CC BY
206
ВЕТЕРИНАРИЯ
УДИ: 602.68:57.083.3
ХОРИОНИЧЕСКИЙ ГОНАДОТРОПИН КАК ИНДИКАТОР БЕРЕМЕННОСТИ КОРОВ
Бо гда н о в Ил ь г и за р Ис м а и л о в и ч , ка н д и д а т в ет ер и н ар н ых н аук, до и е н т Бо гда н о в а Ма р и н а Ан атол ь е в н а , ка н д и д а т би оло г и ч е ских н аук В а с и л ь е в Д м и тр и й Ар ка дь е в и ч , д о кт ор би оло г и ч е ских н аук, пр о фессор Ф о м и н Ал е кс а н д р Н и кол а е в и ч , кан д и д а т т ехн и ч е ских н аук, д о и е н т ФГБОУ ВПО « Ул ья н о в ская го суд ар ст в е н н ая сел ь скохозя й ст в е н н ая а ка д ем ия » 432063, г. Ул ья н о в ск, бул ь в ар Н о в ы ы й Ве н е и, 1 Тел. 8(8422) 55-95-83, е-таИ: п1сидзИа@уапЬех.ги ООО "Науч н о-Техн и ч е ски й Це н тр "Пр омТехЭ н ер го "
432071, Ул ья н о в ская о бл а ст ь, Ул ьян о в ск, ул. Фе д ер а и и и, 5 0 тел./факс:8 (8422) 44-35-11
Нлю чев ые сл ов а: круп н ы/й р о га т ы/й ско т, ст ел ь н о ст ь, д и агн о ст и ка, хор и о н и -ческий гонадотропин, иммунизация, титр антител
В ст а т ь е пр е д ст авле н/1 р езул ь т ат/1 изуч е н ия хор и о н и ч е ско го г о н а д о тр о п и -н а у кор о в р азл и ч н ы/х п ор о д и ср о ко в ст ел ь н о ст и. Уст а н о вле н о, ч т о ка ч е ст в е н н о е и кол и ч ест в е н н о е о пр е д еле н и е хор и о н и ч е ско го го н а д о тр о п и н а м оже т служ и т ь о сн о -в а н и ем для р ан н е й д и агн о ст и ки ст ел ь н о ст и у кор о в, а сам горм о н м оже т р а ссм а -триваться в качестве индикатора беременности.
В в еде н и е н ь I м и , в то в р е м я ка к Р - су бъ ед и н и ца ХГ и ЛГ
Хо р и о н и ч е с к и й го н а дотро п и н (ХГ) от- ра зл и ч а ются . Бета - субъеди н и ца ХГ со сто ит
к р ыт в ко н це 3 0-х годо в Б . Цо нде ко м в мо ч е и з 1 1 9 а м и н о к и сл отн ы х оста тко в, ра с п ол о -
же н ш, и н в п е р и од б е р е м е н н о ст и [ 1 ] . же н н ь I х а н а л о г и ч н о с Р -с убъ ед и н и це й л ю -
Хо р и о н и ч е с к и й го н а дот ро п и н с ин те - те и н и з и ру ю ше го го р мо н а , н о го н а дот ро п и н
зируется клетками трофобласта уже с пер- дополнительно содержит 30 аминокислот-
вых дней его формирования. ных остатков с карбоксильного конца, ко-
ХГ з а н и м а ет осо бо е м е сто с р еди дру- то р ых н ет в Р-субъеди н и це л ю б о го друго го
г их го р м о н о в, о н п оя вля ется в о р га н и з м е гл и ко п роте и н а . Воз м ож н о, б и ол о г и ч е с ка я
матери не только в крови и моче, но и во и иммунологическая специфичность гона-
всех других тканях и жидкостях [3]. дотропина и обусловлена этим отличием
ХГ я вля ется сл ож н ы м бел ко в ы м со- [5, 10] .
еди н е н и е м, отн ос ится к гру п п е гл и ко п роте - В б и ох и м и ч е с ко м от н о ш е н и и го н а до-
идо в . Уста н о вл е н о, что ХГ, та к же, ка к и ЛГ, т ро п и н ы ч ел о ве ка и о бе з ья н бл и з к и дру г
со сто ит и з двух п ол и п е птидн ых це п е й а- и дру гу, н о с ра зл и ч ия м и в отн о ш е н и и в ре м е -
Р-субъеди н и ц. Ал ьфа -субъеди н и ца ХГ и ЛГ н и п оя вл е н ия и в кол и ч е стве н н о м а с п е кте
о ка за л и с ь иде н ти ч н ы м и и вза и м ос вя за н - э кс к р е ци и с м оч о й . На п р и м е р, у м а ка к и с
периодом беременности 167 дней экскреция хорионального гонадотропина наблюдается в период между 14 и 31 днем берем е н н ости . У ч ел о ве ка п р и б е ре м е н н ости ХГ появляется в моче уже на 8-й день после оплодотворения и увеличивается до максимума к 70 дню беременности с последующим снижением (до низкого уровня) без дальнейшего изменения в течение второго и третьего триместра [3].
Кл и н и ч е с к и м и н а бл юде н ия м и и л а б о-раторными исследованиями было убеди-тел ь н о до ка за н о, ч то ХГ я вля ется гл а в н ы м специфическим гормоном беременности [3].
Ос но в ная фун кция ХГ за кл юча ется в защите беременности, среди гуморальных факторов во время этого процесса плацентарным гормонам принадлежит первостепенная роль, хотя эстрогены и прогестерон по праву считаются протекторами беремен-н ост и [ 9, 1 1] . В ра н н и е с ро к и, ко гда н ет е ще сфо р м и ро ва н н о й пл а це нт ы1, ХГ, ка к и п озже, играет роль регулятора сложных гормональных процессов, которые обеспечивают нормальное течение беременности.
До с то в е р н о уста н о вл е н о , ч то во в р е м я б е ре ме н н ост и ХГ о ка з Ы1 ва ет л юте отр о п н Ы1 й эффект у людей и животных, который выражается в поддержании и последующем развитии желтого тела [6].
Е ст ь с в еде н и я , ч то ХГ о б н а руже н у в с е х исследованных ныне видов млекопитаю-щ их [ 8] . В э кстра ктах пл а це нт Ы1 оди н н а дца -ти видов высших приматов с помощью биологических и иммунологических методов
о п ределя л и ко н це н тр а ци ю ХГ. Сходн Ы1 е гонадотропины были обнаружены в плаценте к р ы I с, м ы I ш е й и м о р с к и х с в и н о к . Исс л едо в а -тели предполагают, что в ближайшем будущем будут обнаружены плацентарные гонадотропины и у других млекопитающих [7].
П р и изуче н и и соста ва п ре па рата « Хо р ио-фа г», исходн ы м мате р иал ом для которого служила плацента коровы, были обнаружены гормоны в следующих коли-ч е ст в а х : э ст р а ди ол - 3078-4086 п г/ мл , ФСГ
- 9, 23-15,5 0 м м е/ мл , ЛГ - 5,97-8,54 м м е/ мл , хорионический гонадотропин - 5,09-13,0 мме/мл, пролактин - 92,6-123,7 мме/мл [2].
Хориальны Iй гонадотропин человека
является активным антигеном, о чем свидетельствует эффективное образование антител в ответ на введение гормона кроликам, даже без использования адъюванта.
В поел едн ее в ремя в меди ци не ко й практике накоплен определенный материал по ранней диагностике беременности, основанный на определении хорионического гонадотропина.
Им м у н о ф е р м е н Т н Ь I е э к е п р е е е - м е тод Ь I
о п редел е н ия ХГ ил и Ь -ХГ в м оч е п оз воля ют диагностировать беременность через 1-2 н едел и п о ел е н и да ц и и п л од н о го я й ца . Та к и е тест-системы для быстрого определения наличия или отсутствия беременности женщины могут использовать сами в домашних ус-л о в ия х. Одн о ета ди й н ы й и м му н ол о ги ч е е к и й тест основан на принципе сэндвича для ка-
ч е ет в е н н о го о п р едел е н и я hCG .
Им е ютея е о о б ще н и я о п ол ож и тел ь н о м результате определения хориогонина при исследовании на стельность первотелок [4]. Иеел едо ва тел и е п о м о щ ь ю ре а к ц и и то р мо -жения гемагглютинации выявляли в сыворотке крови испытуемых животных наличие плацентарного гонадотропина, используя в качестве эритроцитарного диагностикума (на гонадотропин) эритроциты овцы, нагруженные гиалуронидазным формалинизиро-ва н н ы м п ре п а ра то м . В ка ч е етве а н ти е ы воротки была использована сыворотка кроликов, иммунизированных этим препаратом. П р и и еел едо ва н и и 1 5 2 е ы во рото к б е ре ме н -ных и небеременных телок установили пригод н о ет ь м е тода в 9 0% ел уч а е в .
Та к и м образо м, вопрое о наличии и ко н це н т ра ци и ХГ в о р га н и з ме мл е ко п ита ю-щих, в частности, коров, и возможности его использования в качестве индикатора стельности остается открытым и требует глубокого изучения.
Уч иты вая в ы шеука за н н ое, цел ью н а -шей работы явилось изучение наличия данного гормона у коров, и, при положительном результате, определение его концентрации в сыворотке крови коров различных пород и возраста.
Ма те р и ал ы и м етоды
Соде ржа н ие пла це нта р н о го го н адо-тропина в крови было изучено у 54 коров
Та бл и ца 1
С оде ржа н и е хо р и о н и ч е с ко го го н а дот ро п и н а в к р о в и ко р о в (п=60
№ п/п Порода Во з р а ст, год С р о к стельности, дни Кол и ч ест в о хо р и о -нического гонадо-тро п и н а МЕ/л
1 2 3 4 5
1 месяц стельности
ч/п 4 16 8,7
бестужевс. 5 21 3,9
ч/п 4 31 4,1
ч/п 6 14 3,2
бестужевс. 7 20 3,7
бестужевс. 5 26 4,0
в среднем 4,60±0,83
2 месяц стельности
ч/п 7 42 4,2
бестужевс. 5 48 4,8
ч/п 6 54 4,1
ч/п 6 60 4,5
бестужевс. 4 37 4,2
бестужевс. 7 58 5,0
в среднем 4,47±0,15
3 месяц стельности
ч/п 7 86 14,5
бестужевс. 6 91 6,8
ч/п 5 78 5,7
бестужевс. 5 83 6,8
ч/п 7 74 6,6
бестужевс. 7 92 10,1
в среднем 8,42±1,36
4 месяц стельности
бестужевс. 6 121 5,8
ч/п 8 104 6,6
ч/п 5 110 6,2
бестужевс. 7 118 6,2
ч/п 6 110 6,8
бестужевс. 6 103 5,6
в среднем 6,20±0,21
5 месяц стельности
ч/п 7 142 4,1
ч/п 5 128 3,8
бестужевс. 6 145 5,5
ч/п 6 131 4,0
бестужевс. 7 154 3,3
бестужевс. 6 140 6,1
в среднем 4,4 7±0,48
Та бл и ца 1 ( п р одол же н и е ] С оде ржа н и е хо р и о н и ч е с ко го го н а дотр о п и н а в к р о в и ко р о в (п=60]
№ п/п Порода Во з р а ст, год С р о к стельности, дни Кол и ч ест в о хо р и о -нического гонадо-тро п и н а МЕ/л
1 2 3 4 5
6 месяц стельности
бестужевс. 6 162 6,0
бестужевс. 6 166 5Д
ч/п 5 180 6,1
ч/п 7 159 6,5
бестужевс. 5 174 5,7
ч/п 6 180 6,1
в среднем 5, 92±0,21
7 месяц стельности
бестужевс. 7 205 5,7
ч/п 7 200 5,5
бестужевс. 6 199 6,0
ч/п 5 211 5,7
ч/п 4 194 5,9
бестужевс. 6 208 5,3
в среднем 5 , 68±0,12
8 месяц стельности
бестужевс. 6 219 4,5
ч/п 5 229 4Д
ч/п 4 242 4,8
бестужевс. 6 217 4,0
бестужевс. 5 223 5Д
ч/п 5 231 4,0
в среднем 4,4 2±0,2
9 месяц стельности
бестужевс. 6 269 3,0
ч/п 6 250 3,1
бестужевс. 5 262 3,4
ч/п 6 247 4Д
бестужевс. 4 268 3,2
ч/п 5 257 3,0
в среднем 3 ,3 0±0,19
бесплодные коровы
бестужевс. бесплодная 0,001
ч/п бесплодная 0,0
бестужевс. бесплодная 0,0
бестужевс. бесплодная 0,0
ч/п бесплодная 0,0
ч/п бесплодная 0,0
в среднем 0,0
8,42
~ 46 447
6,2
^4,47
5,92
5,68
4,42
г-
-3,3-
12
¡§10 ш ^
8
со Го § 16
§ 24
8 §о £^2 о
*0
1 мес 2 мес 3 мес 4 мес 5 мес 6 мес 7 мес 8 мес 9 мес сроки стельности
Р и с . 1 . С оде ржа н и е хо р и о го н и н а в с ы в о р отке к р о в и стел ь-ных коров
черно-пестрой и бестужевской породы на разных сроках стельности и у 6-ти бесплод-н ь I х ж и в от н ь I х в хо зя й ст в а х Ул ья н о в с ко й о б -ласти.
По ка ждо му ж и вотн о му б ыл и п ол учены сведения по имеющейся в хозяйстве учетно-статистической документации (данные журнала учета искусственного осеменения и отелов).
Ко н це нтра ци ю хо р ио н ич ес ко го го н а -дотропина в сыворотке крови определяли методом твердофазного иммунофермент-ного анализа при помощи набора реагентов для иммуноферментного определения хорионического гонадотропина.
Ре зул ьтат ы1 и ссл едо в а н и я
Ре зул ьтат ы и ссл едо ва н ия п о и зуч е н и ю содержания хорионического гонадотропина в сыворотке крови коров представлены в таблице 1 и рис.1.
Ка к по ка зал и резул ьтаты н а ш их исследований, в крови стельных коров установлено наличие хорионического гонадо-т ро п и н а . П р и это м у ро ве н ь го р м о н а м е ня л -ся в зависимости от срока беременности. Та к, с р едн е е соде ржа н и е за п е р в ы й ме ся ц стел ь н ости со ста в ил о 4, 6±0, 8 3 МЕ/л. В те -чение второго месяца стельности концен-т ра ция де ржа л а с ь н а у ро в н е 4, 1 - 5, 0 МЕ/л ( с редн и й п о ка за тел ь - 4,4 7±0, 15 МЕ/л) . В последующий месяц наблюдалось увеличен и е кол и ч е ст в а ХГ до у р о в н я 8 , 4 ± 1, 3 6 МЕ/л . В да л ь н е й ш е м з а ре ги ст р и ро ва н о с н иже н и е у ро в н я го р м о н а до 6, 2 ±0, 2 1 МЕ/л в ч еты ре меся ца и 4,47±0,48 МЕ/л в пяти меся ч н ы й
с ро к бе р е м е н н ости . На ч и -ная с пятого месяца, отмечены изменения содержания гормона, выраженные в увеличении его концентра ц и и до 5, 9 2±0, 2 1 МЕ/л . В да л ь н е й ш е м кол и ч е ство хориогонина сохранялось н а у ро в н е 5, 68±0, 1 2 МЕ/л . С седьм о го м е ся ца стел ь-ности концентрация постепенно снижалась и перед отелом зафиксирован пока зател ь 3,30±0, 19 МЕ/л . В п р о б а х с ы I в о р от к и от бе с -плодных коров хорионический гонадотропин не обнаруживался.
В цел о м с редн е е соде ржа н и е го р м о -на у стельных коров варьировало на разных с р о ка х стел ь н о ст и от 3, 3 0 ±0 , 1 9 до 8, 4 2 ± 1, 3 6 МЕ/л .
А н а л и з с оде ржа н ия го р м о н а у ж и вот-ных различного возраста и пород не выявил достоверной разницы по уровню хориогонина в сравнительном возрастном и породном аспектах.
Со поста вляя получе н н ые да н н ые с имеющимися сведениями о содержании гормона у человека, где к 8-10 дню беременности концентрация хориогонадотропина у беременных женщин достигает 100-200 МЕ/л, а в теч е н и е п е р в ых двух м е ся це в б е -ременности секреция гормона возрастает в 2 раза за каждое трое суток, достигая макс и м а л ь н о го з н а ч е н ия 50000-200000 МЕ/л к 6-8 неделе и постепенно снижается, исчезая через насколько дней после родов, можно отметить аналогичную картину по колебанию концентрации гормона у коров.
За кл юч е н и е
Исследование крови коров в разных физиологических состояниях: беременных (на протяжении всего периода) и бесплодных - свидетельствует о том, что содержание хорионического гонадотропина в сыворотке крови коров в течение всего периода стел ь н ост и кол е бл ется от 3, 30±0, 19 до 8,4 2±1, 3 6 МЕ/л , в то в ре мя ка к у б е с пл од-ных животных гормон не обнаруживается. Ма кс и мал ь ная ко н це нтра ция хо р ио го н и н а
ста вл я ет 8, 4 2± 1,3 6 МЕ/л . При это м и ссл едо -в а н и я с оде ржа н и я го р мо н а у ж и в отных раз-л и ч н о го воз р аста и п о род н е выявили до-сто в е рно й р аз н и цы по уровню хориогонина
а с п е ктах . Сл едо в а тел ь н о, ка ч еств е н н о е и ко -
го н а дотро п и н а м ожет сл уж ить о с н о ва н и е м
а с а м го рмо н м оже т р ас с м а три в а ться в ка ч е -
Б и бл и о гр а ф ич ес к и й сп и со к
1 . Ама рба е в, А.-Ш-М. Б иол о ги чес кая
ро в / А .-Ш-М. Ам а р ба е в, Б .X . Аб б а со в - Ал -м а -Ата : На у к а , 1982. - С . 26-29;
2 . Ба гма н о в, М.А. Рол ь м и к роб н о го фактора в этиологии гинекол о гических бо/ М. А . Ба гм а н о в : А вто реф . ди с . . . . до кт. вет. н а у к . - К а з а н ь, 1998, - 44 с . ;
3 . Д и м итро в, Д . Я . Хо риа л ь н ый гона-дотро п и н ч ел о ве ка / Д . Я . Д и м итро в /Пе р. с
б ол г. И . П. Па п а з о в о й. - М . : Ме д и ц и н а , 1979 .
4 . Коля ко в, Я . Е . Вете ри н а рна я и м мун ол о г ия / Кол я ко в Я . Е . - М. : А г ро п р о м и зда т, 1986. -С . 2 38-239;
5 . На за ро в, А.Т. В веде н ие в кл и н и-ч е с ку ю б и ох и м и ю пл а це н ты / А .Т. На за р о в, А .Н . Че н . - Ал м а -Ата, 1984. - С . 1 0 1 ;
6 . Са вч е н ко, О . Н. Го рмо н ы яичника и го н а дотро п н ые гормоны / О.Н. Савченко // Мед и ц и н а . - Л. , 1967 . - 269 с . ;
7 . Сол о п а е ва , И .М. П р о бл е мы нейро-
ц и и и м му н н о й с и сте мы в клинике / И.М. Сол о п а е в а , Н . И . Ша р о в а //Сб . н а уч ных трудов.
- ГМИ. - Го рь к и й, 1988. - С . 9 1 -97 ;
8 . Солопаева, И . М. Хорионический го н а дотро п и н в б и ол о г и и и м ед и ц и н е / И.М. Сол о п а е ва . - Н. Но в го род : Изд- во ННГУ и м . Н . И . Ло б а ч е в с ко го, 2000. - С . 1 5 - 2 1 ;
9 . Hytten, E . The physiology of human pregnancy, 2 Auf, Blakwell / E . Hytten, J . Leitch .
- Oxford, 197 1 . - P. 75-80;
10 . Mckerns, K W. Structure and function of the gonadotropins / K W. Mckerns . - New York : Plenum press, 1978. - 628 p . ;
1 1 . Simmer, H . A . In Biology of Gestazion / H . A . Simmer. - New York, 1968. - Bd . 1. - 290 p . .
УДК:619.616.36:636.2
ОЦЕНКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ МЕТАБОЛИЗМА У КОРОВ С ЖИРОВЫМ ГЕПАТОЗОМ
В а с и л ь е ва С в етл а н а Вл а ди м и ро в н а, ка н д и д am ее т ер и н ар н ых н аук,
Са н кт-Пе т ер бур гская го суд ар cm е е н н ая а ка д ем ия е е т ер и н ар н о й м е д и и и н Ы1 г. Сан кт-Пе т ер бург, ул. Ч ер н и го е ская, д. 5, т ел 8(812)388-30-51,
Тел. 8 812 388-30-51, E-mail: swet@mail. ги
Кл юч е в ы е сло ва : короеы/, жироео й гепатоз, метаболизм, гормоны/, стельность, отёл.
Жир о е о й ге п а т оз кор о е я еля е т ся тр уд н о д и аг н о ст и р уем ы/м з а бол е е ан и ем д о пр оя ел е н ия кл и н и ч е ских сим п т ом о е. В п ер и о д глубо ко й ст ел ь н о ст и бол ь ш и н ст е о
3 а и скл ю ч е н и ем ур о е ня прям о го бил ируби н а. Ко н и е н тр а и ия горм о н о е щ и т о е и д н о й жел ез Ы1 у кор о е с жир о е ы/м ге п а т оз ом и з д ор о е ы/х п ер е д о т ёлом д о ст о е ер н о о тл и -
4 ае т ся. Чер ез н е д ел ю п о сл е р о д о е е ы/я еля ю т ся з н а ч и т ел ь н ы/ е изм ен е н ия п о каз а т е-
