CC BY
24
ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ДЕСТРУКТИВНЫХ ФОРМ ОСТРОГО ХОЛЕЦИСТИТА
Кчибеков Э.А. УДК: 616.366-002-036.11:57.083
ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия Росздрава»
IMMUNOCHEMICAL DIAGNOSTICS OF DESTRUCTIVE FORMS OF ACUTE CHOLECYSTITIS
Kchibekov E.A.
Ключевые слова: острый холецистит, деструктивный холецистит, Keywords: acute cholecystitis, destructive cholecystitis, score estimation,
балльная оценка, ткань желчного пузыря, ферритин. ferritin.
В настоящее время острый холецистит является одним из наиболее распространенных острых хирургических заболеваний органов брюшной полости [1, 2,
7, 15]. Значительный рост количества больных острым холециститом, отмечаемый в последние десятилетия, сопровождается увеличением доли пациентов пожилого и старческого возраста. Распространенность этой патологии сохраняющиеся, несмотря на совершенствование хирургической тактики. Уровень летальности и послеоперационных осложнений [3, 4, 12], обусловливают не только медицинскую, но и социальную значимость этой проблемы.
Разработка надежных методов своевременной диагностики острого холецистита является актуальной проблемой современной медицины. [5, 6, 7]. Важное значение имеет создание лабораторных панелей оценки степени тяжести и остроты патологического процесса при обострении хронических или скрыто протекающих форм этого заболевания. Она основывается на тщательном сборе анамнеза, объективных физикальных данных, лабораторных тестах, рентгенологического и компьютерного томографического исследования. Однако ни одна из этих позиций не дает надежного диагностического результата. Так точность только анамнестических и объективных данных при диагностике деструктивных состояний не превышает 57,19% .
Для оценки функционального состояния печени, желчных путей в клинической лабораторной диагностике применяется достаточно много биохимических тестов и маркеров [8, 9, 11].
В то же время, при диагностике многих деструктивных состояний хорошо зарекомендовал себя ферритин, который, по мнению многих исследователей, считается показателем деструкции тканей. [12, 13, 14].
Материалы и методы исследования
На первом этапе проведено исследование уровня ферритина в сыворотке больных острым холеци-
ститом (80 пациентов), хроническим холециститом (56 пациентов). На втором этапе исследования проводилось определение титров ферритина в ткани желчного пузыря и сыворотке крови у 56 больных хроническим холециститом. При определении ферритина в сыворотке пациенты не воздерживались от приема пищи, никаких специальных приготовлений не требовалось. Собирали кровь обычной венепункцией в вакутейнеры и отделяли сыворотку от клеток центрифугированием после образования сгустка.
Концентрацию ферритина в сыворотке крови определяли методом непрямого иммуноферментного анализа в нг/мл коммерческими тест-системами ЗАО «БиоХим-Мак» (Москва), в ткани желчного пузыря определяли методом радиальной иммунодиффузии. Определение тканевого ферритина проводили после гомогенизации исследуемых тканей. Гомогенизация проводилась следующим образом. Патологически измененную ткань желчного пузыря, удаленного во время холецистэктомии, измельчали и растирали со стеклянным порошком до сметанообразной консистенции. Для разрушения клеточных мембран и структур проводили трехкратное размораживание и замораживание гомогената. Затем проводили экстракцию растворенных белков физиологическим раствором из расчета 3 объема на 1 г ткани.
Для идентификации ферритина в тканевых био-птатах использована та же стандартная тест-система, определяющая эквивалентное соотношение известного антигена и соответствующих ему антител. Изменения концентрации ферритина в сыворотке крови у большин-ств а обследов анных б ольных коррелиров али с уровнями медиатора в тканях.
Полученные результаты исследований обработаны с помощью пакета статистического анализа Statistica 6, SPSS V 10.0.5, программ «STATLAND», «EXCEL-97», «Basic Statistic» c учетом стандартных методик вариационной статистики, включая вычисление критерия t Стьюдента для оценки достоверности различий. Данные представ-
лены в виде М±т, достоверные различия обсуждались при t=<0,001.
Результаты и обсуждение
Аргументацией возможности использования ферритина для диагностики деструктивного состояния послужила высокая его надежность в диагностике деструктивных состояний при других нозологических формах. Установлена четкая зависимость концентрации тканевого ферритина от степени деструктивного процесса. Колебания ферритина в сыворотке крови варьировали при катаральном холецистите от 50 до 60 нг/мл
а, при флегмонозном - до З06 нг/л. Значения ферритина в сыворотке от 0 до 10 нг/мл, в ткани желчного пузыря от 0 до 0,25 мг/л - приняты за 1 балл.
Уровень сывороточного ферритина был более высок при деструктивных формах острого холецистита, и составил (З06,0±62,З нг/мл р<0,01), что соответствует З0 баллам, по сравнению с уровнем при недеструктивных формах хронического холецистита 6 баллов (59,З±15,2З нг/мл, р<0,05) и контрольным уровнем 2 балла (21,9±1,З5 нг/мл, р<0,01) (таблицы 1,2).
Уровень ферритина в сыворотке 70 нг/мл принят за 7 баллов, в ткани желчного пузыря 0,75 мг/л принят за З балла; в сумме 10 баллов - предполагается недеструктивный холецистит. При сумме от 10 баллов - вероятен деструктивный холецитит. Получены высокие цифры ферритина у больных осложненным деструктивным процессом.
Возможно, снижение содержания ферритина при гангренозном холецистите связано с тем, что на фоне некроза тканей увеличивается активность протеоли-тических ферментов (катепсины), которые разрушают
Табл. 1. Содержание ферритина (M±m) в сыворотке крови больных в зависимости от формы холецистита
Форма холецистита n Содержание ферритина (M±m), нг/мл р
Катаральный 7 55,1±13,74 р<0,05
Флегмонозный 12 306,0±62,3 р<0,01
Гангренозный 5 78,3±21,73 р<0,05
Хронический 7 59,3±15,23 р<0,05
Контрольная группа 6 21,9±1,35
не только структурные элементы клеток, но и белки, в том числе и ферритин, фрагменты деградации которого иммунохимически не определяются.
Всем пациентам с такой суммой баллов выполнены санирующие операции холецистэктомии. Воспалительная деструкция подтверждена у всех больных при визуальной характеристике операционных находок и последующем гистологическом исследовании. Среди оперированных были, в том числе, и те больные, диагностика деструктивного состояния у которых традиционными методами была затруднительна, а операционные находки подтвердили необходимость и своевременность хирургического лечения.
Литература
1. Барановский П.В. Клиническое значение С-реактивного белка / Барановский П.В., Куцин Н.Ф. // Врачеб. Дело. - 1998. - №10. - С. 75-79.
2. Борисов А.Е. Современное состояние проблемы лечения острого холецистита / Борисов А.Е., Земляной, В. П., Левин, Л. А. и др. // Вестник хирургии им. Грекова. - 2001. - Т. 160, №6. - С. 92-95.
3. Гербов В.В. Возможности эндохирургического лечения распространенного перитонита / Гербов В.В., Кулиш В.А., Мешеша Берхане Редае // В сб: Миниин-вазивные технологии в неотложной хирургии. - Краснодар. - 2002. - С. 30-31.
4. Ковалев М.М. Активность аминотрансфераз сыворотки крови у больных острым холециститом / Ковалев М.М., Бурка А.А., Рой В.П. // Врач. Дело.
- 1977. - №7. С. 78-81.
5. Кулиш В.А. Эндовидеохирургическое лечение деструктивного холецистита и его осложнений / Кулиш В.А., Коровин А.Я., Манжос А.Н., Кулиш П.А., Мешеша Берхане Редае.// В сб: Миниинвазивные технологии в неотложной хирургии.
- Краснодар, 2002. - С. 55-56.
6. Кузнецов Н.А. Выбор тактики, сроков и метода проведения операции при остром холецистите / Кузнецов Н. А., Аронов Л. С., Харитонов С. В. // Хирургия.
- 2003. - №5. - С. 35-40.
7. Кокуева О.В. Диагностическая информативность компонентов желчи при хронических желчекаменных холециститах / Кокуева О.В. // Современные тенденции развития гастроэнтерологии. Тез. докл. научн.-практ. конф. - Ижевск. 1995. - С. 91-92.
8. Лищенко А.Н. Диагностическая и лечебная тактика при осложнённом остром холецистите и холецистопанкреатите / Лищенко А.Н., Ермаков Е.А., Дегтярёв М.М. // Вопросы оказания экстренной и неотложной помощи: Материалы юбил. конф., посвящённой 35-летию Краснодарского городского центра скорой медицинской помощи. - Краснодар. 1999. - Т.1. - С. 39-44.
9. Ломакин М.С. - Иммунологический надзор / Ломакин М.С. - М.: Медицина. 1990. - 256 с.
10. Мусаева М.Д. Значение допплеровских методик исследования в диагностике заболеваний желчного пузыря: автореф. Дис. канд. мед. Наук / Мусаева М.Д.
- Москва, 1997. - 21 с
11. Назаров П. Г. Реактанты острой фазы воспаления./ Назаров П. Г.- С-Пт., «Наука», 2001. - 401 с .
12. Kimura Y. Definition, pathophysiology, and epidemiology of cholangitis and cholecystitis. / Kimura Y., Takada T., Kawarada Y. [et al.] // J Hepatobiliary Pancreat Surg.
Табл. 2. Содержание ферритина (М±т) в экстрактах желчного пузыря в зависимости от формы холецистита и зоны поражения
Форма холецистита n Содержание ферритина в морфологически измененных зонах желчного пузыря мг/л на 1 у.е. общего белка, M±m Среднее содержание ферритина по всем зонам, M± m
Наибольшая Промежуточная Наименьшая
Хронический 10 0,94±0,76 0,28±0,23 1,2±1,11 0,81±0,7
Катаральный 7 3,9±1,24 2,2±1,2 2,45±0,42 2,85±1,68
Флегмонозный 15 3,08±0,3 10,8±1,88 7,2±1,72 7,03±2,42
Гангренозный 7 1,0±0,73 0,64±0,56 0,94±0,54 0,86±0,61
Дефинитивный материал 10 - -
2007. - P. 15-26.
13. Keus F. Surgical aspects of symptomatic cholecystolithiasis and acute cholecystitis. / Keus F., Broeders I., van Laarhove C. // Best Pract Res Clin Gastroenterol. 2006.
- P. 31-51.
Контактная информация
Кчибеков Элдар Абдурагимович - ассистент кафедры хирургических болезней педиатрического факультета ГОУ ВПО АГМА, к.м.н.
414041, Астрахань, ул. Яблочкова 5 , кв. 60. e-mail: Eldar_76@ inbox.ru
