CC BY
31
гина активно участвовать в процессах биогенеза АКМ, уместно предположить, что, как и при применении АНП, NO-эффект имеет место и в этом случае.
Таким образом, АНП нивелировал, а даларгин ослаблял последствия блокады синтеза оксида азота. В настоящее время молекулярные структуры пептидной природы считаются одной из самых перспективных основ для создания нового поколения лекарственных средств. Выявленные в данном эксперименте свойства АНП и даларгина ингибировать проли-феративный ответ гладких миоцитов и купировать развитие оксидативного стресса могут быть использованы при разработке новых методов профилактики и коррекции гиперреактивности и патологического ремоделирования воздухоносных путей на ранних этапах онтогенеза.
Литература
1. Арутюнян A.B., Дубинина Е.Е,, Зыбина H.H. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: Мет. рек. СПб., 2000.
2. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И. и др. Свободные радикалы в живых системах // ВИНИТИ АН СССР: Итоги науки и техники. Сер. биофизика. М., 1991. Т. 29.147 с.
3. Лишманов Ю.Б., Нарыжная Н.В., Маслов Л.Н. // Вопр. мед. химии. 1999. Т. 45. Вып. 3. С. 227-231.
4. Маслов Л.Н., Реброва Т.Ю. // Эксперим. и клин, фармакология. 2000. Т. 63, №3. С. 24-28.
5. Реброва Т.Ю., Маслов Л.Н., Лишманов Ф.Н. и др. // Рос. физиол. журнал им. И.М. Сеченова. 2001. Т. 87. №5. С. 628-641.
6. Boer R., Ulrich W.R, Klein Т. et al. // Mol. Pharmacol. 2000. Vol. 58, №5. P. 1026-1034.
7. Hamad A.M., Jonson S.R., Knox A.J. // Am. J. Physiol. 1999. Vol.277, №5. P. L910-918.
8. Khavandgar S., Homayoun H., Dehpour A. // Neurosci Lett. 2002. Vol. 329, №2. P. 237-240.
9. Kiemer A.K., Vollmar A.M. //J. Biol. Chem. 1998. Vol. 273, №22. P. 13444-13451.
10. Kiemer A.K., Vollmar A.M. // Immunol. Cell Biol. 2001. Vol. 79, №1. P. 11-17.
11. Kuzmenko A. I. //West. Med. J. 1999. Vol. 71, №4. P. 63-66.
12. LiuJ., Dong C„ Cazin L. et al. // Brain Res. Dev. Brain. Res. 2001. Vol. 126, № 2. P. 211-215.
13. Mikawa K., Kume H., Takagi K. // Arzneimittel-forschung. 1998. Vol. 48, № 9. P. 914-918.
14. Okawa H., Horimoto H., Mieno S. et al. //J. Cardiol. 2002. Vol 39, № 6. P. 299-304.
15. Warburton D„ Schwarz M., Tefft D. et al. // Mech. Dev. 2000. Vol. 92, № 1. P. 55-81.
□ □□
/ Иг м
/ ^¡рж
г ^¡К
УДК 612.215-092.19.001.6 К.С. Голохваст, С.С. Целуйко
ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ ЦЕОЛИТОВ ВАНГИНСКОГО МЕСТОРОЖДЕНИЯ ПРИ ИНГАЛЯЦИОННОМ ПУТИ ВВЕДЕНИЯ В УСЛОВИЯХ ДЛИТЕЛЬНОГО ОХЛАЖДЕНИЯ
Амурская государственная медицинская академия, г. Благовещенск
Природные цеолиты — минералы, относящиеся к группе каркасных алюмосиликатов, в последние десятилетия находят все большее применение в медицинской практике, что объясняется широким спектром фармакологического воздействия и, в первую очередь, их высокой ионообменной и адсорбционной способностью. Благодаря этим свойствам цеолиты оказывают выраженное антитоксическое и гепатопротек-адрное действие, участвуют в нормализации обмена,
стимулируют регенераторные процессы в организме, а также имеют иммуномодулирующий эффект, в частности, стимулируя клеточный иммунный ответ [2, 3,6, 8, 9-11]. Однако практически все работы, посвященные воздействию цеолитов на организм человека или животного, касаются их перорального введения.
Цель настоящей работы заключалась в оценке влияния природных цеолитов Вангинского месторождения Амурской области на состояние клеточ-
ных популяций и морфологические показатели клеток бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) крыс при ингаляционном пути введения в условиях длительного охлаждения.
Материалы и методы
Исследования проводились на белых беспородных крысах. В опыт было взято 80 белых крыс. Для оценки иммуномодулирующего эффекта цеолитов Ван-гинского месторождения исследовали наиболее массово представленные клетки — макрофаги и лимфоциты бронхоальвеолярного лаважа. Для экспериментального подавления иммунной системы дыхательных путей животных охлаждали в климатической камере "ILKA" ("Feutron", ФРГ) при температуре 15°С. Охлаждение проводилось в течение 15 суток по 3 часа в день. Часть животных до охлаждения подвергалась ингаляциям цеолитов в попытке компенсировать повреждающее действие холода. В соответствии с этим все животные были разделены на 4 группы по 20 особей: "контроль" — интактные животные; "холод" — охлаждаемые животные; "цеолит" — животные, которым ингаляционно вводились цеолиты; "це-олит+холод" — охлаждаемые животные, которым ингаляционно вводились цеолиты. После экспериментальных воздействий проводились бронхоальвеоляр-ный смыв и изготовление мазков. На препаратах идентифицировали клетки, и в каждой группе производили подсчет относительного и абсолютного содержания всех жизнеспособных клеток, относительного числа макрофагов и лимфоцитов, а также морфомет-рическую оценку ряда клеточных параметров. Измерено по 500 макрофагов и 500 лимфоцитов из каждой группы. Статистическая обработка результатов заключалась в получении средних значений и доверительных интервалов к ним при уровне значимости р=0,05.
Результаты и обсуждение
Морфометрические исследования клеток разных экспериментальных групп животных показали следующее. Количество жизнеспособных клеток в группе "контроль" составило 88,2% от общего количества клеток. При воздействии холода наблюдалось снижение количества жизнеспособных клеток до 61%, что объясняется повреждающим действием холода, неоднократно описанным в литературе [4, 5]. При этом абсолютное число клеток в одном мл возрастало с 1,5x105 в группе "контроль" до 5,8x105 в группе "холод". Подоб-
Морфологические параметры макрофагов в разных группах
Параметры Группы
"контроль" "холод" "цеолит" "цеолит+холод"
Округлость клетки 1,62±0,14 1,82+0,13 2,01±0,18 1,75+0,16
Округлость ядра 1,21 ±0,11 1,12±0,09 1,23±0,12 1,14+0,13
Длина клетки, мкм 8,14±0,52 7,01+0,49 9,14+0,52 7,55±0,46
Длина ядра, мкм 5,12±0,38 4,22±0,41 6,39±0,54 4,65±0,39
Резюме
Методом морфометрии изучали влияние цеолитов Вангинского месторождения Амурской области на состояние клеточных популяций макрофагов и лимфоцитов и функциональную активность клеток в норме и при экспериментальном воздействии холода. Обнаружено снижение доли жизнеспособных клеток, функциональной активности макрофагов, увеличение абсолютного числа клеток и доли лимфоцитов. Показано, что введение цеолитов охлажденным животным приводило к нормализации указанных параметров. Обсуждается возможный им-муномодулирующий эффект цеолитов Вангинского месторождения.
K.S. Golokhvast, S.S. Tseluyko
IMMUNOMODULATION EFFECT OF ZEOLITES OF VANGIN DEPOSIT BY INHALATION WAY IN LONG COOLING CONDITION
Amur state medical academy, Blagoveshchensk Summary
Method of a morphometry studied influence of zeolites Wangins of a deposit of the Amur area on a condition of cell populations of macrophages and lymphocytes and functional activity of cells in norm and at experimental influence of a cold. Depression of a share of teleorganic cells, augmentation of absolute number of cells, augmentation of a share of lymphocytes, depression of functional activity of macrophages is revealed. It is shown, that introduction of zeolites by the cooled animal led to normalization of the specified parameters. The possible immune effect of zeolites Wan-gins of a deposit is discussed.
ное увеличение абсолютного числа клеток в легких происходит в результате холодовой пролиферации и отмечалось другими авторами [5, 7]. Ингаляторное введение цеолитов животным не оказало статистически значимого влияния на жизнеспособность клеток и на их число, хотя при воздействии холода добавление в ингаляционную среду цеолита носит явный защитный характер, относительное число клеток в группе "цеолит+холод" составило 77% (рис. 1), а абсолютное — 1,8x105 (рис. 2). Таким образом, общее число клеток по сравнению с группой "холод" снизилось в 2,3 раза,
контроль холод цеолит цеолит +
холод
Е жизнеспособные Ш нежизнеспособные
Рис. 1. Относительное содержание жизнеспособных и нежизнеспособных клеток в разных группах животных
100 тыс. в 1 мл
контроль
холод
цеолит
цеолит + холод
3 удельное количество клеток
О тносительное количество клеток
__\'.','/,WA_____
Рис. 2. Абсолютное содержание жизнеспособных клеток в разных группах животных
но оказалось значительно вы иге, чем у контрольных животных.
Нормальное соотношение макрофагов и лимфоцитов в группе "контроль" составляло 70 и 30% соответственно. Под действием холода доля макрофагов упало до 28%, а относительное содержание лимфоцитов возросло до 72%. Такая инверсия может объясняться тем, что кроме классических защитных функций макрофаги также выделяют факторы, ингибиру-ющие функцию Т-лимфоцитов [1 ]. Ранее было показано, что инвертирование количества макрофагов и лимфоцитов можно объяснить возрастанием пула лимфоцитов, а не гибелью макрофагов [5,7]; соответственно, ингибирующая функция макрофагов падает за счет снижения их синтетической активности. Об этом свидетельствуют результаты морфометрии некоторых клеточных параметров, приведенные в таблице. Так, у макрофагов из группы "холод" можно отметить статистически достоверное уменьшение таких морфометрических показателей, как округлость ядра, длина клетки, длина ядра, площадь клетки, площадь ядра по сравнению с контролем (таблица).
При воздействии цеолитов на интактных животных картина популяционного соотношения статистически не отличалась от распределения в контрольной группе. При ингаляторном введении цеолитов охлаждаемым животным количество макрофагов и лимфоцитов стремилось к нормальным значениям, т.е. частично нивелировалось повреждающее действие холода — 53 и 47% соответственно. В то же время у макрофагов животных из группы "цеолит" отмечалось увеличение округлости и длины клетки, длины ядра и уменьшение площади клетки, площади ядра и ядерно-цито плазматического соотношения, по сравнению с контрольной группой. Это может свидетельствовать о частичном восстановлении синтетической функции макрофагов и эффективности процессов ингибиро-вания пролиферации лимфоцитов.
Рис. 3. Относительное содержание макрофагов и лимфоцитов в разных группах животных
Таким образом, цеолиты Вангинского месторождения Амурской области оказывают иммуномодули-рующее и криопротекторное действие на систему местного иммунитета нижних дыхательных путей. Понимание конкретных механизмов этих процессов требует дальнейшего изучения.
Литература
1. Бойчук Н.В., Исламов P.P. , Улумбеков Э.Г. и др. Гистология (введение в патологию). М.: ГЭОТАР,
1997. 960 с.
2. Брек Д. Цеолитовые молекулярные сита. М.: Мир, 1976. 781 с.
3. Гамидов М.Г. Эффективность использования цеолитов Приамурья при желудочно-кишечных болезнях животных и птицы: Автореф. дис.... д-ра вет. наук. Улан-Удэ, 2004. 43 с.
4. Герасин В. А., Паламарчук Г.Ф., Ивчик Т.В. // Содержимое бронхов при хроническом бронхите. Л.: ВНИИ пульмонологии МЗ СССР, 1981. С. 96-99.
5. Прокопенко A.B. Системный анализ структурных проявлений компенсаторно-приспособительных реакций нижних дыхательных путей: Дис.... канд. мед. наук. Благовещенск, 2000. 238 с.
6. Убашеев И.О. Природные лекарственные средства при повреждениях органов и тканей. Улан-Удэ,
1998. 224 с.
7. Целуйко С.С., Прокопенко A.B. Системный анализ компенсаторно-приспособительных реакций в легких. Благовещенск, 2001. 124 с.
8. Ivkovic S., Deutsch U., Siiberbach A. et al. //J. Adv. Ther., 2004. №21 (2). P. 135-147.
9. Katie M., Bosnjak B. et al. // Frontiers in Biosciences, 2006. Vol 11, P. 1722-1732.
10. Pavelrc К., Katie M. et al. //J. Cancer Res. Clin Oncol, 2002. Jan. 128(1). P. 37-44.
11. Pavelic K. // Croatica Chemica Acta, 2005. Vol 78(1), P. 91-98.
QQO
