CC BY
4
136
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
остеобластов человека в ходе остеогенной дифференци-ровки in vitro.
Протеомный анализ проводили при помощи тан-демной масс-спектрометрии с ионной подвижностью. В литературе все еще нет примеров сравнения разных подходов протеомики-дробовика, которые можно реализовать на этой платформе, поэтому в рамках поставленной биологической задачи мы провели сравнение data dependent (DDA) и data independent acquisition (DIA) подходов протеомного анализа.
Методы DIA-протеомики оказались на порядок более эффективными по сравнению с классическим DDA-подходом. Однако все подходы позволили выделить три четких кластера — ИКК в контроле, ИКК в дифференци-ровке и остеобласты.
Патологическая остеогенная дифференцировка ИКК значительно отличается от нормальной остео-генной дифференцировки при формировании костной ткани. Описанные нами различия представляются перспективными для поиска подходов для терапии КАС. Исследование выполнено при поддержке гранта РНФ номер 18-14-00152.
ИММУНОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГЕНЕРАЦИИ РАН В УСЛОВИЯХ ПРИМЕНЕНИЯ СУПЕРНАТАНТА ПРОБИОТИЧЕСКИХ БАКТЕРИЙ BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM
П.Б. Лозовая, Е.Д. Полянских, Е.Г. Костоломова
ФГБОУ ВО Тюменский государственный медицинский университет, Тюмень, Россия
e-mail: p.lozovaYa@Yandex.ru
Ключевые слова: ранозаживляющее средство «Cellgel», ре-паративная регенерация, апоптоз.
На 20 половозрелых кроликах — самцах проведен эксперимент, целью которого является изучение методом иммуногистохимии индекса пролиферации (Ki-67-позитивные клетки) и готовности к апоптозу (С095-позитивные клетки) клеток эпидермиса и дермы в условиях применения супернатанта пробиотических бактерий Bifidobacterium bifidum. Понимание роли апоптоза в образовании рубцовой ткани может способствовать поиску новых подходов к терапии, связанной с воздействием на иммунные механизмы регуляции гибели клеток.
Животные были разделены на контрольную и экспериментальную группы. Под общим обезболиванием на спине животного по паравертебральной линии формировали инфицированные раны мягких тканей, через 3-5 суток начинали лечение. В группе контроля лечение проводили традиционным методом. В экспериментальной группе применяли супернатант Bifidobacterium bifidum. С 1 по 25 сутки под местной анестезией выполняли биопсию раны. Иммуногистохимические реакции проводили в парафиновых срезах с использованием первичных антител Ki 67, CD95 / Apo 1, (DAKO) и системы визуализации En vision. Ядра докрашивали гематоксилином. У контрольной группы закрытие раневого дефекта происходило к 20 суткам с формированием грубого соединительнотканного рубца и сохранением дистрофически — дегенеративных изменений подкожной клетчатки и мышц, дегенеративных изменений нервных стволиков. В экспериментальной группе на 10 сутки эксперимента наблюдается полная эпителизация раневого дефекта с его оволосением, гистологическая картина
эпителизации с сохранением всех функционирующих структур, что характеризует потенцирование суперна-тантом Bifidobacterium bifidum механизмов физиологической репаративной регенерации. При иммуногистохи-мическом исследовании до начала лечения количество клеток экспрессирующих маркер CD95+ и Ki67+ одинаково во всех группах. В экспериментальной группе на 1-3 сутки наблюдается рост носителей CD95+ с последующим его снижением, начиная с 3-5 суток. С 1 суток, наблюдается рост носителей маркера Ki67+и продолжается до 15 суток. На 3-5 сутки наблюдаем «перекрест маркеров», что, на наш взгляд, характеризует переход первой фазы раневого процесса во вторую. В группе контроля наблюдается снижение CD95+. На 5 сутки наблюдается некоторый всплеск уровня Ki67+ с дальнейшим его уменьшением практически до нуля. В эпидермисе молодых рубцов обнаруживаются активные процессы пролиферации. Метка локализуется в ядрах клеток ба-зального и шиповатого слоя и округлых клетках, которые имеются в сосудах и между коллагеновыми волокнами зоны роста. В контрольной группы закрытие раневого дефекта происходит к 20 суткам, в дерме метки нет.
Супернатант пробиотических бактерий Bifidobacterium bifidum является индуктором апоптоза в первую фазу раневого процесса. Во вторую и третью фазы данное вещество индуцирует механизмы физиологической репара-тивной регенерации.
ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ЭЛЕКТРОПРОВОДЯЩИЙ МАТЕРИАЛ ДЛЯ ОСТЕОИНДУКЦИИ НА ОСНОВЕ АЦЕТАТ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ С PEEDOT:PSS
К.И. Луканина, Н.А. Шарикова, П.М. Готовцев, Т.Е. Григорьев
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
e-mail: Lukanina.k@gmail.com
Ключевые слова: тканевая инженерия, аналог ЭЦМ на основе природных полимеров, электропроводящие материалы, PEEDOT:PSS, ацетат целлюлозы.
Как известно для эффективной пролиферации и адгезии остеобластов предпочтительнее использовать нетканый высокопористый материал, обладающей свойством электропроводности [1]. Архитектура полимерной основы может варьироваться в зависимости от типа и локализации замещаемой нативной ткани. В данной работе в качестве полимерной основы выбран диацетат целлюлозы, природный полимер, обладающий требуемыми прочностными характеристиками и биосовместимостью. В качестве электропроводящего наполнителя выбран PEEDOT:PSS, представляющий собой полимерную смесь двух иономеров. Один компонент в этой смеси состоит из полистиролсульфоната натрия, который представляет собой сульфированный полистирол. Часть сульфониль-ных групп депротонирована и несет отрицательный заряд. Другой компонент — PEDOT, несет положительные заряды и основан на политиофене. Получение материалов на основе полистиролсульфоната ограничено избирательной растворимостью в органических растворителях и технологическими ограничениями в переработке данного полимера. Отдельной задачей является сшивка PEEDOT:PSS, так полимер достаточно быстро растворяется в водных растворах. Однако в работе предложен метод введения данного электропроводящего компонента в полимерную базу.
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
