CC BY
21
Беляев В.А., Серов А.В., Скрипкин В.С., Ве-ревкина М.Н., Чернова Т.С., Раковская Е.В.; заявитель и патентообладатель ООО НПО "Юг-Биовет". - № 2013111243/15; заявл. 12.03.13; опубл. 10.01.15, Бюл. № 1.
4. Самохин В.Т. Методические указания по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных, / утв. дир. института, д.б.н., проф. В.Т. Самохин, ВНИИНБЖ. 1987.
5. Собакарь М.С. Антиоксидантная терапия и метаболические подходы к лечению
заболеваний сердечно-сосудистой системы / Е.В. Ших // Биомедицина. - 2010. - Т. 1. - №3. С. 10-21.
6. Шантыз А.Х. Оценка острой токсичности препарата Гидропептон-плюс / А.А, Дельцов // В сборнике: Актуальные проблемы современной ветеринарной науки и практики / Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию Краснодарского научно-
исследовательского ветеринарного института. - 2016. - С. 137-140.
ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ НОВОГО АНТИОКСИДАНТНОГО ПРЕПАРАТА «ПОЛИОКСИДОЛ»
Киреев И.В., Оробец В.А.
Резюме
В статье представлены результаты изучения максимально-переносимых доз и определения параметров острой токсичности нового антиоксидантного препарата «Полиоксидол». Установлено, что он при однократном внутрижелудочном введении относится к третьему классу опасности в соответствии с действующей нормативно-технической документацией.
ACUTE TOXICITY OF A NEW ANTIOXIDANT DRUG "POLYOXIDOL"
Kireev I.V., Orobets V.A.
Summary
The article presents the results of studying the maximum-tolerated doses and determining the parameters of acute toxicity of the new antioxidant preparation "Polyoxidol". It has been established that, with a single intragastric administration, it belongs to the third hazard class in accordance with the current regulatory and technical documentation.
УДК:619:616.98+636.2
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ КРЫС ПРИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ХЛАМИДИОЗЕ
Кочетова О. В. - к.в.н., доцент Пермский институт ФСИН России
Ключевые слова: хламидиоз, шейка матки, лимфатические узлы, тимус, селезенка, печень, мягкая мозговая оболочка.
Key words: chlamydia, cervix, lymph nodes, thymus, spleen, liver, mild membranes.
Различные виды хламидий вызывают заболевания широко распространенные в популяции животных. Кроме острых процессов, хламидийная инфекция ассоциирована с большим числом хронических заболеваний, сопровожда-ющихся воспалением и фиброзом, что приводит к значительному поражению вовлеченных в инфекционный процесс органов и тканей. Зачастую при хламидиозе отсутствуют специфические клинические
симптомы, поэтому методы лабораторной диагностики имеют первостепенное значение.
Материалы и методы исследований. Иммуногистохимическое окрашивание серийных срезов тканей производили перокси-дазным методом, используя моно - и поли-клональные антитела к хламидийному антигену и систему визуализации ЕпУ^юп™ фАКО). Для разведения первичных антител использовали растворитель антител, редуцирующий фоновое окрашивание фАКО). Все
этапы окрашивания проходили на нагревательном столике при температуре 37°С. Суммарное время реакции (без микроскопии и оценки полученных результатов): 12 мин 05 с. Учитывая время, необходимое для приготовления криостатных срезов, для микроскопии и оценки полученных результатов суммарное время колебалось в пределах 20-22 минут.
Результаты исследований. В органах репродуктивной системы взрослой особи отмечена экспрессия хламидийного антигена в
эпителиальных тканях шейки матки и эндометрия. В случае наступления беременности возбудитель гематогенным путем может распространяться в ткани плода, повреждая их.
Нами установлена экспрессия антигена в эпителиальных клетках шиповатого слоя эпителия (рис. 1). Именно здесь хламидии могли переживать длительно внутриклеточно, не вызывая четких клинических проявлений заболевания у взрослой особи.
Рисунок 1- Иммуногистохимическая реакция с хламидийным антигеном. Экспрессия хламидийно-го антигена в клетках многослойного плоского эпителия шейки матки. х 4.
Иммунная система репродуктивных органов реагировала на внедрение возбудителя, но в связи с биологическими особенностями его иммунный ответ был несовершенен. О наличии иммунной активации иммунокомпе-тентных клеток свидетельствовала положительная экспрессия антигена в лимфоцитах и макрофагальных элементах субэпителиальных отделов шейки матки и эндометрия.
О гематогенном пути распространения инфекции свидетельствует повреждение клеток эндотелия. Именно этот фактор является первоопределяющим патогенетическим звеном при развитии хламидийной инфекции у плода. С одной стороны, эндотелиальные клетки оказывают защитную роль при распространении инфекции, с другой стороны, при их повреждении возбудитель может гематогенным путем мигрировать в организме, как взрослой особи, так и в организме плода. Именно такой путь распространения является наиболее опасным для внутриутробного заражения
Иммунологические реакции, обеспечи-
ваемые клеточными и гуморальными факторами, в своем течении имеют целый ряд стадий. В них принимают участие клеточные элементы (макрофаги, лимфоциты Т - клеточного и В - клеточного ряда) и плазменные факторы, в частности, иммуноглобулины, участвующие в реакциях гиперчувствительности немедленного типа. К органам иммуно-компетентной системы относятся тимус у плодов и молодых особей, селезенка, лимфатические образования различной локализации, прослеживаемые наиболее хорошо в органах дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, т.е. там, где вероятность контакта клеточных систем организма с возбудителем наиболее высока. В связи с этим нами была прослежена локализация возбудителя в органах иммунокомпетентной системы (селезенке, лимфатических узлах).
Особенно остро на внедрение хламидий в организм реагирует лимфоидная система -барьер на пути любого патологического агента при распространении его в макроорганизме. В лимфатических узлах экспрессию хла-
мидийного антигена наблюдали, в первую очередь, в макрофагальных элементах пери-фолликулярных зон - именно в том месте, где происходит контакт иммунокомпетентных клеток с антигеном и старт иммунного ответа
Рисунок 2
В тимусе плода и новорожденных экспрессия хламидийного антигена прослеживается на уровне мозгового слоя (рис. 3), где наиболее интенсивен уровень иммунных реакций и наблюдаются изменения, связанные со становлением иммунного ответа на внедрение возбудителя. При этом следует учесть незрелость тимуса у особей раннего возраста (слабую выраженность ретикулоэпителиаль-ной системы - телец Гассаля, принимающих участие в выработке иммунокомпетентных поэтинов, стимулирующих созревание и бла-сттрансформацию лимфоцитов).
(рис. 2). Иммунокомпетентные клетки выявляли также на уровне синусов (субкапсуляр-ных и мозговых) с характерной цитоплазма-тической экспрессией хламидийного антигена.
Известно, что печень является также барьерной системой для многих возбудителей, проникающих и распространяющихся по организму гематогенным путем. В первую очередь следует отметить лимфоидно-макрофагальную систему, клетки которой способны выполнять роль макрофагов, реагировать на внедрение возбудителя и осуществлять иммуногенные функции. Так, на нашем материале была установлена экспрессия хла-мидийного антигена на уровне клеток сину-соидных капилляров, т.е. в клетках лимфоид-но-макрофагальной системы (рис. 4).
- Экспрессия хламидий в клетке лимфатического узла крысы. Иммуногистохимическая реакция с хламидийным антигеном. х 4
Рисунок 3 - Иммуногистохимическая реакция с хламидийным антигеном. Экспрессия антигена в макрофагах мозгового слоя дольки тимуса плода крысы. х 10.
Рисунок 4 - Иммуногистохимическая реакция с хламидийным антигеном. Экспрессия антигена в макрофагах на уровне синусоидных капилляров печени плода крысы. х 4.
Важную роль в развитии патогенеза при хламидиозе играет селезенка. В светлых центрах фолликулов органа происходит активизация элементов клеточного и гуморального звена иммунопатологических реакций. Клеточные элементы макрофагального звена иммунных реакций способны осуществлять фагоцитоз чужеродных, биологически активных, антигенов, в частности, бактериальных. Хла-мидии, также являющиеся высокоспецифическим антигеном, подвергаются фагоцитозу клетками макрофагальной системы. Эту реакцию можно наглядно проследить применением иммуногистохимической реакции.
Известно, что центральная нервная сис-
тема является наиболее чувствительной к проникновению инфекционного возбудителя в условиях повреждения, функциональной и морфологической незрелости гематоэнцефа-лического барьера с учетом тропизма возбудителя, куда он проникает гематогенным путем. В структуре сосудистых стенок, в первую очередь, повреждаются клетки внутренней оболочки - эндотелиоциты, в цитоплазме которых хламидии могут переживать и мигрировать по организму. Нами была выявлена экспрессия хламидийного антигена в цитоплазме эндотелиальных клеток мягкой мозговой оболочки (рис. 5).
Рисунок 5 - Иммуногистохимическая реакция с хламидийным антигеном. Экспрессия антигена в эндотелиальных клетках сосудистой стенки мягкой мозговой оболочки плода крысы. х 4.
При использовании иммуногистохими-ческого метода исследования удалось проследить основные патогенетические звенья в развитии хламидийной инфекции. У взрослых особей страдают, в первую очередь, репродуктивные органы (матка), где инфекция чаще имеет хронический характер течения, возбудитель может находиться в латентном состоянии, что особенно опасно для заражения потомства гематогенным путем. Органы лимфо-идно-макрофагальной системы (печень, лимфатические узлы) являются первым барьером защитного характера на пути хламидий в организме. Наличие хламидийных антигенов в иммуннокомпетентных клетках, способных выполнять макрофагальную функцию, доказывает формирование иммунного ответа в «барьерных» органах, что может сдерживать гематогенное распространение возбудителя по организму. Если деятельность этой системы, несовершенна по каким - либо причинам (сопутствующая патология, иммунодефицит-ные состояния, ослабление организма и другие), страдают органы, в частности, головной мозг, который является наиболее защищенным в связи с существованием гематоэнцефа-лического барьера.
Обсуждение результатов. Хла-мидийная инфекция принимает генерализованный характер течения с возможностью повреждения самых защищенных органов при недостатке местных барьерных структур, что и было доказано при использовании иммуно-гистохимического метода исследования с хламидийным антигеном. На нашем материа-
ле с помощью иммуногистохимического метода исследова-ния удалось проследить точки фиксации возбудителя в организме взрослой особи, плодовых тканях крыс. Точками воздействия при патогенетическом развитии инфекционного хламидийного процесса, являются: у взрослых особей - органы репродуктивной системы, у плодов и новорожденных иммунокомпетентные органы, в частности, тимус, селезенка, лимфатические узлы. В случае внутриутробной контаминации плода и рождения зараженного организма возбудитель находит благоприятные условия для развития на уровне головного мозга и паренхиматозных органов.
Заключение. Таким образом, в основе изучения интранатального и постнатального патогенеза инфекции можно отметить следующие звенья. Прохождение через родовые пути способствует попаданию возбудителя в организм новорожденного при прямом контакте с инфицированными эпителиальными клетками репродуктивных органов (следует учесть также возможность аспирации и заглатывания плодом инфицированных околоплодных вод с высоким содержанием возбудителя), далее происходит гематогенное распространение возбудителя, включая иммуно-компетентные органы, которые утрачивают способность адекватно реагировать на инфекционное начало, с дальнейшей фиксацией в органах - мишенях с развитием той или иной клинико - морфологической формы заболевания.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Ермоченко, В.А. Иммуногис-тохимический метод в патологоанато-мической диагностике хламидийной инфекции / Е.Д. Черствый, Т.А. Летковская, В.А. Ермоченко // БГМУ: 90 лет в авангарде медицинской науки и практики: сб. науч. тр. / Бел.гос. мед. ун-т; редкол.: А.В. Сикорский [и
др.]. - Минск, 2011. - Т. 2. - С. 61.
2. Ермоченко, В.А. Сравнительная характеристика морфологического и иммуногистохимического методов диагностики хламидийной инфекции плодов и новорожденных / В.А. Ермоченко, Е.Д. Черствый // Здравоохранение. - 2012. - № 12. - С. 56-60.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ КРЫС ПРИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ХЛАМИДИОЗЕ
Кочетова О.В.
Резюме
Достоверным в диагностике хламидийной инфекции является иммуноморфологический метод, который позволил с большой точностью установить тропизм возбудителя в органах и тканях крыс при экспериментальном заражении.
IMMUNOHISTOCHEMICAL RESEARCHES OF ORGANS AND TISSUES OF RATS IN EXPERIMENTAL CHLAMIDIOSIS
Kochetova O.V.
Summary
Immunomorphologic method, which enabled to determine with great accuracy tropism of agent in organs and tissues of rats in case of experimental introduction of infection, is reliable in diagnostics of chlamydial infection.
УДК 619:616.9-574
ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ АНТИОКСИДАНТОВ ПРИ ТРАНСПОРТНОМ СТРЕССЕ У ПТИЦЫ
Кузьминова Е.В. -д.в.н., в.н.с.; Семененко М.П. - д.в.н., зав. лабораторией Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт
Ключевые слова: каротин, селен, антиоксиданты, птица, стресс. Key words: carotene, selenium, antioxidants, poultry, stress.
В настоящее время птицеводство является наиболее динамично развивающейся отраслью агропромышленного комплекса, обеспечивающей производство таких ценных продуктов питания, как яйцо и мясо. Повышение эффективности выращивания сельскохозяйственной птицы во многом определяется устойчивостью поголовья к воздействию агрессивных факторов окружающей среды. При этом, огромное количество антропогенных стрессовых причин, сопровождающих процесс поступательной интенсификации птицеводства, серьезно снижают иммунологическую реактивность организма, делая его более уязвимым к различным заболеваниям. Установлено, что в ответ на различные по природе и
силе раздражители (стрессоры) организм отвечает развитием неспецифических адаптационных реакций, характеризующихся изменением интенсивности и направленности всех метаболических процессов. Следствием этого является активизация процессов перекисного окисления липидов и снижение резервов ан-тиоксидантной защиты организма, что в результате приводит к деструкции клеточных мембран, снижению на этом фоне функциональной активности образуемых ими систем организма [2,5,6].
Поэтому, использование врачебно-биологических приемов, в том числе и за счет применения антиоксидантов, обеспечивающих адаптивную состоятельность организма
