CC BY
53
Иммунно-гормональные изменения
при активизации воспроизводительной функции
у молочных коров пептидными биокорректорами
С.А. Чуев, аспирант, Н.В. Безбородов, д.б.н, профессор АНО ВПО Белгородский УКЭП
Обменные процессы представляют собой основные функции в организме, с которыми связаны все остальные его изменения. При промышленном
содержании животных различного рода негативные факторы часто способствуют возникновению нарушений обменных процессов, которые приводят к потере воспроизводительной функции, продуктивных показателей и рентабельности молочного скотоводства. В настоящее время при интенсивных
технологиях содержания маточного поголовья с целью получения высоких показателей необходимо проводить весь комплекс стимулирующих обменные процессы мероприятий, направленных на активизацию продуктивных показателей, защитных сил организма и его воспроизводительной способности в различные периоды репродуктивного цикла [1—3].
Целью исследований было изучение физиолого-биохимических изменений в тканях и определение эффективности восстановления воспроизводительной функции у коров при стимуляции обменных процессов комплексными пептидными биокорректорами гамавитом и гипофизином Ла Вейкс.
Материалы и методы исследований. Исследования по определению эффективности действия и биохимических изменений в тканях молочных коров после применения пептидных биокорректоров были проведены в ЗАО «Племзавод «Разуменский» Белгородской области на голштино-фризских коровах в зимне-стойловый период. Среднегодовой удой по стаду коров составил 5900 кг молока. Формирование опытных групп коров проводили на клинически здоровых животных после родов. В группы-аналоги коров подбирали по породной принадлежности, возрасту, продуктивности и физиологическому состоянию.
Гамавит — комплексный физиологически сбалансированный водный раствор, содержащий плаценту денатурированную эмульгированную, нуклеонат натрия, набор аминокислот, витаминов, солей.
Гипофизин Ла Вейкс содержит карбетоцин (1-дезамино-1-монокарбо-2-(0-метил)-тирозин— окситоцин) в количестве 0,07 мг в качестве синтетического действующего начала, действие которого аналогично окситоцину, но более продолжительно и разносторонне.
Морфобиохимические исследования крови проводили по общепринятым методикам [4]. Определяли в динамике содержание эстрадиола, прогестерона, кортизола, а также лизоцимную (ЛАСК), бактерицидную активности сыворотки крови (БАСК) и фагоцитарную активность ней-трофилов (ФАНК).
Для проведения исследований по определению биохимических изменений в крови животных после применения пептидных биокорректоров было подобрано пять групп коров сразу после отёла по 25 гол. в каждой (рис.).
Животным I гр. внутримышечно вводили биокорректор гамавит в дозе 10 мл/гол/сут однократно начиная со вторых суток после родов в сочетании с пептидным синтетическим препаратом гипофизи-ном внутримышечно в дозе 5,0 мл/гол однократно.
Гамавит и гипофизин в аналогичных дозах вводили коровам II гр. с 21-х сут., III гр. — на 45-е сут., IV гр. — на 60-е сут. после родов.
Животные V гр. (контрольной) были интакт-ными.
У пяти коров в каждой группе для проведения морфобиохимических исследований брали кровь из яремной вены. Для определения гормонов кровь брали три раза, а для определения остальных биохимических показателей — четыре: первый раз — до начала введения препаратов; второй, третий и четвёртый разы — согласно схеме исследований в течение периода исследования (90 сут. после родов — сервис-период).
Количественное определение гормонов эстра-диола-17 в, прогестерона, кортизола в сыворотке крови коров проводили при помощи методики твердофазного иммуноферментного анализа [5, 6].
Лизоцимную активность сыворотки крови определяли модифицированным фотоэлектроко-лориметрическим методом (УНИИЭВ, Украина, 1979) с применением суточной культуры Micrococcus lysodeikticus, содержащей 500 млн микробных тел в 1 мл раствора. Бактерицидную активность сыворотки крови также определяли фотонефеломе-трическим методом с использованием суточной культуры E. Coli, содержащей 2 млрд микробных тел в 1 мл раствора. Фагоцитарную активность нейтрофилов сыворотки крови определяли при помощи методики, основанной на учёте числа бактерий (стафилококки), захваченных нейтрофи-лами в процессе их совместного инкубирования в термостате [7].
Эффективность стимуляции воспроизводительной функции у коров всех групп (n=25) определяли по показателям оплодотворяемости, индекса осеменения, количества полноценных половых циклов, наличия заболеваний репродуктивных органов. Полученный цифровой материал обрабатывали статистически с использованием ПК и пакета прикладных программ Microsoft office excel. Разницу считали достоверной при: * — Р<0,05; ** — Р<0,01; *** — Р< 0,001 по сравнению с предыдущим значением показателя внутри каждой из групп животных.
Результаты исследований. Проведённые исследования сыворотки крови коров показали (табл. 1), что содержание гормона эстрадиола-17 имело тенденцию неодинакового изменения в течение изучаемого сервис-периода (90 сут.). Было установлено, что у коров II гр., где гамавит и гипофизин применяли на 21-е сут. после родов, количество эстрадиола в периферической крови повысилось к 45-м сут. в 2,5 раза (до 67,01+10,9 пг/мл, Р<0,05) и оставалось практически на этом уровне до 60-х сут. после родов. Тенденция повышения эстрадиола (в 1,9 раза) была отмечена и у животных I гр. Затем к 60-м сут. уровень гормона снизился у них до первоначального значения.
Содержание эстрадиола в сыворотке крови коров III — V& после применения препаратов имело тенденцию к снижению к 90-м сут. соответственно на 35,0; 50,2 и 37,0%.
Уровень прогестерона имел одинаковый характер изменений, который характеризовался
I группа
роды 0 2 II группа
L
роды 0
кровь
10 21
45
60
кровь
гамавит + гипофизин
кровь А
кровь А
10
21
45
60
кровь
90 сут
кровь А
90 сут
III группа
кровь А
кровь А
гамавит + гипофизин
кровь А
кровь А
роды 0
10
21
45
60
90 сут
IV группа
гамавит + гипофизин
кровь А
L
кровь А
кровь кровь А А
роды 0
10
21
45
60
80 90 сут.
Vk. группа
кровь А
роды 0 2 Рис. - Схема исследований
кровь А
10
21
45
кровь А
60
кровь
А
90 сут. '
тенденцией к повышению его концентрации в крови животных каждой группы, независимо от того, в какое время после родов были применены биокорректоры: у коров I гр. — 8,6; II гр. — 14,7; III гр. — 11,4; IV гр. — 7,2. У животных гр. повышение составило 4,9 раза. Таким образом, наибольшее повышение концентрации прогестерона отмечено в сыворотке крови коров II гр., где биокорректоры вводили на 21-е сут. после родов. Концентрация кортизола в крови коров в основном имела тенденцию повышения к концу сервис-периода, за исключением животных II гр., где это повышение содержания кортизола составило 20,0% (до 0,24+0,01 нмоль/л, Р<0,05) и не менялось до конца исследований.
Исследования показателей естественной резистентности в крови коров показали, что после применения биокорректоров гамавита и гипофизина
её факторы активизируются в исследуемых группах неоднозначно (табл. 2). Изначально у коров всех групп до применения препаратов уровень бактерицидной активности находился в пределах нижних физиологически нормальных значений и к 60-90-м сут. исследований повышался неравномерно по отношению к первоначальному уровню. Превышение к 90-м сут. исследований составило у животных I гр. 1,8; II - 2,1; III - 2,6; IV - 1,7 и Ук. - 1,7 раза. Уровень лизоцимной активности также повышался к 90-м суткам в сыворотке крови коров всех групп: I - в 1,9; II - 2,1; III - 2,0; IV - 1,6 и Ук. - 1,5 раза. Фагоцитарная активность нейтрофилов крови животных к 90-м суткам повышалась следующим образом: I - на 17,2; II- 5,9; III - 16,0; IV - 10,3 и Ук. - 8,6%. Суммарное превышение активности изучаемых факторов естественной резистентности в крови коров к 90-м сут. исследований по сравнению
2. Показатели естественной резистентности, % (n=5; X±Sx)
1. Содержание гормонов в сыворотке крови (n=5; X±Sx)
Забор крови (в течение сервис-периода - 90 сут.)
Показатель Группа 1-й (до введения препаратов) 2-й (после введения): I гр. - на 21-е сут.; II и V - на 45-е сут.; III и IV - на 60-е сут. 3-й (после введения): I гр. - на 45-е сут.; II - на 60-е сут.; III, IV, V - на 90-е сут.
Эстрадиол-17р, пг/мл I II III IV Vk. 63,04±31,9 26,88±3,9 68,67±14,6 77,30±16,0 79,98±18,3 123,53±23,3 67,01±10,9* 54,60±11,0 51,86±10.7 54,59±10,50 68,44±10,8 82,76±20,8 45,1±10,1 38,56±11.4 50,37±13,91
Прогестерон, нмоль/л I II III IV Vk. 1,27±0,27 0,78±0,10 1,18±0,38 1,29±0,28 1,28±0,20 4,74±2,08 1,07±0,30 5,95±4,52 1,75±0,76 7,10±4,57 10,98±4,77 11,53±4,66 13,51±4,62 9,38±6,22 6,39±2,11
Кортизол, нмоль/л I II III IV Vk. 0,25±0,03 0,20±0,01 0,27±0,07 0,20±0,02 0,23±0,02 0,25±0,03 0,24±0,01* 0,27±0,04 0,39±0,17 0,27±0,03 0,29±0,03 0,24±0,01 0,24±0,01 1,63±1,37 0,50±0,20
Показатель Группа Забор крови
1-й 2-й 3-й 4-й
I 13,6±0,3 13,5±0,2 21,3±0,5* 24,5±0,7
Бактерицидная II 13,1±0,4 13,2±0,4 23,3±0,7 28,1±0,6
активность III 12,9±0,6 13,1±0,5 29,1±0,4** 34,4±0,6*
сыворотки крови IV 14,1±0,4 14,2±0,5 22,5±0,4 24,9±0,3*
Vk 12,6±0,3 13,1±0,6 20,7±0,6 21,7±0,3
I 41,2±0,6 40,5±0,6 73,6±0,9 80,0±0,6
Лизоцимная II 41,5±0,4 41,3±0,5 80,1±0,6* 90,4±1,2
активность III 39,1±0,7 39,1±0,5 65,6±0,7* 81,3±1,7
сыворотки крови IV 42,3±0,5 41,6±0,7 60,3±0.3 71,3±1,3
Vk 41,6±0,3 41,0±0,4 48,2±0,5 62,6±1,9
I 77,1±0,5 76,3±0,7 80,1±1,4* 90,3±0,4
Фагоцитарная II 78,8±0,6 78,4±0,5 80,1±0,6 83,5±0,5*
активность III 75,3±0,5 77,2±0,7 81,9±1,4** 87,1±1,4
нейтрофилов в крови IV 77,1±0,6 77,9±0,4 80,3±0,7* 85,1±1,6
Vk 76,6±0,6 78,1±0,4 80,2±0,5 83,2±0,8
с первоначальным уровнем по группам составило:
I - на 47,6; II - 47,2; III - 64,1; IV - 35,8 и - на 28,0%. Отмеченные изменения показателей естественной резистентности в крови свидетельствуют о наиболее выраженных изменениях у животных
II гр., где превышение к концу исследований было наибольшим (67,3%). Наименьший уровень активности факторов естественной резистентности отмечен в крови коров V контрольной гр. (28,0%). Таким образом, стимулирующий характер действия биокорректоров был наиболее эффективным после их применения на 21-е сут. после родов (II гр.).
В I гр. после однократного применения препаратов на 2-е сут. после родов по одному разу осеменили 15 (60,0%) гол., по два раза - 5 (20,0%), по три раза - 3 (12,0%) гол. Всего на группу было затрачено 34 осеменения. Индекс осеменения в группе составил 2,8. Оплодотворилось 12 (48,0%) коров.
Во II гр. после применения гамавита и гипо-физина на 21-е сут. после родов по одному разу
осеменили 13 (52,0%) гол., по два раза — 5 (20,0%), по три раза — 2 (8,0%) гол. Всего на группу было затрачено 29 осеменений. Индекс осеменения в группе составил 1,4. Оплодотворилось 21 (84,0%) гол.
В III гр., где биокорректоры применяли на 45-е сут. после родов, по одному разу осеменили 13 (52,0%) коров, по два раза — 8 (32,0%), по три раза — 3 (12,0%) коровы. Всего на группу затратили 38 осеменений. Индекс осеменения составил 2,5. Оплодотворилось 15 (60,0%) гол.
В IV гр., где препараты применяли на 60-е сут. после родов, по одному разу осеменили 10 (40,0%), по два раза — 2 (8,0%), по три раза — 1 (4,0%) корову. Всего на группу коров затратили 17 осеменений. Индекс осеменения составил 1,2. Оплодотворилось 14 (56,0%) животных.
В V (контрольной) гр., где препараты не применяли, на протяжении всего периода исследований (90 сут.) по одному разу осеменили 10 (40,0%) коров, по два раза — 5 (20,0%), по три раза — 5
(20,0%) животных. Всего на группу затрачено 35 осеменений. Индекс осеменения в группе составил 2,9. Оплодотворилось 12 (48,0%) коров.
Полученные результаты эффективности стимуляции воспроизводительной функции у коров в послеродовом периоде биокорректорами гамавит и гипофизин Ла Вейкс показали, что наилучшим вариантом будет их совместное применение на 21-е сут. послеродового периода (II гр.).
Выводы. Регуляция биохимических процессов различными биокорректорами представляет собой одно из актуальных направлений теоретической и практической биохимии и физиологии. Рассматриваемые биокорректоры гамавит и гипофизин Ла Вейкс имеют различные механизмы действия на организм коров. Полученные данные исследований гормональных изменений при различных вариантах стимуляции гамавитом и гипофизином воспроизводительной функции у коров в послеродовом периоде показали наличие наиболее значимых изменений в динамике гормонов эстрадиола -17в и кортизола в сыворотке крови животных II гр. Эти изменения отмечены через 15 сут. после введения препаратов (2-е взятие крови — 45-е сут. после родов). При повышенном содержании эстрадиола и большем числе межгормональных достоверных корреляций (эстрадиола, прогестерона) сервис-период короче [8]. Отмеченные изменения в динамике эстрогенов характерны для процессов становления половой цикличности, когда инициация полового цикла стимулируется повышением эстрогенов с одновременным снижением прогестерона. Изменения в содержании остальных гормонов у коров из других групп были недостоверными и малозначимыми в силу того, что инициация половой цикличности при различных схемах применения биокорректоров происходила в разные сроки, что отражалось на динамике гормональных изменений.
Проведённые исследования по изучению механизмов влияния пептидных биокорректоров гама-вита и гипофизина на метаболические процессы в организме коров при активизации воспроизводительной функции показали наличие выражен-
ного стимулирующего физиолого-биохимические процессы их действия. Полученные данные применения препаратов свидетельствуют о том, что в течение максимально возможного сервис-периода для молочных коров, который составляет 90 сут., совместное применение гамавита и гипофизина на 21-е сут. (II гр.) способствовало оплодотворяемости 84,0% животных при минимальном индексе осеменения (1,4) и количестве послеродовых заболеваний (16,0%). Эффективность профилактики скрытого мастита составила 60,0 против 36,0% в контроле.
Изменения обменных процессов, связанные с индукцией применяемыми биокорректорами процессов активизации иммунно-эндокринного обеспечения функциональных взаимосвязей между органами и системами, а также отмеченная эффективность стимуляции репродуктивной функции коров в послеродовом периоде служат основанием для их совместного применения в практике молочного скотоводства.
Таким образом, для стимуляции воспроизводительной функции и профилактики послеродовых заболеваний коров рекомендуется применение внутримышечно пептидных препаратов гамавита в дозе 10 мл/гол/сут в сочетании с гипофизином Ла Вейкс в дозе 5,0 мл/гол, однократно на 21-е сут. после родов.
Литература
1. Прытков Ю.А. Влияние тканевого препарата на воспроизводительную функцию высокопродуктивных молочных коров: автореф. дисс. ... канд. биол. наук. Дубровицы, 2009. 18 с.
2. Постовой С.Г. Влияние препаратов простагландина F-26 на сократительную функцию матки и эффективность их применения для профилактики послеродовых заболеваний у коров: автореф. ... дисс. канд. вет. наук. Краснодар, 2010. 22 с.
3. Племяшов К.В. Воспроизводительная функция у высокопродуктивных коров при нарушении обмена веществ и её коррекция: автореф. дисс. докт. вет. наук. СПб., 2010. 30 с.
4. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики. М.: КолосС, 2004. 520 с.
5. Pasqualini J.R., Kind F.A. Hormones and the Fetus, v. 1-2, N. Y, 1986-1988.
6. Zeelen F.I. Medicinal chemistry of steroids, Elsevier, 1990. 403 p.
7. Воронин Е.С. Иммунология / под ред. Е.С. Воронина. М.: Колос-Пресс, 2002. 408 с.
8. Sakaguchi M., Sasamoto Y., Suzuki T. et al. Postpartum ovarian follicular dynamics and estrous activity in lactating dairy cows // J. Dairy Sci. 2004. V. 87. P. 2114-2121.
