CC BY
27ИХА-ДИАГНОСТИКА
иммунохроматографические
экспресс-тесты
КАК ОПТИМАЛЬНОЕ РЕШЕНИЕ В УСЛОВИЯХ ОГРАНИЧЕННОГО БЮДЖЕТА
В последние 10 лет все большую популярность набирают иммунохроматографические экспресс-тесты, которые позволили сделать большой шаг в сторону повышения чувствительности, специфичности и качества анализа. Однако, как показывает практика, данный вид анализа все еще остается одним из самых непонятных в России. Чтобы правильно и эффективно его использовать, важно понимать все особенности этого метода.
Иммунохроматографический анализ (ИХА) основан на принципе тонкослойной хроматографии и реакции между антигенами и антителами. Реакция происходит на тест-полосках, произведенных с использованием современных достижений биотехнологии. Тест-полоска представляет собой многослойный комплекс, состоящий из разных материалов и содержащий сухие реагенты. На подложку из пластика наклеены в определенном порядке: впитывающий материал для образца; фильтр, пропитанный раствором конъюгата антител к определяемому антигену с цветной меткой и высушенный; пористая мембрана из нитроцеллюлозы с нанесенными в виде линий специфичными антителами (тест) и антивидовыми антителами (контроль); абсорбирующий материал.
Для удобства использования тест-полоски могут быть помещены в различные пластиковые планшеты или устройства.
Образец для проведения ИХА-анализа — биологическая жидкость человека (моча, кровь, сыворотка, слюна) — содержит анализируемое вещество (аналит). Тест-полоску погружают в образец впитывающим участком или наносят несколько капель образца на впитывающий участок. Образец поглощается впитывающим участком тест-полоски и за счет капиллярных сил начинает двигаться по ней. Вместе с фронтом жидкости движутся реагенты, заранее нанесенные на тест-полоску. Когда фронт жидкости достигает других реагентов, нанесенных в тестовой зоне, происходит реакция антиген-антитело, и образуется окрашенная линия. В качестве цветной метки могут служить микрочастицы коллоидного золота, латекса и др. Образец впитывается тест-полоской и движется с фронтом жидкости, доходит до фильтра с конъюгатом и смывает конъюгат с фильтра. При этом антиген, содержащийся в образце, связывается с антителами конъюгата, и образуется окрашенный комплекс антиген-антитело. Окрашенный комплекс продолжает двигаться вдоль тест-полоски и достигает тестовой зоны. На мембране антиген этого комплекса связывается со специфическими антителами тестовой линии, окрашивая ее. Оставшиеся реагенты продолжают двигаться по мембране и, дойдя до линии контроля, окрашивают ее, связываясь с антивидовыми антителами.
При правильном использовании и соблюдении инструкции ИХА-тесты позволяют получить результат анализа с достоверностью более 99%. Важно обращать внимание на чувствительность и специфичность (данная информация содержится в инструкции) используемых ИХА-тестов.
Еще один из наиболее активно развивающихся направлений лабораторной диагностики — иммунофер-ментный анализ (ИФА) — иммунологический метод качественного или количественного определения различных низкомолекулярных соединений, макромолекул, вирусов и пр., в основе которого также лежит специфическая реакция антиген-антитело. Однако сравнивать методы ИХА и ИФА некорректно: это два инструмента для применения в различных ситуациях и в различных условиях. ИФА — более высокочувствительные и специфичные тесты, но они требуют сложного оборудования, квалифицированных специалистов, большого количества проводимых анализов в день. ИХА-тесты лучше подходят для экстренного тестирования, домашней диагностики и для использования в небольших лабораториях с небольшим количеством проводимых тестов в день.
Всемирная организация здравоохранения четко определяет роль ИХА в системе диагностики: данные тесты предназначены для использования в тех случаях, когда требуется предварительный скрининг, и особенно полезны в ситуациях, когда ресурсы, выделяемые на диагностику, ограничены (https://www.who.int/diagnostics_ laboratory/faq/simple_rapid_tests/en/).
ВОЗ выделяет несколько ключевых свойств экспресс-тестов, которые делают их оптимальными для медицинской диагностики в регионах России:
• сочетание качества, простоты и низкой стоимости позволяет проводить диагностику на достаточно высоком уровне в условиях ограниченного бюджета;
• тесты позволяют получить результат в течение
10 минут — 2 часов и не требуют дополнительного оборудования и специальных знаний; быстрое получение результата позволяет своевременно назначить лечение;
• предназначены для использования с отдельными образцами или с ограниченным количеством образцов, что делает их более экономичными
в лабораториях с малым количеством проводимых исследований;
• возможность хранения при комнатной температуре в течение длительного периода (до двух лет) позволяет снизить требования
к местам хранения и транспортным средствам, что отражается на их экономичности. Время до получения результата — ключевой, но не единственный фактор ИХА-тестов. Другим ключевым преимуществом этого метода является его простота — простота проведения анализа, простота подготовки образца, простота подготовки места для анализа.
Таким образом, при правильном использовании и соблюдении инструкции ИХА-тесты — это надежный инструмент для скрининговых исследований, экстренной диагностики и домашней диагностики, совмещающий быстроту проведения анализа с высокой достоверностью получаемых результатов.
www.akvarel2002.ru
