика ферментного статуса клеток и тканей при болезнях органов пищеварения: Автореф. дис. ... докт. биолог. наук. — 1991.
6. Нарциссов Р.П. Применение п-нитротетразолия фиолетового для количественной цитохимии дегидрогеназ лимфоцитов человека // Архив анат., гистол. и эмбр. — 1969. — № 5. — С. 85-87.
7. Петричук С.В., Шищенко В.М., Духова З.Н. и др. Диагностические и прогностические возможности клинической цитохимии. — М., 2005. — 74 с.
Знаменательные и юбилейные даты из истории медицины
Уильям Гарвей родился в 1578 г. в Фолкстоне. В 1593 г. был принят в Киз-колледж Кембриджского университета. Первые три года учебы Гарвей посвятил изучению «дисциплин, полезных для врача» — классических языков (латыни и греческого), риторики, философии и математики. Особенно его интересовала философия. Следующие три года Гарвей изучал дисциплины, непосредственно относящиеся к медицине. В то время в Кембридже это изучение сводилось, в основном, к чтению и обсуждению произведений Гиппократа, Галена и других древних авторов. Иногда устраивались анатомические демонстрации; преподаватель естественных наук обязан был делать это каждую зиму, а Киз-кол-ледж имел разрешение проводить два раза в
год вскрытия тел казненных преступников. В 1597 г. Гарвей получил звание бакалавра, а в октябре 1599 г. покинул Кембридж и, по обычаям того времени, для усовершенствования в образовании отправился в Падую.
Медицинская школа в Падуе была в то время на вершине славы. 25 апреля 1602 г. Гарвей получил степень доктора медицины и вернулся в Лондон. 14 октября 1609 он был зачислен в штат престижной больницы Св. Варфоломея. В течение двадцати лет Гарвей исполнял обязанности врача больницы, несмотря на то, что его частная практика в Лондоне постоянно расширялась.
В 1628 г. был опубликован труд Гарвея «Анатомическое исследование о движении сердца и крови у животных». В этой книге Гарвей подробно описал работу сердца, выделил малый и большой круги кровообращения. Измерив величину систолического объема, частоту сокращений сердца и общее количество крови в теле овцы, Гарвей доказал, что за 2 минуты вся кровь должна пройти через сердце, а в течение 30 минут через него проходит количество крови, равное весу животного. Отсюда следовало, что, вопреки утверждениям Галена о поступлении к сердцу все новых и новых порций крови от вырабатывающих ее органов, кровь возвращается к сердцу по замкнутому циклу, по выражению Гарвея, «циркулирует». Замкнутость же цикла обеспечивают мельчайшие трубочки — капилляры, соединяющие артерии и вены. Он писал, что во время сокращения сердца кровь из левого желудочка поступает в аорту, а оттуда по сосудам все меньшего и меньшего сечения доходит до всех уголков тела. Наряду с этим, Гарвей доказал, что сердце ритмически бьется до тех пор, пока в организме теплится жизнь, причем после каждого сокращения сердца наступает короткий
перерыв в его работе, во время которого этот важный орган отдыхает. Правда, Гарвей не мог определить, зачем нужно кровообращение: для питания или для охлаждения организма? Взгляды Гарвея встретили острую критику многих врачей, прежде всего анатомов. Поскольку Гарвей рассматривал проблему кровообращения, или, по-латыни, с1гси!а1:ю Ба^Ыгнв, — его противники прозвали Гарвея «с1гси!аИог». Прозвище весьма обидное, так как по-латыни оно значит «шарлатан, обманщик». Споры о кровообращении вышли далеко за пределы круга специалистов и стали темой комедии Мольера «Мнимый больной».
В 1646 г. Гарвей издал в Кембридже два анатомических очерка «Исследования кровообращения», а в 1651 г. вышел его второй фундаментальный труд — «Исследования о зарождении животных». В нем обобщались результаты многолетних исследований Гарвея, касающихся эмбрионального развития беспозвоночных и позвоночных животных, а также была сформулирована теория эпигенеза. Гарвей утверждал, что яйцо есть общее первоначало всех животных и все живое происходит из яйца. Исследования Гарвея по эмбриологии послужили мощным стимулом к развитию теоретического и практического акушерства, а также полностью опровергли идею самозарождения, согласно которой всякого рода «нечисть» и никому не нужные насекомые, являющиеся бичом человечества, возникают сами по себе.
В 1654 г. Гарвей был избран президентом Коллегии врачей, однако отказался от этой почетной должности, сославшись на преклонный возраст. За научные достижения ему при жизни был поставлен памятник в Королевском колледже врачей в Лондоне.
Умер Гарвей в Лондоне в 1657 г., когда ему исполнилось 79 лет.
