CC BY
9Literatur
1.Agrokhimiya: Klassicheskiy universitetskiy uchebnik dlya stran SNG. Pod. Red. V.G. Mineeva. - M.: Izd-vo VNIIA imeni D.N. Pryanishnikova, 2017. - 854 s.
2.Vil'dflush I.R. Ratsional'noe primenenie udobreniy: Posobie // Gorki: Belorusskaya gosudarstvennaya sel'skokhozyaystvennaya akademiya, 2002, - 324 s.
3.Mineev V.G. Agrokhimiya: ucheb. posob. - 2-e izd., pererab. i dop. - M.: MGU, 2004. - 720 s.
4.Mitrofanov S.V. Programmnyy kompleks po prognozirovaniyu urozhaynosti osnovnykh sel'skokhozyaystvennykh kul'turtsentral'nogo regiona Rossii/S.V. Mitrofanov, V.S. Nikitin, S.A. Belykh, D.A. Blagov, V.B. Lyubchenko // Tekhnika i oborudovanie dlya sela. - 2018. - № 8. - S. 41-43.
5.Romanenko G.A. Udobreniya. Znachenie, effektivnost'primeneniya: spravoch. posobie. - M.: TsINAO, 1998. - 376 s.
52
УДК 576.89:639.3
ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ МЕТОД ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ТОКСОПЛАЗМОЗА
НАЗАРОВА Светлана Анатольевна, аспирант кафедры эпизоотологии, микробиологии и паразитологии, svetlanak9191@mail.ru
НОВАК Михаил Дмитриевич, д-р биол. наук, профессор кафедры эпизоотологии, микробиологии и паразитологии, peace100@mail.ru
Рязанский государственный агротехнологический университет имени П.А. Костычева
Цель исследований заключалась в разработке иммунохроматографического метода (ИХМ) диагностики токсоплазмоза и изучении его распространенности в товарных свиноводческих хозяйствах, на молочных фермах и среди мышевидных грызунов в Рязанской области. Экспериментально изучена чувствительность и информативность ИХМ с разработанными токсоплазменными имму-нореагентами. Сероэпизоотологический мониторинг позволил установить высокие показатели экстенсивности инвазии при токсоплазмозе свиней, крупного рогатого скота и мышевидных грызунов: 34, 26 и 40% соответственно, что подтверждает потенциальную угрозу заражения человека. При сравнительном изучении чувствительности и информативности ИХМ и РНГА с мембрано-ци-топлазменным антигеном Toxoplasma gondii, а также при сопоставлении с результатами микроскопического исследования мазков-отпечатков из головного мозга и внутренних органов свиней (на бойнях Рязанской области), мышевидных грызунов (на территории Окского государственного биосферного заповедника) установлена высокая диагностическая эффективность иммунохрома-тографического метода. ИХМ экспресс-тест является специфичным, высокочувствительным, доступным для практикующих ветеринарных врачей, компактным, не требующим специального оборудования при постановке и специальных навыков лаборанта-исследователя. На основании полученных данных обосновано практическое применение иммунохроматографического метода в комплексе профилактических, оздоровительных мероприятий при токсоплазмозе, в том числе на мясоперерабатывающих предприятиях при проведении ветеринарно-санитарной экспертизы туш и органов животных.
Ключевые слова: свиньи, крупный рогатый скот, мышевидные грызуны, иммунохроматографи-ческий метод (ИХМ), экспресс-тест, нитроцеллюлозная мембрана, Toxoplasma gondii.
Введение
Большое внимание медицинские и ветеринарные специалисты уделяют болезням, возбудители которых передаются от животных человеку через продукты животного происхождения. Токсоплаз-моз распространен чрезвычайно широко [14]. Установленный коэффициент заболеваемости в континентальном масштабе составляет 1,2 на 100 тыс. населения [4]. Показатели зараженности токсоплазмами населения в различных регионах Российской Федерации варьируют от 15 до 30% [6, 8, 11]. Заболевание протекает в латентной, субклинической форме или сопровождается симптомами пневмонии, нарушения функций пищеварительной, репродуктивной, нервной систем,
органов зрения. У беременных женщин, серопози-тивных на токсоплазмоз, возможны аборты, мерт-ворождения, а у новорожденных - гидроцефалия, менингоэнцефалиты, гермафродитизм и соматические патологии [11].
Основным источником возбудителя токсоплаз-моза для животных и человека являются кошки, дефинитивные хозяева Toxoplasma gondii; крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, кролики и человек - промежуточные хозяева [1, 3, 5, 12]. Заражение человека происходит при употреблении в пищу недостаточно термически обработанного мяса и мясных продуктов. Среди сельскохозяйственных животных токсоплазмоз установлен у 79% овец, 25% крупного рогатого скота, 42% сви-
© Назарова С. А., Новак М. Д., 2019 г.
ней [6]. По данным Е.А. Шевкуновой, Б.А. Тимофеева и др., при обследовании коров в Московской, Тверской и других областях Центрального района Российской Федерации средние показатели экстенсивности инвазии при токсоплазмозе крупного рогатого скота составляют 1,2% [12, 13]. У животных заболевание чаще протекает в латентной форме, реже в острой, что затрудняет диагностику, способствует широкому распространению и представляет угрозу для безопасности человека [7, 9]. В животноводческих хозяйствах с различной технологией содержания животных, преимущественно на товарных фермах, высока вероятность распространения токсоплазмоза в связи с постоянной циркуляцией возбудителя среди грызунов [3, 10]. Факторами, способствующими распространению токсоплазмоза в Центральном районе Российской Федерации, являются отсутствие культурных пастбищ и пригодных для выпаса участков, высокая концентрация животных на небольших территориях, негигиенический водопой и низкий уровень ветеринарно-санитарных мероприятий [6]. В настоящее время известно только небольшое число лабораторных методов, позволяющих избежать как ложноположительных, так и ложноотрицательных результатов исследований на токсоплазмоз. Высокоэффективны следующие методы лабораторной диагностики: НРИФ, РНГА, ИФА, ИХМ, ПЦР. С помощью этих методов можно выявлять как антитела, так и антигены токсоплазм, определять стадию заболевания и обосновывать необходимость назначения специфических средств лечения [2, 6, 13].
Материалы и методы исследований
Исследования на токсоплазмоз крупного рогатого скота, свиней и мышевидных грызунов проводили в научном центре лабораторных исследований (НЦЛИ) и лаборатории паразитологии ФГБОУ ВО РГАТУ с использованием стандартизированных методов. Кровь от животных для скрининга на специфические антитела и антигены токсоплазм получали в соответствии с общепринятыми методиками. После выдерживания в термостате при температуре 37° С в течение 2,5 часов сыворотки крови отделяли от сгустков фибрина и форменных элементов и центрифугировали 10 минут при 1500 об./мин.
При проведении ветеринарно-санитарной экспертизы туш и органов свиней, крупного рогатого скота на бойнях и в убойном цехе животноводческих предприятий осуществляли взятие проб
сердца, селезенки, лимфатических узлов и головного мозга в соответствии с установленными правилами. Мышевидных грызунов (желтогорлая мышь, малая лесная мышь, рыжая полевка, малая бурозубка), отловленных в естественных биотопах на территории Окского государственного биосферного заповедника, исследовали методом полного гельминтологического вскрытия с отбором внутренних органов (сердце, легкие, печень, селезенка) и головного мозга. В последующем из внутренних органов и головного мозга сельскохозяйственных животных и мышевидных грызунов изготавливали по два мазка - отпечатка, которые фиксировали 96%-м этиловым спиртом, окрашивали азур-эозином по Романовскому и микроско-пировали с помощью иммерсионной системы для обнаружения трофозоитов и псевдоцист токсо-плазм. Полученные из селезенки, лимфатических узлов и головного мозга гомогенаты подвергали фильтрации и пулы тканевой жидкости от каждого животного исследовали с помощью иммунохрома-тографического метода.
Компоненты для проведения ИХМ экспресс-теста изготавливали в НЦЛИ на основе токсоплаз-менных иммунных сывороток кроликов с применением нитроцеллюлозной мембраны Bio-Rad. Для проведения иммунохроматографического анализа использовали блоттинг- мембрану BioRad из 100%-й нитроцеллюлозы, краситель, приготовленный на фосфатно-солевом буферном растворе (рН=7,2-7,4), позитивные токсоплазменные сыворотки крови кроликов, негативные кроличьи сыворотки, тканевую жидкость из гомогенатов внутренних органов и головного мозга исследуемых животных или сыворотки крови от них.
Всего исследовано: сывороток крови от крупного рогатого скота - 150 (15 - в возрасте от 14 мес. до двух лет, 135 - от двух до шести лет), от 50 свиней (40 свиноматок и 10 подсвинков в группе откорма I); пробы тканевой жидкости, полученные из гомогенатов внутренних органов, лимфатических узлов и головного мозга от 130 мышей и 10 свиней. Сыворотки крови исследовали с помощью двух методов: РНГА и ИХМ экспресс-теста.
Оптимальную концентрацию красителя устанавливали в опыте, апробируя в ИХМ разные разведения на фосфатно-солевом буферном растворе. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Определение концентрации красителя в ИХМ
Разведения красителя Результаты исследований
1:5 Интенсивное окрашивание зоны "Оп" в темно-синий цвет, результат не распознается
1:10 Положительный результат: в зоне "Оп" две линии темно-синего цвета на светло-голубом фоне
1:20 Нечеткое светло-голубое окрашивание, результат почти не виден, в некоторых случаях две линии в зоне "Оп" отсутствуют
Иммунохроматографический метод основан на фических антигенов и комплементарных антител. принципе тонкослойной хроматографии и пред- Связывание белков (мембрано-цитоплазменных ставляет собой взаимодействие белков - специ- антигенов токсоплазм) на нитроцеллюлозной мем-
бране Bio-Rad происходит благодаря ее адсорбционным свойствам. При исследовании в ИХМ выделяются две зоны: опытная (Оп) и контрольная (К). Результаты ИХМ оценивали визуально через 5 минут после нанесения исследуемого материала на тест-полоски нитроцеллюлозной мембраны. Положительным результатом считали появления в зоне Оп двух параллельно расположенных линий темно-синего цвета на голубом фоне, а в контрольной - К отсутствие линий или наличие одной, соответствующей спектру глобулиновой фракции нормальной сыворотки крови (рис. 1).
Рис. 1 - Результаты исследований с помощью иммунохроматографического метода на антигены Toxoplasma gondii (экспериментальные данные)
Результаты исследований и обсуждение
При анализе статистических данных клинических больниц г. Рязани установлены единичные случаи заболевания людей токсоплазмозом на территории Рязанской области, без госпитализации и летальных исходов. Латентные формы токсоплазмоза зарегистрированы среди детей, молодых людей до 17 лет, а также у беременных женщин при массовом скрининге, обязательном в первом триместре беременности.
По данным журнала регистрации паразитарных болезней в ГБУ РО Рязанская областная ветеринарная лаборатория исследования кошек на токсоплазмоз проводятся нерегулярно.
Исследования на токсоплазмоз сывороток крови сельскохозяйственных животных в Рязанской области с помощью иммунохроматографического метода показали следующие результаты: свиньи - ЭИ=34%, крупный рогатый скот - ЭИ=26%. Результаты ИХМ на токсоплазмоз при исследовании животных разных возрастных групп отличаются. Данные серологического скрининга представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Результаты исследований в ИХМ сывороток крови свиней и крупного рогатого скота разного возраста
Вид животного Пол/возраст Количество ЭИ, %
исследованных серопозитивных
Крупный рогатый скот Нетели от 16 мес. до 2,5 лет 15 2 13,3
M Коровы от 3 до 6 лет 55 13 23,6
Свиньи Свиноматки от 1,5 до 5 лет 23 10 43,4
M Поросята от 2,5 до 6 месяцев 42 4 9,5
Полученные результаты свидетельствуют о более высоких показателях серопозитивности на токсоплазмоз у взрослых животных по сравнению с молодняком: коровы - 23,6%, нетели - 13,3%, свиноматки - 43,4%, поросята и подсвинки от 2,5 до 6 месяцев - 9,5%.
Из анамнеза случаев положительных результатов ИХМ на токсоплазмоз следует, что у свиноматок достаточно часто отмечаются аборты и бесплодие, а приплод, полученный от них, с признаками гермафродитизма.
При изучении особенностей эпизоотического
Рис. 2 - Положительные результаты ИХМ на токсоплазмоз у крупного рогатого скота и мышевидных грызунов в разные месяцы (2016-2018 гг.)
процесса токсоплазмоза в зависимости от сезона года выяснено, что среди крупного рогатого скота увеличение количества серопозитивных животных наблюдается в весенне-летний период (рис. 2).
Аналогичная закономерность сезонной динамики токсоплазмоза установлена в популяции мышевидных грызунов на территории Окского государственного биосферного заповедника. Максимальное количество положительных результатов на антитела к токсоплазмам в ИХМ зарегистрировано в мае и июне.
Среди продуктивных животных (крупный рогатый скот) в весенний период, вследствие гиповитамино-зов, вероятны случаи реактивации латентного токсоплазмоза, что подтверждается положительными результатами ИХМ (табл. 3).
Таблица 3 - Показатели серопозитивности на токсоплазмоз у крупного рогатого скота
по месяцам года (2018 г.)
Месяц Количество ЭИ,%
исследованных серопозитивных
Январь 10 2 20
Февраль 15 0 -
Март 32 10 31,2
Апрель 10 3 30
Май 40 15 37,5
Июнь 17 4 23,5
Июль 14 3 21,4
Август 12 2 16,6
Скрининг на токсоплазмоз с помощью ИХМ показал серопозитивные результаты у 31,5% мышевидных грызунов. При вскрытии и подробном исследовании вышеуказанных мышей в 23% слу-
чаев выявлен гермафродитизм, а у трех микро-маммалий - недоразвитие половых органов, что свойственно патологии токсоплазмозной этиологии. Полученные данные приведены в таблице 4.
Таблица 4 - Случаи гермафродитизма у мышевидных грызунов с положительными
результатами ИХМ на токсоплазмоз
Вид животного Количество исследованных Число животных и признаками гермафродитизма ЭИ, %
Желтогорлая мышь 93 15 21,5
Малая лесная мышь 33 5 36,3
Рыжая полевка 3 - -
Условные обозначения: «-» - не обнаружено
Изучение эпизоотического процесса токсоплазмоза в популяции мышевидных грызунов с использованием варианта ИХМ для выявления антигенов Toxoplasma gondii в гомогенатах из головного мозга, селезенки и лимфатических узлов позволило установить максимальный пик зараженности в сентябре-октябре, то есть в период сезонной миграции. Результаты исследований представлены в таблице 5
Таблица 5 - Показатели зараженности мышевидных грызунов Toxoplasma gondii в разные _месяцы года по результатам исследований в ИХМ на антигены_
Месяцы года Количество исследован- Число ЭИ,%
ных мышей инвазированных
Май 12 3 25
Июнь 12 9 75
Июль 21 8 38
Август 15 6 40
Сентябрь 32 15 46,8
Октябрь 38 11 28,9
При иммунохроматографическом исследовании тканевой жидкости, полученной из гомогена-тов головного мозга, селезенки и лимфатических узлов мышей, получены положительные результаты соответственно в 42% и 27% случаев. С помощью ИХМ экспресс-теста на антигены у 20% свиней Toxoplasma gondii обнаружены в головном мозге и у 10% - в селезенке.
Проведенный эпизоотологический мониторинг по токсоплазмозу крупного рогатого скота, свиней и мышевидных грызунов на территории Рязанской области позволил установить его широкое распро-
странение. По результатам ИХМ экспресс-теста и РНГА антигены Toxoplasma gondii и антитела к ним выявлены у 39 из 150 коров (ЭИ=26%), у 17 из 50 свиней (ЭИ=34%) и у 52 из 130 мышевидных грызунов (ЭИ=40%). Чувствительность ИХМ экспресс-теста определяли, исследуя параллельно положительные образцы с помощью РНГА с антигенными эритроцитарными диагностикумами на основе токсоплазменных иммунореагентов. В ходе исследований установлено, что ИХМ экспресс-тест является информативным, эффективным методом диагностики токсоплазмоза. Иммунохрома-
тографический метод рекомендуется применять при выполнении комплексных профилактических, ветеринарно-санитарных и оздоровительных мероприятий на животноводческих предприятиях, неблагополучных по токсоплазмозу.
Иммунохроматографический метод в виде экспресс-теста можно использовать для выявления антигенов токсоплазм в тканях и органах убойных животных на мясоперерабатывающих предприятиях, бойнях, в лабораториях ветеринарно-санитарной экспертизы, а также при проведении эпизоотологического мониторинга в автохтонных природных очагах по результатам исследований мышевидных грызунов-резервуаров возбудителей токсоплазмоза.
Заключение
Токсоплазмоз, как потенциально опасный зо-оноз, при снижении популяционного иммунитета сельскохозяйственных, диких, синантропных животных, может протекать в форме энзоотий и спорадических случаев острого заболевания у людей. Особенно опасны оппортунистические вирусные, бактериальные инфекции и протозойные инвазии (пневмоцистоз, криптоспоридиоз), возникающие на фоне иммунодефицитных состояний и осложняющие их.
Анализ ситуации по токсоплазмозу животных в Рязанской области показывает достаточно широкое его распространение, нерегулярные исследования в рамках ветеринарных лабораторий и отсутствие какого-либо скрининга при ветеринар-но-санитарной экспертизе и санитарной оценке продукции на мясоперерабатывающих предприятиях. В условиях бойни, крупного мясокомбината или убойного цеха животноводческого предприятия целесообразно применять экспресс-тесты, такие как иммунохроматографический метод вместо серологических, достаточно трудоемких реакций РНГА, ИФА. Иммунохроматографический метод позволяет исследовать на антигены токсоплазм большое количество проб материала за короткий период (на один анализ затрачивается 5 минут). Для послеубойной диагностики токсоплазмоза животных в качестве исследуемого материала следует брать образцы головного мозга, паренхиматозных органов (селезенки, печени), сердца, соматической мускулатуры и лимфатических узлов. Сопоставление известных методов диагностики токсоплазмоза (РНГА, световой микроскопии окрашенных мазков отпечатков из внутренних органов) позволило установить, что ИХМ экспресс-тест имеет высокую диагностическую ценность, доступен для практикующих ветеринарных врачей, не требует специального оборудования и особых навыков лаборанта-исследователя.
В хозяйствах условно благополучных по токсо-плазмозу два раза в год следует проводить эпи-зоотологический мониторинг по токсоплазмозу с использованием ИХМ экспресс-теста. В свиноводческих хозяйствах рекомендуется выполнять ис-
следования животных всех возрастных, технологических групп (свиноматки, хряки, молодняк всех возрастов групп).
Список литературы
1. Беспалова Н.С. Значение домашних плотоядных в поддержании токсоплазмоза на территории Воронежской области / Н.С. Беспалова, Ю. И. Степкин, С.С. Катков // Ветеринарная патология. - 2016. - №3. - С. 17-23.
2. Беспалова Н.С., Катков С.С. Сопоставимость разных методов диагностики токсоплазмоза плотоядных // Молодой ученый. — 2016. — № 6. - С. 58-60.
3. Вершинин И.И. Токсоплазмоз кошек и собак / И.И. Вершинин, Н.В. Телятникова, В.И. Петренко // Ветеринарная клиника. - 2003. № 1. - С.12.
4. Доронин-Доргелинский Е.А. Распространение токсоплазмоза и саркоцистоза у человека и животных, правовое регулирование организации и борьбы с ними / Е.А. Доронин-Доргелинский, Т.Н. Сивкова // Российский паразитологический журнал. - 2017. - Т. 39 - Вып. 1. - С. 35-41.
5. Заводнова О.С. Врожденный токсоплазмоз / О.С. Заводнова, С.М. Безроднова, В.С. Боташева, Т.В. Кальная // Российский педиатрический журнал. - 2005. - №1. - С.13-16.
6.Новак М.Д. Токсоплазмоз / М.Д. Новак, А.И. Новак, С.Н. Королева // Научно-практическое издание. Кострома: Изд-во Костромской ГСХА. -2005. - 99 с.
7.Новак М.Д. Паразитарные болезни животных / М.Д. Новак, А.И. Новак // Учебно-методическое пособие. Рязань, 2012. - 213 с.
8.Покровский В.В. Вич-инфекция: клиника, диагностика и лечение / В.В. Покровский, Т.Н. Ермак, В.В. Беляева, О.Г. Юрин // ГЭОТАР - МЕД. - М., -2003. - 488 с.
9.Сивкова Т.И. Сероэпизоотологические исследования при токсоплазмозе собак в г. Перми / Т.И. Сивкова, Н.Н. Катаева // Российский паразитологический журнал. М.:- 2008.- №3. - С. 60-62.
10.Соломатина М.А. Особенности эпизоотологии токсоплазмоза кошек в Липецке / М.А. Со-ломатина, Н.С. Беспалова // Международный студенческий научный вестник. - 2018. - №4 (4). - С. 575-578.
11.Степанова Н.И. Токсоплазмоз животных и человека / Н.И. Степанова, М.Г. Смайкина // Рос-сельхозиздат М., 1970. - С. 6-11.
12.Тимофеев Б.А. Токсоплазмоз крупного рогатого скота: автореф. дисс. ... док. вет. наук: 03.00.19 / Ставрополь, 1975. - 44 с.
13.Шевкунова Е.А. Некоторые данные по обследованию сельскохозяйственных животных на токсоплазмоз / Е.А. Шевкунова, Н.К. Мищенко, Д.Н. Засухин // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммунобиол., М., 1961. - № 6. - С. 125-128.
14.Dubey J.P. Toxoplasma gondii / J.P. Dubey // BMJ. - 2000. - V. 322. - P. 142-147.
IMMUNOCHROMATOGRAPHIC METHOD FOR THE DIAGNOSTIC OF TOXOPLASMOSIS
Nazarova Svetlana A.., graduate student of department of epizootology, microbiology and parasitology, svetlanak9191@mail.ru.
Novak Mikhail D., Doctor of biology, Professor, professor of department of epizootology, microbiology and parasitology, peace100@mail.ru.
Ryazan State Agrotechnologycal University Named after P.A. Kostychev
The purpose of the research was to develop an immunochromatographic diagnostic method (IHM) of toxoplasmosis and study its prevalence in commercial pig farms, dairy farms and among mouse-like rodents in the Ryazan region. The sensitivity and information content of IHM with the developed toxoplasma immunoreagents has been experimentally studied. Seroepizootologycal monitoring allowed us to establish high rates of extensiveness of invasion in toxoplasmosis of pigs, cattle and rodents, respectively, 34%, 26% and 40%, which confirms the potential threat of human infection.A comparative study of the sensitivity and informativity of IHM and PHA with Toxoplasma gondii membrane-cytoplasmic antigen, as well as when compared with the results of microscopic examination of smears - imprints from the brain and internal organs of pigs (in the slaughterhouses of the Ryazan region), mouse-like rodents (in the territory of Oksky State Biosphere Reserve) a higher diagnostic efficiency of the immunochromatographic method was established. IHM rapid test is highly specific, sensitive, accessible to practicing veterinarians, compact, not requiring special equipment in the formulation and special skills of the laboratory assistant - researcher. On the basis of the data obtained, the practical application of the immunochromatographic method in the complex of preventive and health-improving measures for toxoplasmosis, including at meat processing enterprises during the veterinary-sanitary examination of animal carcasses and organs, has been substantiated.
Key words: pigs, cattle, mice, immunochromatographic method, express - test, nitrocellulose membrane, Toxoplasma gondii.
Literatura
1. Bespalova N.S. Znacheniye domashnikh plotoyadnykh v podderzhanii toksoplazmoza na territorii Voronezhskoy oblasti/N.S. Bespalova. Yu. I. Stepkin. S.S. Katkov//Veterinarnaya patologiya.- 2016. - №3. - S. 17-23.
2. Bespalova N.S.. Katkov S.S. Sopostavimost raznykh metodov diagnostiki toksoplazmoza plotoyadnykh //Molodoy uchenyy. — 2016. — № 6.5. — S. 58-60.
3. Vershinin I.I. Toksoplazmozkoshekisobak/I.I. Vershinin. N.V. Telyatnikova. V.I. Petrenko//Veterinarnaya klinika. - 2003. № 1. - S.12.
4. Doronin-Dorgelinskiy E.A. Rasprostraneniye toksoplamoza i sarkotsistoza u cheloveka i zhivotnykh. pravovoye regulirovaniye organizatsii i borby s nimi / E.A. Doronin-Dorgelinskiy. T.N. Sivkova // Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal. - M., 2017. - T. 39 - №1. - S. 35-41.
5. Zavodnova O.S. Vrozhdennyy toksoplazmoz / O.S. Zavodnova. S.M. Bezrodnova. V.S. Botasheva. T.V. Kalnaya // Rossiyskiy pediatricheskiy zhurnal. - 2005. - №1. - S.13-16.
6. Novak M.D. Toksoplazmoz/M.D. Novak. A.I. Novak. S.N. Koroleva//Kostroma: Izdatelstvo Kostromskoy GSKhA. 2005. - 99 s.
7. Novak M.D. Parazitarnye bolezni zhivotnykh / M.D. Novak, A.I. Novak // Uchebno-metodicheskoye posobiye. Ryazan', 2012. - 213 s.
8. Pokrovskiy V.V. Vich-infektsiya: klinika. diagnostika i lecheniye / V.V. Pokrovskiy. T.N. Ermak. V.V. Belyayeva. O.G. Yurin. - M.. GEOTAR-MED. 2003. - 488 s.
9. Sivkova T.I. Seroepizootologicheskiye issledovaniya pri toksoplazmoze sobak g. Permi / T.I. Sivkova. N.N. Katayeva //Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal. - 2008. - №3. - S.60-62.
10. Solomatina M.A. Osobennosti epizootologii toksoplazmoza koshek v Lipetske /M.A. Solomatina. N.S. Bespalova // Mezhdunarodnyy studencheskiy nauchnyy vestnik. - 2018. - №4 (4). - S.575-578.
11. Stepanova N.I. Toksoplazmoz zhivotnykh i cheloveka /N.I. Stepanova. M.G. Smaykina // Moskva. -Rosselkhozizdat. 1970. - S. 6-11.
12. Timofeyev. B.A. Toksoplazmoz krupnogo rogatogo skota: avtoref. diss. ... doktora vet. nauk: 03.00.19 [Tekst]/ Stavropol. 1975. - 44 s.
13. Shevkunova E.A.. Mishchenko N.K.. Zasukhin D.N. Nekotoryye dannyye po obsledovaniyu s/kh zhivotnykh na toksoplazmoz//Zhurnal mikrobiol.. epidemiol. i immunobiol.. M.. 1961. № 6.- S. 125-128;
14. Dubey J.P. Toxoplasma gondii/ J.P. Dubey//BMJ. - 2000. - V. 322. - P. 142-147.
