CC BY
139
4,,с™= 308б(-и+2,43ХТЗево,+0,304УВСММ-0,339ХОлигоп-0,106ТХМДА) где погрешность не превышает 5,7 %. Для расчета регрессионного уравнения объема интрафолликулярного эпителия:
- коэффициент детерминации ^2 = 0,994 > 0,95;
- уровень значимости критерия Фишера ^ = 55. до-15 < 005-
Из рассматриваемой совокупности полученным критериям соответствует только параметры «Т3 общий», «Т3 свободный», при коэффициенте корреляции не ниже 0,73 по модулю.
В окончательном виде регрессионное уравнение имеет вид:
_ = 18,7(- 1,2453 + 0,5249 Xтз „6и. + 1,7196 Xтз 1в0, >
где погрешность не превышает 3,5 %.
Таким образом, для расчета функциональной активности щитовидной железы достаточно измерить параметры «Т3 свободный», «Т3 общий», «ВСММ», «Ацилаза почек», «МДА», «Олигопептиды», «Ацилаза почек» и решить систему уравнений:
+ 0,09 X Ацилаза почек )
Yd,ф„лл»кУла = 125,53 (- 0,03 + 0,94X.
^высф .эпит.
3Q86(-1,3+2,43XT3CB0„+C,31XBCMM-0,34Xaiur0n-C,11XMflA) Y,кол„оид. = 18,7(- 1,25 + 0,53Xтз о6и. + 1,72Xтз „.о, )
Заключение. Разработана математическая модель, позволяющая с высокой долей вероятности определять структурные изменения, возникающие в ЩЖ при хроническом ЭТ.
Аналогичные вычисления можно вести и для других желез внутренней секреции, используя значения маркеров эндогенной интоксикации и гормонального профиля, характеризующего функциональное состояние изучаемого органа. Преимущества метода - неинвазивность, техническая простота и экономическая доступность.
Литература
1. Горностаев Д.В. Судебно-медицинская оценка поражения щитовидной железы при наркотической интоксикации.: Автореф. дисс..к.м.н..- М., 2003.- 23 с.
2. Демко П.С. и др. // Актуальные проблемы морфологии: Тр. Сибирского мед. ун-та.- Томск, 2002.- С. 118-119.
3. Калашникова С.А. и др. // Бюл. экспер. биологии и медицины.- 2007.- № 12.- С. 707-711.
4. Камышников В.С. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика: Спр-к: в 2 т.- Мн.: Интерпрессервис, 2003.
5. Новочадов В.В., Писарев В.Б. Эндотоксикоз: моделирование и органопатология.- Волгоград: ВолГМУ, 2005.- 240 с.
6. Правила лабораторной практики в Российской Федерации // Приказ М3 РФ от 19 июня 2003 г. № 267.
7. Хмельницкий О.К. Цитологическая и гистологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. Рук-во.- СПб.: СОТИС, 2002.- 288 с.
8. Хмельницкий О.К., Иванова А.Ю. // Архив патологии.-2000.- №5.- С. 13-18.
9. Davies T.F., Larsen P.R. Thyrotoxicosis. In: Larsen P.R., Ed Williams Textbook of Endocrinology, 10th ed. Philadelphia: WB Saunders, 2003.- P. 374-421.
УДК615.214.22:612.017
ИММУНОКОРРИГИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ФЕНИБУТА М.А. САМОТРУЕВА, А.Н. ОВЧАРОВА, И.Н. ТЮРЕНКОВ*
Существование взаимосвязи между иммунной и нейроэндокринной системами установлено давно, но лишь в последние десятилетия выявлены конкретные медиаторы, с помощью которых реализуется взаимодействие между иммунокомпетентными и нервными клетками. Получены убедительные доказательства влияния различных гормонов на функционирование иммунной системы. Установлено участие многих нейромедиаторов в нейро-иммунном взаимодействии. На иммунокомпетентных клетках обнаружены рецепторы ко многим известным гормонам и нейро-
пептидам, что доказывает их участие в реализации эфферентного звена нейроиммунных связей [4, 5, 6]. Принципиально важными стали работы по изучению иммунотропной активности таких медиаторов центральной и периферической нервной системы, как допамин, серотонин и ГАМК [3]. Было показано, что активация серотонинергической системы через пресинаптические механизмы (блокада обратного захвата серотонина) вызывает снижение иммуногенеза. Активация допаминергических влияний посредством также пресинаптических (блокада обратного захвата допа-мина или блокада допаминовых ауторецепторов) и постсинапти-ческих (активация постсинаптических рецепторов) механизмов сопровождается стимуляцией иммунного ответа [1]. Увеличение активности ГАМК-ергической системы, достигнутое активацией ГАМК-А рецепторов или модулирующих ГАМК передачу бензо-диазепиновых рецепторов приводит к повышению иммунологической реактивности. Снижение же активности ГАМК-ергической системы блокадой соответствующих рецепторов подавляет иммунитет [2, 3].
Исходя из представлений о роли нервной системы в регуляции иммунологической реактивности, становится интересным изучение иммунокорригирующих свойств нейротропных препаратов. Учитывая особенности механизма действия, широкий спектр фармакологических показаний к применению, а также низкую токсичность весьма привлекательными в этом аспекте являются ноотропные средства, особенно, производные ГАМК.
Цель исследования - изучение иммунокорригирующих свойств фенибута при экспериментальной иммуносупрессии.
Таблица 1
Влияние фенибута на формирование реакций гиперчувствительности замедленного типа и прямой гемагглютинации на модели циклофос-фановой иммуносупрессии
Группы ИР ГЗТ, Титр антител в РГПА,
животных (n=10) M ± m, % M ± m, lg
Опыт: 19,7 ± 2,7 1,24 ± 0,13
фенибут
(25 мг/кг) t, = 2,8 t1 = 0
+ циклофосфамид при p1 < 0,05
(100 мг/кг)
t2 = 4,0 t2 = 5,7
при p2 < 0,05 при Р2 < 0,01
Контроль 1: 11,4 ± 0,47 1,2 ± 0,06
(дист. вода)
Контроль 2: 8,2 ± 0,6 0,5 ± 0,03
циклофосфамид
(100 мг/кг) tj = 4,2 t] = 10,4
при p1 < 0,05 при Р1 < 0,001
Волгоградский ГМУ, кафедра фармакологии и биофармации ФУВ, 400131, Россия, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1
Материалы и методы. Экспериментальная часть работы выполнена на 90 мышах линии СВА обоего пола 3-4-х месячного возраста массой 18-20 г., распределенных по 10 особей в каждой группе. В качестве гетерологичного корпускулярного антигена для иммунизации мышей применяли эритроциты барана (ЭБ). Изучение влияния фенибута на клеточное звено иммунного ответа на ЭБ проводили на основе реакции гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ) - 1-я серия эксперимента [7]. Иммунизацию проводили подкожным введением оптимальной дозы ЭБ (2х108) в 100 мкл. На 5-е сутки вводили под апоневротическую пластинку правой задней конечности разрешающую дозу - 108 ЭБ в 50 мкл физиологического раствора («опытная лапка»), в левую лапку соответственно 50 мкл растворителя («контрольная лапка»). Интенсивность иммунного ответа на инъекции ЭБ определяли через 24 часа - вычисляли индекс реакции (ИР) для каждой мыши по формуле: ИР=( Мо - Мк)/ Мкх100%, где Мо - масса «опытной» лапы, Мк - масса «контрольной» лапы. Влияние фе-нибута на гуморальное звено иммунного ответа оценивали на основе реакции прямой гемагглютинации (РПГА) - 2-я серия эксперимента [7]. При постановке РПГА иммунизацию проводили однократно внутрибрюшинно 5 х 108 ЭБ в объеме 100 мкл через 1-2 часа после введение фенибута. Через 7 дней после иммунизации животных выводили из эксперимента, получали сыворотку. Для инактивации комплемента сыворотку прогревали при 1 56°С в течение 30 мин. Реакцию гемагглютинации проводили в 96-луночных планшетах в объеме 50 мкл разводящей жидкости (0,5% раствора бычьего сывороточного альбумина (БСА), приготовленного на физиологическом растворе), в которой последовательно двукратно разводили исследуемые сыворотки. После разведения сывороток в лунки вносили по 25 мкл 1% взвеси ЭБ. Окончательную регистрацию результатов проводили через 18
часов после постановки реакции. Титр антител (наибольшее разведение сыворотки, при котором наблюдается агглютинация ЭБ) выражали в среднегеометрических показателях.
Для определения изменений массы и клеточности органов иммунной системы выведение животных из опыта проводили через сутки после введения фенибута (3-я серия эксперимента) [8]. Извлекали тимус и селезенку. Лимфоидные органы взвешивали, готовили клеточные суспензии и проводили подсчет количества ядросодержащих клеток (ЯСК) в камере Горяева. Количество ЯСК выражали в абсолютных и относительных (по отношению к массе лимфоидного органа) значениях.
Объективизация иммунологической депрессии велась внут-рибрюшинным введением животным опытных и контрольной (2) групп алкилирующего цитостатического препарата циклофосфа-мида в дозе 100 мг/кг [7]. Интервал между введением циклофос-фамида и фенибута составлял 1 ч.
Во всех трех сериях сформированы группы животных:
1-я группа (опытная) животные с иммуносупрессией, получавшие однократно внутрибрюшинно в день иммунизации фени-бут в дозе 25 мг/кг в 0,5 мл дистиллированной воды.
2-я группа - контроль № 1 - иммунизированные животные, получавшие дистиллированную воду в эквивалентном объеме.
3-я группа - контроль № 3 - иммунизированные особями с моделью иммуносупрессии. Все манипуляции проводили по международным принципам Хельсинской декларации.
Результаты были обработаны статистически по программе «ЗТАТОЯАРИ» с применением Ї- критерия Стьюдента.
Результаты. Для оценки иммунокорригирующих свойств фенибута проанализирован ряд параметров, характеризующих формирование иммунитета в условиях фармакоиндуцированной иммунологической недостаточности. Показатели относительно контроля 1 (І4 и р1 ) и контроля 2 (І2 и р2 )
Анализ изменений иммунной реакции у мышей линии СВА при введении алкилирующего соединения циклофосфан в дозе 100 мг/кг позволил смоделировать иммунологическую недостаточность, проявляющуюся снижением индекса РГЗТ на 28% (р1<0,05), подавлением выработки антиэритроцитарных антител на 58% (р1<0,001) (табл. 1), инволюцией тимуса и селезенки на 20% и 10% соответственно (р1<0,01 и р1<0,05), а также снижением пролиферации ядросодержащих клеток в тимусе и селезенке по отношению к 1 мг массы лимфоидного органа более чем на 20% по сравнению с показателями в контрольной группе № 1 (р1<0,05) (табл. 2). Однократное введение фенибута в дозе 25 мг/кг животным с моделью иммуносупрессии сопровождается выраженным стимулирующим действием в отношении клеточного звена иммунологической реактивности, что проявляется в увеличении индекса реакции ГЗТ более чем на 50% не только по сравнению с животными контрольной группы № 2 (р2<0,05), но и более чем на 40% по отношению к показателям в группе мышей, получавших дистиллированную воду (р1<0,05) (табл. 1).
При изучении влияния фенибута на формирование циркулирующего пула антиэритроцитарных антител в РПГА установлено его модулирующее влияние на титр гемагглютининов, что проявляется в увеличении этого показателя более чем на 50% по отношению к группе животных, которым для формирования иммуносупрессии вводили циклофосфамид (р2<0,01). При сравнении с контролем № 1 изменений уровня антител не наблюдали, что характеризует отсутствие стимулирующего действия фенибу-та на гуморальное звено иммунного ответа (табл. 1).
Под влиянием фенибута в дозе 25 мг/кг происходит устранение нарушений пролиферативных процессов в органах иммунной системы, вызванных введением циклофосфамида. Изучаемый
препарат проявляет статистически достоверное стимулирующее действие в отношении и массы (увеличение более чем на 20%) и клеточности (увеличение более чем на 50%) тимуса (р1<0,01 и р1<0,05 соответственно). Кроме того, действие фени-бута направлено на восстановление процессов формирования лимфоцитов в селезенке (показатели массы и клеточности органа достигают уровня значений в контрольной группе № 1, несколько превышая их), что свидетельствует о наличии у препарата выраженных корригирующих свойств (р2<0,05) (табл. 2).
Фенибут обладает иммунокорригирующим свойством, проявляющимся в устранении ингибирующего действия циклофос-фамида на процессы формирования клеточного и гуморального звеньев иммунитета и на процессы пролиферации в лимфоидных органах. В отношении клеточной реакции иммунного ответа препарат демонстрирует стимулирующую активность.
Литература
1. Девойно Л.В. и др. // Эксперим. и клин. фармакол.-2004.- № 3.- С. 48-50.
2. Девойно Л.В. и др. // Физиол. ж. им. М.И. Сеченова.-1990.- № 6.- С. 808- 812.
3. Идова Г.В. Механизмы нейроиммуномодуляции серо-тонинергической, допаминергической и ГАМК-ергической системами: Дис...д-ра биол.наук. - Новосибирск, 1993.
4. Михайлова А.А. // Иммунол.- 1992.- № 4.- С. 4- 8.
5. Насонова В.А. и др. // Вест. РАН.- 1994.— № 1.- С. 4-7.
6. Судаков К.В. // Иммунол.- 2003.- № 6.- С. 372.
7. Турищев В.Е. Влияние циклофосфана и глицифона на
кинетику первичного иммунного ответа: Дис. к.м.н.- Казань,
1987.
8. Хаитов Р.М. и др. Методические указания по изучению иммунотропной активности фармакологических веществ: Рук-во по эксперим. доклин. изучению новых фармакол. веществ / Под ред. Р.У. Хабриева.- М., 2005.
УДК 616.61-053.31-07
МОЛЕКУЛЫ СРЕДНЕЙ МАССЫ КАК КРИТЕРИЙ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ И ПОКАЗАТЕЛЬ ВЫДЕЛИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ
ПОЧЕК У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ С ИШЕМИЧЕСКОЙ НЕФРОПАТИЕЙ, НАХОДЯЩИХСЯ В КРИТИЧЕСКОМ СОСТОЯНИИ
Н.Ю. КУЛИКОВА, Н.В. САХАРОВА, Т.В. ЧАША *
Частота ишемической нефропатии (ИН) в структуре заболеваемости новорожденных, перенесших критические состояния, составляет 95,6% [1]. По современным представлениям содержание молекул средней массы (МСМ) в жидкостях организма отражает степень эндогенной интоксикации, а распределение молекул средней массы между плазмой крови и мочи позволяет более достоверно оценить выделительную функцию почек [2, 3, 4].
Цель работы - выявление эндогенной интоксикации и оценка выделительной функции почек у новорожденных с ИН, находящихся в критическом состоянии; изучение уровня молекул средней массы плазмы крови и мочи.
Обследовано 123 доношенных новорожденных перинатального центра Ивановского НИИ материнства и детства. Основная группа - 83 новорожденных детского реанимационного отделения и отделения выхаживания недоношенных II этапа с ИН: 44 новорожденных с ИН I степени, 20 - с ИН II степени и 19
- с ИН III степени. Контроль - 40 здоровых новорожденных.
* Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н.Городкова, 153045, Россия, г.Иваново, ул. Победы, 20
Таблица 2
Влияние фенибута на массу и клеточность органов иммунной системы в условиях циклофосфановой иммуносупрессии
Группы животных (n=10) Масса селезенки, мг Кол-во ЯСК в селезенке, х106 Кол-во ЯСК в 1 мг селезенки, х105 Масса тимуса, мг Кол-во ЯСК в тимусе, х106 Кол-во ЯСК в 1 мг тимуса, х104
Опыт: фенибут (25 мг/кг) + циклофосфамид (100 мг/кг) 123,8 ± 11,6 t1 = 1,6 при p1>0,05 t2 =3,3 при Р1<0,05 39 ± 5,3 t1 = 3,2 при p<0,05 t2 =3,9 при p2<0,05 3,5 ± 0,4 t1 = 1,8 при p>0,05 t2 =3,4 при Р2<0,05 49,4 ± 2,5 t1 = 4,0 при Р1<0,01 t2 = 4,8 при Р2<0,01 90 ± 13,9 t1 = 14 при Р1<0,001 t2 = 5,9 при Р2<0,001 8 ± 0,13 t1 = 18 при Р2<0,001 t2 = 21 при Р2<0,001
Контроль 1: (дист. вода) 102,3 ± 3,2 21,7 ± 1,2 2,7 ± 0,2 38,5 ± 1 32,9 ±2,3 3,5 ± 0,2
Контроль 2: циклофосфамид (100 мг/кг) 84,8 ± 3,4 t1 = 3,7 при Рі <0,05 16,6±2,2 t1 = 1,8 при Р1>0,05 2±0,2 t1 = 2,5 при Р1 <0,05 31±1,4 t1 = 4,4 при Р1<0,01 8,4±0,6 t1 = 10 при Р1<0,001 2,8 ± 0,2 t1 = 2,5 при Р1<0,05
