CC BY
17
Н. В. КОЛЕСНИКОВА, Н. Г. СОБОЛЕВА, В. Л. КТЯНЦ
ИММУНОТРОПНЫЕ ЭФФЕКТЫ ДЕРИНАТА В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ДЕТЕЙ С ОБОСТРЕНИЕМ ХРОНИЧЕСКОГО ПИЕЛОНЕФРИТА
Кафедра клинической иммунологии, аллергологии, кафедра педиатрии Кубанского государственного медицинского университета, Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: [email protected]
Исследованиями выявлено, что традиционная этиотропная терапия обострения хронического пиелонефрита у детей даже в период полной клинической ремиссии не позволяет полностью устранить нарушения показателей врожденного и адаптивного иммунитета. Включение в комплексную терапию детей с обострением хронического пиелонефрита отечественного иммуномодулятора «деринат» обнаружило его достоверную клинико-иммунологичес-кую эффективность в виде отмены дефектов основных параметров клеточного и гуморального звеньев иммунной системы с нормализацией цитокинового баланса про- и противовоспалительных цитокинов, параметров функциональной активности системы НГ. Выраженная биологическая активность дерината, стимулирующая специфические и неспецифические реакции иммунитета, позволяет добиться восстановления основных параметров иммунного статуса в гораздо более ранние сроки (в фазе частичной клинической ремиссии), чем при применении изолированной традиционной терапии.
Ключевые слова: хронический пиелонефрит, обострение, врожденный и адаптивный иммунитет, иммунодиагностика, иммунотерапия, деринат.
N. V. KOLESNIKOVA, N. G. SOBOLEVA, V. L. KTYANTS
immunotropical effects of derinat in the complex therapy of children with an aggravation of a chronic pyelonephritis
Department of clinical immunology, allergology, laboratory diagnostics FIS and PPS, department of children's diseases,
The Kuban state medical university, Russia, 350063, Krasnodar, Sedin str., 4. E-mail: [email protected]
By researches it is revealed that traditional etiotropic therapy of a chronic pyelonephritis at children even during full clinical remission does not allow to eliminate completely infringement of parameters of congenital and adaptive immunity. Inclusion in complex therapy of children with an aggravation of a chronic pyelonephritis domestic immunopotentiat derinat allows to define its authentic clinicoimmuno efficiency in the form of a cancelling of defects of key parameters cellular and humoral a part of immune system, with normalization balance for- and anti-inflammatory citotoxical, parameters of functional activity neutrophile's system. The expressed biological activity of derinat is stimulating specific and nonspecific reactions of immunity, what allows to achieve restoration of key parameters of the immune status, and in much earlier terms (in a phase of partial clinical remission), than at application of the isolated traditional therapy.
Key words: chronic pyelonephritis in a stage, congenital and adaptive immunity, immunodiagnostics, immunotherapy, derinat.
Введение микроальбуминурии и раннюю нормализацию лабо-
Ранее нами было показано, что в острую фазу раторных параметров мочи при комплексной терапии хронического пиелонефрита у детей имеют место пиелонефритов у детей [4]. В связи с изложенным достоверные признаки многозвеньевой вторичной целью исследования явилась оценка клинико-им-иммунной недостаточности [1], что обуславливает мунологической эффективности иммуномодулятора целесообразность включения в базисную терапию «деринат», включенного базисную терапию детей с заболевания элементов иммунотропной терапии. обострением хронического пиелонефрита. В этой связи интерес представляет отечественный иммуномодулятор «деринат» (ЗАО фп «Техно- Материалы и методы исследования медсервис») - высокомолекулярное физиологиче- 105 детей с диагнозом «хронический пиелонефрит ски активное вещество природного происхождения в стадии обострения» (ХПо) в возрасте от 9 до 18 лет (вытяжка из молок осетровых или лососевых рыб были распределены на 2 клинические подгруппы, отв виде натриевой соли высокоочищенной деполи- личающиеся по видам проводимой терапии. Так, дети меризованной нативной дезоксирибонуклеиновой 1-й подгруппы (50 человек) получали традиционную кислоты с молекулярной массой 270-500 кД) [2, 3]. антибактериальную терапию в виде «защищенных» пе-Выбор данного иммуномодулятора обусловлен про- нициллинов и цефалоспоринов 3-го поколения, а так-тивовоспалительными и репаративными свойствами же терапию анафероном (по 1 таблетке 3 раза в день дерината, обеспечивающими полное исчезновение сублингвально за 30 минут до приема пищи в течение
1 месяца); дети 2-й клинической подгруппы (55 человек) получали наряду с традиционной терапией им-муномодулятор «деринат» по схеме: внутримышечно по 5 мл 1,5%-ного раствора с интервалом 48 часов № 5, а затем интраназально по 2 капли 3 раза в день в обе половинки носа в течение 2 недель. Им-мунотропная терапия подключалась на 3-й день после начала традиционной терапии. Оценка иммунологических параметров у детей клинических подгрупп проводилась через 3 недели (фаза частичной ремиссии) и через 6 месяцев (фаза полной ремиссии) от начала терапии. Группу контроля составили 45 практически здоровых детей того же возраста. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов оценивали методом проточной цитофлю-орометрии («FacsCan», «Becton Dickinson»), используя моноклональные антитела производства «Becton Dickinson» (США). В периферической крови определяли содержание Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов/ индукторов (CD3+CD4+), цитотоксических Т-клеток (CD3+CD8+) с расчетом иммунорегуляторного индекса (ИРИ) (CD3+CD4+/CD3+CD8+), а также NK-лимфо-цитов (CD16+CD56+) и В-клеток (CD19+). Сывороточные концентрации IgG, IgM, IgA определяли методом радиальной иммунодиффузии по Манчини, содержание ЦИК - методом жидкостной преципитации 4%-
ным ПЭГ-6000, концентрацию провоспалительных (IL1P) и противовоспалительных (IL4) цитокинов -методом ИФА по тест-системам «ООО ЦИТОКИН» (г. Санкт-Петербург). Рассчитывали цитокиновый коэффициент (КЦ) как отношение IL1P/IL4, величина которого прямо коррелирует с клинической тяжестью заболевания [5]. Оценка функциональной активности системы нейтрофильных гранулоцитов (НГ) проводилась по общему числу активно фагоцитирующих клеток (%ФАН), показателям поглотительной (ФЧ, ФИ) и переваривающей способности (%П, ИП) в отношении St. aureus (штамм № 209). Оксидазную биоцидность НГ оценивали с помощью спонтанного и стимулированного NBT-теста по содержанию формазан-пози-тивных клеток (%ФПК), среднему цитохимическому индексу (СЦИ) и коэффициенту мобилизации (КМ) как отношения %ФПК в стимулированном NBT-тесте к таковому в спонтанном [6]. Для расчета статистических показателей с определением Т-критерия Стьюдента использовались программы «Microsoft Excel» и пакет прикладных программ «STATISTICA 6.0».
Результаты исследования
Установлено, что традиционное лечение не приводило к восстановлению параметров клеточного иммунитета во все сроки исследования, тогда как включение
Таблица 1
Влияние комбинированной иммунотропной терапии на параметры клеточного иммунитета у детей с хроническим пиелонефритом в активной фазе процесса (М±м, р)
Группа Т-лимфоциты В-лимфоциты NK-лимфоциты
CD3+ % CD3+ абс. CD3+ CD4+ % CD3+ CD4+ абс. CD3+ CD8+ % CD3+ CD8+ абс. ИРИ у. е. СD19+ % СD19+ абс. CD16+ CD56+ % CD16+ CD56+ абс.
1-ХПНа До лечения 55,25± 1,47* 1,29± 0,08* 37,50± 2,10* 0,87± 0,02* 18,50± 0,76* 0,44± 0,06* 2,05± 0,04 10,25± 0,44* 0,25± 0,02* 37,00± 1,12* 1,19± 0,02*
1-ХПНа Через 3 недели 53,84± 1,15* 1,27± 0,03* 37,89± 2,23* 0,90± 0,03* 18,58± 0,87* 0,44± 0,16* 2,04 10,79± 0,22* 0,26± 0,01* 31,02± 1,18* 0,76± 0,04*
1-ХПНа Через 6 месяцев 55,74± 1,27* 1,31± 0,05* 39,96± 2,11* 0,98± 0,04* 19,10± 0,69* 0,49± 0,25* 2,04 10,80± 0,24* 0,28± 0,04* 25,13± 1,21* 0,65± 0,05*
2-ХПНа До лечения 55,25± 1,47* 1,29± 0,08* 37,50± 2,10* 0,87± 0,02* 18,50± 0,76* 0,44± 0,06 2,05± 0,04 10,25± 0,44* 0,25± 0,02* 37,00± 1,12* 1,19± 0,02*
2-ХПНа Через 3 недели 56,16± 1,10Л 1,39± 0,03 41,10± 2,15* 1,10± 0,05*л 19,66± 0,59л 0,51± 0,08л 2,09± 0,02 11,02± 0,09л 0,28± 0,01 27,03± 1,02*л 0,67± 0,03*л
2-ХПНа Через 6 месяцев 58,05± 1,47л 1,67± 0,08л 46,97± 2,13л 1,29± 0,08л 22,97± 0,75л 0,59± 0,04л 2,14± 0,01л 11,98± 0,02л 0,33± 0,04л 18,03± 1,25*л 0,47± 0,02л
Контроль (здоровые) 57,30± 1,13 1,59± 0,03 45,50± 2,04 1,26± 0,03 21,2± 0,39 0,59± 0,04 2,13± 0,05 12,5± 0,29 0,35± 0,03 15,5± 0,09 0,43± 0,03
Примечание: 1-ХПНа - 1-я подгруппа (сравнения) детей с ХПН в активную фазу;
2-ХПНа - 2-я подгруппа (основная клиническая) детей с ХПН в активную фазу; * - достоверность отличий от контроля (р<0,01); л - достоверность межподгрупповых различий (р<0,01).
в комплексную традиционную терапию дерината привело к преимущественной нормализации содержания Т- и В-лимфоцитов, а также величины ИРИ в ранние сроки наблюдения с полным их восстановлением через 6 месяцев от начала иммунотропного лечения (табл. 1). Между тем содержание CD16(+)CD56(+)-лимфоци-тов было достоверно выше, чем в контроле, однако относительно детей 1-й клинической подгруппы содержание ЫК-клеток было достоверно ниже: в 1,4 раза (через 3 недели) и в 1,1 раза (через 6 месяцев).
Нормализация содержания сывороточных !дв, 1дМ, !дА наблюдалась в обеих клинических подгруппах к концу мониторинга (через 6 месяцев), однако при включении в терапию дерината она наступала уже на стадии частичной компенсации (табл. 2). Изолированная традиционная терапия вызывала лишь тенденцию к снижению концентрации ЦИК: даже через 6 месяцев их содержание в 1,4 раза превышало таковое в контроле. Между тем при включении дерината в комплексную терапию обнаружено достоверное снижение концентрации ЦИК уже в фазу частичной клинической ремиссии, с полной нормализацией показателя к 6-му месяцу наблюдений. Содержание !1_1р при традиционной терапии достоверно превышало таковое в контрольной группе детей во все сроки исследования, однако уже через 3 недели от начала комплексной иммунотропной терапии имела место нормализация показателя, наиболее выраженная к концу наблюдений (табл. 2). Средняя концентрация 11_4 в сыворотке крови детей 1-й клинической подгруппы
продолжала достоверно возрастать относительно возрастной нормы, наиболее выраженно - в фазу полной клинической ремиссии, тогда как у детей 2-й клинической подгруппы значения концентрации 11_4 как в фазу частичной, так и полной клинической ремиссии вошли в полуторасигмальную зону контроля (табл. 2). Сравнительная оценка коэффициента цитокинового баланса (!1_1р/!1_4) показала соответствие такового контрольным значениям в обеих клинических подгруппах к концу наблюдения. Однако если в 1-й подгруппе снижение коэффициента происходило за счет возрастания концентрации 11_4, то при иммунотропном лечении - за счет нормализации содержания как !1_1р, так и 11_4.
В обеих клинических подгруппах во все сроки наблюдения исходно высокий процент активных фагоцитов достоверно снижался до уровня возрастной нормы. Между тем в динамике традиционной терапии резкая активация поглотительной способности фагоцитов (возрастание ФЧ и ФИ в среднем в 1,2 раза) и дефекты оксидазной биоцидности клеток привели к угнетению их переваривающей способности. Включение в базисную терапию дерината не вызывало усиления поглотительной способности, а показатели переваривания и оксидазной биоцидности НГ полностью нормализовались в период полной клинической ремиссии (табл. 3).
Обсуждение
Таким образом, изолированная этиотропная терапия ХПо у детей даже в период полной клинической
Таблица 2
Влияние комбинированной иммунотропной терапии на параметры гуморального иммунитета у детей с хроническим пиелонефритом в активной фазе процесса (М±м, р)
Группа |дм г/л 1дА г/л г/л ЦИК пг/мл !Ь1Р нг/мл !Ь4 нг/мл КЦ (!L1p/!L4) у. е.
1-ХПНа До лечения 1,14±0,07* 1,44±0,03* 14,21±0,94* 29,21±2,02* 111,07±3,24* 53,26±1,12* 2,35±0,31*
1-ХПНа Через 3 недели 1,17±0,03* 1,49±0,07 14,07±0,34* 29,00±1,86* 85,23±2,41* 65,13±3,21* 1,33±0,11*
1-ХПНа Через 6 месяцев 1,29±0,09 1,50±0,05 13,10±0,28* 26,14±1,32* 48,11±2,12* 87,35±4,55* 0,60±0,03
2-ХПНа До лечения 1,14±0,07* 1,44±0,03* 14,21±0,94* 29,21±2,02* 111,07±3,24* 53,26±1,12* 2,35±0,31*
2-ХПНа Через 3 недели 1,27±0,04л 1,51±0,04 13,18±0,21л 21,13±1,53л 69,53±2,21л 50,24±4,11л 1,41±0,15*
2-ХПНа Через 6 месяцев 1,36±0,09 1,59±0,06 11,98±0,26л 18,85±2,00л 32,87±1,95л 51,75±5,14л 0,62±0,10
Контроль (здоровые) 1,31±0,04 1,53±0,04 12,57±1,01 19,30±1,12 34,00±2,50 50,80±4,70 0,69±0,09
Примечание: 1-ХПНа - 1-я подгруппа (сравнения) детей с ХПН в активную фазу;
2-ХПНа - 2-я подгруппа (основная клиническая) детей с ХПН в активную фазу; * - достоверность отличий от контроля (р<0,01); л - достоверность межподгрупповых различий (р<0,01).
Таблица 3
Влияние комбинированной иммунотропной терапии на функциональную активность НГ у детей с хроническим пиелонефритом в активной фазе процесса (М±м, р)
Группа %ФАН ФЧ ФИ %П ИП NBT-спонт. NBT-стимул. КМ
СЦИ %ФПК СЦИ %ФПК
1-ХПНа До лечения 58,18± 1,95* 5,29± 1,10 2,95± 0,16 48,77± 2,28* 0,56± 0,12* 0,56± 0,02* 4,71± 0,25* 0,61± 0,04* 3,99± 1,21* 0,85± 0,04*
1-ХПНа Через 3 недели 56,25± 1,15* 6,27± 1,16* 3,56± 0,05* 39,10± 2,10* 0,50± 0,28* 0,43± 0,04 4,98± 0,91* 0,59± 0,02 5,12± 1,04* 0,87± 0,06*
1-ХПНа Через 6 месяцев 48,64± 2,04 6,35± 1,11* 3,68± 0,04* 35,14± 2,33* 0,45± 0,37* 0,40± 0,01 5,77± 1,12* 0,50± 0,03 5,88± 1,14* 1,02± 0,05*
2-ХПНа До лечения 58,18± 1,95* 5,29± 1,10 2,95± 0,16 48,77± 2,28* 0,56± 0,12* 0,56± 0,02* 4,71± 0,25* 0,61± 0,04* 3,99± 1,21* 0,85± 0,04*
2-ХПНа Через 3 недели 48,11± 1,23 5,10± 1,13 3,00± 0,70 50,76± 2,18* 0,79± 0,16 0,50± 0,04* 4,96± 0,45* 0,84± 0,09* 6,79± 1,47* 1,37± 0,08
2-ХПНа Через 6 месяцев 47,08± 2,13 4,89± 0,75 2,94± 0,88 55,89± 1,48 1,75± 0,62 0,48± 0,03* 6,37± 0,75 0,89± 0,03* 8,97± 2,21 1,42± 0,09
Контроль (здоровые) 46,30± 1,18 4,42± 0,86 2,78± 0,79 57,3± 2,21 1,96± 0,19 0,38± 0,04 7,00± 1,00 0,56± 0,06 9,98± 2,32 1,44± 0,03
Примечание: 1-ХПНа - 1-я подгруппа (сравнения) детей с ХПН в активную фазу;
2-ХПНа - 2-я подгруппа (основная клиническая) детей с ХПН в активную фазу; * - достоверность отличий от контроля (р<0,01).
ремиссии при отсутствии субъективных жалоб, повышенной температуры тела, при нормальном количестве лейкоцитов и СОЭ в общем анализе крови не позволяет полностью устранить нарушения в иммунном статусе. Количественный дефицит CD3(+)-, CD4(+)СD8(+)-, CD19(+)-лимфоцитов, высокая концентрация !дв, ЦИК, 11_1р, 11_4 и дефекты фагоцитарного звена могут быть связаны с известной способностью антибиотиков нарушать взаимодействие Т- и В-лимфоцитов в иммунном ответе, угнетать дифференцировку полипотентных стволовых клеток с уменьшением количества Т- и В-лимфоцитов [7]. Включение дерината в комплексную терапию детей с ХПо продемонстрировало его достоверную клинико-иммунологическую эффективность в виде отмены дефектов клеточного и гуморального звена иммунной системы, с нормализацией цитокинового баланса про- и противовоспалительных цитокинов и уровня функционирования НГ.
Поскольку данный иммуномодулятор по своей структуре является родственным организму человека [8], его фармакокинетика не требует высоких энергетических затрат, что очень важно при лечении воспалительных процессов у детей, отличающихся интенсивным метаболизмом [9]. Кроме того, важно, что использование в терапии детей с ХПо дерината позволяет добиться клинико-иммунологической эффективности в гораздо более ранние сроки (в фазе частичной клинической ремиссии), чем при изолированной традиционной терапии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Колесникова Н. В., Ктянц В. Л. Состояние врожденного и адаптивного иммунитета при обострении хронического пиело-
нефрита у детей // Кубанский научный медицинский вестник. -2009. - № 3 (108). - С. 52-61.
2. Каплина Э. Н, Ершов Ф. И., Наровлянский А. Н. и соавт. Механизм действия природного иммуномодулятора «деринат» // Мат. 2-го Всемирного конгресса по иммунологии и аллергологии. -М., 2004. - С. 93.
3. Каплина Э. Н., Вайнберг Ю. П. // Деринат - природный иммуномодулятор для детей и взрослых. - М.: Научная книга. -2005.- С. 76.
4. Нежданова М. В., Солдатов О. М., Балыкова Л. А. и соавт. Использование дерината у детей с пиелонефритом // Дет. больница. - 2003. - № 2. - С. 53-55.
5. Кузник Б. И., Гаймоленко И. М., Цыбенова Б. Ц. Влияние вилона на иммунитет детей с хроническими заболеваниями легких // Цитокины и воспаление. - 2003. - Т. 2. № 4. - С. 21-26.
6. Нестерова И. В., Колесникова Н. В., Чудилова Г. А. Комплексное трехуровневое исследование системы ней-трофильных гранулоцитов с возможной диагностикой им-мунодефицитных состояний при различной патологии // Методич. рекомендации, МЗРФ. - М., 1996.- № 96/11. -25 с.
7. Соловьев Г. М., Петрова И. В., Ковалев С. В. Иммунокор-рекция, профилактика и лечение гнойно-септических осложнений в кардиохирургии. - М., 1987. - С. 160.
8. Куссельман А. И., Супоня Ю. М. Иммунореабилитация детей, больных пиелонефритом // Int.Journ.Immunorehabilit. - 2002. -№ 4 (2). - С. 228-232.
9. Куссельман А. И. Клиническая эффективность препарата «деринат» в педиатрической практике // Terra Medica nova. - 2007. -№ 2. - С. 21-25.
Поступила 03.06.2009
