CC BY
0
I ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
прогнозирования, в то время как предшествующая терапия после алло-ТГСК (ИТК) оказалась наименее значимым фактором. Исключение факта ИТК после алло-ТГСК не повлияло на значение AUC ROC кривой (0,87) (рис. 1С). При анализе точности модели частоты ложноотрицательных (FNR) и ложноположительных (FPR) ошибок оценивались для трех временных диапазонов прогнозирования. На графике error plot (рис. ID) проиллюстрировано, что после Д+100 значения обоих коэффициентов ошибок не превышают 22%, в то время как до Д+100 модель не может быть использована для точного прогноза на основе используемых независимых переменных.
Заключение. В данной модели прогнозирования, обладающей высокой чувствительностью и специфичностью,
продемонстрировано наибольшее значение высокого уровня BCR/ABL после алло-ТГСК на риск рецидива. В то же время уровень экспрессии BCR/ABL до Д+100 не обладает прогностической способностью в отношении рецидивов, которые могут быстро развиваться без фазы МОБ. Тем не менее уровень BCR/ ABL относительно точно предсказывает рецидивы после Д+100 на фоне продолжающейся профилактики ИТК. Кроме того, факт отсутствия хронической РТПХ является важным независимым фактором, повышающим риск развития рецидива. Для решения вопроса о возможности клинического применения данной модели необходима ее дальнейшая оценка в многоцентровом исследовании.
Ахмедов М. И., Клясова Г. А., Паровичникова Е. Н., Кузьмина Л. А., Васильева В. А., Дроков М. Ю., Довыденко М. В., Дмитрова А. А., Попова Н. М., Конова З. В., Никифорова Н. М., Королева О. М., Михальцова Е. Д., Куликов С. М., Федорова А. В.
ИНФЕКЦИИ КРОВОТОКА В ФАЗУ ДО ПРИЖИВЛЕНИЯ ПОСЛЕ ПЕРВЫХ И ПОВТОРНЫХ ТРАНСПЛАНТАЦИЙ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Инфекции кровотока (ИК) относятся к тяжелым осложнениям после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток крови (алло-ТГСК).
Цель работы. Цель исследования — изучить частоту, этиологию, факторы риска и результаты лечения ИК до приживления транс-плантатау больных после первых и повторных алло-ТГСК.
Материалы и методы. В ретроспективное исследование было включено 290 пациентов: 284 после первой и 37 пациентов после повторной алло-ТГСК в ФГБУ «НМИЦ гематологии» с января 2018 года по сентябрь 2021 года (таблица 1). Эпизодом ИК считалось выделение
Таблица 1. Характеристика пациентов
микроорганизма из гемокультуры у больных с симптомами инфекции. Для коагулазонегативных стафилококков и коринебактерий требовалось выделение бактерий из двух образцов.
Результаты и обсуждение. После первой алло-ТГСК ИК возникли у 85 (29,9%) пациентов, из ниху 77 (90,6%) — однократно, у 8 (8,4%) — повторно; общее число эпизодов ИК составило 94. Медиана времени возникновения первого эпизода ИК составила 9 дней (0—61 день после алло-ТГСК). Всего после первой алло-ТГСК было выделено 111 микроорганизмов, из них 57 (51,3%) — грамотрицательных бактерий, 54 (48,7%) — грамположительных. После повторной алло-ТГСК ИК
Характеристика Первые алло-ТГСК, N=284 Повторные алло-ТГСК, N=37 Р
Пол, п (%) Мужской Женский 137(48,2] 147(51,8) 19(51,4) 18(48,6) 0,730
Возраст, медиана 36 (range 17-65) 38 (range 19-58) 0,452
НСТ-С1 с учетом возраста, п (%) 0 >2 145(51,1) 114(40,1) 25 (8,9%) 11 (29,7%) 14 (378%) 12(32,4%) <0,0001
Диагноз, п (%) Острый миелоидный лейкоз Острый лимфобластный лейкоз Миелодиспластичские синдромы Миелофиброз Неходжкинские лимфомы Апластическая анемия Хронический миелоидный лейкоз Множественная миелома Другие 118(41,5) 87(30,6) 33(11,6) 13 (4,5) 12 (4,2) 8 (2,8) 7(2,5) 3(1,D 3(1,D 17(45,9) 13 (35,1) 3(8,1) 3(8,1) 1 (2,7) 0,993
Фаза заболевания, п (%) Ремиссия Вне ремиссии 254 (89,4) 30(10,6) 33 (89,2) 4(10,8) 0,963
Кондиционирование, п(%) Миелоаблативное Пониженной интенсивности 76 (26,8) 208 (73,2) 4(10,8) 33 (89,2) 0,042
Источниктрансплантата, п (%) Костныймозг Стволовые клетки крови 63 (22,2) 221 (778) 3(8,1) 34 (91,9) 0,051
Донор, п (%) Родственный идентичный Неродственный идентичный Неродственный частично идентичный Гаплоидентичный 82 (28,9) 61 (21,5) 45(15,8) 96(33,8) 3(8,1) 5(13,5) 7(18,9) 22 (59,5) 0,006
Профилактика РТПХ, п (%) АТГ ПТЦФ ТСРаЬ/СР19-деплеция АТГ+ПТЦФ Без профилактики 72 (25,4) 101 (35,6) 50(176) 45(15,8) 16(5,6) 4(10,8) 19(51,4) 6(16,2) 7(18,9) 1 (2,7) 0,210
Иммуносупрессивная терапия, п (%) ЦСА+ММФ ЦСА+МТХ ТСРаЬ/СР19-деплеция (протокол) ЦСА+ММФ+МТХ Без профилактики 142 (50,0) 25 (8,8) 50(176) 58 (20,4) 9 (3,2) 27 (73,0) О 6(16,2) 4(10,8) О 0,054
Профилактика фторхинолонами, п (%) 104(36,6) 10(270) 0,358
Клеточностьтрансплантата СР34+ клеток/кг, медиана 5,0 (range 1,5-20,8) 5,8 (range 2,2-11,2) 0,005
Первичная несостоятельность, п (%) 21 (74) 11 (29,7) 0,002
Первичная гипофункция, п (%) 16(5,6) 3(8,1) 0,714
Таблица 2. Однофакторный анализ риска развития ИК до приживления трансплантата после первых и повторных алло-ТГСК
Factor Первые алло-ТГСК, п (%) Р Повторные алло-ТГСК,п (%) Р
Возраст £36 лет <36 лет 50(32,1) 35 (27,3) 0,435 9(39,1) 4 (28,6) 0,724
Пол Мужской Женский 48 (35,0) 37 (25,2) 0,092 7(36,8) 6 (33,3) 0,823
Фаза заболевания Ремиссия Вне ремиссии 12 (40,0) 73 ¡28,7) 0,237 2 (50,0) 11 (33,3) 0,602
Колонизация БЛРС/КР/ВРЭ Да Нет 45 (30,6) 40 (29,8) 0,897 5 (38,5) 8 (36,4) 0,901
Профилактика фторхинолонами Да Нет 31 (30,1) 54 (30,2) 0,990 5 (50,0) 8 (30,8) 0,440
Кондиционирование Миелоаблативное Пониженной интенсивности 22 (28,9) 63 (30,3) 0,884 О (О) 13(39,4) 0,276
Время от диагноза до алло-ТГСК £10 месяцев <10 месяцев 50 (32,9) 35 (26,5) 0,299
Показания к повторной алло-ТГСК Несостоятельность трансплантата Рецидив заболевания 8 (32,0) 5 (41,7) 0,716
Донор Родственный идентичный Неродственный идентичный Неродственный частично идентичный Гаплоидентичный 16(19,5) 16(26,2) 24 (53,3) 29 (30,2) 0,001 О (О) 3 (60,0) 3 (42,9) 7(31,8) 0,352
Источник трансплантата Костныймозг Стволовые клетки крови 14(22,2) 71 (32,1) 0,161 2 (66,7) 11 (32,4) 0,278
Профилактика РТПХ АТГ ПТЦФ ТСРаЬ/СР19-деплеция АТГ+ПТЦФ Без профилактики 16(22,2) 28 (277) 18(36,0) 20 (44,4) 3(18,8) 0,071 2 (50,0) 4(21,1) 2 (33,3) 5 (71,4) О (О) 0,156
Продолжительность нейтропении £22 дней <22 дней 33 (23,2) 52 (36,6) 0,019 10(34,5) 3 (375) 0,874
Первичная несостоятельность Yes No 1 (4,8) 72 (274) 0,109 5 (50,0) 8 (29,6) 0,275
Первичная гипофункция Yes No 6 (37,5) 67 (25,0) 0,392 1 (33,3) 12(35,3) 0,946
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
возниклиу 13 (35,1%), из ниху 2 (92,3%) — однократно,у 1 (7,7%) — повторно; общее число эпизодов ИК составило 14. .Медиана возникновения первого эпизода ИК была позже после повторной алло-ТГСК и составила 16 дней (1—28 дней) в сравнении с первой алло-ТГСК (р=0,014). Всего после повторных алло-ТГСК было выделено 14 микроорганизмов, из них 7 (50,0%) — грамотрицательных бактерий, 7 (50,0%) — грамположительных. Частота карбапенем-устойчивых бактерий была выше после повторной алло-ТГСК (57,1% (4/7) против 14,0% (8/57), р=0,048). В их число входили КиЬ^сеНа, рпеитоп1ае (п=11) и Аст&оЬас&г ЬаитапИ (п=1). По результатам однофакторного анализа тип донора и продолжительность нейтропении >22 дней были достоверно ассоциированы с более высоким риском развития ИК до приживления трансплантата после первой алло-ТГСК. При многофакторном анализе трансплантации от неродственных частично совместимых доноров являлись единственным независимым фактором риска развития ИК до приживления после первой алло-ТГСК (ОР=2,93; 95% ДИ:1,55—5,51;
р=0,008). Факторов риска развития ИК до приживления после повторной алло-ТГСК выявлено не было (таблица 2). Общая 30-дневная выживаемость после всех эпизодов ИК до приживления трансплантата составила 94,4%. Выживаемость после ИК была ниже после повторной по сравнению с первой алло-ТГСК (71,4% vs. 97,9%; р<0,0001). Выживаемость была в особенности ниже после ИК, вызванных карба-пенем-устойчивыми штаммами после повторной по сравнению с перВОЙ алло-ТГСК (25,0% 100,0%; Р<0,0001).
Заключение. ИК до приживления трансплантата остаются частым осложнением после алло-ТГСК, в особенности при алло-ТГСК от неродственных частично совместимых доноров. Частота ИК после повторной алло-ТГСК несколько выше по сравнению с первой. Грамотрицательные бактерии превалируют в этиологической структуре. Частота ИК, вызванных карбапенем-устойчивыми штаммами, была выше после повторной алло-ТГСК, что сопровождалось неблагоприятным прогнозом.
Бархатов И. М., Садыков А. М., Карпунина У. Д., Зубаровская Л. С., Кулагин А. Д.
ОЦЕНКА ВЗАИМОСВЯЗИ ИЗМЕНЕНИЯ ДЛИНЫ ТЕЛОМЕР КЛЕТОК ДОНОРСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ И КИНЕТИКИ
ВОССТАНОВЛЕНИЯ ГЕМОПОЭЗА ПОСЛЕ АЛЛО-ТГСК
ФГБОУ ВО «ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России
Введение. Теломеры представляют собой участки ДНК, расположенные на концах хромосом, состоящие из тандемных нуклеотидных повторов (ТТАООО)п, длиной от 2 до 20 кб у человека, обеспечивающих защиту от слипания и недорепликации генетически значимых участков ДИК. При этом длина теломер варьирует в зависимости от типа клеток, их пролиферативного потенциала и степени дифферен-цировки, что предполагает возможность применения этого показателя в оценке кинетики реконституции гемопоэза при проведении аллоген-ной трансплантации гемопопоэтических стволовых клеток (ТГСК).
Цель работы. Исследование взаимосвязи между длиной теломер в клетках доноров и реципиентов после ТГСК и показателями приживления трансплантата.
Материалы и методы. В исследование был включен материал 27 доноров и реципиентов после ТГСК. Все пациенты демонстрировали полный донорский химеризм, рецидивов в исследуемой выборке зарегистрировано не было. Анализ измерения абсолютной длины теломер проводился с помощью метода ПЦР в режиме реального времени с использованием двух наборов стандартных олигомеров
для измерения длины теломер и оценки уровня однокопийного гена. ДИК для проведения исследования выделяли из ядросодержащих клеток костного мозга, цельной венозной крови и аферезного материала.
Результаты и обсуждение. Медиана длины теломер у доноров нашей выборки составила 2,4 кб. Нами была обнаружена прямая корреляционная зависимостьу реципиентов после ТГСК на фоне достижения полного донорского химеризма между длиной теломер и количеством тромбоцитов (г=0,26, р=0,018) и лимфоцитов (г=0,28, р=0,016). На фоне снижения сроков приживления трансплантата длина теломер у реципиентов на 40—60-й день после ТГСК была достоверно выше, что подтверждается наличием отрицательной корреляционной зависимости между длиной теломер и сроком восстановления пула лейкоцитов (р = 0,029), тромбоцитов (р=0,038) инейтрофилов (р = 0,01).
Заключение. Полученные намирезультатыуказываютнаналичие взаимосвязи между кинетикой восстановления гемопоэза и длины теломер ядросодержащих клеток костного мозга в посттрансплантационном периоде.
Беловежец Т. Н., Горчаков А. А., Кулемзин С. В.
СОЗДАНИЕ И АНАЛИЗ ЭФФЕКТИВНОСТИ САЯ Т-КЛЕТОК, СПЕЦИФИЧНЫХ ОДНОВРЕМЕННО К СБ19 И СБ20
Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, г. Новосибирск
Введение. Несмотря на успех одобренных FDA и появление все новых CAR Т-клеточных продуктов, нельзя сказать, что такая терапия оказывается неизменноуспешной для всех пациентов. На сегодняуже получены данные, что примерно половина случаев неудачного применения С019-специфичных CAR Т-клеток — это С019-негативные рецидивы заболевания (Gardner R. et al., 2016; Pan J. et al., 2020), связанные с ускользанием опухолевых клеток из-под контроля CAR Т. Для таких пациентов имеет смысл применять CAR Т-клетки другой специфичности, например к CD20 или к CD22. Кроме того, данную проблему может частично решить создание биспецифичных CAR, одновременно распознающих два или более антигена (Zah Е. et al., 2016; Martyniszyn A. et al., 2017; Stab N. N. et al., 2020).
Цель работы. Создание и сравнение активностей двух вариантов CAR Т-клеток двойной специфичности (CD19-CD20) — биспецифич-ного и бицистронного вариантов — с моноспецифичными вариантами.
Материалы и методы. Были сконструированы лентивирусные плазмиды, кодирующие CAR с антигенраспознающими доменами от антител 2F2 (антиС020) и FMC63 (антиС019) в двух вариантах: биспецифическом (scFv соединены через гибкий линкер в одной полипептидной цепочке) и бицистронном (два отдельных рецептора находятся под контролем общего промотора и соединены через Р2А). С использованием псевдотипированных лентивирусных частиц на основе данных плазмид и Т-клеток здорового донора были получены целевые
CAR Т-клеточные продукты, для которых проводился анализ поверхностной экспрессии CAR, а также фенотипирование и анализ цито-токсичности против опухолевых клеток-мишеней.
Результаты и обсуждение. Мы получили Т-клетки здорового донора, экспрессирующие различные варианты CAR двойной специфичности (CD19—CD20): биспецифичном и бицистронном, а также показали достаточный уровень экспрессии CAR на поверхности и специфическое связывание целевых антигенов каждым из антиген распознающих модулей. Кроме того, была показана специфическая цитотоксичность CAR Т-клеток против CD20+ CD19+ клеток-мишеней на уровне, сравнимом с моноспецифичными CAR на основе антител FMC63 и 2F2. Также был изучен субпопуляци-онный состав полученных CAR Т-клеточных продуктов, поскольку известно, что коммитированные CAR Т-клетки хуже персистируют в организме (Xu X. J. et al., 2016; Viaud S. et al., 2018).
Заключение. Используемая нами методика позволяет получать популяцию CAR Т-клеток с высокимуровнем экспрессии CAR, которые способны перенаправлять цитотоксическую активность Т-клеток на опухолевые антигены, причем каждый модуль в составе CAR является функциональным. Разработка CAR двойной специфичности является актуальной задачей, так как такой вариант может обеспечить более полный контроль над опухолью, а также помочь пациентам с исходно гетерогенными опухолями.
