CC BY
49
DOI: 10.24412/2074-5036-2022-2-6-12 УДК 578.821.2
Ключевые слова: вирус, оспа коз, нодулярный дерматит, гетерологичная вакцина, иммуногенность.
Key words: virus, goat pox, lumpy skin disease, heterologous vaccine, immunogenicity
Кондибаева Ж. Б., Шаяхметов Е. А., Саметова Ж. Ж., Аманова Ж. Т., Усембай А. К., Абитаев Р. Т., Булатов Е. А.
ИММУНОГЕННОСТЬ ГЕТЕРОЛОГИЧНОЙ ВАКЦИНЫ ИЗ ВИРУСА ОСПЫ КОЗ
ШТАММА «g20-lkv» против нодулярного дерматита крс
IMMUNOGENICITY OF HETEROLOGOUS VACCINE FROM GOAT POX VIRUS STRAIN
"G20-LKV" against lumpy skin disease of cattle
Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности. Адрес: 080409, Казахстан, Жамбыльская область, п. Гвардейский, Бауыржан Момышулы 15.
Scientific-research institute of biological safety problems. Address: 080409, Kazakhstan, Zhambyl region, Gvardeisky, Bauyrzhan Momyshuly 15.
Кондибаева Жанат Буркитбаевна, PhD, ведущий научный сотрудник. E-mail: zhanat.kondybaeva@mail.ru
Kondibaeva Zhanat Burkitbaevna, PhD, Leading Researcher. E-mail: zhanat.kondybaeva@mail.ru Шаяхметов Ералы Асхатович, младший научный сотрудник. E-mail: eraly.shax@gmail.com Shayakhmetov Yeraly Askhatovich, Junior Researcher. E-mail: eraly.shax@gmail.com Саметова Жанна Жумабековна, магистр биотехнологии, научный сотрудник. E-mail: sametova_zh.zh@mail.ru
Sametova Zhanna Zhumabekovna, Master of Biotechnology, Researcher. E-mail: sametova_zh.zh@mail.ru Аманова Жанат Темирбаевна, магистр биологии, старший научный сотрудник. E-mail: amanova-janka@mail.ru Amanova Zhanat Temirbaevna, Master of Biology, Senior Researcher. E-mail: amanova-janka@mail.ru Усембай Абдурахман Кайратович, старший лаборант. E-mail: ausembai@mail.ru Usembai Abdurakhman Kairatovich, Senior Laboratory Assistant. E-mail: ausembai@mail.ru Абитаев Руслан Тореханович, магистр биологии, научный сотрудник. E-mail: rusabitaev@mail.ru Abitaev Ruslan Torekhanovich, Master of Biology, Researcher. E-mail: rusabitaev@mail.ru Булатов Ербол Акенович, кандидат биологических наук, заведующий лабораторией. E-mail: erbol_km@mail.ru Bulatov Yerbol Akenovich, PhD of Biology, Head of the Laboratory. E-mail: erbol_km@mail.ru
Аннотация. В работе представлены результаты определениие иммуногенности гетерологичной вакцины из штамма «G20-LKV» вируса оспы коз против нодулярного дерматита КРС. Иммуногенность вакцины оценивали по наличию вируснейтрализующих антител (ВНА) и результатам контрольного заражения. Введение животным вакцины из штамма «G20-LKV» подкожно в объеме 2,0 мл в дозе от 105,0 ТЦД50 вызывает формирование иммунитета у привитых животных через 21 сутки, длительностью не менее 12 месяцев.
Summary The paper presents the results of determining the immunogenicity of a heterologous vaccine from the "G20-LKV" strain of the goat pox virus against lumpy skin disease for cattle. The immunogenicity of the vaccine was assessed by the presence of virus neutralizing antibodies (VNA) and the results of challenge. The introduction of animal vaccines from the "G20-LKV" strain, subcutaneously in a volume of 2.0 ml at a dose of 105.0 TCD50, causes the formation of immunity in vaccinated animals 21 days after vaccination, lasting at least 12 months.
Введение
Оспа коз, оспа овец и нодулярный дерматит являются заразными вирусными болезнями коз (GTPV), овец (SPPV) и крупного рогатого скота (LSDV), соответственно вызываемыми вирусами рода Capripoxvirus (CaPV) семейства Poxviridae, которые серологически неотличимы друг от друг и способны индуцировать гетерологичную перекрестную защиту [11, 17]. Поскольку существует
только один серотип СаРУ, различение SPPV, GTPV и LSDV с помощью серологических и антигенных методов затруднено [15, 14].
Нодулярный дерматит для Казахстана является относительно новым заболеванием, поэтому обеспечение ветеринарно-санитар-ной безопасности и эпизоотического благополучия по названной болезни имеет важное научно-практическое значение. На территории Казахстана нодулярный дерматит впер-
вые был зарегистрирован в Западном Казахстане в 2016 году [18].
В соответствии с новой классификацией он включен в список болезней МЭБ, подлежащих обязательному уведомлению, в категорию «Болезни и инфекции крупного рогатого скота» [6, 20]. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота (НД КРС) -вирусная высококонтагиозная болезнь крупного рогатого скота, реже - овец, коз и буйволов, характеризующаяся лихорадкой, образованием некротизирующихся кожных узлов (бугорков), генерализованным лимфаденитом, отеком конечностей, поражением глаз и слизистых оболочек органов дыхания. Заболевание передается животным, в основном, кровососущими насекомыми, комарами, москитами и мухами. Наибольшее количество больных животных регистрируется там, где много кровососущих насекомых. Заражение КРС нодулярным дерматитом происходит при попадании в организм животных ДНК-содержащих вирусов нескольких вариантов: Neethling, Allerton или BLD. При этом заражение, вызываемое вариантом Neethling, который является про-тотипным возбудителем нодулярного дерматита [4, 5], встречается чаще.
В связи с обострением эпизоотический ситуации по заразному узелковому (нодулярно-му) дерматиту крупного рогатого скота в мире и в сопредельном с нами государстве - России, принимается ряд мер по недопущению этой опасной болезни на территорию страны [10]. В том числе необходимо иметь высокоэффективные диагностические препараты и средства специфической профилактики, которые в короткие сроки позволили бы идентифицировать возбудителя НД КРС и быстро купировать распространение инфекции. Это обстоятельство требует постоянных поисков новых штаммов, пригодных для изготовления средств диагностики и специфической профилактики нодулярного дерматита КРС. Для активной специфической профилактики используют как гомологичные живые атте-нуированные вирусные вакцины из штамма Neethling, так и гетерологичные живые ат-тенуированные вирусные вакцины из штаммов каприпоксвирусов, полученных от овец
и коз. Все штаммы каприпоксвирусов, которые используются в качестве вакцины, могут вызывать сильную местную реакцию в месте инъекции. Рекомендуемая прививная доза из гомологичного вируса - 2,5 lg ТЦД50/см3, а доза гетерологичной вакцины из вируса оспы овец и коз - 3,5 lg ТЦД50/см3 (10-кратная «овечья» доза) [7, 16].
По данным литературы применение гетерологичной вакцины из штамма «G20-LKV» для профилактики НД КРС является одним из актуальных методов борьбы с инфекцией. В свою очередь, вакцинные препараты, наряду с высокой эффективностью, должны обладать достаточной безвредностью и имму-ногенностью [13, 1].
Впервые в Казахстане, в НИИПББ, была разработана технология изготовления вакцины против нодулярного дерматита крупного рогатого скота из штамма «G20-LKV» вируса оспы коз, которая по своим иммунобиологическим свойствам не уступает зарубежным вакцинам. Потребности в проведении нами данных исследований для Казахстана и стран Центральной Азии достаточно велики, поскольку применение живой вирусвакцины из штамма «G20-LKV» для профилактики НД КРС на данной территории является одним из главных залогов успеха борьбы с этими инфекциями [9].
Цель исследования - определение им-муногенности гетерологичной вакцины из штамма «G20-LKV» вируса оспы коз против вируса нодулярного дерматита КРС.
Материалы и методы
Характеристика штаммов
Вакцинный штамм «G20-LKV» вируса оспы коз
В экспериментальной работе использован вакцинный штамм «G20-LKV» вируса оспы коз (№ GenBank: AY077836.1), полученный путем длительного пассирования в культуре клеток почки ягнят (ПЯ) и относящийся к семейству Poxviridae, роду Capripoxvirus, вид Variola Caprina [2]. Инфекционная активность штамма составила 105,58- 106 00ТПД../ см3, а вакцина, изготовленная с применением данного штамма, индуцирует иммунитет на 5-е сутки у 100 % вакцинированных
коз. Животные в возрасте 6-36 месяцев при подкожной иммунизации вакциной в дозе 100 ТЦД50 из штамма «G20-LKV» приобретают полную невосприимчивость на 5-е сутки к контрольному заражению вирулентным вирусом оспы коз при 100-процентной заболеваемости контрольных невакцинированных животных. Полученный штамм обладает высокой биологической активностью, иммуно-генностью и безвредностью.
Штамм «НИИПББ-2019/К» вируса модулярного дерматита КРС типа «НИТЛИНГ»
Штамм «НИИ11ББ-2019/К», был получен из изолята эпизоотического вируса НД КРС, выделенного от больного крупного рогатого скота в Атырауской области в 2016 году. Штамм вируса обладает патогенностью для крупного рогатого скота, которая характеризуется стимуляцией клинического заболевания нодулярным дерматитом у не менее 80 % животных, подвергнутых заражению, используется для контроля живых и инакти-вированных вакцин против нодулярного дерматита крупного рогатого скота.
Штамм «НИИПББ-2019/К» вируса ноду-лярного дерматита типа «НИТЛИНГ» репродуцировался в культуре клеток до количеств, вызывающих 50 % цитопатический эффект -1055 - 106,0 ТЦД50/см3.
Методы исследований
Иммуногенность вакцины определяли на клинически здоровых невакцинированных против НД КРС и других поксвирусов животных. До вакцинации определяли иммунный фон КРС к вирусу нодулярного дерматита. С этой целью сыворотки крови КРС исследовали в реакции нейтрализации (РН) на наличие антител к вирусу нодулярного дерматита КРС. Нейтрализующую активность сывороток определяли по индексу нейтрализации, которую вычисляли по разнице логарифмических показателей титров нормальной и испытуемой сыворотки.
Перед вакцинацией содержимое ампулы с вакциной растворяли физиологическим раствором. Для этого в ампулы вносили физиологический раствор в объеме, равном объему до высушивания и тщательно встряхивали
до полного растворения вакцины. После растворения вакцины разводили стерильным физиологическим раствором для получения необходимой прививной дозы. В одной прививной дозе для КРС должно быть не менее 15 000 ТЦД50 гетерологичного вируса (оспа коз).
Иммуногенность вакцины против НД КРС проверяли на 10 животных в возрасте 6-12 месяцев, живой массой 70-110 кг, (8 голов вакцинированные, 2 головы контрольные). Вакцину вводили подкожно, по 2,0 см3 (15 000 ТЦД50) в область средней трети шеи с соблюдением правил асептики. На 7, 14 и 21 сутки после вакцинации отбирали пробы (сыворотка крови) для определения ВНА к вирусу нодулярного дерматита в РН. За инфицированными животными вели клиническое наблюдение в течение 21 суток с ежедневной термометрией тела.
На 21-е сутки после вакцинации всех вакцинированных и двух контрольных животных внутрикожно заражали вирулентным штаммом «НИИПББ-2019/К» вируса ноду-лярного дерматита КРС методом титрования в разведениях с 10-1 по 10-5 объемом 0,5 мл. За животными вели ежедневные клинические наблюдения с измерением температуры тела в течение 14 суток.
Для определения продолжительности иммунитета у животных, привитых вакциной вируса оспы коз из штамма LKV» против нодулярного дерматита КРС, проводили исследование на 18 животных (КРС) вакцинированных в дозе 15 000 ТЦД50 в объеме 2,0 см3. Через 6, 9 и 12 месяцев вакцинированных животных вместе с интактной группой КРС подвергали контрольному заражению вирулентным штаммом «НИИПББ-2019/К» вируса нодулярного дерматита в дозе 1000 ИД50 внутрикожно методом титрования в разведениях с 10-1 по 10-5 объемом 0,5 мл.
У всех вакцинированных и контрольных животных брали кровь через 6, 9 и 12 месяцев перед контрольным заражением для определения титра вируснейтрализующих антител.
Вакцина считалась иммуногенной, если у вакцинированных животных отсутствовали
Таблица 1
Результаты исследований сывороток крови вакцинированных КРС на наличие
вируснейтрализующих антител в РН
п/п Вид животных Доза вакцины ТЦД50/гол Результаты исследования сывороток крови (сут) Реакция животных
7 14 21
РН РН РН
1 КРС 15 000 0,50±0,00 0,75±0,25 1,25±0,14 Не наблюдалось
2 КРС - 1,0±0,12 1,31±0,11
3 КРС 0,75±0,31 1,25±0,43 1,75±0,43
4 КРС - 1,12±0,35 1,37±0,16
5 КРС 0,50±0,00 1,06±0,15 1,50±0,19
6 КРС - 1,12±0,13 1,31±0,11
7 КРС 0,75±0,10 1,37±0,16 1,68±0,27
8 КРС 0,83±0,09 1,50±0,24 2,00±0,00
9 КРС (контрольный) 10-1 - 10-5 - - - Угнетение, отказ от корма, температура тела 41,0 0С, на месте инъекции 10-1 разведения вируса в течение 5-7 суток отмечены уплотнения, покраснение и набухание кожного покрова
10 КРС (контрольный) - - -
клинические признаки НД КРС после контрольного заражения вирулентным вирусом, тогда как контрольные животные заболевали с клиническими признаками болезни (повышение температуры тела до (41,0-41,5) °С, появления бугорчатки, переходящие в везикулы и пустулы в месте введения вирулентного вируса размером не менее 2,0 см в диаметре). Анализ результатов исследований проводили с использованием программы Microsoft Excel 2010 (Магаой™ Согр., WS, USA) и GraphPad Prism 6 (GraphPad™, San Diego, CA, USA).
Результаты исследований
Изучение иммуногенности вакцины показало, что у вакцинированных животных на 7, 14 и 21 сутки в сыворотке крови присутствуют вируснейтрализующие антитела в титрах 0,75-2,0 lg ТЦД50/см3. В сыворотке крови контрольных КРС не выявляли антител против указанных инфекций (таблица 1).
В результате проведенных исследований установлено, что все вакцинированные животные на протяжении 21 суток (срок наблюдения) оставались клинически здоровыми, повышения температуры тела и каких-либо припухлостей в местах введения вакцины не наблюдалось. Результаты реакции у вакцинированных животных представлены на рисунке (рис 1).
Анализполученныхрезультатовсвидетель-ствует, что все вакцинированные животные
Рис. 1. Температуры тела КРС после вакцинации от 0 до 21 суток.
Рис. 2. Контрольное заражение КРС после вакцинации (21 сутки) вирулентным вирусом «НИИПББ-2019/К» методом титрования в разведениях с 10-1 по 10-5.
после заражения вирулентным штаммом «НИИПББ-2019/К» вируса НД КРС были устойчивы к контрольному заражению. Общее клиническое состояние у вакцинированных животных было в пределах нормы, признаков отклонения от физиологической нормы в течение 14 суток (срок наблюдения), температурная реакция, либо другие побочные действия препарата на организм животных не отмечалось.
В свою очередь, контрольные животные заболели с проявлением характерных клинических признаков. У них отмечали повышение температуры тела (40,5-41,5) 0С на протяжении 5-7 суток, появление на месте введение, припухлости и папулы размером 5-6 см в диаметре в месте введения вирулентного вируса. На 8-10 сутки папулы превращались в везикулы с развитием некротических очагов (рис 3, 4).
На основе анализа полученных результатов было установлено, что гетерологичная вакцина вируса оспы коз для профилактики нодулярного дерматита обладает иммуноген-ностью при однократной иммунизации животных, что согласуется с данными ученых (В. Н. Сюрин и др, 1998, Д. В. Грачев, 2006, К а Davies, С. Otema, 1981, К Р. КйсЫ^, 1989). Проверка иммуногенности вакцины показала, что она обладает иммуногенной эффективностью и защищает животных от заболевания при заражении вирулентным штаммом «НИИПББ-2019/К» вируса ноду-лярного дерматита.
Рис. 3. Папулы и пустулы в местах введения вирулентного вируса с 10-1 по 10-3.
Рис. 4. Температурная реакция КРС, находившегося в опыте по определению иммуногенности вакцины, после контрольного заражения, наблюдения за 14 суток.
Результаты реакции животных на контрольное заражение представлены на рисунках (рис. 2, 3, 4)
Таким образом, анализ полученных результатов показал, что после вакцинации гетерологичной вакциной вируса оспы коз против НД КРС в сыворотках крови вакцинированных животных отмечалось наличие специфических антител достаточного уровня защиты от данной инфекции. В наших экспериментах не обнаружено ни одного случая повышения температуры тела и отклонения от физиологической нормы.
В дальнейших исследованиях была поставлена задача изучения продолжительности иммунитета у животных, привитых вакциной вируса оспы коз против нодулярного дерматита КРС. Результаты опытов представлены в таблице 2.
Таким образом, анализ полученных результатов показал, что после вакцинации гетерологичной вакциной вируса оспы коз против НД КРС в сыворотках крови вакци-
Таблица 2
Длительность иммунитета у КРС, привитого вакциной вируса оспы коз
из штамма «С^-Ь^У»
№ п/п Сроки после иммунизации, мес Количество вакцинированных животных, гол Титр ВНА (Х±т) Количество интактных животных, гол Результаты контрольного заражения
вакцинированных животных интактных животных
1 6 4 1,50±0,43 2 0/4 2/2
2 9 4 1,12±0,35 2 0/4 2/2
3 12 4 1,00±0,31 2 0/4 2/2
Примечание: - в числителе количество заболевших животных; - в знаменателе общее количество животных в группе.
нированных животных отмечалось наличие специфических антител достаточного уровня защиты от данной инфекции. В наших экспериментах не обнаружено ни одного случая повышения температуры тела и отклонения от физиологической нормы.
В дальнейших исследованиях была поставлена задача изучения продолжительности иммунитета у животных, привитых вакциной вируса оспы коз против нодулярного дерматита КРС. Результаты опытов представлены в таблице 2.
Из данных таблицы 2 видно, что у вакцинированных животных в течение 1 года в крови присутствуют вируснейтрализую-щие антитела в титрах в пределах 1,50-1,00 ^ ТЦД50/см3. Иммунизированные животные в течение 12 месяцев оставались невосприимчивыми к вирулентному вирусу НД КРС (срок наблюдения).
Таким образом, в результате проведенных исследований, нами получена иммуногенная и слабореактогенная гетерологичная вакцина против нодулярного дерматита КРС из штамма «^20-ЬКУ» вируса оспы коз, индуцирующая образование напряженного иммунитета на 21-е сутки и длительностью 12 месяцев (срок наблюдения).
Обсуждение результатов
Наиболее эффективной мерой профилактики нодулярного дерматита КРС является вакцинация. Эффективная иммунопрофилактика зависит от выбора вакцинного препарата, который в свою очередь обусловливается иммуногенностью, безвредностью и стабильностью штамма. В связи с этим в
настоящее время перспективным направлением является применение вакцинных препаратов с использованием гетерологичных вакцин. Следовательно, можно защищать КРС против нодулярного дерматита с помощью штаммов каприпоксвируса, полученных от овец и коз. В 1989 и 1990 году румынский штамм вакцины против оспы овец использовали для борьбы со вспышкой нодулярного дерматита в Египте [12, 19].
Полученные нами экспериментальные данные по определению иммуногенности ге-терологичной вакцины вируса оспы коз против нодулярного дерматита свидетельствуют о том, что разработанная нами вакцина против нодулярного дерматита КРС соответствует аналогичным исследованиям с данными зарубежных ученых [3, 8].
В результате проведенных экспериментов установлено, что гетерологичная вакцина вируса оспы коз из штамма «G20-LKV» в дозе 15 000 ТЦД50 создает у однократно привитых животных напряженный иммунитет у крупного рогатого скота от нодулярного дерматита, не вызывая у них повышения температуры тела и развития клинических признаков болезни. Проведенные нами исследования свидетельствуют о том, что гетерологичная вакцина обладает достаточной антигенной активностью и иммуногенностью. Иммунитет у привитых вакциной животных наступает на 21-е сутки и сохраняется в течение 12 месяцев (срок наблюдения).
Заключение
На основании проведенных исследований можно заключить, что гетероло-
гичная вакцина против вируса оспы коз обладает полноценной иммуногенностью против НД КРС. Предлагаемый биопрепарат рекомендуется для профилактической иммунизации КРС как в угрожаемых, так и в неблагополучных хозяйствах по болезни нодулярного дерматита КРС и оспы коз.
Список литературы
1. Абдураимов Е. О. Изучение иммунобиологических свойств штамма «G20-LKV» вируса оспы коз / Е. О. Абдураимов, С. М. Мамадалиев, М. А. Мамбеталиев, Е. А. Булатов // Карантинные и зоонозные инфекции в Казахстане: Сб. трудов посвящ. 10-летию суверенитета Республики Казахстан и 50-летию Талдыкорганской противочумной станции. Выпуск 4. Алматы, 2001. С. 296-297.
2. Абдураимов Е. О. Разработка технологии изготовления вирусвакцины против оспы коз: авто-реф. дисс. на соискание уч. степ. канд. вет. наук. / Е. О. Абдураимов. 2003. С. 9-12.
3. Грачев Д. В. Иммунобиологические свойства вируса оспы коз, выделенного в Республике Таджикистан: автореф. дисс. на соискание уч. степ. канд. вет. наук. / Д. В. Грачев. Покров, 2006. 26 с.
4. Гуненков В. В. Заразный узелковый дерматит крупного рогатого скота / В. В. Гуненков. // Сборник науч. Тр. ВГНКИ. 2005. Т. 66. С. 46-54.
5. Закутский Н. И. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота: характеристика возбудителя болезни, распространение, диагностика и меры борьбы (обзор литературы) / Н. И. Закутский, В. М. Балышев, С. Г. Юрков, А. Г. Гузалова, А. В. Луницин // Ветеринарный врач. 2016, № 4. С. 3-12.
6. Кодекс здоровья наземных животных МЭБ / Т. 1. - 23 изд. - Париж, 2014. - Гл. 1. 2. Критерии включения болезней, инфекций и инфестаций в список МЭБ. - С. 5.
7. Кукушкина М. С. Сравнительный анализ эффективности гомологичной и гетерологичной иммунизации овец и коз против оспы / М. С. Кукушкина, А. В. Гарькин, Н. В. Мороз, В. И. Диев // Вестник Кыргызского научно-исследовательского института животноводства, ветеринарии и пастбищ им Арстанбека Дуйшеева (КыргНИИЖВиП). Бишкек, 2007. № 1. С. 234-238.
8. Мищенко В. А. Влияние физиологического и иммунобиологического статуса КРС на уровень поствакцинального иммунитета / В. А. Мищенко, А. В. Кононов, А. В. Мищенко и др. // Ветеринария Кубани. 2008.№ 2. С. 5-7.
9. Патент KZ (A) №10997, 14.12.2001. «Способ приготовления вирусвакцины против оспы коз» / Абдураимов Е. О., Мамадалиев С. М., Мамбеталиев М. А., Абдураимова Ж. О.
10. Эпизоотическая ситуация по заразному узелковому дерматиту в РФ. Россельхознадзор,
2019. Режим доступа: URL:https://www.fsvps.ru/ fsvps/ook/ndrussia/
11. Babiuk S. Capripoxviruses: An Emerging Worldwide Threat to Sheep, Goats and Cattle. / S. Babiuk, T. R. Bowden, D. B. Boyle, D. B. Wallace, R. P. Kit-ching // Transboundary and Emerging Diseases. 2008. 55 (7): Р. 263-272. https://doi.org/10.1111/j.1865-1682.2008.01043.x .
12. Brenner J. Lumpy skin sease (LSD) in a large dairy herd in Israel. / J. Brenner, M. Haimovitz, E. Oron, Y. Stram, O. Fridgut, V. Bumbarov, L. Kuznetzova, Z. Oved, A. Waserman, S. Garazzi, S. Perl, D. Lahav, N. Edery, H. Yadin // Isr. J. Vet. Med., 2006. № 61, Р. 73-77.
13. Zhugunissov K. Goatpox virus (G20-LKV) vaccine strain elicits a protective response in cattle against lumpy skin disease at challenge with lumpy skin disease virulent field strain in a comparative study. / K. Zhugunissov, Y. Bulatov, M. Orynbayev, L. Kutumbetov, Y. Abduraimov, Y. Shayakhmetov,
D. Taranov, Z. Amanova, M. Mambetaliyev, Z. Absatova et al. // Vet. Microbiol. 2020, 245, 108695. Р. 1-8.
14. Gershon P. D. A Capripoxvirus Pseudogene Whose Only Intact Homologs Are in Other Poxvirus Genomes. / P. D. Gershon, D. N. Black. // Virology. 1989. 172, Р. 350-354.
15. Kitching R. P. Studies on the major common precipitating antigen of capripoxvirus. / R. P. Kitching, J. M. Hammond, D. N. Black // J. Gen. Virol. 1986, 67, Р. 139-148.
16. Menasherow S. A high-resolution melting (HRM) assay for the differentiation between Israeli field and Neethling vaccine lumpy skin disease viruses. / S. Menasherow, O. Erster, M. Rubinstein-Giuni, A. Kovtunenko, E. Eyngor, B. Gelman,
E. Khinich, Y. Stram. // J. Virol. Methods. 2016, 232, Р. 12-15.
17. Sileshi Aregahagn. Spatiotemporal Distributions of Sheep and Goat Pox Disease Outbreaks in the Period 2013-2019 in Eastern Amhara Region, Ethiopia. / Sileshi Aregahagn, Belege Tadesse, Bethelihem Tegegne, Yalelet Worku, and Seid Mohammed. / Veterinary Medicine International 2021: Р. 1-7. https://doi.org/10.1155/2021/6629510.
18. Orynbayev M. B. Lumpy skin disease in Kazakhstan / M. B. Orynbayev, R. K. Nissanova, B. M. Khairullin, A. Issimov, K. D. Zakarya, K. T. Sultankulova, L. B. Kutumbetov, A. B. Tu-lendibayev, B. Sh. Myrzakhmetova, E. D. Burashev, S. S. Nurabayev, O. V. Chervyakova, A. K. Nakhanov, R. A. Kock. // Tropical Animal Health and Production (2021) 53: 166. DOI: 10.1007/s11250-021-02613-6.
19. OIE Terrestrial Manual 2017 Chapter 2/4/13.-Lumpy skin disease.
20. FAO. (2017). Lumpy skin disease (LSD) field manual for veterinarians. http://www.fao.org/3Za-i7330e.pdf.
