CC BY
11
https://clinical-journal. ru
E-ISSN 2686-6838
RESEARCH ARTICLE 3. Medical sciences
УДК 615.072
Corresponding Author: Kozin Dmitry Andreevich — Laboratory assistant-researcher of the Laboratory of Chemical and Pharmaceutical Analysis of the N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology, Moscow, Russian Federation
E-mail: kozin1993@inbox.ru
© Kozin D.A., Shprakh Z.S., Budko A.P., Pugacheva R.B., Ektova L.V., Eremina V.A., Gusev D.V., Reshetnyak V.Yu., Nesterova O.V. - 2023
| Accepted: 30.01.2023
http ://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-1-78-82
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПРИМЕСЕИ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ ЛХС-1269 МЕТОДОМ ВЭЖХ-МСМС
Козин1'2 Д.А., Шпрах1'2 З.С., Будько1 А.П., Пугачева1 Р.Б., Эктова1 Л.В., Еремина1 В.А., Гусев1 Д.В., Решетняк2 В.Ю., Нестерова2 О.В.
'ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина», г. Москва, Российская Федерация
2ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова (Сеченовский Университет), г. Москва, Российская Федерация
Аннотация. В НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина синтезирован N-гликозид индоло[2,3-а]карбазола, получивший лабораторный шифр ЛХС-1269, показавший в ходе исследований выраженное противоопухолевое действие. В ходе исследования ЛХС-1269 методом ВЭЖХ было выявлено присутствие двух примесей, получивших названия ЛХС-1269-Х и ЛХС-1269-Y (примеси Х и Y). Электронный спектр поглощения (ЭСП) пика примеси Х был аналогичен ЭСП полученного и описанного ранее N-гликозида индоло[2,3-а]карбазола под лабораторным шифром ЛХС-1208, а ЭСП примесиY - спектру ЛХС-1269, что указывает на принадлежность обеих примесей к индоло[2,3-а]карбазолам. В связи с этим высказано предположение о строении этих примесей: примесь Х является ксилозидом агликона аналогичного по структуре агликону ЛХС-1208, который может образовываться в качестве побочного продукта на одной из последних стадий синтеза ЛХС-1269, а примесь Y имеет структуру триацетилового эфира ЛХС-1269, являющегося предшественником ЛХС-1269 в процессе синтеза.
Целью работы являлась идентификация примесей в субстанции ЛХС-1269, подтверждение их структур и принадлежности к производным индоло[2,3-а]карбазола.
Идентификацию примесей проводили с использованием метода ВЭЖХ-МСМС. Для этого направленным встречным синтезом получены примеси Х и Y, имеющие предполагаемые структуры, которые использовали как образцы сравнения.
Сравнение времен удерживания пиков на экстрагированных ионных хроматограммах (ЭИХ) и МСМС-спектров примесей с ЭИХ и МСМС-спектрами образцов сравнения предполагаемых примесей подтвердило их строение.
В результате проведенной работы идентифицированы структуры примесей Х и Y и подтверждена принадлежность этих примесей к производным индоло[2,3-а]карбазола.
Ключевые слова: фармацевтические субстанции, индолокарбазолы, родственные примеси, ВЭЖХ, масс-спектрометрия, стандартизация, встречный синтез.
IDENTIFICATION OF IMPURITIES IN THE PHARMACEUTICAL SUBSTANCE LS-1269 BY HPLC-MSMS
Kozin1'2 D.A., Shprakh1'2 Z.S., Budko1 A.P., Pugacheva1 R.B., Ektova1 L.V., Eremina1 V.A., Gusev1 D.V., Reshetnyak2 V.Yu., Nesterova2 O. V.
'N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology, Moscow, Russian Federation
2Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russian Federation
Abstract. The N.N. Blokhin Oncology Research Center synthesized indolo[2,3-a]carbazole N-glycoside, which received the laboratory cipher LСS-1269, which .showed a pronounced antitumor effect during research.. During the study of LСS-1269 by HPLC, the presence of two impurities was revealed, called LŒ-1269-X and LСS-1269-Y (impurities X and Y). The electronic absorption spectrum (EAS) of the impurity peak X was similar to the EAS of the indolo[2,3-a]carbazole N-glycoside obtained and described earlier under the laboratory cipher LCS-1208, and the EAS of the impurity was the spectrum of LCS-1269, which indicates that the impurities belong to indolo[2,3-a]carbazoles. In this regard, it is suggested about the structure of these impurities: impurity X is a xyloside of aglycone similar in structure to aglycone LCS-1208, which can be formed as a by-product at one of the last stages of the synthesis of LCS-1269, and impurity Y has the structure of triacetyl ester LCS-1269, which is a precursor of LCS-1269 in the synthesis process.
https://clinical-journaL ru
E-ISSN 2686-6838
The aim of the work was to identify impurities in the substance LHS-1C69, to confirm their structures and belonging to derivatives of indolo[2,3-a]carbazole.
The identification of impurities in the substance LCS-1269 was carried out using the HPLC-MSMS method. For this purpose, X and Y impurities having the assumed structures were obtained by directed counter synthesis, which were used as reference samples.
Comparison ofpeak retention times on extracted ion chromatograms (XIC) and MSMS spectra of impurities with XIC and MSMS spectra of samples of comparison of the alleged impurities confirmed their structure. As a result of the work carried out, the structures of impurities X and Y were identified and the affiliation of these impurities to derivatives of indolo[2,3-a]carbazole was confirmed.
Keywords: pharmaceutical substances, indolocarbazoles, related impurities, HPLC, mass spectrometry, standardization, counter synthesis.
Введение. В НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина синтезирован N-гликозид индоло[2,3-а]карбазола, К-[12-(1^-Б-ксилопиранозил)индоло-[2,3-а]пирроло-[3,4-с]карбазол-5,7-дион-6-ил]пиридин-2-карбоксамид, получивший лабораторный шифр ЛХС-1269. По механизму биологического действия ЛХС-1269 относится к перспективной группе мультитаргетных интеркаляторов ДНК и ремодуляторов хроматина. В процессе испытаний in vitro и in vivo ЛХС-1269 проявил значительную противоопухолевую активность на ряде экспериментальных моделей опухолей [1, 2].
В ходе стандартизации ЛХС-1269, как фармацевтической субстанции, была разработана и валидирована ВЭЖХ-методика с использованием диодно-матричного детектора [3]. Помимо пика действующего вещества, который имел время удерживания (RT) 3,9 мин, на полученных хроматограммах присутствовали пики двух примесей: первая примесь, получившая шифр ЛХС-1269-Х (примесь Х), содержание которой не превышало 0,90%, имела RT равное 2,1 мин. Для второй примеси - ЛХС-1269-Y (примесь Y), RT составило 6,59 мин, а ее содержание в субстанции не превышало 1,50%.
Цель настоящего исследования - определение структур примесей Х и Y путем методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, сопряженной с тандемной масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МСМС), и подтверждение их принадлежности к производным индоло[2,3-а]карбазола.
Материалы и методы. В работе использовали образцы фармацевтической субстанции ЛХС-1269, синтезированные в лаборатории химического синтеза НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина. В качестве образцов сравнения использовали полученные путем направленного встречного синтеза ксилозид агликона ЛХС-1208 и соединение-предшественник ЛХС-1269.
В ходе выполнения эксперимента использовали следующее оборудование: весы аналитические Sartorius 2405 (Sartorius, Германия), высокоэффективный жидкостный хроматограф Agilent 1260 Infinity II (Agilent technologies, США), тандемный масс-спектрометр SCIEX X500R QTOF
под управлением программного обеспечения SCIEX OS (Ver. 2.1.6.) (AB Sciex Pte. Ltd. Сингапур), систему для получения особо чистой воды типа ASTM-1 Milli-Q Water Purification System Simplicity UV S Kit (Millipore, США).
Реактивы: ацетонитрил gradient grade для ВЭЖХ (Merck, Германия), вода деионизованная ASTM-1, ДМСО >99% (Acros organic, Бельгия), калибровочный раствор "ESI Positive Calibration Solution for the SCIEX X500 System" (AB Sciex Pte. Ltd. Сингапур), муравьиная кислота 98+% (Acros organic, Бельгия).
Для получения испытуемого раствора около 0,010 г ЛХС-1269 (точная навеска) помещали в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяли в 10 мл смеси ДМСО-ацетонитрил (1:9) и перемешивали. 0,5 мл полученного раствора переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили до метки смесью вода-ацетонитрил (1:1) и перемешивали. Для получения растворов образцов сравнения около 0,001 г образца (точная навеска) помещали в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяли в 10 мл смеси ДМСО-ацетонитрил (1:9) и перемешивали. 0,5 мл полученного раствора переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили до метки смесью вода-ацетонитрил (1:1) и перемешивали.
Подвижная фаза (ПФ) А - ацетонитрил -0,1% раствор муравьиной кислоты в деионизованной воде в соотношении 1:9 (по объему). ПФ Б - ацетонитрил - 0,1% раствор муравьиной кислоты в деионизованной воде в соотношении 9,5:0,5 (по объему). Скорость подачи ПФ - 0,5 мл/мин в градиентном режиме в течение 15 минут (0 мин - 100 % А, 6,4-7,0 мин - 100% Б, 7,515,0 мин - 100% А). Хроматографическое разделение проводили на предколонке Zorbax 4.6 мм х 12,5 мм CB-C18 5-Micron и колонке Poroshell 120 150 мм х 3 мм, EC-C18 2,7 мкм, при температуре 40°С. Объем пробы, вводимой в хроматограф, составил 5 мкл.
Ионизацию производили методом "электроспрей" при напряжении +5500 V, давлении газа-распылителя и газа-испарителя в 55 psi. Температура в камере ионизации 450°С. Давление газовой завесы входной ионной оптики составляло 25 psi.
Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-1 —--—
hllps: clinical-journal. ru
E-ISSN 2686-6838
Регистрацию ионов осуществляли при IDA-режиме в диапазоне от 50 до 800 Да. Единичное сканирование проводилось за 0,346 секунды. Минимальный порог выбора ионов-прекурсоров по интенсивности составлял 10 ионов в секунду. Потенциал диссоциации ионов-прекурсоров составлял 80 V при энергии соударения 30 - 15 V. Давление азота на втором квадруполе составляло 7 psi.
Результаты и обсуждение. В процессе разработки ВЭЖХ-методики [3] были получены электронные спектры поглощения (ЭСП) пиков примесей (рис. 1). ЭСП примеси Х (1) по спектральным характеристикам и положению максимумов поглощения был аналогичен спектру ранее полученного и описанного в [4] 6-амино-12-(а-Ь-арабинопиранозил)индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона) (ЛХС-1208), а ЭСП примеси Y был аналогичен спектру ЛХС-1269 (2).
Рис.1 - ЭСП пиков действующего вещества и примеси субстанции ЛХС-1269: 1-ЭСП пика примеси Х, 2-ЭСП пика ЛХС-1269
Fig.1 - Electronic absorption spectra (EAS) of peaks of the active compound and impurity of the substance LHS-1269: 1-EAS peak of impurity X, 2-EAS peak of LCS-1269
ЛХС-1208 является арабинозидом, поэтому его присутствие в ЛХС-1269, который является ксилозидом, невозможно из-за разных исходных соединений на первой стадии синтеза [1]. Было высказано предположение, что примесь Х является ксилозидом агликона ЛХС-1208 6-амино-12-ф-Б-ксилопиранозил)индоло [2,3 -а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионом). Указанное соединение может образоваться в качестве побочного продукта на одной из последних стадий синтеза ЛХС-1269 за счет возможного наличия остатков гидразина в гидразиде пиколиновой кислоты [1].
Учитывая высокое значение RT примеси Y, было предположено, что данная примесь является К-[12-(2,3,4-три-0-ацетил^-Б-ксилопиранозил)индоло-[2,3-а]пирроло-[3,4-с]карбазол-5,7-дион-6-ил]пиридин-2-карбоксамидом - предшественником ЛХС-1269 при его синтезе.
Для идентификации структур примесей использовали метод ВЭЖХ, сопряженной с тандемной масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МСМС), являющийся наиболее точным, чувствительным и информативным при определении структуры соединений с малым содержанием в анализируемых образцах сложного состава [5].
На IDA графике хроматограммы полного ионного потока ЛХС-1269 обнаруживали МСМС-спектры ионов-прекурсоров со значением m/z 578,1672 Да и RT около 6,7 мин, что соответствует расчетной массе протонированной молекулы ЛХС-1269. На экстрагированной ионной хроматограмме
(ЭИХ) (рис. 2) эти ионы образовывали пик с аналогичным RT. На 5,7 мин IDA-графики показали наличие ионов-прекурсоров со значением m/z 473,1462 Да, что соответствует предпологаемой массе протонированной молекулы примеси Х. На ЭИХ эти ионы также образовывали пик с RT около 5,7 мин. На 8,28 мин был обнаружен ион-прекурсор со значением m/z 704,1992 Да, что соответствует предполагаемой массе протонированной молекулы примеси Y. Данный ион-прекурсор образует на экстрагированной ионной хроматограмме пик с RT около 8,3 мин.
ф LHS- 17S9|M«H|<X1C homOTO&l 7 wiH?(iwnpl< 1|- ICS- 1Я9 070Ы / « unol 1 HDAIOI MS (WD ЛИЛ ЬЛ167 & D 010 Da ф X |М-КГ MC torn 020617 «лС lande 1) - LCS-1263 020517. bœenmert 1 И0А TOF MS (1Ю - 20001 473 1« -«-0010 Da ф Y |M-Kj- Ж Iran 020617 «яЮ sarde 1) - LCS-12SSJC0517. Experiment 1 .ЮА TOF MS ООО-2000) 704 1ЭЭ0 010 De
3SeS \n*
3Se5
„X
3<fe5
2.6ei oc^So
2 4e5 Л oc
f j 1B*5 T Se5 i. ЛХС-12«> LCS-1269
1*6
T 2e5 T0e5
(M 4 Ge4 t X Y L k
1 i 3 « 5 S : « 9 io и ъ и m Tin» miii
Рис.2 - ЭИХ субстанции и структура ЛХС-1269 по ионам-прекурсорам ЛХС-1269 и примесей Х и Y. Fig.2 - XIC of the substance and structure of LCS-1269 by precursor ions of LCS-1269 and impurities X and Y.
https://ctinical-joumaL ru
E-ISSN 2686-6838
На IDA графиках образца сравнения ксилозида агликона ЛХС-1208 присутствовали ионы-прекурсоры, со значением RT 5,7-5,8 мин и значением m/z 473,1512 Да, что соответствует рассчитанной массе его протонированной молекулы (рис. 3). На ЭИХ ионы-прекурсоры образца сравнения образовывали пик c RT 5,7 мин, а МСМС-спектр этих ионов (1) совпадал по дочерним ионам с МСМС-спектром иона-прекурсора примеси Х, что полностью подтверждает предположение о строении примеси Х.
RT ионов-прекурсоров соединения-предшественника ЛХС-1269 в описанных выше условиях составило 8,28 мин, а значение m/z -704,2037 Да, что соответствует рассчитанной массе протонированной молекулы триацетиловогого эфира ЛХС-1269. МСМС-спектр (2) также совпадал со спектром примеси Y. На ЭИХ ионы-прекурсоры образовывали пик с таким же RT, что полностью подтверждает предположение о строении и происхождении примеси Y.
Рис.3 - МСМС-спектры образцов сравнения примесей Х и Y: 1- МСМС-спектр и структура образца сравнения и примеси Х; 2 — МСМС-спектр и структура образца сравнения и примеси Y. Fig.3 - MSMS-spectra of samples comparing impurities X and Y: 1 — MSMS spectrum and structure of the reference sample and impurity X; 2 — MSMS spectrum and structure of the reference sample and impurity Y.
Выводы. В фармацевтической субстанции ЛХС-1269 с применением метода ВЭЖХ-МСМС были идентифицированы примеси Х и У. Подтверждено предположение о том, что примеси X и У являются производными индоло[2,3-а]карбазола. Примесь Х имеет структуру 6-амино-12-(Р-Б-
ксилопиранозил)индоло [2,3 -а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-диона, а примесь У является N-[12-
(2,3,4-три-0-ацетил-Р-Б-ксилопиранозил)индоло-[2,3-а]пирроло-[3,4-с]карбазол-5,7-дион-6-ил]пиридин-2-карбоксамидом. Методом
направленного встречного синтеза получены примеси Х и У, которые в дальнейшем могут использоваться в качестве образцов сравнения при стандартизации содержания примесей в субстанции ЛХС-1269.
REFERENCES
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК
[1]. Ektova, L.V. Synthesis and Cytotoxic Activity of Indolo [2, 3-a] Pyrrolo [3, 4-c] Carbazole-5, 7-Dione N-Glycosides Substituted on the Maleimide Nitrogen Atom / L.V. Ektova, V.A. Eremina, N.I. Tikhonova, I. L. Plikhtyak, L. A. Medvedeva, I. V. Yartseva, N. I. Moiseeva, I. S. Golubeva, I.P. Yavorskaya, A.P. Bud'ko, O.I. Tarasova, R. B. Pugacheva // Pharmaceutical Chemistry Journal. - 2020. -T. 54. - №. 5. - C. 455-458. DOI:10.1007/s11094-020-02222-x
[2]. Zenkov R. G. Molecular Mechanisms of Anticancer Activity of N-Glycosides of Indolocarbazoles LCS-1208 and LCS-1269 / R.G. Zenkov, O.A. Vlasova, V.P. Maksimova, T.I. Fetisov, N.Y. Karpechenko, L.V. Ektova, V.A. Eremina, V.G. Popova, O.G. Usalka, E.A. Lesovaya, G.A. Belitsky, M.G. Yakubovskaya, K.I. Kirsanov. //Molecules. - 2021. -T. 26. - №. 23. - C. 7329. DOI: 10.3390/molecules26237329.
[3]. Shprakh, Z. Development and validation of HPLC method for analysis of indolocarbazole derivative LCS-1269 / Z.
[1]. Ektova, L.V. Synthesis and Cytotoxic Activity of Indolo [2, 3-a] Pyrrolo [3, 4-c] Carbazole-5, 7-Dione N-Glycosides Substituted on the Maleimide Nitrogen Atom / L.V. Ektova, V.A. Eremina, N.I. Tikhonova, I. L. Plikhtyak, L. A. Medvedeva, I. V. Yartseva, N. I. Moiseeva, I. S. Golubeva, I.P. Yavorskaya, A.P. Bud'ko, O.I. Tarasova, R. B. Pugacheva // Pharmaceutical Chemistry Journal. - 2020. - T. 54. - №.5. - C. 455-458. DOI :10.1007/s11094-020-02222-x
[2]. Zenkov R.G. Molecular Mechanisms of Anticancer Activity of N-Glycosides of Indolocarbazoles LCS-1208 and LCS-1269 / R.G. Zenkov, O.A. Vlasova, V.P. Maksimova, T.I. Fetisov, N.Y. Karpechenko, L.V. Ektova, V.A. Eremina, V.G. Popova, O.G. Usalka, E.A. Lesovaya, G.A. Belitsky, M.G. Yakubovskaya, K.I. Kirsanov. //Molecules. - 2021. - T. 26. - №. 23. - C. 7329. DOI: 10.3390/molecules26237329.
[3]. Shprakh, Z.. Development and validation of HPLC method for analysis of indolocarbazole derivative LCS-
https://ctinical-joumaL ru
E-ISSN 2686-6838
Shprakh, A. Budko, D. Kozin, L. Ektova, Gusev D., V. Reshetnyak, O. Nesterova // Pharmacia. - 2021. - Т. 68. -№.2. - С. 427-431. DOI:
10.3897/PHARMACIA.68.E63457
[4]. Игнатьева, Е.В. Стандартизация фармацевтической субстанции препарата ЛХС-1208 / Е.В. Игнатьева, И.В. Ярцева, З.С. Шпрах, А.П. Будько, Л.В. Эктова, Д.А. Козин, В.Ю. Решетняк, О.В. Нестерова, Е.А. Панкратова //Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2021. - Т. 10. - №.3. - С. 88-94. DOI:10.33380/2305-2066-2021-10-3-88-94
[5]. Wang, A. Q. A rapid and sensitive liquid chromatography/negative ion tandem mass spectrometry method for the determination of an indolocarbazole in human plasma using internal standard (IS) 96-well diatomaceous earth plates for solid liquid extraction / A.Q. Wang, W.Zeng, D.G. Musson, J.D. Rogers, A.L. Fisher // Rapid communications in mass spectrometry. - 2002. - Т. 16. - №.10. - С. 975-981. D0I:10.1002/rcm.669
1269 / Z. Shprakh, A. Budko, D. Kozin, L. Ektova, Gusev D., V. Reshetnyak, O. Nesterova // Pharmacia. - 2021. -Т. 68. - №.2. - С. 427-431. DOI: 10.3897/PHARMACIA.68.E63457
[4]. Ignateva, E.V. Standardization of the Pharmaceutical Substance of the Drug LCS-1208 / E.V. Ignateva, I.V. Yartseva, Z.S. Shprakh, A.P. Bud'ko, L.V. Ektova, D.A. Kozin, V.Yu. Reshetnyak, O.V. Nesterova, E.A. Pankratova // Drug development & registration. - 2021. -Vol. 10. - №.3. - P. 88-94. D0I:10.33380/2305-2066-2021-10-3-88-94
[5]. Wang, A. Q. A rapid and sensitive liquid chromatography/negative ion tandem mass spectrometry method for the determination of an indolocarbazole in human plasma using internal standard (IS) 96-well diatomaceous earth plates for solid-liquid extraction / A. Q. Wang, W. Zeng, D. G. Musson, J. D. Rogers, A. L. Fisher // Rapid communications in mass spectrometry. -2002. - Т. 16. - №.10. - С. 975-981. DOI: 10.1002/rcm.669
Contribution of the authors. The authors Z.S. Shprakh and D. V. Gusev developed a plan of experiments, the authors L. V. Ektova
and V.A. Eremina synthesized samples of the substance and impurities. The authors D.A. Kozin, R.B. Pugacheva and A.P. Budko
carried out the identification of impurities in the pharmaceutical substance LCS-1269. The authors O.V. Nesterova and V.Y.
Reshetnyak took part in writing the text of the article. All the authors took part in the analysis and discussion of the results obtained.
Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest.
Kozin D.A. — SPIN ID: 1047-1100; ORCID ID: 0000-0003-1125-1932
Shprakh Z.S. — SPIN ID: 3639-7108; ORCID ID: 0003-3034-750X
Budko A.P. — SPIN ID: ORCID ID: 0000-0001-6594-4051
Pugacheva R.B. — SPIN ID: 8210-7062; ORCID ID: 0000-0003-2640-935X
Ektova L.V. — SPIN ID: ORCID ID: 0000-0002-3987-6072
Gusev D.V. — SPIN ID: 4613-3230 ORCID ID: 0000-0003-0218-8265
Reshetnyak V.Yu. — SPIN ID: 4901-0033; ORCID ID: 0000-0003-1704-7828
Nesterova O.V. — SPIN ID: 6385-4687; ORCID ID: 0000-0002-7424-0627
For citation: Kozin D.A., Shprakh Z.S., Budko A.P., Pugacheva R.B., Ektova L.V., Eremina V.A., Gusev D.V., Reshetnyak V.Yu., Nesterova O.V. IDENTIFICATION OF IMPURITIES IN THE PHARMACEUTICAL SUBSTANCE LS-1269 BY HPLC-MSMS. // Medical & pharmaceutical journal "Pulse". - 2023;25(1):78-82. http://dx.doi.org/710.26787/nydha-2686-6838-2023-25-1-78-82.
Вклад авторов: З.С. Шпрах и Д.В. Гусев разработали план экспериментов, авторы Л.В. Эктова и В.А. Еремина синтезировали образцы субстанции и примесей. Авторы Д.А. Козин, Р.Б. Пугачева и А.П. Будько идентифицировали примеси в фармацевтической субстанции ЛХС-1269. Авторы О.В. Нестерова и В.Ю. Решетняк участвовали в написании текста статьи. Все авторы принимали участие в анализе и обсуждении полученных результатов.
Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Козин Д.А. — SPIN ID: 1047-1100; ORCID ID: 0000-0003-1125-1932
Шпрах З.С. — SPIN ID: 3639-7108; ORCID ID: 0003-3034-750Х
Будько А.П. — SPIN ID: ORCID ID: 0000-0001-6594-4051
Пугачева Р.Б. — SPIN ID: 8210-7062; ORCID ID: 0000-0003-2640-935X
Эктова Л.В. — SPIN ID: ORCID ID: 0000-0002-3987-6072
Еремина В.А. — SPIN ID: ORCID ID: 0000-0002-7457-3659
Гусев Д.В. — SPIN ID: 4613-3230 ORCID ID: 0000-0003-0218-8265
Решетняк В.Ю. — SPIN ID: 4901-0033; ORCID ID: 0000-0003-1704-7828
Нестерова О.В. — SPIN ID: 6385-4687; ORCID ID: 0000-0002-7424-0627
Для цитирования: Козин Д.А., Шпрах З.С., Будько А.П., Пугачева Р.Б., Эктова Л.В., Еремина В.А., Гусев Д.В., Решетняк В.Ю., Нестерова О.В. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПРИМЕСЕЙ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ ЛХС-1269 МЕТОДОМ ВЭЖХ-МСМС // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". 2023;25(1):78-82. http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-1-78-82.
