CC BY
26
МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
Иммуннохемилюминесценция в диагностике эхинококкоза Касыев Н. Б.1, Айтназаров М. С.2, Нурбекова А. Н.3
'Касыев Нурбек Бекташович /Kasyev Nurbek Bektashovich — кандидат медицинских наук, доцент;
2Айтназаров Мыктыбек Сатылбалдиевич /AjtnazarovMyktybek Satylbaldievich - кандидат медицинских наук,
ассистент,
кафедра хирургии общей практики с курсом комбустиологии, Кыргызская государственная медицинская академия им. И. К. Ахунбаева;
3Нурбекова Анара Нурбековна /Nurbekova Anara Nurbekovna - студент, медицинский факультет,
Киргизско-российский славянский университет им. Бориса Ельцина, г. Бишкек, Кыргызская Республика
Аннотация: в данной статье приводятся результаты применения ИХЛ (иммунохемилюминесценции) цельной крови в диагностике рецидивного эхинококкоза. Так как раннее выявление рецидива эхинококкоза и эффективное оперативное лечение пробретает первостепенное значение. Целью данной работы является определить дифференциально-диагностическую ценность реакции ИХЛ цельной крови при рецидиве эхинококкозе и остаточных полостях после эхинококэктомии. Под нашим наблюдением находились 136 больных рецидивным эхинококкозом, 109 больных с первичным эхинококкозом, 91 больных с остаточными полостями после эхиноккэктомии различной локализации. В качестве контроля обследовано 186 больных с другими заболеваниями (гепатиты, цирроз печени, опухоли печени и легких, холециститы и др.), имеющими определенное клиническое сходство с эхинококкозом и требующими проведения дифференциальной диагностики, а также 30 человек доноров. Помимо этого были обследованы 111 человек в сроки от 6 месяцев до 10 лет, которые ранее были оперированы по поводу эхинококкоза. При сопоставлении ИХЛ с известной серологической реакцией установлены преимущества ИХЛ- это быстрота получения результата, малое количество применяемой жидкости (крови - 0,02 мл.), объективность оценки и специфичность реакции равнялась 97 %, а чувствительность - 98-99 %. По мере увеличения срока после радикальной операции идет постепенное снижение интенсивности ИХЛ при отсутствии рецидива и нарастание степени интенсивности ИХЛ, либо остается на прежнем уровне - при рецидиве. Таким образом, полученные нами данные показывают, что ИХЛ цельной крови является ценным диагностическим тестом и этот метод должен быть в комплексе обследования лиц, подозрительных на эхинококкоз. Если УЗИ, КТ, позволяет нам выявить объемное образование печени и других органов брюшной полости, а рентгенологическое исследование - в легких, ИХЛ дает возможность уточнить характер патологии и выполнить радикальность выполненной операции, выявить рецидив болезни.
Ключевые слова: рецидивный эхинококкоз, серологическая диагностика, иммунохемилюминецсенция.
Введение
В настоящее время с ростом первичного эхинококкоза, также увеличивается количество больных с рецидивным и резидуальным эхинококкозом.
Диагностика и лечение этих форм эхинококкоза представляет значительные трудности по сравнению с первичным эхинококкозом в связи с длительным существованием паразита и ослаблением защитных сил организма. Иммунологические методы диагностики РЛА, РНГА мало пригодны при рецидивном и резидуальном эхинококкозе из-за длительного сохранения следовой реакции в послеоперационном периоде [4, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 14].
С целью улучшения иммунологической диагностики рецидивного и резидуального эхинококкоза нами апробирован новый хемилюминесцентный метод, в основе которого лежит регистрация изменений излучений биологических жидкостей в норме и патологии [1, 2, 3, 8, 12, 13].
Материал и методы исследования
Под нашим наблюдением находились 136 больных рецидивным эхинококкозом, 109 больных с первичным эхинококкозом, 91 больных с остаточными полостями после эхиноккэктомии различной локализации. В качестве контроля обследовано 186 больных с другими заболеваниями (гепатиты, цирроз печени, опухоли печени и легких, холециститы и др.), имеющими определенное клиническое сходство с эхинококкозом и требующими проведения дифференциальной диагностики, а также 30 человек доноров. Помимо этого были обследованы 111 человек в сроки от 6 месяцев до 10 лет, которые ранее были оперированы по поводу эхинококкоза.
Хемилюминесцентные исследование осуществлялось на специальном аппарате - хемилюминометре КШДА - 1, в диапазоне длины волн от 300-600 нм, работа которого основана на регистрации возникшей вспышки хемилюминесценции, расположенном на невидимом спектре излучений.
С целью сравнения и определения чувствительности хемилюминесценции проводили серологические тесты: реакция латекс-агглютинации (РЛА) у 128 больных с рецидивным эхинококкозом различной локализации, подтвержденным на операции.
Методика основана на изучении интенсивности излучения иммунохемилюминесценции (ИХЛ) активированной люминолом. Преимущество данного метода заключается в том, что благодаря использованию цельной крови, как внутри, так и во вне клетки происходят сложные иммунохимические реакции с антигеном эхинококковой жидкости и антителом цельной крови, тем самым усиливает свечение, повышая информативность и специфичность метода.
Результаты и их обсуждение
Анализ результатов исследования показал, что при оценке показателей иммунохемилюминесценции цельной крови имеет значение два показателя: интенсивность хемилюминесценции и время достижения максимального показателя свечении.
Реакция ИХЛ цельной крови была применена у 109 больных с первичным эхинококкозом. При анализе данных установлено, что у больных эхинококкозом интенсивность показателя ИХЛ составила 73,9+ 1,8 квант/с*4п.
Контрольную группу составили больные с заболеваниями печени и желчевыводящих путей, больные с опухолями печени и легких, которые имели сходную клиническую картину с эхинококкозом. У больных с другими заболеваниями печени и легких интенсивность свечения составила 37,1+0,9 x 105 квант/с х 4п, а время- 16,7+1,7 мин. У доноров показатели были соответственно 2 0 , 1 + 1,8 х 1 0 5 кв/с х 4п .
Из 136 больных с рецидивным эхинококкозом у 94 был неосложненный, у 42 человек -осложненный эхинококкоз. Сроки, прошедшие после операции, были от 1 года до 10 лет и больше. У лиц с неосложненным эхинококкозом показатели хемилюминесценции составили: 8 3,5 + 1,4x 105 квант/с х 4п, а при осложненном эхинококкозе- 63,4+ 1,5 x 105 квант/с х 4п, а время достижения - минут.
Исследуя в динамике послеоперационный период установлено, что при радикально выполненной операции интенсивность ИХЛ постепенно снижалась, а через 3 - 5 лет после операции показатели ее не отличались от данных полученных у больных с различными заболеваниями печени и легких и доноров. В случаях нерадикальности операции и оставлении резидуальных кист интенсивность ИХЛ оставалась на прежнем уровне или незначительно снижалась.
Довольно часто трудно отдифференцировать в послеоперационном периоде остаточную полость после эхинококкэктомии от резидуального эхинококкоза. Известные нами иммунологические тесты часто дают ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Показатель интенсивности ИХЛ у больных с остаточными полостями составил 3 1 , 2 + 6х1 0 5 квант/с х 4п, время — 14, 3 + 1 , 9 минут, что в 2,0 раза меньше по сравнению с рецидивным эхинококкозом. Эту методику ИХЛ цельной крови мы ставили при поступлении, при выписки и в отдаленные сроки после операции.
Реакция латекс - агглютинации в диагностике первичного эхинококкоза оказалась высоко информативной - до 95-96 %, но в диагностике рецидива и, особенно, в дифференциальной диагностике остаточных полостей после эхинококкэктомии ценность этой реакции снижается, так как положительная реакция сохраняется длительное время и после удаления всех кист. Мы исследовали РЛА у 67 больных. Из 41 больных с рецидивным эхинококкозом, который в последствии был подтвержден на операции, у двух реакция была отрицательной и еще у двух сомнительной. Чувствительность составила менее 94 %. У остальных больных реакция была положительной.
У 23 больных с наличием остаточной полости также исследована РЛА. Срок прошедший после операции был от одного года до 6 лет. Из 23 пациентов у одного реакция была отрицательной, у второго - сомнительной, у остальных - положительная, в более низком титре. Следовательно, реакция латекс - агглютинации не может быть использована с целью дифференциальной диагностики рецидива эхинококкоза от остаточной полости после эхинококкэктомии. Кроме того нужно отметить, что в связи с разрывом связи с бывшими республиками СНГ, возникли трудности в приобретении реактивов и диагностикума. В постановки реакции имеются элементы субъективизма, результаты получаем не ранее суток.
Таким образом разработанная нами реакция иммунохемилюминесценции цельной крови активированной люминалом, является простой в выполнении, дает возможность в короткое время и с меньшими затратами диагностировать рецидивный эхинококкоз. Чувствительность методики доходит до 97-98 %.
Применение этой реакции совместно с инструментальными методами диагностики способствует раннему выявлению рецидива эхинококкоза и своевременному лечению с целью снижения осложнений и летальности.
Оперативное лечение рецидива эхинококкоза представляет собой трудности в техническом плане и в связи с тем, что у большинства больных имеют место осложненные формы эхинококкоза, наличие спаечного процесса и выраженной интоксикацией. Здесь необходимо избрать наиболее рациональный доступ, который бы позволял провести тщательное обеззараживание содержимого кисты и надежно ликвидировать полость фиброзной капсулы.
При рецидивном эхинококкозе легкого проводилась боковая торакотомия в 6-м межреберье, при поражении правого легкого и печени лишь в одном случае применен торакоабдоминальный доступ, а в остальных случаях торакотомия, удаляли кисты легкого, а затем доступ Федорова-лапаротомия и осуществлялось эхинококкэктомия печени. При локализации кист в правой доли печени применялся в основном доступ по Федорову и лишь при диафрагмальной локализации - внеплеврально-внебрюшинный доступ по Мельникову, а при локализации кист в левой доли печени и брюшной полости - срединный доступ.
Обеззараживание содержимого кист осуществлялось термическим способом, и только при легочной локализации полость фиброзной капсулы обрабатывалась спиртом и йодонатом.
Наибольшие трудности представляла ликвидация фиброзной капсулы. При легочной локализации у 15 больных применена методика Вишневского А. А., а у остальных использован капитонаж с использованием нерассасывающего материала, либо инвагинации, но с обязательным ушиванием бронхиального свища.
При локализации кист в печени и других органов брюшной полости метод ликвидации полости фиброзной капсулы зависел от локализации, размера и состояния кист, а также возраста и общего состояние больного. В основном использован закрытый метод, разработанный в клинике. К радикальным операциям при гидатидозном эхинококкозе печени относили выполнение идеальной эхинококкэктомии без вскрытие хитиновой оболочки. После идеальной эхинококкэктомии фиброзную капсулы полностью или субтотально иссекали, а раневую поверхность печени закрывали путем гепатизации или оментогепатопексии.
Наиболее радикальным методом хирургического лечения при эхинококкозе является резекция печени, сущность которой заключалась в полном удалении паразитарной кисты с перикистозными тканями и тем самым предотвращались рецидивы заболевания и развитие послеоперационных осложнений - нагноение остаточной полости, формирование наружного желчного свища, абсцессов.
При больших кистах, либо при нагноении применен полузакрытый метод: после обеззараживания содержимого кист положен органосохраняющий принцип эхинококкэктомия с последующей надежной ликвидацией или рациональным дренированием остаточной полости, предупреждающей развитие осложнений и рецидивов.
Таким образом, наши исследования показали, что рецидив эхинококкоза довольно часто встречается и в наше время, диагностика его должна включать комплекс исследований: УЗИ, КТ, ИХЛ цельной крови с эхинококковым антигеном.
Выбора метода операции должен исходить из локализации кисты, ее размеров и количества, а также характер осложнений. Применение ИХЛ цельной крови позволяет провести дифференциальную диагностику между рецидивом заболевания и остаточной полости после эхинококкэктомии, а следовательно, и избирать наиболее рациональный метод лечения.
Вывод
1. ИХЛ цельной крови является высокочувствительным (98 %) методом диагностики рецидивного, резидуального эхинококкоза.
2. Использование этой методики в динамике позволяет отдифференцировать рецидивный, резидуальный эхинококкоза от остаточных полостей послеэхинококкэктомии, что имеет значение в выборе тактики метода оперативного лечения.
Литература
1. Асанов М. А., Акматов Б. А., Чртбаев К. Ч. Биохемилюминесценция в сельском хозяйстве. Тр.
Моск. Вет. Академ. Имени К. И. Скрябина, М, 1986, с. 65-67.
2. Батуков И. В., Скачек А. Е. Всес. Школа биотермо- хемилюминесценции. Суздаль, 1990. С. 77-78.
3. ВладимировЮ. А., ШерстневМ. П. Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. М: ВИНИТИ, 1989. Т.
24. с. 176-179.
4. Гилевич М. Ю., Гилевич Ю. С. и др. Хирургия, 1990. № 12. с. 64-69.
5. Кешишьян А. Ш., АлексанянЮ. Т. Мат. 19 всес. науч. конф. Чимкент, 1989. С. 72-79.
6. Курбонов К. М., Давлатов Д. Е. и др. Диагностика и тактика хирургического лечения рецидивного эхинококкоза печени // Здравоохранение Таджикстана, 2014. № 2 (321). С. 36-43.
7. Милонов О. Б., Осмонов А. О. Рецидивный, резидуальный эхинококкоз органов брюшной полости. Хирургия, 1985. № 1. с. 37-40.
8. Моцартов В. Д., Мамилев В. К. Хемилюминесценция в диагностике заболеваний брюшной полости, Биохемилюминесценция в сельском хозяйстве. Тр. Моск. Вет. Акад. им. К. И. Скрябина, М, 1986. с. 62.
9. Петровский Б. В., Милонов О. Б., Дееничин П. Г. В кн: Хирургия эхинококкоза. М, 1985.
10. Рустамов И. Р., Одилея А. Х. Хирургическое лечение рецидивного эхинококкоза печени и легких. Клин. Хирургия, 1985. № 10. С. 56-57.
11. Помелов B. C., Каримов Ш. И., Нишанов Х. Т. Осложнения после эхинококкэктомии печени и возможности их профилактики // Хирургия, 1992. № 1. С. 83-88.
12. Фриго Н. В., Манукьян Т. Е. и др. Диагностика ранних форм сифилиса методом иммунохемилюминесценции // Вестник дерматологии и венерологии, 2013 № 6, С. 66-72.
13. Ds Sole P., Zippa S. and Zittaru G. P. Chemiluminescense of phagocylyc cell. «Akta med. Rom», 1984. № 22. p. 178-195.
14. Morel Ph., Robert I., Rohner A. et al. Surgical treatment of hydatid disease of the liver: A surgery of 89 patients // Surgery, 1988. V. I 04. № 5. P. 852-862.
