CC BY
52
УДК 616.- 002.5 - 036.15 - 053.2:612.017.1 Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
9. International Organization for Standardization. ISO 1567:1999 Dentistry-Denture base polymers. Geneva: International Organization for Standardizations. - 1999.
10. Jagger D. C., Harrison A., Jandt K. D. The reinforcement of dentures // J. Oral. Rehabil. - 1999. - Vol. 26. - P. 185-194.
11. John J., Gangadhar S. A., Shah I. Flexural strength of heat-polymerized polymethyl methacrylate denture resin reinforced with
glass, aramid, or nylon fibres // J. Prosthet. Dent. - 2001. - Vol. 86. № 4. - P. 424-427.
12. Vallittu P. K. Flexural properties of acrylic resin polymers reinforced with unidirectional and woven glass fibers // The Journal of Prosthetic Dentistry - 1999. - Vol. 81. № 3. - P. 318-326.
Поступила 21.09.2009
А. Е. ДОРОШЕНКОВА1, Е. Е. АНОРИНА1, Н. В. СТАВИЦКАЯ1, Н. X. ТХАКУШИНОВА2
информативность иммунологических показателей КАК ИНДИКАТОРОВ АКТИВНОСТИ ЛАТЕНТНОЙ ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ИНфЕКЦИИ У ДЕТЕЙ
Кафедра фтизиопульмонологии КГМУ,
350040, г. Краснодар, ул. Айвазовского, 95. E-mail: stavitskaya@mail.ru;
2ГУЗ СКДИБ,
350012, г. Краснодар, ул. Красных партизан, 6/5
Изучены показатели протективного клеточного иммунитета ex vivo у детей с латентной туберкулезной инфекцией в сопоставлении с результатами кожного туберкулинового теста. Обнаружены однотипные иммунологические изменения в ответ на микобактериальную инфекцию у детей с гиперергической реакцией на туберкулин и в случаях нарастающей туберкулиновой чувствительности, заключающиеся в угнетении Т-клеточного звена и усилении функциональной активности В-систе-мы, что не позволяет судить об угрозе прогрессирования латентной туберкулезной инфекции на индивидуальном уровне. В результате исследования установлено, что достоверным показателем недостаточной резистентности к прогрессированию туберкулезной инфекции является низкий уровень цитокинового индекса (<2), отражающего усиление Т1п2-опосредованного иммунного ответа по соотношению ключевых цитокинов: IFNT/IL4; IL-18/IL-10.
Ключевые слова: туберкулез, дети, цитокины.
A. Ye. DOROSHENKOvA1, Ye. Ye. ANORINA1, N. V. STAVITSKAYA1, N. Ch. THACHUSHINOVA2
THE INFORMATIVE VALUES OF IMMUNOLOGICAL TESTS AS INDICATORS OF ACTIVITY OF LATENT TB-INFECTION IN CHILDREN
1Department of Phtysiopneumology of Kuban State Medical University,
Russia, 350040, Krasnodar, str. Aivazovskogo, 95. E-mail: stavitskaya@mail.ru;
2Clinical Jnfection hospital for children,
Russia, 350012, Krasnodar, street Red the guerrilla, 6/5
Tests of protective cell immunity ex vivo in children with latent TB-infection were studied in comparison with the results of the tuberculin skin test. Identical immunological changes were observed in response to TB-infection - suppression of T-cell system and increasing B-system in children with hyperergical reaction to tuberculin and in cases with increasing tuberculin sensibility. This does not allow of assessing the threat of the TB-infection in individuals.
The investigation proved that the reliable indication of insufficient resistance to TB-infection is the low level of cytokine index (< 2,0), which reflects the increase of TH2 immune response according to the ratio of key cytokines: IFNY/ IL-4; IL-18/ IL-10.
Key words: tuberculosis, children, cytokines.
Туберкулез относится к реактивным иммунологически зависимым заболеваниям [10]. Известно, что основная роль в защите организма от туберкулезной инфекции принадлежит клеточному иммунитету [1, 2, 8, 9, 6]. Патогенетическая инертность микобактерий туберкулеза нарушается макроорганизмом, который после иммунологической перестройки провоцирует ги-перергическую реакцию против возбудителя. Вместе с тем, если деструкция опережает репарацию, акцент смещается в пользу патогенеза, часто принимая необратимый характер [3, 4, 12].
Широко распространенным методом раннего выявления туберкулезного инфицирования у детей являет-
ся туберкулинодиагностика с ежегодной постановкой внутрикожной пробы Манту. Однако большинство авторов как у нас в стране, так и за рубежом обращают внимание на малую информативность кожного туберкулинового теста в разграничении латентной туберкулезной инфекции и туберкулеза. Так, по данным Е. С. Овсянкиной и соавт. [5], заболевшие дети выявляются по результатам туберкулинодиагностики не более чем в 10% случаев. Этот показатель еще ниже по наблюдениям М. Ра1 и D. Menzies [13] и составляет 1,7%.
В последние годы многие авторы придерживаются гипотезы о нарушении соотношения между реакциями ТЬИ и ТЬ|2 как одной из причин, лежащих в основе про-
грессирования первичной туберкулезной инфекции или развития рецидивов этого заболевания [11, 14, 15, 10].
Цель данной работы - установить динамичность взаимоотношений между M. tuberculosis и макрорганиз-мом инфицированных детей путем многофакторного анализа иммунологического гомеостаза.
Материалы и методы исследования
Под наблюдением находилось 317 детей, из которых составлены следующие группы:
1-я — 85 учитывались в VIA группе диспансерного наблюдения (ДН) по поводу конверсии туберкулиновой чувствительности;
2 — 74 из V^ группы ДН, поскольку у них отмечалась высокая реакция на туберкулин — инфильтрат 15-17 мм и более, а также везикулонекротический эффект независимо от размеров ответной реакции;
3 — 81 состоял в VIB группе ДН по поводу усиливающейся туберкулиновой чувствительности;
4 — 77 взятых на учет в IIIA группу ДН с малыми остаточными туберкулезными изменениями (ОТИ) в виде одиночных кальцинатов во внутригрудных лимфатических узлах, что принято считать показателем присутствия в организме микобактерий туберкулеза в течение 2 и более лет без прогрессирования - «скрытая инфекция».
Все дети были вакцинированы, 39 - ревакцинированы вакциной BCG с хорошо выраженными постпрививочны-ми рубчиками в 95,8% случаев. У всех детей проводили общепринятый комплекс клинико-лабораторного обследования с применением обязательных, дополнительных и факультативных методов исследования. Общеклиническое обследование включало изучение анамнеза жизни ребенка, анамнеза болезни и туберкулиновой чувствительности, а также физикальные методы.
Туберкулиновая чувствительность определялась с помощью пробы Манту с 2 ТЕ PPD-L, реакция оценивалась согласно Приказу МЗ и СР РФ от 2003 года № 109.
Иммунологические исследования проводились на кафедре аллергологии и клинической иммунологии Кубанского государственного медицинского университета и иммунологической лаборатории Института аллергии и астмы КГМУ. Группой контроля служили здоровые дети, не инфицированные микобактериями туберкулеза, — 30 человек.
Мононуклеары периферической крови выделялись из гепаринизированной крови общепринятым методом на центрифуге РС-6 в градиенте плотности фиколл-пак
(плотность - 1077-78) (фирма «Pharmacia», Швеция). После 3-кратной отмывки в среде 199 лейкоциты ре-суспендировали в среде RPMI 1640 (фирма «Serva», Германия). Культивирование проводилось в течение 9 суток в 96-луночных планшетах в среде RPMI 1640, в концентрации 3x105 клеток на лунку и объеме 150 мкл в атмосфере, содержащей 5% CO2, при 37° С и 96%-ной влажности. Популяционный и субпопуля-ционный состав лимфоидных клеток периферической крови регистрировали с использованием моноклональных антител к дифференцировочным антигенам: CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+ (ООО «Сорбент», Москва) с детекцией на проточном цитофлуориметре FAXSCAN (фирма «Becton Dickinson», США).
Для оценки иммунологической реактивности применяли комплекс унифицированных тестов: подсчет абсолютного и относительного количества СD3+-лимфоцитов, иммунорегуляторных субпопуляций СD4+, СD8+-лим-фоцитов, CD16+ (NK-клеток), CD19+ (В-лимфоцитов), определение индекса СD4+/СD8+. Концентрацию IL-4, IL-10, IL-18 и IFN-Y в сыворотке крови определяли им-муноферментным методом с использованием наборов CYTELISA™ (США).
Оценку результатов проводили на иммунофермен-тном анализаторе «ANTHOS 2010» (фирма «Becton Dickinson», США).
Статистическая обработка полученных результатов проводилась методом вариационной статистики и корреляционного анализа с помощью программы «Microsoft Excel 2003» («Windows XP»). Для выявления достоверности различий использовали критерий Стьюдента.
Результаты и их обсуждение
С учетом примерно одинакового возрастно-полового состава внутри выделенных групп иммунологические тесты оценивались по каждой группе отдельно. Количественные показатели популяционного и субпо-пуляционного составов лимфоидных клеток периферической крови во всех группах наблюдаемых детей оказались однотипными.
Достоверное снижение общего количества Т-лимфо-цитов ^D3+) отмечено только у пациентов VIB группы ДН, то есть при длительном воздействии микобактерий туберкулёза на организм. Наряду с этим у них снизилось количество Т-лимфоцитов-хелперов ^D4+), но повысилось содержание СD8+-лимфоцитов и, соответственно,
Таблица 1
Уровень цитокинов, характеризующих функциональную активность ТМ-лимфоцитов у детей, инфицированных микобактериями туберкулёза, а также имеющих знаки спонтанного излечения ТВ (в сыворотке крови, М±т, рд/т1)
Группы ДН Число детей Характер цитокинов и их показатели
IFN-Y IL-18
VA А1 47 58,2±2,1 42,8±1,7
а2 38 33,4±2,7 36,6±1,6
УІБ 74 41,1±2,2 47,3±1,8
VIB 81 39,1±3,0 32,7±1,5
IIIA Аі 42 54,6±2,7 49,8±1,4
А2 35 35,6±3,1 36,3±1,7
Здоровые неинфицированные дети 30 18,4±3,2 8,4±1,9
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
Уровень цитокинов, характеризующих функциональную активность ТМ-пимфоцитов у детей, инфицированных микобактериями туберкулёза, а также имеющих знаки спонтанного излечения ТВ (в сыворотке крови М±т, рд/т1)
Группы ДН Число детей Характер цитокинов и их показатели
IL-4 IL-10
VA A1 47 10,4±0,5 13,7±1,6
A2 38 22,7±0,75 27,2±1,2
V^ 74 41,1±2,2 29,1±0,6
VIB 81 39,1±3,0 19,8±0,7
IIIA A1 42 11,2±0,9 11,9±1,6
A2 35 21,8±0,6 23,1±1,1
Здоровые неинфицированные дети 30 18,4±3,2 4,1±0,14
нарушилось соотношение CD4+/CD8+, иммунорегулятор-ный коэффициент стал равным 1,45.
Несколько «приличнее» выглядит картина фенотипи-рования лимфоцитов у детей с высокими и гиперергичес-кими реакциями на туберкулин (V^ группа ДН). Снижение количества CD3+ и повышение CD4+ несущественно, однако возрастает количество СD8+-клеток и иммунорегу-ляторный коэффициент также снижается - до 1,7. Изучаемые показатели у детей из IIIA группы ДН соответствовали таковым у детей из V^ группы ДН, т. е. при наличии гиперергической реакции на туберкулин, а также у детей из VIA группы ДН, у которых был диагностирован ранний период туберкулиновой конверсии.
Функциональная активность Т-лимфоцитов, оцениваемая по реакции in vitro на ФГА, в той или иной степени оказалась сниженной во всех группах, но выраженные нарушения зарегистрированы в V^, VIB и IIIA группах. Тем не менее более глубокое угнетение функции Т-клеток отмечается у детей с нарастающей чувствительностью к туберкулину. При этом средние значения этого показателя статистически достоверно отличаются как по сравнению с контролем, так и с детьми из VIA группы ДН. Достоверного различия в группах детей из V^ и VIB не получено (р > 0,05), тогда как по сравнению с IIIA, т. е. с детьми, уже имеющими знаки перенесённой инфекции, угнетение функциональной активности Т-лимфоцитов при нарастающей аллергии оказалось существенным.
В связи с новыми представлениями о поляризации иммунного ответа мы определяли цитокиновый профиль, характеризующий функциональную активность Т-лимфоцитов отдельно 1-го и 2-го типов (Th1 и Th2). Наши исследования показали разнонаправленность секреторной деятельности Т-лимфоцитов среди детей VIA и IIIA групп: у части детей из VIA группы в период ранней конверсии туберкулинового теста, также как и из IIIA с малыми ОТИ во внутригрудных лимфатических узлах, концентрации ключевых цитокинов остаются мало изменёнными, в то время как у другой части, а также у детей с гиперергией и нарастающей туберкулиновой чувствительностью регистрируются их повышенные значения. С учетом полученных результатов потребовалось выделить в указанных группах детей по две подгруппы: VIA1 и VIA2; IIIA1 и IIIA2.
Функциональная активность Т-лимфоцитов представлена в таблицах 1 и 2, из которых видно, что у
детей из VIA группы ДН напряженность ТЬИ-клеточно-го ответа была разной. У 47 из них содержание IFN-Y в сыворотке крови увеличилось в 3 раза, а IL-18 - в
5 раз по сравнению с контрольной группой, тогда как у 38 - лишь в 1,8 и 4 раза соответственно. При этом характерно содержание IL-4 и IL-10, свидетельствующих
06 усилении Th-2-клеточного ответа. Если в первой подгруппе (VIA1) содержание IL-4 увеличилось в 2,5, то во второй (VIA2) - в 5,5 раза. Соответственно количество IL-10 увеличилось в 1,7 и 3,5 раза.
Aналогичные данные получены у детей IIIA группы ДН (с остаточными туберкулёзными знаками после спонтанного излечения): у 42 из них содержание IFN-T в сыворотке крови увеличилось в 2,9 раза, IL-18 - в 5,9 по сравнению с контрольной группой, а у 35 - в 1,9 и 4,3 раза соответственно. Вместе с тем значительная разница отмечена в реакции ТЬ|2-кпеточного звена. Содержание IL-4 в первой подгруппе (IIIA1) увеличилось в 2,7, а в подгруппе IIIA2 - в 5,3 раза, IL-10 соответственно в 1,5 и 3 раза.
Таким образом, у 44,7% детей из VIA и у 45,4% из IIIA групп ДН определено усиление ТЬ|2-опосредован-ного иммунного ответа. Из 162 клинически здоровых детей, взятых на учет в эти группы ДУ только в связи с конверсией туберкулиновой чувствительности (VIA) или результатами профилактической флюорографии (IIIA), у 89, что составило 54,9%, не выявлено функционального дисбаланса в Т-клеточном иммунитете.
В разной степени нарушения иммунитета с превалированием Т2-клеточного ответа обнаружены у всех детей с гиперергической, в том числе везикулонекротической и нарастающей туберкулиновой реакцией. Следует обратить внимание на значительное увеличение IL-10 у детей как с выраженными реакциями на туберкулин, так и у части из них, наблюдающихся в VIA и IIIA группах ДН, что может свидетельствовать о возможности усиления эффекта тканевого повреждения в местах присутствия микобактерий туберкулёза [14].
Мы полагаем, что выведенный нами индекс соотношения ключевых цитокинов IFN-T/IL-4 и IL-18/IL-10 может служить объективным критерием индивидуальной реакции организма ребенка на микобактериальную инфекцию (табл. 3).
Если у здоровых неинфицированных детей, а также почти у 55,0% из групп VIA и IIIA высокие индексы соот-
Индекс соотношения функциональной активности ТМ/^2 у детей, инфицированных микобактериями туберкулеза, а также имеющих знаки спонтанного излечения ТВ
Группы ДН Число детей Цитокиновый индекс
IFN-Y/IL-4 IL-18/IL-10
VA А1 47 5,6 3,1
А2 38 1,5 1,3
УІБ 74 1,4 1,6
VIB 81 1,9 1,7
IIIA А1 42 4,8 3,0
А2 35 1,6 1,8
Здоровые неинфицированные дети 30 4,4 1,0
ношения функциональной активности ТЬИЯЬгё (4,8-5,6 IFN-T/IL-4 и 3,0—3,1 ^-18/^-10 соответственно) обусловливаются превалированием клеточного иммунитета над гуморальным, то низкие показатели этого индекса (1,4—1,9 IFN-T/IL-4 и 1,3—1,8 ^-18/^-10 соответственно) у остальных детей свидетельствуют о недостаточной функции ТЬИ-клеток и значительной активности Т1л2-опосредованных реакций.
Таким образом, проведенное исследование показало, что инфицирование детей микобактериями туберкулеза сопровождается изменениями иммунологической реактивности, при этом степени реагирования клеточного звена носят индивидуальный характер. Более выраженные нарушения отмечаются у детей с длительным пребыванием активной инфекции в организме, т. е. учитываемых в VIB группе диспансерного наблюдения. Наиболее характерным является подавление Т-клеточного иммунитета и сдвиг соотношения регуляторных субпопуляций Т-хелперы/Т-супрессоры в пользу последних.
Имеющееся в мировой и отечественной литературе положение о том, что доминирование либо ТИ1, либо ТЬ|2-клеток оказывает непосредственное влияние на течение инфекции, вызываемой внутриклеточными патогенами, нашло отражение и в наших исследованиях. Вместе с тем нами установлено, что смещение соотношения Т1"|1/Т112 носит индивидуальный характер, даже при однотипной ответной реакции на кожный туберкулиновый тест. Так, у 55,3% детей, находившихся в раннем периоде туберкулиновой конверсии, и у 54,6% - у впервые выявленных с остаточными туберкулезными изменениями в виде кальцинатов во внутригрудных лимфатических узлах иммунный статус изменяется несущественно, ци-токиновый профиль свидетельствует о положительном балансе в сторону ТИ1, повышение секреции ^-4 и ^-10 незначительное. В то же время у остальных детей из этих групп, а также у всех из VIБ и VIВ групп обнаружены в разной степени нарушения иммунитета с превалированием ТЬ|2-клеточного ответа. Таким образом, надёжным ориентиром в оценке соотношения Т1"|1/Т112 и, следовательно, определении предрасположенности к прогрессированию латентной туберкулезной инфекции может служить количественный показатель - цитокиновый индекс, который следует ввести в алгоритм дообследования детей после определения конверсии туберкулиновой реакции по пробе Манту с 2 ТЕ PPD-L.
ЛИТЕРАТУРА
1. Авербах М. М. Иммунология и иммунопатология туберкулёза. - М., 1976. - 312 с.
2. Гергерт В. Я., Авдиенко В. Г., Космиади Г. А. и др. Специфические IgE антитела и иммунодоминантные антигены при туберкулёзе // Куб. науч. мед. вестник. - 2001. - Т. 58. № 4. -С.48-51.
3. Княжецкий С. М. Руководство по туберкулезу органов дыхания. - Л.: «Медицина», 1972. - 623 с.
4. Митинская Л. А. Туберкулинодиагностика (лекция) // Про-бл. туберкулеза. - 1998. - № 4. - С. 76-77.
5. ОвсянкинаЕ. С., ГубкинаМ. Ф.,КузьминаИ. К., СтахееваЛ. Б., Бородина Н. Н., Залетина Е. Ю. Принципы проведения превентивной химиотерапии у детей и подростков из VI группы диспансерного учета // Пробл. туб. - 2007. - № 8. - С. 25-28.
6. Bloom B. R. and Bennett B. Mechanism of a reaction in vitro associated with delayed-type hypersensitivity // Science. - 1996. -Vol. 153. - Р. 80-82.
7. Bloom B. R.Туберкулез. Патогенез, защита, контроль. -М., 2002. - 677 с.
8. Boom W. H. The role of T-cell subsets in Micobacterium tuberculosis infection // Infect. Agents Dis. - 1996. - V. 5, № 2. - P. 73-81.
9. Colston M. J. The immune reponse to tuberculosis. Pap. Tuberc. Symp. Brit. Pharm. Conf. Glasgow, Sept. 11-12, 1996 // Pharm. and Pharmacol. - 1997. - V. 49. № 1. - Р. 37-41.
10. DannenbergA. M., Jr. Immune mechanisms in the pathogenesis of pulmonary tuberculosis // Rev. Infect. Dis. - 1989. - Vol. 11 (Suppl. 2). - P. 369-378.
11. MaggiE., ParronchiP., MannettiR. et al. Reciprocal regulatory effects of IFNY and IL-4 on the in vitro development of human Th1 and Th2 clones // J. Immunol. - 1992. - Vol. 148. - Р. 2142-2147.
12. MillerF. J. Туберкулез у детей. Перевод с англ. - М.: «Медицина», 1984. - 350 с.
13. Pai M., Menzies D. Interferon-y release assays: what is their role in the diagnosis of active tuberculosis? // Clin. Infect. Dis. - 2007. -Vol. 44. - Р. 74-77.
14. Rook G. A. W., Onyebujoh, Stanford J. L. Th1-Th2 switch and loss of CD4 cells in chronic infections; an immuno-endocrinological hypothesis not exclusive to HIV // Immunol. Today. - 1993. - Vol. 14. - P. 568-569.
15. Surcel H. L., Troye-Blomberg M., Paulie S. Th1/Th2 profiles in tuberculosis based on proliferation and cytokine response of blood lymphocytes to Mycobacterium tuberculosis antigens // Immunol. -1994. - Vol. 81. - P. 171-176.
Поступила 27.08.2009
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
УДК 617.711-004.1 Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
А. И. ЕРЕМЕНКО, С. В. ЯНЧЕНКО, А. В. КИСЕЛЕВ
МОДИФИЦИРОВАННАЯ ИМПРЕССИОННАЯ ЦИТОЛОГИЯ у БОЛЬНЫХ ВТОРИЧНЫМ СИНДРОМОМ «СУХОГО ГЛАЗА», ОБУСЛОВЛЕННЫМ ИНСТИЛЛЯЦИЯМИ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ С НАЛИЧИЕМ КОНСЕРВАНТА
Кафедра глазных болезней Кубанского государственного медицинского университета,
Россия, 350089, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: vlyan20000@mail.ru
Модифицированная импрессионная цитология (с использованием инструмента для дозированного забора клеточного материала конъюнктивы и проведением компьютерного морфологического анализа микроизображений) была выполнена у 38 больных вторичным синдромом «сухого глаза» (В-ССГ), обусловленным длительными инстилляциями глазных капель с наличием консерванта бензалкония гидрохлорида, а также у 20 добровольцев без признаков офтальмопатологии. У больных В-ССГ было отмечено достоверное уменьшение среднего количества эпителиоцитов конъюнктивы без признаков повреждения (на 62%; р<0,001), увеличение среднего количества повреждённых эпителиоцитов (в 1,9 раза; р<0,001) и уменьшение количества бокаловидных клеток (в 2 раза; р<0,001) в расчёте на одно поле зрения. Наиболее выраженным было увеличение интегрального коэффициента энтропии (по Автандилову), отражающего уровень общей дезорганизации ткани (в 2,5 раза; р<0,001).
Ключевые слова: синдром «сухого глаза», модифицированная импрессионная цитология.
A. I. EREMENKO, S. V. YANCHENKO, A. V. KISELYOV
MODIFIED IMPRESSION CYTOLOGY AT THE PATIENTS WITH THE «DRY EYE»,
CAUSED PRESERVATIVE CONTAINING EYE DROPS
Department of Ophthalmology of the Kuban State Medical University,
Russia, Krasnodar, 350089, Sedin St., 4. E-mail: vlyan2000@mail.ru
Modified impression cytology (with the use of the instrument for the dosed out fence of a cellular material of the conjunctiva, and carrying out of the computer morphological analysis of microimages) was applied to 38 patients with the dry eye, caused preservative containing eye drops and to 20 healthy persons. Decrease of notalterated conjunctival cells quantity (on 62%; p<0,001), increase of alterated conjunctival cells quantity (in 1,9 times; p<0,001), and decrease of goblet cells quantity (in 2,0 times; p<0,001) were noted in dry eye patients (counting on one field of vision). The increase of the integrated entropy coefficient was the most expressed (in 2,5 times; p<0,001).
Key words: dry eye, modified impression cytology.
Введение
В течение последних десятилетий были получены данные о токсическом действии консерванта глазных капель бензалкония гидрохлорида (в концентрации, превышающей 0,005%) на эпителиальную выстилку глазной поверхности [5], а также о роли длительных инстилляций капель, содержащих значительное количество указанного консерванта, в патогенезе вторичного синдрома «сухого глаза» (В-ССГ) [2, 7]. Для верификации морфологических изменений в тканях конъюнктивы и роговицы, в том числе и при В-ССГ, может применяться способ импрес-сионной цитологии [2, 4, 9]. Однако при использовании классической техники [9] не всегда возможна однозначная трактовка результатов исследования, что связано с недостаточной стандартизацией усилия компрессии при заборе клеточного материала, а также с субъективностью описательного морфологического анализа [3]. Приведенные факты определяют актуальность дальнейшего изучения цитоморфологии конъюнктивы у больных вторичным синдромом «сухого глаза», развившимся на фоне длительной инстилляционной терапии каплями, содержащими консервант.
Цель исследования - изучить морфологический статус эпителиальной выстилки конъюнктивы у больных
вторичным синдромом «сухого глаза», обусловленным длительными инстилляциями капель с наличием консерванта, путём использования модифицированной импрессионной цитологии.
Методика исследования
Под наблюдением были 58 человек (мужчин - 27; женщин - 31) пожилого возраста (65±2,9 года). В первую группу (контроль) вошли 20 человек (40 глаз) без признаков офтальмологической патологии. Вторая группа включала 38 больных (76 глаз) В-ССГ средней тяжести [2] и первичной открытоугольной II «А» стабилизированной глаукомой. Все пациенты имели «стаж» глаукомы более 3 лет, офтальмохирургические вмешательства не выполнялись. Внутриглазное давление было нормализовано путём проведения длительных инстилляций (не менее 3 лет) одного из вариантов офтальмологического раствора 0,5%-ного тимолола малеата с содержанием консерванта бензалкония гидрохлорида 0,1 мг два раза в сутки. Не представляется возможным исключить наличие у пациентов данной группы синдрома «сухого глаза» до начала инстилляционной терапии. Тем не менее клиническая манифестация ксероза у всех наблюдавшихся произошла на фоне длительного использования капель, содер-
