CC BY
34
УДК 616.216.1-097
ИММУННЫЕ И ОКСИДАНТНЫЕ НАРУШЕНИЯ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ И ОБОСТРЕНИЕМ ХРОНИЧЕСКИХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ВЕРХНЕЧЕЛЮСТНЫХ ПАЗУХ
© Конопля А.И., Будяков С.В., Конопля Н.А.
Кафедра биологической химии, кафедра оториноларингологии Курского государственного медицинского университета, Курск;
Н:
МУЗ "Городская больница № 2”, Белгород
E-mail: [email protected]
На базе МУЗ "Городская больница № 2" г. Белгорода у больных гнойным острым и обострением хронического верхнечелюстного синусита установлены нарушения Т- и В-клеточного звена иммунитета, цито-кинового статуса, системы комплемента, функционально-метаболической активности нейтрофилов и пере-кисного окисления липидов. Выявлено, что у больных хроническим гнойным верхнечелюстным синуситом по сравнению с пациентами с первично острым процессом более выражены нарушения клеточного звена иммунитета и проявления "оксидантного стресса" и в меньшей степени изменены показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов, цитокинового звена и системы комплемента. Обоснована необходимость поиска и апробирования в клинических исследованиях способов и средств коррекции нарушений иммунного статуса, перекисного окисления липидов у больных воспалительными заболеваниями верхнечелюстных пазух, что позволит улучшить результаты лечения данной категории больных и снизить процент осложнений.
Ключевые слова: гнойный верхнечелюстной синусит, иммунный статус, перекисное окисление липидов.
IMMUNE AND LIPID PEROXIDATION DISTURBANCES IN PATIENTS WITH ACUTE AND THE EXACERBATION OF CHRONIC INFLAMMATORY DISEASES OF GENYANTRUM Konoplya A.I., Budyakov S.V., Konoplya N.A.
Biochemistry Department, Otorhinolaryngology Department of the Kursk State Medical University, Kursk;
Belgorod City Hospital N 2, Belgorod The disturbances of T- and the B-cellular response of immunity, citokyne status, and system of the complement, neutrophil activity and lipid peroxidation were revealed in patients with purulent acute genyantrum and the exacerbation of chronic genyantrum on the basis of Belgorod City Hospital N 2. It was established, that the response of immunity and lipid peroxidation are more expressed in patients with chronic purulent genyantrum compared to the patients with the acute sinusitis. The necessity of the search for the ways of correcting the disturbances of the immune status, lipid peroxidation in antronasal inflammatory diseases and their testing in clinical investigations was proved. It will allow improving the results of management of the patients given and lowering the percentage of complications.
Key words: purulent genyantrum, immune status, lipid peroxidation.
Воспалительная патология околоносовых пазух имеет устойчивую тенденцию роста, происходит увеличение рецидивирующих и хронических форм заболевания, несмотря на совершенствование способов диагностики и лечения [7]. Неэффективность традиционного лечения гнойных синуситов, сопутствующая применению антибиотиков, в большой степени связана с развитием антибиотикорези-стентности патогенной флоры и иммуносу-прессивным действием антибиотиков на местном и системном уровнях [13].
На современном этапе развития оториноларингологии существенная роль в патогенезе гнойных синуситов отводится дефектам иммунной защиты слизистой оболочки и развитию "окислительного стресса", что диктует необходимость применения в методах их лечения современных иммуномодулирующих и антиоксидантных препаратов. Имеются единичные работы, посвященные избирательному изучению нарушений иммунного статуса и процессов перекисного окисления липидов у больных воспалительными заболеваниями
верхнечелюстных пазух в зависимости от формы заболевания: обострение хронического или же первично острый процесс [7, 13]. Тогда как в ряде работ, посвященных проблеме изучения иммунного гомеостаза в условиях первично острого воспалительного процесса и обострения хронического, например, при сальпингоофорите, панкреатите и других нозологиях, установлены существенные различия в характере и степени выраженности нарушений иммунного и оксидант-ного статусов, что напрямую влияет на патогенез заболевания, развитие осложнений и "отвечаемость" на проводимую фармакотерапию [14].
Таким образом, продолжает оставаться актуальным вопрос о характере и степени выраженности иммунных и оксидатных расстройств на местном и на системном уровне у больных как с острым верхнечелюстным синуситом (ОВС), так и с обострением хронического (ОХВС).
Исходя из этого, целью исследования стало изучение характера нарушений иммунного статуса и состояния перекисного окисления липидов у больных с воспалительными заболеваниями верхнечелюстных пазух (ВЗВП): острого верхнечелюстного гнойного синусита и обострения хронического.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Под постоянным наблюдением находились 23 больных с веривицированным диагнозом острый гнойный верхнечелюстной синусит, и 24 больных с обострением хронического верхнечелюстного синусита (средний возраст составил 29,7±3,8 и 30,2±3,3 года, соответственно). Диагноз верхнечелюстного синусита верифицировался на основании характерной клинической картины, лабораторных и рентгенологических данных. Группа контроля состояла из 15 здоровых доноров-добровольцев того же возраста (28,9±3,1 лет).
Лабораторные методы исследования крови проводились по общепринятым методикам при поступлении больных в стационар. При оценке гемограмм за основу брались физиологические нормы, соответствующие между-
народной системе единиц (СИ) в клинических исследованиях [11].
В работе фенотип лимфоцитов определялся методом иммунофлюоресцент-ного анализа с помощью моноклональных антител (ООО "Сорбент", г. Москва) к структурам CD3 (общие Т-лимфоциты), CD4 (Т-хелперы), CD8 (цитотоксические клетки), CD16 (NK-клетки), CD25 (рецептор к ИЛ-2), CD95 (индукторный фактор апоптоза), HLA-DR (поздний маркер активации), CD22 (В-лимфоциты) [9].
Содержание СЗ, СЗа, С4, С5, С5а,
С1 -ингибитора-компонентов комплемента (С1 -инг.), фактора Н иммуноглобулины классов M, G и A определяли в плазме крови методом радиальной иммунодиффузии по Ман-чини, используя диагностический набор ООО НПЦ " Медицинская иммунология"
(г. Москва). Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов в плазме крови определяли спектрофотометрическим методом [18], а общую активность системы комплемента - стандартной методикой [11]. Количественная оценка уровней ФНОа, ИЛ-1а, ИЛ-1ß, ИЛ-6, ИЛ-8, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), ИЛ-4, ИЛ-10, интерферона а и у, рецепторного антагониста ИЛ-1 (РАИЛ) проводилась с помощью тест-систем (ООО "Цитокин", г. Санкт-Петербург) методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови оценивали по фагоцитарному индексу (ФИ) и фагоцитарному числу (ФЧ). Активность кисло-родзависимых систем нейтрофилов оценивали по реакции восстановления нитросинего тетразолия спонтанного (НСТ-сп.) и стимулированного зимозаном (НСТ-ст.) [2, 10, 17].
Выраженность перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по содержанию в крови малонового диальдегида (МДА) и ацилгидроперекисей (АГП) [1, 3]. Кроме этого, определяли активность каталазы [6].
Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя непараметрические методы: критерии Вилкоксона-Манна и Уитни, Крускала-Уоллиса, Фридмана и непараметрический вариант критерия Ньюмена-Кейлса [8].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При изучении представительства имму-нофенотипированных клеток крови на момент поступления у больных ОВС установлено снижение относительного и абсолютного количества Т-клеток, повышение содержания Т-хелперов, КК-клеток и представителей клеток-маркеров ранней активации (табл. 1).
У больных ОХВС по сравнению со здоровыми донорами снижено абсолютное содержание СБЗ-лимфоцитов, Т-хелперов, процентное содержание клеток маркеров ранней и поздней активации (СБ25 и ИЬА-ОК-клетки), но повышено количество цитотокси-ческих и КК-клеток (СБ8 и СБ16-клетки) и клеток индукторов апоптоза (СБ95-лимфоцитов) (табл. 1).
При сравнительном анализе у больных ОВС и у больных ОХВС имеются противоположные изменения в представительности СБ4 и СБ25-лимфоцитов: у больных ОВС количество данных клеток повышено, тогда как у пациентов с ОХВС количество этих клеток достоверно снижается по отношению к норме, это свидетельствует о недостаточно-
сти развития клеточного иммунного ответа у больных ОХВС, так как СБ4-клетки - это Т-хелперы, являющиеся посредником в распознавании антигена эффекторными клетками, а СБ25 - клетки ранней активации или маркер к ИЛ-2, являющийся важным цитоки-ном в инициации клеточного звена иммунного ответа. Кроме этого, у больных с ОХВС выявлено дальнейшее снижение общих Т-лимфоцитов, увеличение клеток поздней активации и лимфоцитов с цитотоксической активностью (СБ8 и СБ16). Обращает на себя внимание и увеличение СБ95-лимфоцитов - инициаторов программы гибели клеток.
У больных ОВС выявлено повышение абсолютного и относительного содержания В-лимфоцитов при повышении в плазме крови концентрации 1§М, 1§0 и ЦИК, тогда как у пациентов с ОХВС наоборот, выявлена супрессия гуморального звена иммунитета, что проявляется снижением содержания В-лимфоцитов, 1§М и ЦИК, при этом концентрация 1§М и б^А остается на контрольных значениях (табл. 1).
Следовательно, у больных ОХВС по сравнению с ОВС установлены более выражен-
Таблица 1
Иммунофенотипированные лимфоциты и показатели гуморального звена иммунитета
у больных ВЗВП (М±т)
Показатели Единицы измерения Здоровые доноры Больные с ОВС Пациенты с ОХВС
1 2 3
СБ3 % 54,3±4,3 46,4±3,8*1 46,9±4,4
109/л 1,14±0,02 1,02±0,02^ 0,92±0,04*1,2
СБ4 % 44,76±3,2 55,6±4,0*1 41,8±3,9*2
109/л 0,94±0,04 1,12±0,02*1 0,82±0,03*1,2
СБ8 % 28,10±2,0 25,0±3,1 36,2±2,8*1,2
109/л 0,59±0,02 0,55±0,02 0,71±0,05*1,2
СБ22 % 12,4±0,8 ^ і 14,5±1,1 1 9,7±0,5*1,2
109/л 0,26±0,02 0,32±0,02*1 0,19±0,02*1,2
СБ16 % 8,5±0,2 9,1±0,21 1 9,9±0,2*1,2
СБ25 % 4,0±0,22 5,3±0,11*1 3,1±0,12*1,2
СБ95 % 14,2±1,9 16,1±2,0 23,1±1,7*1,2
ИЬА-БЯ % 30,2±2,1 32,3±2,0 18,1±1,3*1,2
1§М г/л 1,16±0,08 1,82±0,03*1 0,89±0,05*1,2
1§о г/л 8,7±0,41 9,9±0,3*1 8,8±0,5*2
1§А г/л 1,62±0,05 1,51±0,04 1,53±0,03
ЦИК усл. ед. 80,5±3,9 95,4±4,0*1 71,2±2,1*1,2
Примечание: звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р<0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти различия.
Рис. 1. Концентрация цитокинов и компонентов системы комплемента в плазме крови и ФМА нейтрофилов периферической крови у больных ВЗВП.
Примечание: радиус окружности - показатели у здоровых доноров-добровольцев (1 группа); I I - показатели у больных ОВС до лечения (2 группа); --- - показатели у больных ОХВС до лечения (3 группа);0 - р<0,05
между показателями 2 и 3 группами по отношению к 1 группе;
- р<0,05 между показателями 2 и 3 групп.
ные нарушения гуморального и клеточного звеньев иммунитета, что представляется более выраженным снижением содержания СБЗ, СБ4, СБ22, СБ25-лимфоцитов, концентрации 1^М, ЦИК, повышением количества СБ8 и СБ-25-клеток.
Нейтрофилы - одни из главных клеток врожденного иммунитета, осуществляющих первую линию защиты организма от инфекции, кроме этого, громадная роль фагоцитов в приобретенном иммунитете становится все более очевидной благодаря работам последнего десятилетия [12]. В то же время именно нейтрофилы, обладая высоким провоспали-тельным потенциалом, способны провоцировать развитие системного воспалительного ответа при иммунном воспалении, имеющем место и при ВЗВП [5]. Все это определяет
важность изучения состояния функционально-метаболической активности нейтрофилов при данной патологии.
Выявлено, что у больных ОВС при поступлении в стационар повышен ФИ и показатели НСТ-теста, как спонтанного, так и стимулированного, что приводит к повышению функционального резерва нейтрофилов (рис. 1).
У пациентов с ОХВС активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови остается на уровне нормы, тогда как повышено значение НСТ-теста спонтанного, но не выше значений у больных ОВС (рис. 1).
Таким образом, у больных ОВС имеет место стимуляция ФМА нейтрофилов периферической крови, что, вероятно, является ком-
пенсаторной реакцией организма на инфекционный агент, что усиливает миграцию фагоцитов в гнойный очаг, тогда как у больных ОХВС ФМА нейтрофилов практически остается на прежнем уровне.
Фагоцитоз начинается с диапедеза фагоцитов и накопления их в очаге воспаления. Взаимодействуя с бактериями, фагоциты активируются, в цитоплазме накапливаются гранулы, наполненные мощными протеазами. Возрастают поглощение кислорода и генерация активных форм кислорода (кислородный взрыв), включая перекись водорода и гипохлорит, а также окись азота. В дополнение к перечисленным признакам активации макрофаги начинают выделять в среду мощные медиаторы воспаления, среди которых особой активностью отличаются так называемый ФНОа, ИНФу, ИЛ-8 и другие. Кроме этого, на функциональное состояние нейтрофиль-ных лейкоцитов и их готовность к реагированию на бактериальные стимулы оказывают существенное влияние продукты активированных иммунных клеток - цитокины [5].
Изучение цитокинового статуса у больных ВЗВП дало следующие результаты. В условиях ОВС выявлено повышение концентрации в плазме крови всех изученных про-воспалительных цитокинов: ФНОа, ИЛ-1а, ИЛ-1Р, ИЛ-6, ИЛ-8, Г-КСФ, ИНФа и ИНФу, и как компенсаторный механизм - противовоспалительного цитокина РАИЛ. Концентрации других цитокинов, обладающих антагонистическими эффектами, остались на уровне нормы (ИЛ-4 и ИЛ-10) (рис. 1).
У больных ОХВС в меньшей степени, чем у предыдущей группы, выявлено повышение концентрации ФНОа, ИЛ-1а, ИЛ-6, ИЛ-8, ИНФу, а концентрация ИЛ-1Р и Г-КСФ остается на уровне нормы. При этом без изменений остается концентрация всех изученных противовоспалительных цитокинов: РАИЛ, ИЛ-4, ИЛ-10 (рис. 1).
Таким образом, в условиях как ОВС, так и ОХВС наблюдается активация провоспали-тельного звена иммунного статуса, что проявляется повышением концентрации провос-палительных цитокинов, тогда как компенсаторного повышения концентрации антагонистических цитокинов (РАИЛ, ИЛ-10, ИЛ-4) у больных с ВЗВП не наблюдается. При этом важным фактом является то, что у больных
ОХВС содержание провоспалительных цито-кинов в крови существенно ниже, чем у пациентов с ОВС (рис. 1).
Важным в поддержании неспецифической защиты организма от бактериальной инвазии, регуляции клеточных и гуморальных эффектов иммунокомпетентных клеток является система комплемента, поэтому нами изучено содержание ее компонентов у больных ВЗВП [7].
В условиях ОВС выявлено повышение активности комплемента, концентрации в плазме крови как неактивных продуктов (С3, С4 и С5), так и их активных молекул, обладающих провоспалительной активностью и стимулирующей хемотаксис клеток макрофагально-моноцитарного ряда (С3а и С5а) (рис. 1). При этом концентрация компонентов системы комплемента, обладающих ингибирующей активностью - фактор Н и С1инг., оказалась также повышена (рис. 1).
Таким образом, у больных ОВС наблюдается стимуляция системы комплемента как по классическому, так и по альтернативному путям, при этом повышение концентрации С3а, С5 и С5а свидетельствует об активном состоянии системы комплемента, что подтверждается повышением общей активности комплемента. Компенсаторно у больных ОВС имеет место повышение концентрации и ингибиторов как классического, так и альтернативного путей активации комплемента (повышение концентрации С1инг. и фактора Н соответственно) (рис. 1).
При ОХВС установлено также повышение концентрации изученных компонентов системы комплемента, но концентрация С3, С5, С1инг. оказалась меньше, чем у больных предыдущей группы, что, вероятно, свидетельствует об "истощении" компенсаторных механизмом данной системы (рис. 1). Полученные несколько различные результаты можно объяснить тем, что у больных с ОВС активация системы комплемента происходит преимущественно по классическому пути, т.е. с участием комплекса антиген-антитело (инфекционного агента), тогда как у больных с ОХВС, наоборот, активация данной системы происходит за счет альтернативного пути, т.е. без участия иммуноглобулинов и, соответственно, без специфического инфекционного агента, в ответ на это в изучаемых группах
больных компенсаторно повышается концентрация ингибиторов соответствующих путей активации: при ОВС - С1инг. (классического), а при ОХВС - фактора Н (главного ингибитора альтернативного пути активации системы комплемента).
При всех многочисленных причинах развития иммунного воспаления общим является нарушение структурного и энергетического гомеостаза в клетках-мишенях поврежденных органов и тканей. Происходит усиление генерации активных метаболитов кислорода, образующиеся свободные окислительные радикалы нейтрализуются биоантиоксидантами различной химической природы. В случае, когда емкости компонентов антиоксидантной системы оказывается недостаточно для обезвреживания основной массы генерируемых активных метаболитов кислорода, усиливаются процессы ПОЛ, что является основной причиной нарушения структуры клеточных мембран, увеличения их проницаемости, разобщения окислительного фосфорилирования, снижения энергообеспечения клеток и угнетения синтеза ферментов антиоксидантной системы, что замыкает своеобразный порочный круг, при котором в крови резко повышается концентрация метаболитов, обладающих иммуносупрессорным эффектом: про-
дуктов ПОЛ, ацилгидроперекисей, диеновых конъюгатов жирных кислот, малонового диальдегида и др. [4, 15, 16].
Поэтому нами проводилось изучение концентрации в плазме крови продуктов ПОЛ и активности одного из ключевых ферментов антиоксидантной системы защиты организма - каталазы.
У больных как ОВС, так и ОХВС имеет место повышение концентрации в плазме крови продуктов ПОЛ: МДА и АГП. При этом у больных с ОХВС МДА и АГП достоверно выше, чем у пациентов с ОВС, а активность каталазы не отличается от таковой у здоровых доноров (рис. 2). Полученные данные свидетельствуют о более выраженном "окислительном стрессе" в условиях ОХВС, по сравнению с ОВС, что диктует необходимость коррекции выявленных нарушений в состоянии ПОЛ, в первую очередь у больных с ОХВС.
Таким образом, различия в характере и выраженности нарушений иммунного и ок-сидантного статусов на системном уровне у больных с ВЗВП можно представить в виде таблиц, в которых наглядно отражены изменения в отличие от характера ВЗВП: острого или обострения хронического процесса (табл. 2).
Рис. 2. Концентрация продуктов ПОЛ и активности каталазы в плазме крови у больных ВЗВП.
Таблица 2
Состояние иммунного и оксидантного статусов на системном уровне у больных ОВС и
ОХВС до лечения
Показатели У больных ОВС У больных ОХВС Показатели У больных ОВС У больных ОХВС
СБ3 і а ИЛ-6 ТТ т
СБ4 т і ИЛ-8 ТТ т
СБ8 норма т Г-КСФ т норма
СБ16 т тт ИНФа т т
СБ95 норма т ИНФу тт т
СБ25 т ИЛ-4 норма норма
НЬЛ-БЯ норма і ИЛ-10 норма норма
СБ22 т і РАИЛ т норма
1?М т і Комплемент тт т
0? О т норма Сз тт т
0? Л норма норма Сза т т
ЦИК т С4 т т
ФИ т норма С5 тт т
ФЧ норма норма С '-Л а т норма
НСТ-сп. т т С1инг. тт т
НСТ-стим. т норма Фактор Н т тт
ФНОа тт т МДА т тт
ИЛ-1а тт т АГП т тт
ил-ір т норма Катал аза т норма
Примечание: Т - повышение показателя относительно уровня нормы, 4- - снижение показателя относительно уровня нормы.
На основании полученных результатов можно сделать следующие заключения: у больных ВЗВП при поступлении в стационар на системном уровне имеет место нарушение целого ряда показателей иммунного и оксидантного статусов; у больных ОХВС по сравнению с пациентами с ОВС более выражены нарушения клеточного звена иммунитета и проявления "оксидантного стресса", которые отражаются в повышении концентрации продуктов ПОЛ, и в меньшей степени изменены показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов, цитокинового звена и системы комплемента, что, вероятно, обусловлено истощением компенсаторно-приспособительных механизмов поддержания иммунного гомеостаза у больных в условиях хронического иммунного воспаления; у больных с ОВС преимущественно активация системы комплемента происходит по классическому пути, тогда как у больных с ОХВС, наоборот, активация данной системы происходит за счет альтернативного пути; более
выраженные изменения иммунного и окси-дантного статусов на системном уровне.
Таким образом, полученные результаты предопределяют необходимость поиска и клинического апробирования схем и способов фармакологической и нефармакологической иммунореабилитации с целью коррекции выявленных нарушений иммунного статуса и состояния перекисного окисления липидов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бенисевич В.И., Идельсон Л.И. Образование перекисей непредельных жирных кислот в оболочке эритроцитов при болезни Мар-киафава-Микели // Вопр. мед. химии. - 1973. - Т. 19, Вып. 6. - С. 596-599.
2. Виксман М.Е., Маянский А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитроси-него тетразолия. - Казань, 1979. - 15 с.
3. Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания
гидроперикисей липидов в плазме крови // Лаб. дело. - 1983. - № 3. - С. 33-36.
4. Земсков А.М., Земсков В.М., Козлов В.А. и др. Нелимфоидные механизмы иммунопатологии. - М., 2007. - 450 с.
5. Коненков В.И., Рязанцева Н.В., Наследнико-ваИ.О. и др. Аллельный полиморфизм генов ИЛ-4 и ИЛ-10 как один из возможных механизмов, способствующих хронизации вирусных гепатитов // Иммунология. - 2007. -№ 2. - С. 68-72.
6. Кушманова О.Д., Ивченко Е.М. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. - М.: Медицина. - 1983. - С. 98-99.
7. Лавренова Г.В., Катинас Е.Б., Галкина О.В.
Иммунотерапия Ронколейкином острых гнойных синуситов: методические рекоменда-
ции. - СПб., 2003. - 19 с.
8. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высшая школа, 1980. - 243 с.
9. Лесков В.П., Чередеев А.Н., Горлина Н.К., Но-воженов В.Г. Клиническая иммунология для врачей. - М., 1997. - 120 с.
10. Медведев А.Н., Чаленко В.В. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза // Лаб. дело. - 1991. - № 2. - С. 19-20.
11. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. - М.: Медицина, 1987. -365 с.
12. Пинегин Б.В., Маяковский А.Н. Нейтрофилы: структура и функция // Иммунология. -2007. - № 6. - С. 374-382.
13. ПлужниковМ.С., ЛавреноваГ.В., КатинасЕ.Б. Монотерапия при острых гнойных синуситах // Журнал вушних, носових i горлових хвороб. - 1999. - № 5. - С. 89-91.
14. Петров С.В., Конопля А.А., Газазян М.Г. и др. Лабораторно-диагностические критерии воспаления придатков матки // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2006. - Т. 5. - № 1. - С. 87-89.
15. ПрокопенкоЛ.Г., БровкинаИ.Л., БыстроваН.А. и др. Эритроциты и регуляция иммунного гомеостаза (материалы открытия). - Курск: КГМУ, 2006. - 132 с.
16. Прокопенко Л.Г., Лазарев А.И., Бровкина И.Л. и др. Эритроцитзависимые эффекты лекарственных и физиотерапевтических средств. -Курск: КГМУ, 2008. - 336 с.
17. Щербаков В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительности нейтрофилов к стимуляторам // Лаб. дело. - 1989. - № 1. - С. 3033.
18. Haskova V., Kaslik J., Matl I. Hovy zpusob stanoveni circulujieich imunokomplexu v lid-skych serech // Cas. Lek. Ces. - 1977. -Vol. 116. - P. 436-437.
