CC BY
7
76
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
Проблема сохранения и восстановления репродуктивного здоровья женщин заслуживает особого внимания на современном этапе социального и экономического развития общества. Несмотря на значительные успехи, достигнутые в области вспомогательных репродуктивных технологий, благополучный исход беременности наблюдается далеко не у всех пациенток, проходящих лечение от бесплодия. Одним из важнейших факторов в патогенезе репродуктивных дисфункции у женщин является нарушения функции эндометрия. Эндометрий — это внутренняя оболочка матки, которая при гормональной стимуляции подвергается децидуальной трансформации, обеспечивающей имплантацию эмбриона в случае зачатия и дальнейшее поддержание беременности. Для изучения эндометрия в норме и при патологии разработаны модели выделения и культивирования клеток эндометрия in vitro. Однако в основном, культивируемые модели эндометрия представляют из себя монокультуры отдельных типов эндометриальных клеток в виде клеточного монослоя. Актуальным направлением современной клеточной биологии является переход к исследованию трехмерных (3D) клеточных моделей, наиболее близких по архитектуре к тканям организма человека. Одной из таких моделей является культивирование клеток в сфероидах. Нами разработана технология формирования стандартизированных по размеру сфероидов из клеток эндометрия, с узко дисперсным распределением по размеру, позволяющая сформировать сфероиды заранее заданного размера. На основе данной технологии разработана функциональная 3D модель эндометрия, отличающаяся наличием в своем составе основных клеточных компонентов и экстраклеточного матрикса, характерных для эндометрия человека, а также возможностью достичь плотности клеточного материала, сравнимой с нативной тканью. В качестве основы трехмерной конструкции используется модель культивирования клеток эндометрия в виде сфероидов, помещенных в коллагенизированный скаффолд на основе целлюлозы, полученный из децеллюляризированного яблока. Функциональность данной модели подтверждена способностью клеток в составе конструкции отвечать на гормональную стимуляцию тканеспецифической децидуальной дифференцировкой. Кроме этого, данная конструкция позволяет смоделировать 28-дневный менструальный цикл в культуре. Культивирование данной модели возможно как с использованием стандартной культуральной среды, так и в средах, не содержащих компоненты животного происхождения. Так же нами создана такая модель с использованием клеток, полученных от доноров с эндометриозом, заболеванием характеризующимся разрастанием ткани эндометрия за пределы полости матки. Разработка технологии формирования данной ткане-инженерной конструкции имеет как фундаментальное, так и прикладное значение для изучения эндометрия в норме и при патологии. Работа поддержана грантом РНФ № 22-74-10126.
ИММУНОГЕННЫЕ СВОЙСТВА ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ТЕСТИКУЛЯРНОЙ ВАКЦИНЫ
А.Б. Доржиева, Г.В. Селедцова
НИИ Фундаментальной и Клинической Иммунологии, Новосибирск, Россия
e-mail: dorzhieva-ayana@yandex.ru
Ключевые слова: онкология, опухолеассоциированные антигены, противоопухолевая вакцинация, противоопухолевый иммунитет.
Разработка новых лекарственных препаратов с исключительными точечными мишенями в опухолевых клетках не сможет сыграть ключевой роли в эффективном лечении, поскольку внутриклеточные биохимические сигнальные пути одинаковы у опухолевых и нормальных клеток. Тем не менее, опухолевые клетки могут отличаться от нормальных клеток по количеству и качеству иммунологических маркеров (антигенов, АГ). Специфическими маркерами опухолей разного ге-неза являются АГ, которые в здоровом организме присутствуют в клетках яичка. [1]. Эти опухолеассоциированные АГ (ОАА) играют важную роль в поддержании высокой ростовой и инвазивной активности опухолевых клеток.
Большинство ОАА представлено эволюционно консервативными молекулами, поэтому регистрируется высокая степень гомологии между ОАА человека и животных. Но структурные межвидовые отличия ОАА можно выгодно использовать для повышения им-муногенности противоопухолевых вакцин. Показано, иммунизация мышей человеческими, но не мышиными, меланома-ассоциированными гликопротеинами gp75 и gp 100, способна предотвращать развитие в их организме меланомы B16 [2]. В обратной ситуации мышиные ОАА могут быть более эффективными индукторами иммунных реакций у пациентов в сравнении с их человеческими аналогами. В нашей работе мы использовали клетки яичка барана для индукции перекрестных иммунологических реакций против ОАА у мышей-опухоленосителей.
Мышей первоначально иммунизировали ксеноген-ным липосомальным тестикулярным АГ, полученным из тестикул барана (основная группа) и сингенным те-стикулярным АГ мыши (сингенный контроль). Через месяц после вакцинации мышам была привита опухоль LLC, контрольной группе мышей были введены только опухолевые клетки. 50% выживаемость мышей синген-ной и контрольной групп составила 20-25 дней. Мыши в экспериментальной группе прожили вдвое дольше, примерно 41-43 дня, а у 20% из них опухоль вообще не развилась. В спленоцитах мышей, у которых не было опухолей после вакцинации липосомной тестикулярной вакциной, было определено количество Т-регуляторных (Treg) и Т-клеток памяти.
Обнаружено достоверное снижение более чем вдвое как наивных T-reg (CD4+CD25+), так и активированных (CD4+CD25+Foxp3+) в лимфоцитах мышей, вакцинированных ксеногенными тестикулярными АГ по сравнению с лимфоцитами мышей, полученных из интактной селезенки. Аналогичная динамика показателей была обнаружена при определении Т-клеток памяти.
Содержание IFN-гамма и IL-10 в супернатантах мышиных спленоцитов, полученных от ксеновакцинированных мышей без опухолей, было исследовано и показало достоверное снижение количества IL-10, но не IFN-гамма.
Литература:
1. Strioga M.M., Darinskas A., Pasukoniene V. et al. V.Vaccine.
2014. V. 32. P. 4015-4024.
2. Hsueh E.C., Morton D.L. Semin Cancer Biol. 2003. V.13. P.
401-407.
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
