CC BY
673
Инфекционный статус реципиентов почки в первый год после трансплантации
Амвросьева Т.В.1, Богуш З.Ф.1, Поклонская Н.В.1, Калачик О.В.2, Садовский Д.Н.2
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии, Минск 2Республиканский научно-практический центр трансплантации органов и тканей на базе 9-й городской клинической больницы, Минск
Amvrosieva TV.1, Bohush Z.F, Paklonskaya N.V.1, Kalachik O.V.2, Sadovski D.N.2
'Republican Research and Practical Center for Epidemiology and Microbiology, Minsk, Belarus 2Republican Center of Organs and Tissues Transplantation (Hospital №9), Minsk, Belarus
Infectious status of kidney recipients in the first year after transplantation
Резюме. Изложены данные вирусологического обследования реципиентов в течение первого года после трансплантации почки в отношении распространенных возбудителей оппортунистических вирусных инфекций: (цитомегаловирус (ЦМВ), вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), вирус простого герпеса 1-го и 2-го типов (ВПГ ' и 2), БК-полиомавирус (БКВ), аденовирусы (АдВ), парвовирус В'9 (ПВ В'9), вирус герпеса человека 6-го типа (ВГЧ 6), %, Варицелла-Зостер вирус (ВЗВ). Установлены доминирующие возбудители - ЦМВ и ВЭБ, которые вызывали активную инфекцию у 4',9 и 30,4% реципиентов соответственно. Изучены особенности (ре-)активации вирусных инфекций у пациентов в течение '2 месяцев после трансплантации органа.
Ключевые слова: трансплантация почки, вирусные инфекции, диагностика, полимеразная цепная реакция.
Медицинские новости. — 2014. — №1. — С. 82—84. Summary. This study presents the results of virological investigation for common causative agents of opportunistic infections (CMV, EBV, HSV ' and 2 tons, HHV 6, VZV, PV B'9, ADV and BKV) in kidney recipients during the first year after transplantation. Predominant viral agents were CMV and EBV: they caused active infection in 4'.9 and 30.4% of kidney recipients, respectively. The study also comprises the features of the (re-)activation of viral infections in patients for the '2 months after organ transplantation. Keywords: kidney transplantation, viral complications, diagnosis, polymerase chain reaction. Meditsinskie novosti. - 2014. - N1. - P. 82-84.
Трансплантация органов - наиболее эффективный метод лечения определенной категории соматических больных, рефрактерных к традиционной медикаментозной или хирургической коррекции. Данное направление оказания медицинской помощи тяжелобольным пациентам в последние годы активно развивается в мире, в том числе в Республике Беларусь. Сегодня отечественное здравоохранение располагает вполне успешным опытом пересадки почки, сердца, легких, печени, поджелудочной железы, имеются реальные перспективы осуществления трансплантации других органов. Наиболее богатую историю в нашей стране имеет опыт пересадки почки. Ежегодно отечественные специалисты производят порядка 100 трансплантаций этого органа.
Несмотря на впечатляющие достижения в области трансплантационных технологий, актуальной проблемой остается риск развития у реципиентов инфекционных осложнений. Они значительно ухудшают качество и снижают продолжительность жизни пациентов. По данным зарубежных специалистов, только в течение первого года после трансплантации почки инфекционные осложнения
регистрируются у 2/3 реципиентов [1]. По современным представлениям, до половины посттрансплантационных осложнений могут иметь вирусную природу. Так, по результатам разных исследований на эту тему, доля пациентов с инфекцией, вызванной цитомегаловирусом (ЦМВ), среди реципиентов почки составляет 8-32%, вирусами простого герпеса 1-го и 2-го типов (ВПГ 1 и 2) - до 53%, Варицелла-Зостер вирусом (ВЗВ) - 4-12% [2]. Весомый вклад вносят и другие вирусные агенты - вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), БК-полиомавирус (БКВ), аденовирусы (АдВ), парвовирус В19 (ПВ В19), вирус герпеса человека 6-го типа (ВГЧ 6) и некоторые другие [3].
Причиной осложнений вирусной этиологии у пациентов после трансплантации органов может быть не только свежее посттрансплантационное инфицирование, но и реактивация присутствующих в организме вирусов, существовавших ранее в латентной, неактивной форме. Данные вирусные патогены, как правило, не приводящие к болезни у здоровых людей, могут стать причиной развития так называемых оппортунистических инфекций у лиц с иммунодефицитным состоянием, которое характерно для реципиентов
почки на фоне применяемой иммуносу-прессивной терапии [2].
Цель исследования - изучение инфекционного статуса реципиентов почки в отношении наиболее значимых возбудителей вирусных инфекций в первый год после трансплантации.
Материалы и методы
Исследовали 398 образцов крови и 352 образца мочи от 84 пациентов, которые были получены из РНПЦ трансплантации органов и тканей на базе УЗ «9-я городская клиническая больница» г. Минска.
Пробоподготовку клинического материала осуществляли следующим образом. Образцы цельной крови инкубировали 1 час при температуре 37°С, затем центрифугировали при 1500 об/ мин в течение 10 минут, после чего отбирали сыворотку. Образцы мочи перед выделением нуклеиновых кислот пятикратно разводили транспортной средой для проб клинического материала (ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспо-требнадзора).
Для выделения вирусных нуклеиновых кислот из сывороток крови применяли коммерческие наборы «РНК-СОРБ», из цельной крови - коммерческие набо-
МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ
№1 • 2014
82
Динамика (ре-)активизации ЦМВ-инфекции у реципиентов почки, %
ры «ДНК-сорб В» (ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора).
Амплификацию нуклеиновых кислот ЦМВ, ВЭБ, ВПГ 1 и 2, ВГЧ 6, ВЗВ, ПВ B19 и АдВ осуществляли с использованием коммерческих тест-систем (ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзо-ра) в соответствии с инструкцией производителя. Постановку реакции с элек-трофоретическим учетом результатов осуществляли на ПЦР-амплификаторе mjMini (BioRad, США). Результаты реакции учитывали с помощью горизонтального электрофореза в агарозном геле. Постановку ПЦР в реальном времени осуществляли на амплификато-рах RotorGene 3000 и 6000 (Corbett Life Sciences, Австралия).
Детекцию БКВ проводили с помощью ПЦР в реальном времени. Использовали Taq-полимеразу, 10х реакционный буфер и раствор MgCl2 (пр-во PrimeTech, Беларусь), смесь дезоксинуклеотидов (пр-во Fermentas). Амплификацию осуществляли с применением взятых из литературных источников праймеров и зондов [9], синтезированных фирмой PrimeTech (Беларусь).
Результаты и обсуждение
В течение 2011-2012 гг. и первой половины 2013 г. проводили вирусологическое обследование реципиентов почки (всего обследовано 84 пациента) в отношении 8
возбудителей вирусных инфекций: ЦМВ, ВЭБ, ВПГ 1 и 2, ВГЧ 6, ВЗВ, ПВ В19, АдВ и БКВ.
Анализ результатов молекулярно-биологических исследований клинического материала реципиентов в течение 12 месяцев после трансплантации с целью определения этиологической структуры вирусных инфекций и выявления доминирующих возбудителей: наиболее часто обнаруживался ЦМВ -у 41,9% из 74 обследованных пациентов. Доля реципиентов с выявленной ВЭБ-инфекцией также оказалась значительной - 30,4% из 79 обследованных пациентов. Уровень регистрации БК-вирусной инфекции составил 17,4% (обследовалось 63 чел.). Молекулярно-генетические маркеры ВГЧ 6 выявлялись у 5,6% (обследовался 71 пациент), АдВ - у 1,9% (обследовалось 54 чел.), ПВ В19 - у 1,7% из 60 обследованных реципиентов. При этом случаи обнаружения ВПГ 1 и 2 (обследовалось 43 реципиента) и ВЗВ (обследовалось 14 чел.) отсутствовали (рис. 1).
Сроки первичного выявления маркеров возбудителей в посттрансплантационном периоде различались. При ЦМВ-инфекции они впервые появились на 45,4±4,05 сутки, при ЭБВ-инфекции - на 31,8±5,06 сутки, при БКВ-инфекции - на 38,1±8,67 сутки.
Для изучения динамики инфекционного статуса реципиентов молекулярно-генетическое обследование пациентов проводили в следующие периоды: до 3 месяцев с короткими интервалами в 2 недели (на 4-е, 14-е сутки, через 1, полтора, 2, два с половиной и 3 месяца), с 3 месяцев до 1 года с интервалом в 3 месяца (6, 9, 12 месяцев).
На рис. 2 представлена динамика (ре-)активизации ЦМВ-инфекции у реципиентов в течение 12 месяцев после трансплантации. Первые случаи регистрации инфекции в посттрансплантационном периоде имели место уже на 4-е сутки наблюдения с выраженной тенденцией к нарастанию ее уровня к 30-м суткам и достижением пика ко 2-му месяцу (43,9%). Затем доля пациентов с активной ЦМВ-инфекцией снижалась. В период 2,5-3 месяца имело место плато - уровни регистрации генетических маркеров ее возбудителя колебались в незначительных пределах от 27,8 до 28,6% соответственно. В течение 3-6 месяцев после трансплантации наблюдалось снижение уровней их регистрации до 25%, а в более поздний период данная инфекция проявлялась эпизодически или не обнаруживалась вовсе.
Динамика (ре-)активизации ВЭБ-инфекции отличалась выраженным на-
Рисунок 3
Динамика (ре-)активизации ВЭБ-инфекции у реципиентов почки, %
Рисунок 4
I Динамика (ре-)активизации ВГЧ 6-инфекции у реципиентов почки, %
№1 • 2014
МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ |в3
растанием доли положительных проб в период с 14 суток до двух месяцев с пиком регистрации в 1-й месяц после трансплантации (22,2%) и постепенным снижением к 3-му месяцу - до 7,3% (рис. 3). В посттрансплантационный период с 3 месяцев до 12 (ре-)активизация ВЭБ-инфекции регистрировалась эпизодически.
Маркеры ВГЧ 6 обнаруживались значительно реже (рис. 4), с пиком регистрации в период 2-2,5 месяца после трансплантации (4,88 и 11,11% соответственно). При более длительном наблюдении (вплоть до 12 месяцев) инфекция, вызванная данным возбудителем, не регистрировалась.
В течение 1,5 месяцев наблюдения имело место постепенное нарастание уровней выявления БКВ-инфекции в группе обследуемых реципиентов до 26,1%, с последующим снижением до 9,1% к 3-му месяцу (рис. 5). В более поздние сроки наблюдения (ре-)акти-визация данной инфекции отмечалась эпизодически.
Генетические маркеры АдВ в обследуемой группе (п=54) были обнаружены только у 4 реципиентов, в том числе у трех - перед трансплантацией органа и
у одного - спустя два месяца после нее.
Эпизодическое выявление генетического материала возбудителя регистрировалось при инфекции, вызванной ПВ В19, который не был обнаружен у реципиентов перед трансплантацией, но был зарегистрирован на 14-е сутки посттрансплантационного периода.
Выводы:
1. В ходе проведенного вирусологического обследования реципиентов почки в отношении распространенных возбудителей оппортунистических инфекций (цМв, ВЭБ, ВПГ 1 и 2, ВГЧ 6, ВЗВ, ПВ В19, АдВ и БКВ) были установлены их доминирующие возбудители - ЦМВ и ВЭБ, вызвавшие активную инфекцию у 41,9 и 30,4% пациентов соответственно. Среди других этиологических агентов регистрировались ВГЧ 6, АдВ, ПВ В19 и БКВ.
2. По результатам мониторинга инфекционного статуса реципиентов в течение первых трех месяцев после трансплантации органа показано, что для ЦМВ-инфекции (ре-)активация наступала спустя 1 месяц после трансплантации с пиком на 2-м месяце. ВЭБ-инфекция и инфекция, вызванная БКВ, характеризовались постепенным нарастанием числа случаев (ре-)активации в течение 1-1,5 месяца после пересадки с последующим медленным его снижением до 3 месяцев. Инфекция, вызванная ВГЧ 6, АдВ и ПВ В19, у большей части реципиентов носила транзиторный характер и спонтанно элиминировалась в течение от 2 недель до 1-2 мес.
3. Оценка инфекционного статуса реципиентов в отношении наиболее значимых возбудителей вирусных инфекций (ЦМВ, ВЭБ, БКВ) в более поздний период наблюдения - до 12 месяцев -показала, что при ЦМВ-инфекции имело место снижение частоты (ре-) активации в посттранплантационный период 3-6 месяцев с последующей спорадической ее регистрацией в более поздние сроки наблюдения. Регистрация (ре-)активации вирусных инфекций, вызванных ВЭБ и БКВ, имела в этот период наблюдения эпизодический характер.
4. Динамичное наблюдение за развитием вирусных инфекционных процессов у реципиентов почки до появления у них клинических признаков инфекции имеет исключительно важное значение для формирования обоснованного спектра детектируемых возбудителей и оптимального перечня диагностически значимых показателей, позволяющих не только установить этиологию вирусных осложнений, но и предотвратить их развитие за счет комплексной оценки инфекционного статуса реципиентов с целью своевременного назначения им этиотропного лечения и коррекции иммуносупрессивной терапии.
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Infectious complications and antibiotic use in renal transplant recipients during a 1-year follow-up / B.Maraha [et al.] // Clin. Microbiol. Infect. - 2001. -Vol.7. - P.619-625.
2. Epidemiology and risk factors of infections after solid organ transplantation / P.Muñoz [et al.] // Enferm. Infec. Microbiol. Clin. - 2012. - Vol.30. - P.10-18.
3. Viral infection after Renal Transplantation: Surveillance and Management / B.Weikert [et al.] // Clin. J. Am. Soc. Nephrol. - 2008. - Vol.3, suppl.2. -P.76-86.
Поступила 20.11.2013 г.
ВЫХОДНЫЕ ДАННЫЕ
«Медицинские новости» № 1 (232) 2014 г. Рецензируемый научно-практический информационно-аналитический журнал. Свидетельство о регистрации № 965 выдано Министерством информации Республики Беларусь 9 июля 2010 года. Периодичность - 1 раз в месяц
Учредитель
Частное издательское
унитарное предприятие «ЮпокомИнфоМед».
Юридический адрес:
220018, г. Минск, ул. Якубовского, 70-5.
УНП 191350993
Редакция
Шарабчиев Юрий Талетович (гл. редактор, директор) Третьякова Ирина Георгиевна (отв. секретарь, реклама)
Марковка С.Н., Пручковская О.Н. (редакторы) Колоницкая О.М. (дизайн, верстка) Вашкевич С.В. (зам. директора)
Адрес для переписки: 220030, Минск, пл. Свободы, 23-35. Тел.: (+375-17) 226-03-95, (+375-17) 327-07-54 (гл. редактор), Mоб. (029) 695-94-19 (Velcom). Тел./факс: (+375-17) 226-00-31. Е-mail: redakcia@tut.by www.mednovosti.by
Ответственность за достоверность и интерпретацию предоставленной информации несут авторы. Редакция оставляет за собой право по своему усмотрению размещать полные тексты публикуемых статей на сайте редакции www.mednovosti.by и в электронных базах данных (на сайтах) своих партнеров
Подписано в печать 24.01.2014 г. Формат 60х84 1/8. Гарнитура Helvetica Narrow. Уч.-изд. л. 11,8. Заказ . Тираж 1028 экз.
Тираж распространения, включая электронную подписку, 1621 экз.
Посещаемость журнала на сайте mednovosti.by в декабре 2013 г составила 308900
Цена свободная.
Подписка: по каталогу РУП «Белпочта» индексы: 74954 (инд.), 749542 (вед.);
по каталогу ОАО «Агентство Роспечать» индекс: 74954
Типография ООО «Поликрафт» Лицензия №02330/0494199 от 03.04.09 Минск, ул. Кнорина, 50
