CC BY
49
УДК 619:576.858:57.086.83 ИЯ. Строганова
ИНФЕКЦИОННАЯ АКТИВНОСТЬ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОГО ВИРУСА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В ПРОЦЕССЕ ХРАНЕНИЯ
В условиях интенсивного ведения животноводства респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота наносят заметный экономический ущерб. Автором статьи представлены результаты изучения инфекционной активности респираторно-сенцитиального вируса крупного рогатого скота в процессе хранения.
Ключевые слова: инфекционная активность, вирус, крупный рогатый скот, процесс хранения.
I.Ya. Stroganova
INFECTIOUS ACTIVITY OF RESPIRATORY AND SYNCYTIAL CATTLE VIRUS DURING STORAGE
In the conditions of intensive animal industries, respiratory illnesses of young cattle growth cause an appreciable economic loss. The research results of infectious activity of respiratory and syncytial cattle virus during storage are given by the author of the article.
Key words: infectious activity, virus, cattle, storage process.
Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота наносят огромный экономический ущерб животноводству, особенно при условии его интенсивного ведения [1]. В хозяйствах мясо-молочного направления они чаще протекают по типу «энзоотической бронхопневмонии». В связи с тем, что многие возбудители, участвующие в их этиологии, убиквитарны, а взрослые животные часто имеют иммунитет, в основном они возникают у телят в период между снижением пассивного и выработкой активного иммунитета [3].
Одним из многих возбудителей, вызывающих болезни органов дыхания у крупного рогатого скота, является вирус респираторно-синцитиальной инфекции (РСИ), относящийся к семейству парамиксовирусов, роду - пневмовирусов. Клинически болезнь проявляется в основном поражением нижних отделов респираторного тракта, повышением температуры, затрудненным дыханием с содышкой, выделениями из носа, сильным кашлем с последующим развитием бронхопневмоний и интерст щиальных эмфизем [8].
Вирус был выделен впервые от крупного рогатого скота с симптомами острого респираторного заболевания (Рассаис1 МТ. е1 а1.) в 1970 г. В настоящее время РС-инфекция крупного рогатого скота регистрируется во всех странах мира с развитым животноводством, а в нашей стране с 1975 г. [2; 4; 8-9].
В отличие от других вирусных респираторных инфекций, эта болезнь остается недостаточно изученной в связи со сложностью выделения и культивирования возбудителя. Трудности культивирования, в свою очередь, затрудняют получение вирусного сырья в достаточном количестве и с высокой инфекционной активностью для изготовления диагностических препаратов и средств специфической профилактики [2; 4-5; 8-9].
РС-вирус относится к числу нестойких вирусных возбудителей. Вероятно, это связано с высоким потенциалом "ломкости" и самораспада его вирионов, представленных не столько сферическими, сколько нитевидными и полиморфными формами [10]. Вирус чрезвычайно лабилен к воздействию физико-химических факторов [11]. Инфекционность респираторно-синцитиального вируса характеризуется термолабильностью [12].
Материалы и методы исследований. Исследования проводили в лаборатории вирусологии московской академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина, в лаборатории вирусологии Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего востока СО Россельхозакадемии и на кафедре эпизоотологии и паразитологии ИПБ и Красноярского государственного аграрного университета в течение 1989-2008 гг. В опытах использовали отечественный штамм респираторно-синцитиального вируса
крупного рогатого скота "РС-Б". Вирус культивировали в перевиваемых линиях клеток: почки теленка (Т-1), почки эмбриона овцы ^^. В качестве поддерживающей среды использовали среду «Игла» с добавлением 2%-й фетальной сыворотки и 100 ЕД антибиотиков. "Снимали" вирус в момент яркого проявления цитопати-ческого действия (ЦПД) на 5-7-е сутки культивирования.
Инфекционную активность вируса определяли путем титрования в культуре клеток FLK и Т-1 пробирочным или микрометодом в 96-луночных полистироловых палатах. Титр вируса рассчитывали по методу Рида и Менча (1938 г.) и выражали в ТЦД 50/мл.
Использовали следующие условия хранения вируса:
- вируссодержащую жидкость при температуре +4°С; -25°С; -70°С;
- лиофилизированный вирус при -25°С (срок наблюдения 12 месяцев);
- лиофилизированный вирус при -25°С (срок наблюдения 5 и 10 лет).
Результаты исследований и их обсуждение. В результате исследований установили высокую термолабильность штамма "РС-Б'" респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота. Вместе с тем определили оптимальные условия и время хранения штамма, при которых сохраняется его инфекционная активность, что очень важно и необходимо для работы с вирусом.
Для хранения в вышеприведенных условиях использовали вирус с исходной инфекционной активностью 4,5-5,0 Lg ТЦД 50/ мл. Полученные данные показали, что вируссодержащая суспензия при 4°С снижает свою инфекционную активность на ЗЕд в течение 2-х месяцев хранения.
При температуре -25°С снижает на 3,5 Lg в течение 6 месяцев хранения. При температуре -70°С снижает инфекционную активность на 2,5 Lg в течение 7 месяцев хранения.
Хранение же лиофилизированного вируса при -25°С в течение 12 месяцев снижает титр вируса на
1 Lg. Хранение лиофилизированного вируса при температуре -25°С в течение 5 лет снижает титр вируса на 3,0-3,5 ед, что затрудняет дальнейшую с ним работу. Возникает необходимость повышать его инфекцион-
ную активность путем культивирования вируса в чувствительных к нему культурах клеток.
Дальнейшее культивирование вируса после 5 лет хранения при -25°С в лиофилизированном состоянии, в перевивальных линиях клеток FLK и Т-1 на протяжении 10-20 последовательных пассажей позволило повысить его инфекционную активность только до 3,0-3,5 Lg ТЦД 50/мл.
Хранение лиофилизированного вируса при -25°С в течение 10 лет оказалось нецелесообразным, титр вируса путем титрования в культуре клеток установить не удалось. И только в полимеразной цепной реакции были обнаружены следы присутствия вируса, а точнее его нуклеиновая кислота.
Выводы
1. Для текущей работы лучше хранить вируссодержащую суспензию штамм "РС-Б"при температуре -70°С.
2. Оптимальным условием для штамма является хранение лиофилизированного препарата вируса при температуре -25 °С в течение 1-3 лет.
3. Хранение же вируса в лиофилизированном состоянии при -25 °С в течение 5 и более лет не позволяет достичь исходной инфекционной активности. Следовательно при работе с вирусом длительное хранение использовать нежелательно.
Литература
1. Система ветеринарно-санитарных, профилактических и лечебных мероприятий против инфекционных болезней крупного рогатого скота в хозяйствах Российской Федерации / М.И. Гулюкин, К.П. Юров, Ю.Д. Караваев [и др.]. - М., 2007. - С. 14.
2. Гуненков, В.В. Респираторно-синцитиальная вирусная инфекция / В.В. Гуненков, ГА Халенев, В.Н. Сюрин // Животноводство и ветеринария. - М., 1975. - Т.8. - С.70-76.
3. Крюков, Н.Н. Вирусные респираторные болезни крупного рогатого скота / Н.Н. Крюков, З.Ф.Зудилина, С.И. Евдокимов // Ветеринария. - 1976. - №6. - С. 111-113.
4. Метревели, Г.Д. Биологические свойства вируса и серологическая диагностика PC-инфекции крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. биол. наук / Г.Д. Метревели; ВГНКИ. - М., 1989. - 19 с.
5. Получение антигена респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота для использования в ИФА / И.Н. Матвеева [и др.] // Ветеринария. - 2007. - №11. - С. 49-51.
6. РИГА в серодиагностике респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота / А.В. Васильев [и др.] // Ветеринария. - 1988. - №10. - С. 33-34.
7. Строганова, И.Я. Культивирование респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота с целью получения диагностических препаратов: автореф. дис. ... канд. вет. наук / И.Я. Строганова. -М., 1990. - 16 с.
8. Baker, J.C. Bovine respiratory syncytial virus / J.C. Baker // Veterinary Clinics of North America Food Animf. Practice. - 1997. - Vol. 13. - P. 425-454.
9. Valarcher, J-F. Bovine respiratory syncytial virus infection / J-F. Valarcher, G. Taylor // Vet. Res. - 2007. -Vol. 8. - Р. 153-180.
10. Лещинская, Н.П. Эпидемиология гриппа и других ОРЗ / Н.П. Лещинская, Т.Н. Юрова // Сб. науч. тр. ВНИИ МЗ СССР. - Л., 1983. - С. 148-177.
11. Тпава, V. Physicochemical properties of bovine respiratory jyncytial virus. Jnaba / V. Tanaha, T. Omori, M. Ma-tumoto // Jap.J.Microbiol. - 1973. - Vol.I7. - P.211-216.
12. Hall, C.B. Possible transmission by fomites of respiratory jyncytial virus / C.B. Hall, R.H. Douglas, J.M. Gei-man // I. Inf. Dis. - 1980. - Vol.141. - P.98-102.
УДК 577.4 С.В. Крайнева, Н.В. Донкова
ОСОБЕННОСТИ БИОХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА КРОВИ СТЕЛЬНЫХ КОРОВ В УСЛОВИЯХ ТЕХНОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ
Авторами статьи изучены показатели биохимического состава крови стельных коров, находящихся в хозяйствах, подвергнутых техногенному загрязнению. Установлено, что в организме данных животных увеличена активность мембраносвязанных ферментов (АЛТ и АСТ), развивается диспротеи-немия, гипогликемия и гиперхолестеринемия.
Ключевые слова: стельные коровы, биохимия крови, техногенное загрязнение.
S.V. Kraineva, N.V. Donkova
BLOOD BIOCHEMICAL STRUCTURE PECULIARITIES OF THE IN-CALF COWS IN THE TECHNOGENIC POLLUTION CONDITIONS
The indicators of blood biochemical structure of the in-calf agricultural cows under technogenic pollution are researched by the authors of the article. It is established that membrane-bound enzymes activity (ALT and AST) is increased in an organism of the given animals; disproteinemia, hypoglycemia and hypocholesterinemia is developing.
Key words: in-calf cows, blood biochemistry, technogenic pollution.
Введение. Все процессы, протекающие в организме, в той или иной степени отражаются на биохимическом составе крови, по которому можно судить о степени эндогенной интоксикации, накоплении продуктов обмена, обуславливающих состояние здоровья, а, следовательно, и продуктивность животных [1-2; 5].
Относительное постоянство количественного и качественного состава крови обеспечивает сохранение видовых, породных и индивидуальных особенностей конституции животных. Но наряду с этим состав крови довольно лабилен, что обеспечивает адаптацию как экзо- так и к эндогенным факторам [3-4].
Накопление тяжелых металлов в организме, поступающих с кормом, водой и частицами почвы, сопровождается повышением уровня экотоксикантов в крови животных. Наиболее чувствительные к такому воздействию беременные животные, но данные об воздействии техногенного прессинга на них немногочисленны. Поэтому изучение биохимических показателей крови стельных коров, содержащихся в условиях техногенного загрязнения, является весьма перспективным [4; 6].
Целью наших исследований являлось изучение особенностей биохимического состава крови стельных коров в условиях техногенного загрязнения.
В задачи исследований входило:
