CC BY
293
УДК 616-097:547.262
ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ, ВЫЗЫВАЕМЫЕ МИЛДРОНАТОМ, РИБОКСИНОМ И ЭССЕНЦИАЛЕ ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ ПОСТУПЛЕНИИ В ОРГАНИЗМ
ЭТАНОЛА
© Павлова М.В., Лосенок С.А., Бровкина И.Л., Прокопенко Л.Г., Быстрова Н.А. Кафедра биологической химии Курского государственного медицинского университета
Длительное введение этанола снижает энергетический и антиоксидантный потенциал эритроцитов, функционально-метаболическую активность (ФМА) нейтрофилов, угнетает иммунологическую реактивность организма, индуцирует появление иммуносупрессирующих свойств у легких эритроцитов. Инъекции милдроната уменьшали выраженность указанных изменений, а в сочетании с рибоксином или эссенциале нормализовали иммунометаболические параметры. Тромбоциты алкоголизированных крыс снижали антиоксидантный статус и индуцировали появление иммуносупрессирующей активности у эритроцитов, угнетали ФМА нейтрофилов. Введение диклофенака и эссенциале отменяли эти свойства тромбоцитов. Рибоксин предотвращал иммуносупрессирующие свойства эритроцитов, а при введении милдроната нейтрофилы приобретали резистентность к действию тромбоцитов.
Ключевые слова: иммуномодуляция, алкогольная интоксикация, милдронат, рибоксин, эссенциале, диклофенак.
IMMUNE-METABOLIC EFFECTS OF MILDRONATE, RIBOXIN AND ESSENTIALE IN THE PROLONGED ADMINISTRATION OF ETHANOL Pavlova M.V., Losenok S.A., Brovkina I.L., Prokopenko L.G., Bystrova N.A.
Biochemistry Department of the Kursk State Medical University
The prolonged introduction of Ethanol reduces the energetic and antioxidant potential of erythrocytes, the functional-metabolic activity (FMA) of neutrophils, suppresses the immunologic activity of the body, and induces the appearance of immune-suppressive properties in light erythrocytes. The injections of Mildronate have reduced the expressiveness of the changes mentioned above, and in combination with Reboxin or Essentiale have normalized the immune-metabolic parameters.
Thrombocytes of alcoholized rats reduced the antioxidant status and induced the appearance of immune-suppressive activity of erythrocytes, suppressed the FMA of neotrophils. The administration of Diclophenac and Essentiale canceled these properties of thrombocytes. Riboxin prevented the immune-suppressive properties of erythrocytes, and on Mildronate injecting neutrophils gained the resistance to the thrombocyte action.
Key words: immune modulation, alcohol intoxication, Mildronate, Riboxin, Essentiale, Diclophenac.
Длительное поступление этанола в организм приводит к усилению свободнорадикального окисления и обусловленного им перекисного окисления липидов. В значительной степени усиливается окисление липидов мембран гепатоцитов, эритроцитов, моноцитов и лимфоцитов. Образование избыточного количества активных метаболитов кислорода усиливает выраженность гиперли-попротеидемии, повышает содержание в крови окислительно-модифицированных форм липопротеидов, которые легко фагоцитируются макрофагами. Это сопровождается "респираторным взрывом" и генерализацией свободно-радикальных процессов. Перекис-ное окисление липидов мембран клеток при-
водит к изменению в них соотношения холестерина и фосфолипидов, содержание холестерина увеличивается, а фосфолипидов снижается [5, 13, 14].
Для лечения последствий алкогольной интоксикации применяют милдронат, угнетающий карнитинзависимый метаболизм высокомолекулярных жирных кислот и стимулирующий альтернативные пути энергопродукции в первую очередь гликолиз [11]. Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют о защитном действии милдроната при гемодинамических, токсических и алиментарных формах нарушения гомеостаза [4, 9,
Вопрос об иммунотропной активности милдроната и его сочетаний с другими препаратами при алкогольной интоксикации остается невыясненным.
Целью работы было изучение иммуномодулирующего действия милдроната, рибоксина и эссенциале при длительном поступлении в организм этанола.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты проведены на крысах Ви-стар массой 180-200 г. Этанол вводили внут-рижелудочно через зонд 60-кратно с интервалом 24 часа по 0,3 г/100 г массы тела, контролем служили интактные крысы и животные, получавшие по аналогичной схеме дистиллированную воду. За трое суток до конца алкогольной нагрузки животным внутрибрюшин-
g
но вводили эритроциты барана (ЭБ) (10 клеток/100 г массы тела) и спустя 4 суток в стопу задней конечности 106 клеток.
Через 5 суток после первой инъекции антигена определяли выраженность гуморального иммунного ответа (ГИО) (по количеству антителообразующих клеток (АОК) в селезенке) и гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) (по разнице массы регионарного и контрлатерального лимфоузлов - РМЛ). Фагоцитарно-метаболическую активность (ФМА) нейтрофилов оценивали по индексу активности фагоцитов и окислительному резерву нейтрофилов (ОРН) [12, 21].
В крови определяли биохимические показатели, характеризующие состояние цитоплазматической мембраны гепатоцитов - активность аланин- и аспартатаминотрансфера-зы (АЛТ и АСТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) и концентрации общего билирубина (ОБ).
Эритроциты выделяли по Beutler (1985), фракционировали в градиенте яичного альбумина и получали фракции легких (< 1,079) и тяжелых (>1,117) эритроцитов. Иммуномодулирующую активность эритроцитов и их фракций определяли путем 3-кратного (с 24 часовым интервалом) внутривенного введения клеток (10 /100 г массы) аллогенным животным.
В лёгких и тяжелых эритроцитах определяли содержание макроэргических соединений - 2,3-бифосфоглицерата (БФГ) и аденоз-
интрифосфата (АТФ) [2], активность антиок-сидантных ферментов - супероксиддисмута-зы (СОД) и глутатионредуктазы (ГР) [10], содержание ацилгидроперекисей (АГП) и малонового диальдегида (МДА) [1].
Выделение NO лейкоцитами устанавливали с помощью реакции Гисса [3]. Тромбоциты выделяли из плазмы обогащенной этими элементами путем центрифугирования в градиенте плотности человеческого альбумина 15 мин при 1000g [7]. Количество МДА в тромбоцитах оценивали по Е.В. Негреску (1992) [15].
Липопротеиды низкой и очень низкой плотности (ЛНП и ЛОНП) определяли гепа-ринмарганцевым методом.
Результаты обрабатывали статистически с использованием критериев Стьюдента и Вил-коксона-Манна-Уитни.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В эритроцитах крыс, длительно получавших этанол, снижалась концентрация БФГ и АТФ, активность СОД, повышалось содержание АГП и МДА. В крови крыс появлялись легкие эритроциты, обладающие иммуносу-прессирующими свойствами. После длительного введения этанола у крыс снижались показатели ИАФ и ОРН, этанол угнетал развитие ГИО и ГЗТ, у животных повышалась активность АЛТ, АСТ и ЩФ в плазме крови.
Введение милдроната усиливало, но не нормализовало выраженность показателей ФМА ПЯЛ, иммунологическую реактивность и состояние мембраны гепатоцитов. Рибоксин и эссенциале в выбранных дозах не оказывали существенного влияния на функции иммуноцитов и состояние мембран.
В сочетании с рибоксином милдронат нормализовал ФМА ПЯЛ, развитие ГИО и ГЗТ (табл. 1). Совместное применение милдроната с эссенциале нормализовало большинство определявшихся показателей функциональной активности иммуноцитов и гепатоцитов (табл. 2). В эритроцитах крыс, получавших этанол, милдронат и рибоксин или эссенциале, уменьшалась выраженность изменений БФГ, АТФ, СОД, АГП и МДА (табл. 3). Легкие эритроциты таких животных при
Таблица 1
Влияние милдроната и рибоксина на иммунологические функции после длительного введения этанола
Показатели Контроль Введение этанола Введение этанола, милдроната и рибоксина
1 2 3
^Ф 64,3±6,2 38,7±4,1*1 60,9±6,4*2
ОРИ 17,8±1,6 8,6±0,9*1 16,1±1,5*2
AОК 26,2±2,9 8,8±0,9*1 24,4±2,8*2
РMЛ 4,6±0,4 2,4±0,2*1 4,1±0,4*2
Таблица 2
Влияние милдроната и эссенциале на иммунологические функции и состояние гепатоцитов при длительной алкогольной интоксикации
Показатели Контроль Введение этанола Введение этанола, милдроната и эссенциале
1 2 3
Иммунологические функции
^Ф 64,3±6,2 38,7±4,1*1 66,0±7,1*2
ОРИ 17,8±1,6 8,6±0,9*1 17,1±1,8*2
AОК 26,2±2,9 8,8±0,9*1 25,1±3,0*2
РMЛ 4,6±0,4 2,4±0,2*1 4,8±0,5*2
Состояние гепатоцитов
AЛT 0,8±0,2 4,9±0,9*1 1,1±0,3*2
ACT 0,4±0,1 2,2±0,5*1 0,6±0,2*2
ЩФ 7,5±1,4 18,6±2,5*1 10,1±2,0*2
ОБ 8,7±0,9 12,3±1,4*1 9,2±1,1*2
Таблица 3
Влияние милдроната, рибоксина и эссенциале на окислительно-энергетический потенциал
эритроцитов при алкогольной интоксикации
Показатели Контроль Введение этанола Введение этанола, милдроната и рибоксина Введение этанола, милдроната и эссенциале
1 2 3 4
БФГ 5,3±0,6 3,2±0,2*1 4,8±0,5*2 5,1±0,6*2
ATФ 1,7±0,2 0,8±0,1*1 1,8±0,2*2 1,5±0,2*2
СОД 54,7±4,0 41,2±3,5*1 51,6±3,9*2 54,0±4,5*2
ГР 112,3±12,2 117,6±19,4 108,5±15,1 114,7±14,7
Ara 1,4±0,2 3,4±0,7*1 1,6±0,3*2 1,3±0,2*2
MДA 33,7±3,9 45,0±4,6*1 36,1±4,2*2 31,7±4,8*2
аллогенном переносе не влияли на ФМА ПЯЛ, развитие ГИО и ГЗТ (рис. 1).
На основании полученных данных можно прийти к заключению о важной роли эритроцитов в развитии иммуносупрессии при алкогольной интоксикации и в реализации иммуномодулирующего действия регуляторов энергетического обмена и полиненасыщен-
ных фосфолипидов.
Проведенные ранее исследования показали, что при различных формах нарушения энергетического гомеостаза тромбоциты приобретают иммуносупрессирующие свойства. Они индуцируются липопротеидами низкой и очень низкой плотности и опосредуемые легкими эритроцитами [16, 18].
Рис. 1. Влияние милдроната, рибоксина и эссенциале на иммуносупрессирующие свойства эритроцитов при алкогольной интоксикации.
Примечание: А - АОК; Б - РМЛ. По оси абсцисс: 1. Контроль (без введения этанола и эритроцитов); 2. Введение эритроцитов, получавших этанол крыс; 3. Введение эритроцитов, получавших этанол, милдронат и рибоксин; 4. Введение эритроцитов крыс, получавших этанол, милдронат и эссенциале.
Выраженная имуносупрессирующая активность характерна для окислительно модифицированных липопротеинов низкой плотности. Они индуцируются активированными формами кислорода, генерация которых резко усиливается при токсических поражениях печени, вызываемых ксенобиотиками и этанолом [6]. Одним из наиболее часто возникающих окислителей является стабильный оксид азота (NO) и его радикал (N0), генерируемые в больших количествах клетками печени и крови [20]. Учитывая это, можно было предположить, что NO является одним из метаболитов, вызывающих окислительную модификацию липопротеидов. Проведенные для проверки этого предположения эксперименты показали, что нейтрофилы алкоголи-зированных крыс, инкубированные в полной среде (30 мин., 37°С), выделяют большее количество оксида азота (N0), чем нейтрофилы интактных животных (содержание N0 в среде соответственно равнялось 0,45 и 1,15 нмоль/5х106 клеток). Клетки осаждали центрифугированием (10 мин., 200 g), к надоса-дочной жидкости добавляли фракцию ЛНП и ЛОНП, выделенную из сыворотки интактных крыс гепаринмарганцевой смесью, и инкубировали 1 час. При инкубации в среде увеличивалось содержание МДА на 7-12% по сравнению с исходным уровнем в той же пробе.
Это позволяет считать, что под влиянием NO среды происходит окислительная модификация ЛНП и ЛОНП.
Тромбоциты интактных крыс (108 клеток) инкубировали в полной среде (2 мл), содержащей окислительно-модифицированные ЛНП и ЛОНП (ОМЛП). После инкубации (1
ч., 37°С) тромбоциты осаждали центрифугированием и определяли в них содержание МДА. До инкубации оно равнялось 0,54, по-
£
сле инкубации 1,63 нмоль/10 тромбоцитов. Таким образом, под влиянием ОМЛП произошла окислительная модификация тромбоцитов.
Эритроциты интактных животных инкубировали с окислительно-модифицирован-
8 7
ным тромбоцитами (10 тромбоцитов, 10
эритроцитов в 1 мл среды 1 час при 37°С). После инкубации и отделения тромбоцитов в эритроцитах обнаруживалось увеличение содержания продуктов ПОЛ и снижение концентрации БФГ. Такие эритроциты при алло-генном переносе супрессировали развитие иммунного ответа у интактных крыс (в норме АОК - 26,4±2,1 тыс / селезенка, после инкубации с тромбоцитами - 12,6±1,0 тыс / селезенка). Инкубация ОМТ с нейтрофилами интактных животных ингибировала их ФМА (в норме ИАФ = 64,2±5,8; ОРН = 17,8±1,5; после инкубации с тромбоцитам ИАФ=47,5±3,9;
ОРН=9,4±1,0). ОМТ in vitro не влияли на величину метаболических маркеров активации лимфоцитов (содержание в них фруктозо-2,6-дифосфата и концентрация лактата после инкубации с тромбоцитами оставались таким же как до нее).
Эффекты, вызываемые действием тромбоцитов на функциональную активность клеток, опосредуются многими факторами, одним из которых, не исключено, является индукция образования вторичных мессенджеров, в том числе простагландинов и Са2+. Учитывая это, исследовано влияние ингибитора циклооксигеназы, диклофенака, блока-тора Са2+-каналов L-типа, изоптина, на вызываемое тромбоцитами алкоголизированных животных появление иммуносупрессирую-щей активности у эритроцитов и снижение ФМА нейтрофилов. Установлено, что внесение в среду инкубации тромбоцитов и эритроцитов диклофенака или изоптина не влияло на появление иммуносупрессирующих свойств у эритроцитов. Вероятно появление иммуносупрессирующих свойств у эритроцитов не зависит от изменения содержания про-стагландинов и Са2+ в эритроцитах. Добавление в среду инкубации тромбоцитов и нейтрофилов диклофенака увеличивало ФМА последних, а внесение изоптина не влияло на показатели защитных функций этих клеток (рис. 2).
Таким образом, угнетающее влияние
тромбоцитов алкоголизированных крыс на ФМА нейтрофилов in vitro зависит от активности циклооксигеназы. Это предполагает непосредственное участие простагландинов, способных ингибировать функциональную активность нейтрофилов через увеличение в них цАМФ. Вместе с тем угнетающее влияние тромбоцитов не зависит от состояния Са2+-каналов, блокируемых изоптином. Это может рассматриваться как низкая чувствительность поглотительной и окислительной функции нейтрофилов к изменению содержания Ca2+ или как проникновение в клетку Ca2+ или как проникновение в клетку Са2+ через каналы, не блокируемые изоптином.
Введение алкоголизированным крысам эссенциале предотвращало появление у тромбоцитов свойства оказывать влияние на метаболизм и функцию эритроцитов и нейтрофилов интактных крыс. Рибоксин и милдронат такого эффекта не вызывали. Инъекции интактным животным рибоксина предотвращали снижение содержания БФГ и увеличение концентрации МДА в эритроцитах, а также появление иммуносупрессирую-щих свойств у этих клеток после инкубации их с тромбоцитами алкоголизированных крыс. Эссенциале и милдронат не снижали чувствительность эритроцитов и нейтрофилов интактных крыс к действию тромбоцитов алкоголизированных животных (табл. 4). При введении ин-
80
70
60
50
40
30
20
10
0
А
4,2
4,3
I
1234
25
20
15
10
Б
111
12 3 4
5
0
Рис. 2. Влияние диклофенака и изоптина на сниженную тромбоцитами ФМА нейтрофилов in vitro.
Примечание: А - ИАФ; Б - ОРН. По оси абсцисс: 1. Контроль (без добавления тромбоцитов); 2. Тромбоциты (без добавления препаратов); 3. Тромбоциты + диклофенак; 4. Тромбоциты + изоптин.
Таблица 4
Влияние эссенциале и рибоксина на иммуносупрессирующие свойства
тромбоцитов и эритроцитов
Клетки животных, получавших препараты Клетки животных, не получавших препараты Эффект при аллогенном переносе
Тромбоциты крыс, получавших этанол и эссенциале Эритроциты интактных крыс Нет эффекта (ОАК=26,7±2,1; РМЛ=5,2±0,4)
Тромбоциты крыс, получавших этанол и рибоксин Эритроциты интактных крыс Супрессия (ОАК=14,5±1,2; РМЛ=3,1±0,2)
Тромбоциты крыс, получавших этанол и милдронат Эритроциты интактных крыс Супрессия (ОАК=13,6±0,2; РМЛ=3,3±0,2)
Тромбоциты крыс, чавших эссенциале полу- Тромбоциты крыс, получавших этанол Супрессия (ОАК=12,8±1,0; РМЛ=3,0±0,2)
Тромбоциты крыс, чавших рибоксин полу- Тромбоциты крыс, получавших этанол Нет эффекта (ОАК=25,3±2,2; РМЛ=5,0±0,4)
Тромбоциты крыс, чавших милдронат полу- Тромбоциты крыс, получавших этанол Супрессия (ОАК=15,1±1,3; РМЛ=3,4±0,3)
тактным крысам милдроната нейтрофилы приобретали резистентность, эритроциты сохраняли чувствитєльность к действию тромбоцитов алкоголизированных животных.
Oднонаправленность действия милдроната, рибоксина и эссенциале при введении в организм алкоголизированных животных и в культуральную среду, содержащую тромбоциты крыс получавших этанол, позволяет считать, что тромбоциты во взаимодействии с эритроцитами играют важную роль в развитии иммуносупрессии при длительном поступлении в организм этанола и в реализации иммуномодулирующего действия изученных препаратов.
Pезyльтаты проведенных исследований позволяют постулировать взаимосвязь гепа-тоцитов, эритроцитов и тромбоцитов в развитии иммуносупрессии при алкогольной интоксикации и реализации иммуномодулирующего действия регуляторов энергетического обмена и антиоксидантов. Поступление в ор-
ганизм этанола приводит к нарушению метаболизма и структуры мембран гепатоцитов. Oдним из первых и постоянных проявлений, вызываемого токсическими соединениями в том числе и этанола, поражения гепатоцитов является усиление свободно-радикаль-ных процессов. При алкогольной интоксикации в гепатоцитах и лейкоцитах периферической крови повышается синтез стабильного оксида азота (NO) и его радикальной формы (NO-). Это выступает пусковым звеном появления в крови и клетках окислительно-модифицированных липопротеидов и тромбоцитов. Oкислительно-модифицированные тромбоциты во взаимодействии с эритроцитами угнетают иммунологическую реактивность организма. Вместе с тем тромбоциты за счет процессов индуцируемых простагландинами (активирующее влияние диклофенака) снижают фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов).
Aктивированные тромбоциты ингибируют спонтанную и индуцированную зимоза-ном генерацию активных метаболитов кислорода лейкоцитами [7]. Характерным для тромбоцитов является зависимость между ускорением метаболизма арахидоновой кислоты и усилением перекисного окисления липидов. Aктивация под влиянием тромбоцитов фосфолипазы Aг усиливает генерацию супероксидрадикала - иона [15]. Интенсификация перекисного окисления липидов обусловлена снижением содержания в активированных тромбоцитах витамина Е и убихино-на, являющихся основными мембранными перехватчиками свободных радикалов [13].
Тромбоциты индуцируют появление им-муносупрессирующих свойств у легких эритроцитов. Oдной из причин появления таких
свойств служит вызываемое тромбоцитами
2+
снижение активности Mg - AТФаз в мембранах эритроцитов и вызываемым этим нарушение энергообеспечения клеток [8]. Принимая во внимание изложенное, есть основание считать, что иммуносупрессорный эффект, вызываемый этанолом, в определенной степени связан с нарушением окислительно-энергетического потенциала клеток крови, участвующих в регуляции иммунологических функций. Mилдронат, рибоксин и эссенциале в парных комбинациях корректируют состояние мембран гепатоцитов, окислительно-энергетический потенциал эритроцитов и функциональную активность имму-ноцитов. Mилдронат ограничивает угнетающее влияние этанола на ФMA нейтрофилов. Это, по-видимому, обусловлено стимулирующим влиянием милдроната на ключевой фермент (фосфофруктокиназу) гликолиза, являющегося основным источником энергообеспечения этого типа клеток. Pибоксин предотвращает, вызываемое этанолом, появление иммуносупрессирующих свойств у легких эритроцитов. В основе этого лежит нормализующее влияние рибоксина на окислительно-энергетический потенциал эритроцитов [19]. Полиненасыщенные фосфолипиды эссенциале стабилизирует клеточные мембраны, за счет вызываемого антиоксидантного и заместительного эффектов [9]. Стабилизация мембран служит необходимым условием эффективного действия регуляторов энергетического обмена, этим объясняет-
ся высокая эффективность изученных парных сочетаний препаратов при алкогольной интоксикации.
Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать следующие выводы.
1. Длительное поступление в организм
этанола снижает энергетический и антиокси-дантный потенциал эритроцитов, повышает в них перекисное окисление липидов, индуцирует появление у легких эритроцитов иммуносупрессирующих свойств, снижает функционально-метаболическую активность
нейтрофилов, угнетает развитие EHO и ГЗТ, повышает в крови активность ферментов, характеризующих состояние мембран гепато-цитов.
2. Введение алкоголизированным крысам милдроната повышало ФMA нейтрофилов, иммунологическую реактивность и состояние мембраны гепатоцитов. В сочетании с рибоксином милдронат нормализовал ФMA нейтрофилов, развитие EHO и ГЗТ, совместное применение милдроната с эссенциале нормализовало большинство показателей функциональной активности, иммуноцитов и состояния мембран гепатоцитов.
3. Mилдронат в сочетании с рибоксином или эссенциале повышали энергетический и антиоксидантный потенциал, снижали выраженность перекисного окисления липидов в эритроцитах алкоголизированных крыс, отменяли иммуносупрессирующие свойства легких эритроцитов животных, получавших этанол.
4. Тромбоциты алкоголизированных крыс in vitro снижали концентрацию макроэргиче-ских соединений и повышали содержание продуктов перекисного окисления в эритроцитах интактных крыс, индуцировали у этих клеток появление иммуносупрессирующей активности. Тромбоциты алкоголизированных крыс in vitro угнетали ФMA нейтрофилов. Угнетающее влияние тромбоцитов отменялось ингибитором циклооксигеназы дик-лофенаком.
5. Эссенциале, введенный алкоголизированным крысам, предотвращал появление у тромбоцитов свойства оказывать влияние на функцию эритроцитов и нейтрофилов. P^ боксин предотвращал индуцируемое этанолом появление иммуносупрессирующих
свойств у эритроцитов интактных крыс после инкубации с тромбоцитами алкоголизированных животных. При введение интактным крысам милдроната нейтрофилы приобретали резистентность к действию тромбоцитов алкоголизированных животных.
ЛИТЕPAТУPA
1. Бенисевич В.И., Идельсон Л.Н. Oбразование перекисей непредельных жирных кислот в оболочке эритроцитов при болезни Ыар-киафава - Ыиколы // Вопр. мед. химии. -і973. - Т. 19, Вып. б. - С. 59б-599.
2. Виноградова И.Л., Багрянцева С.Ю., Дер-виз Г.В. Ыетод одновременного определения 2,3 ДФГ и AТФ в эритроцитах // Лаб. дело. -
1980., № 7. - С. 424-426.
3. Голиков П.П., Николаева Н.Ю., Картавен-ко В.И. и др. Генерация оксида азота лейкоцитами периферической крови в норме и при патологии // Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 2003., № 4. - С. 11-і3.
4. Денисюк Т.А., Лазарев А.И. Иммунометаболи-ческие эффекты, вызываемые тиамином и рибоксином при нарушении энергетического гомеостаза // X Ыеждунар. конгр. "Человек и лекарство": Тез. докл. - M., 2003. - С. б03.
5. Зенков Н.К., Меньшикова Е.Б. Oкислительная модификация липопротеинов низкой плотности // Успехи соврем. биологии. - і996. -Т.11б, № б. - С. 28б-296.
6. Зинчук В.В., Ходосовский М.Н. Участие кис-лородзависимых процессов в патогенезе ре-перфузионных поражений печени // Усп. физиол. наук. - 2006. - Т. 37, № 4. - С. 45-56.
7. Коган А.Х., Ершов В.И., Соколова И.Я., Алекперова Г.Р. Влияние тромбоцитов на генерацию активных форм кислорода лейкоцитами // Бюл. экспер. биол. и мед. - і992. -Т. 113, № б. - С. 582-584.
8. Лазарева Г.А., Бровкина И.Л., Прокопенко Л.Г. Эссенциале и рибоксин как индукторы иммуномодулирующей активности стромы эритроцитов в норме и при токсических формах анемии // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2004. - Т. б7, № 5. - С. 23-27.
9. Лазарева Г.А., Бровкина И.Л., Лазарев А.И. и др. Иммунометаболические эффекты регуляторов энергетического обмена при нарушении гомеостаза. - Курск, 200б. - 230 с.
10. Макаренко Е.В. Комплексное определение активности супероксиддисмутазы и глутати-онредуктазы в эритроцитах больных с хроническими заболеваниями печени // Лаб. дело. -1988. - № 11. - С. 48-50.
11. Мари Р., Греннер Д.., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека - М.: Мир, 1993. - Т. 1. -374 с.
12. Медведев А.Н., Чаленко В.В. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза // Лаб. дело. - 1991. - № 2. - С. 19-20.
13. Меньшиков Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов // Усп. соврем. биол. - 1993. - Т. 113, Вып. 4 - С. 422-455.
14. Нагорнев В.А., Зота Е.Г. Цитокины, иммунное воспаление и атеросклероз // Усп. соврем. биол. - 1996. - Т. 116, вып. 3. - С. 320-331.
15. Негреску Е.В., Лебедев А.В., Балденков Г.Н. и др. Антиоксиданты, перекисное окисление липидов и рецепторзависимое увеличение концентрации Са2+ в тромбоцитах человека // Вопр. мед. химии. - 1992. - Т. 38, Вып. 1. - С. 36-39.
16. Прокопенко Л.Г., Байбурин Ф.Я., Конопля А.И. Питание, гиперлипидемия и иммунитет. - Курск, 1997. - 142 с.
17. Прокопенко Л.Г., Конопля Е.Н., Ласкова И.Л. и др. Метаболическая коррекция токсических и лекарственных иммунопатий. - Курск, 1997. - 199 с.
18. Прокопенко Л.Г., Конопля Н.А., Утешев Б.С. Влияние эссенциале и рибоксина на иммуно-супрессирующие свойства тромбоцитов и эритроцитов при токсическом поражении печени // Эксперим. и клинич. фармакол. -2001, - Т. 64, № 4. - С. 37-41.
19. Прокопенко Л.Г., Бровкина И.Л. Иммунометаболические нарушения и их коррекция // Окислительный энергетический и иммунный гомеостаз (нарушение и коррекция). -Курск. - 2003. - С. 13-34.
20. Серая И.П., Нарциссов Я.Р. Современные представления о биологической роли оксида азота // Усп. совр. биол. - 2002. - Т. 122, № 3. - С. 249.
21. Щербаков В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительности нейрофилов к стимуляторам // Лаб. дело. - 1989. - № 2. - С. 3033.
