CC BY
10
2010 г.
РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ ДОСТАВКИ РЕКОМБИНАНТНОГО ЭРИТРОПОЭТИНА ЧЕЛОВЕКА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ
Колесова М.Е., Хрипко О.П., Нечаева Е.А.
Федеральное государственное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Новосибирская область, р. п. Кольцово, РФ
Цитокины - небольшие пептидные информационные молекулы, регулирующие межклеточные и межсистемные взаимодействия. Из цитокинов гормонального типа лучше всего изучен эритропоэтин (ЭПО). Рекомби-нантный эритропоэтин человека (рчЭПО) широко применяется в клинической медицине для лечения анемий разной этиологии, улучшения сердечной функции и нейропротекции.
Существующие на сегодняшний день препараты рчЭПО представлены в основном инъекционными формами. Наиболее предпочтительным путем введения любого лекарственного препарата является введение per os. Проблема применения рчЭПО в пероральной форме, подобно другим биологически активным веществам белковой природы, состоит в инактивации действующего вещества ферментативными системами организма и низкой биодоступности. В связи с этим, цель исследования - конструирование системы доставки рекомбинантного эритропоэтина человека для перорального применения, изучение ее эффективности и безопасности.
Для создания капсулированной формы рчЭПО были выбраны полимеры обладающие выраженной зависимостью конформации от рН окружающей среды. Мак-
симальную нетоксическую дозу используемых полимеров определяли методом титрования на культурах клеток Vero и Л-68. Было получено 29 экспериментальных лиофилизированных образцов. Размер полученных капсул зависел от концентрации полимера и варьировал от 10 до 500 нм. Капсулы сохраняли стабильность в 0,1 Н растворе соляной кислоты в течение 1 ч. при температуре 37 °С. Концентрацию ЭПО в капсулированном препарате определяли методом иммуноферментного анализа. Эффективность экспериментальных образцов оценивали на животных моделях по изменению концентрации ретикулоцитов в периферической крови мышей. Кроме того, эффективность капсулированного рчЭПО была показана в системе in vitro по стимуляции образования костным мозгом мышей эритроидных колоний в полувязкой среде.
Таким образом, в результате проведенных исследований были подобраны наиболее перспективные полимеры для создания новой лекарственной формы рчЭПО. Отработаны условия получения капсулиро-ванной формы препарата. Получены экспериментальные образцы рчЭПО. Проведены испытания активности полученных образцов препарата in vitro и in vivo. Показана эффективность капсулированной формы эритропоэтина.
ИММУНОАДЪЮВАНТНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРЕПАРАТОВ ЦИТОКИНОВОГО РЯДА
Алпатова Н.А., Никитина Т.Н., Авдеева Ж.И.
ФГБУ «ГИСК им. Л.А. Тарасевича» Минздравсоцразвития России, г. Москва, Россия
Вопрос обеспечения адекватного иммунного ответа на вакцинацию у лиц с ослабленной иммунной активностью и с проявлениями иммунодефицита является актуальным. Решению этой проблемы способствует поиск и разработка средств, направленных на увеличение эффективности вакцинопрофилактики. Повышение эффективности вакцинации достигается путем использования адъювантов. Механизм действия большинства используемых адъювантов опосредуется через активацию эндогенных цитокинов. В настоящее время разработаны лекарственные препараты на ос-
нове рекомбинантных белков цитокинов, которые могут быть использованы не только для проведения цито-кинотерапии, но и в качестве иммуноадъювантов. Изученные препараты цитокинового ряда - «Беталейкин (рчИЛ-1Р)», «Ронколейкин (рчИл-2)», «Альнорин (рчФНОа)», «Аффинолейкин», а также препарат «Иму-нофан», повышают уровень иммунного ответа на специфический антиген вакцин против гепатита А, гепатита В, бешенства, клещевого энцефальта. Для каждого вида вакцин необходим свой набор цитокинов, стимулирующих клеточный или гуморальный тип иммунного
Э
ПРЕПАРАТЫ
ответа. При иммунизации или реиммунизации животных вакциной в сочетании с цитокинами наблюдается более высокий уровень сероконверсии, частота выявления высоких концентраций специфических антител (АТ) и более выраженная противовирусная защита животных. Концентрация АТ у животных, иммунизированных вакцинами с цитокинами, в 1,5 - 7,3 раза превышала уровень АТ у животных, иммунизированных без цитокинов, в зависимости от типа вакцин и используемых цитокинов. Адъювантное действие цитокинов наиболее демонстративно проявляется при использовании малых доз вакцины, на которые развивается слабый иммунный ответ в случае их использования без
цитокинов, а также на экспериментальной модели животных с иммуносупрессией. Результаты исследований на животных с иммуносупрессией свидетельствуют о возможности использования препаратов цитокинов для стимуляции иммунного ответа при вакцинации лиц, имеющих проявления иммунодефицита. Изучен спонтанный и индуцированный антигеном синтез цитокинов клеточными культурами. В вакцинах, полученных с использованием клеток млекопитающих, выявлен ряд цитокинов (ФНОа, ИЛ-1, ИЛ-6). Оценка способности клеток млекопитающих продуцировать цитокины может служить основанием для выбора субстрата при производстве культуральных вакцин.
10 ноября, секция «ВАКЦИНЫ»
СТРАТЕГИИ ПРОФИЛАКТИКИ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА
Злобин В.И., Малое И.В., Козлова И.В., Данчинова Г.А., Верхозина М.М., Демина Т.В., Джиоев Ю.П., Аитов К.А., Борисов В.А., Исаева Е.И., Морозова О.В., Гришечкин А.Е., Конькоеа-Рейдман А.Б.
ГОУ ВПО Иркутский государственный медицинский университет Росздрава, Иркутск; Институт эпидемиологии и микробиологии НЦ ПЗСРЧ СО РАМН, Иркутск; НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского МЗСР, Москва;
ГОУ ВПО Челябинская государственная медицинская академия Росздрава, Челябинск
В результате открытия в 1937 г. отечественными учеными клещевого энцефалита (КЭ) был не только установлен этиологический агент - вирус КЭ, но и переносчик - таежный клещ. Это позволило уже на ранних этапах изучения проблемы определить основные меры профилактики заболевания, которые были направлены на пресечение контактов людей с клещами, а также проведение вакцинации (первая вакцина против КЭ была получена в 1939 г. под руководством Смородин-цева А.А. и Левкович Е.Н.). В дальнейшем усилиями многих специалистов был разработан комплекс мероприятий специфической и неспецифической профилактики. Специфическая профилактика включала в себя активную иммунизацию, прежде всего, групп высокого риска с помощью вакцин, которые постоянно усовершенствовались, а также пассивной иммунизации - введения специфического иммуноглобулина лицам, пострадавшим от укусов клещей. К мероприятиям неспецифической профилактики относились акарицидные обработки, проводимые в больших масштабах, создание «культурных» ландшафтов, санитарное просвещение, а также меры личной защиты от нападений клещей - использование специальной
одежды, репеллентов и акарицидов, соблюдение определенных правил поведения на территориях природных и антропургических очагов.
Резкий подъем заболеваемости КЭ в России в конце ХХ в., а также регистрация других «клещевых» инфекций, включая микст-инфекции, вызвали к жизни вопрос о необходимости внесения дополнений в существующую систему профилактики. Новые Санитарные правила по профилактике КЭ (2008 г.) предусматривают проведение вакцинации населения эндемичных районов с охватом 95% населения. Данный тезис, очевидно, нуждается в детализации и, в частности, он должен быть реализован на территориях с высоким риском заражения людей. Задачей ближайшего будущего является определение уровня высокого риска заражения и тех конкретных районов, где будет целесообразно осуществлять широкомасштабную вакцинацию. Экстренная профилактика должна учитывать вероятность инфицирования человека при укусе клеща другими патогенами и развития микст-инфекции. В условиях сочетанных очагов «клещевых» инфекций возрастает роль неспецифической профилактики.
€
