CC BY
23
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 1 - P. 75-79
УДК: 615.217.32:547.94: 582.951.4 DOI: 10.24412/1609-2163-2023-1-75-79 EDN BGVXLN |||||
ХОЛИНЕРГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ АЛКАЛОИДОВ SOLANUM TUBEROSUML. В.А. ВОРОНОВ, Д.И. ПОЗДНЯКОВ, Д.С.ЗОЛОТЫХ, Ж.В. ДАЙРОНАС, М.В. ЧЕРНИКОВ
Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО Волгоградский государственный медицинский университет Министерства Здравоохранения России, пр. Калинина, д. 11, г. Пятигорск, 357500, Россия
Аннотация. Холинергическая активность алкалоидов соланина и чаконина недостаточно изучена. Цель исследования -определение возможной холинергической активности алкалоидов Solanum tuberosum L. Материалы и методы исследования. Изучали возможность взаимодействия гликоалкалоидов с мускариновыми холинорецепторами (типы М1, М2 и М3), а также с ацетилхолинэстеразой методом молекулярного докинга; влияние на активность ацетилхолинэстеразы по модифицированному методу Эллмана, а на изменение функции холинорецепторов на модели изолированной тощей кишки крыс линии Wistar. Для проведения экспериментов in vitro и ex vivo гликоалкалоиды были выделены в кристаллическом виде путём экстракции и очистки из молодых побегов клубней картофеля. Результаты и их обсуждение. В результате докинга энергия связывания соланина и чаконина с холинорецепторами сопоставима с таковой у атропина, а в отношении МЗ-холинорецепторов превосходит. Энергия связывания донепезила с ацетилхолинэстеразой выше, чем у соланина и чаконина. Анализ in vitro влияния на активность ацетилхолинэстеразы показал, что концентрация полумаксимального ингибирования (IC50) изучаемой суммы гликоалкалоидов существенно выше, чем для референс-соединения донепезила (3,44±0,09 мг/мл и 0,22±0,005 мг/мл соответственно). В результате эксперимента ex vivo установлено, что IC50 суммы гликоалкалоидов незначительно отличался от аналогичного у атропина (2,1±0,08 мг/мл, против 1,39±0,04 мг/мл). Заключение. Соланин и чаконин могут оказывать холиноблокирующее действие за счет антагонистической активности по отношению к МЗ-холинорецепторам, однако, антихолинэстеразное действие выражено слабо.
Ключевые слова: соланин, чаконин, алкалоиды, холинорецепторы, холинэстераза, Solanum tuberosum.
CHOLINERGIC EFFECTS OF ALKALOIDS OF SOLANUM TUBEROSUML.
V.A. VORONOV, D.I. POZDNYAKOV, D.S. ZOLOTYKH, J.V. DAIRONAS, M.V. CHERNIKOV
Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of the Volgograd State Medical University of the Ministry of Health
of Russia, 11, Kalinina Ave., Pyatigorsk, 357500, Russia
Abstract. The cholinergic activity of the alkaloids solanine and chaconine is not well study. The aim of the study is to determine the possible cholinergic activity of Solanum tuberosum L. alkaloids. Materials and methods. We studied the possibility of interaction of glycoalkaloids with muscarinic cholinergic receptors of the M1, M2 and M3 types, as well as with acetylcholinesterase by the method of molecular docking; influence on the activity of acetylcholinesterase according to the modified Ellman method, and on the change in the function of cholinergic receptors in the model of the isolated jejunum of Wistar rats. Glycoalkaloids were isolated in crystalline form by extraction and purification from young shoots of potato tubers for in vitro and ex vivo experiments. Results and discussion. As a result of docking, the binding energy of solanine and chaconine with cholinergic receptors is comparable to that of atropine, and exceeds that of M3 cholinergic receptors. The binding energy of donepezil to acetylcholinesterase is higher than that of solanine and chaconine. An in vitro analysis of the effect on acetylcholinesterase activity showed that the IC50 of the studied amount of glycoalkaloids is significantly higher than for the reference compound donepezil (3.44±0.09 mg/ml and 0.22±0.005 mg/ml, respectively). As a result of the ex vivo experiment, it was found that the IC50 of the amount of glycoalkaloids differed slightly from that of atropine (2.1±0.08 mg/ml versus 1.39±0.04 mg/ml). Conclusion. Solanine and chakonin can have an anticholinergic effect due to antagonistic activity against M3-cholin-ergic receptors, however, the anticholinesterase effect is weakly expressed.
Key words: solanine, chaconine, alkaloids, cholinergic receptors, cholinesterase, Solanum tuberosum.
Введение. Холинергические лекарственные препараты широко представлены в современной практической медицине. Среди средств, оказывающих влияние на холинергический нейротрансмит-тинг, выделяются вещества, блокирующие проведение импульса в синапсе - холиноблокаторы или ан-тихолинергические средства. Также высоким терапевтическим потенциалом обладают лекарственные препараты, стимулирующие холинергическую передачу, среди которых наиболее значимыми с позиции практического применения являются антихо-линэстеразные средства [7].
Solanum tuberosum L. - картофель - широко культивируемое во всех частях мира сельскохозяйственное растение. Его надземные части, а также находящиеся под воздействием света клубни накапливают в периферических тканях сумму гликоалкалоидов - соланина и чаконина. Алкалоиды картофеля были впервые выделены более 200 лет назад и представляют собой бесцветные игольчатые кристаллы, разлагающиеся при температуре 285 С, трудно растворимые в воде (1,380 мг/л, 25 °С) и спирте, хорошо растворимые в кислотах [1]. Соланин и чаконин по химической структуре относятся к стероидным гликоалкалоидам,
состоящим из азотсодержащего агликона - солани-дина, обуславливающего фармакологическое действие, и гликозидной части, представленной у соланина глюкозой, галактозой и рамнозой, а у чаконина -глюкозой и двумя молекулами рамнозы [11].
Фармакологическое действие данных алкалоидов не было изучено в достаточной степени. Известно, что они обладают активностью в отношении псевдохолинэстеразы крови, а также способны блокировать холинорецепторы. Однако в работах не указаны тип холинорецептора, не проведена оценка активности в сравнении с другими лекарственными препаратами. При определении токсичности алкалоидов исследователями была определена только острая токсичность. Дальнейшие исследования фарма-кодинамических и фармакокинетических параметров не получили широкого распространения. Основное число работ по изучению влияния алкалоидов картофеля на холинорецепторы выполнено в середине XX века в соответствии с требованиями своего времени. Сейчас с позиций доказательной медицины для внедрения биологически активных веществ в фармацевтическую практику необходимо оценить большее число фармакологических параметров.
В современной медицине широко применяются лекарственные препараты, содержащие в качестве действующих веществ алкалоиды различного строения, в том числе оказывающие влияние на холинорецепторы. Наиболее известное средство этой группы - атропина сульфат. По классификации в соответствии с регламентом Европейского союза № 1272/2008 [ЕС-GHS (CPQ/CLP] он отнесён ко второй категории токсичности (острая токсичность при вдыхании и острая токсичность при оральном применении), тогда как соланин и чаконин - к четвёртой категории токсичности (острая токсичность при оральном применении) [8-10].
Целью исследования - определение возможной холинергической активности алкалоидов Solanum tuberosum L
Материалы и методы исследования. In silico исследование. На первом этапе работы осуществлено компьютерное моделирование холинергической активности искомых веществ методом молекулярного докинга. В ходе проведения эксперимента in silico была исследована возможность взаимодействия целевых соединений с тремя основными подтипами мускари-новъх холинорецепторов (М1, М2 и М3), а также с аце-тилхолинэстеразой, при этом в ходе постановки in silico анализа в качестве референс-соединений использовали атропин и донепезил соответственно.
При проведении докинга использована программа AutoDock Vina [12]. Кристаллические структуры рецепторов и холинэстеразы получены из открытой базы данных белковых структур Protein Data Bank: М1-холи-норецептор - 5CXV, М2-холинорецептор - 3UON, М3-холинорецептор - 4DAJ, ацетилхолинэстераза - 4EY7.
3D структурные формулы исследуемых лигандов
- соланина и чаконина, а также препаратов сравнения
- атропина и донепезила построены в программе HyperChem. Для подготовки структуры лигандов и белка к докингу использовали графическую оболочку MGLTools. В сайте связывания в структуре М1-холи-норецептора выбраны известные гибкие аминокислотные остатки: SER 109, VAL 113, LEU 1S6, TRP 1S7, LEU 183, THR 192, ALA 193, ALA 196, PHE 197, VAL 38S, TYR 404, CYS 407, TYR 408. Для М2-холинорецептора: TYR104, TYR177, TYR403, TRP422. Для М3-холиноре-цептора: TRP S03, TYR S06, TYR 148, TYR S29, ASNS07, SER 1S1, ASP 147, ALA 238, CYS S32, TRP 199. Для аце-тилхолинэстеразы: TRP 86, GLU 202, SER 203, TRP 286, PHE 29S, TYR 337, TYR 341, HIS447. Перечень аминокислотных остатков был получен на основании указанных белковых комплексов из базы Protein Data Bank в демо-версии программы MolegroVirtualDocker путем выбора наиболее близких аминокислотных остатков относительно лигандов в этих комплексов. Расчет выполнен с использованием системы процессора AMD Ryzen S 3600, объём оперативной памяти 16 ГБ и ОС Windows 10.
Выделение гликоалкалоидов Solanum tuberosum L Для выполнения дальнейших этапов исследования были получены гликоалкалоиды в кристаллическом виде. В качестве источника биологически активных веществ были выбраны молодые побеги клубней картофеля, подвергшиеся воздействию солнечного света, как содержащие наибольшее количество алкалоидов части растения. Экстракцию гли-коалкалоидов из измельчённого сырья проводили раствором уксусной кислоты 3% (соотношение сырьё
- экстрагент 1:5) в течение 2 часов при постоянном перемешивании при комнатной температуре. Полученное извлечение отделяли от остатков измельчённых побегов путём фильтрования через грубые фильтры. К полученному раствору прибавляли раствор концентрированного аммиака до достижения рН=10 и нагревали до 70 "С, при этом на дне колбы образовывался осадок алкалоидов. Для укрупнения частиц смесь отстаивали в течение 12 часов. Осадок отделяли от жидкой фазы фильтрацией через фильтр марки «красная лента», промывали водой, подщелоченной аммиаком, а затем растворяли в горячем спирте этиловом и переносили в кристаллизатор для испарения растворителя [2].
In vitro исследование. В ходе работы in vitro оценивали влияние полученных гликоалкалоидов на активность ацетилхолинэстеразы. Выделенные глико-алкалоиды в количестве S мг (точная навеска) растворяли в смеси ледяная уксусная кислота-вода (1:15) в мерной колбе объёмом 2S мл и доводили водой очищенной до метки. Для получения рабочего раствора с концентрацией 1 мг/мл аликвоту маточного раствора равную S мл переносили в мерную колбу объёмом
100 мл и доводили до метки. Далее готовили двухкратные разведения рабочего раствора с конечной концентрацией гликоалкалоидов 0,5 мг/мл, 0,25 мг/мл, 0,125 мг/мл, и 0,0625 мг/мл, 0,03125 мг/мл.
Активность ацетилхолинэстеразы определяли по модифицированному методу Эллмана. Анализируемая среда содержала 20 мкл раствора ацетилхолинэстеразы (3,2 ЕД/л), 25 мкл раствора двукратных разведений исследуемых соединений и калий-фосфатный буферный раствор в объеме до 300 мкл. В качестве вещества сравнения использовали донепезил в аналогичных концентрациях. Смесь инкубировали в течение 5 минут. Реакцию начинали добавлением ацетилхолин хлорида (25 мкл, 0,02М раствор) и 5,5'-дитиобис-2-нитробензойная кислоты (25 мкл, 0,02М раствор). Оптическую плотность смеси регистрировали через 5 минут при 412 нм с использованием микропланшетного ридера Infifnte F50 (Tecan, Австрия). Тесты выполнены в триплетном исполнении. Концентрация полумаксимального ингибирования (IC50) IC50 (мг/мл) рассчитывали методом пробит -анализа. Данные представлены в виде M±SEM (среднее значение ± стандартная ошибка среднего). Статистические отличия оценивали при уровне значимости р<0,05 методом ANOVA с пост-процессингом по Тьюки. Все используемые в ходе анализа реактивы и соединения были предоставлены Sigma-Aldrich [5].
Ex vivo исследование. Ex vivo оценивали влияние изучаемых гликоалкалоидов на изменение функции холинорецепторов на модели изолированной тощей кишки крыс. В работе были использованы 6 крыс линии Wistar, которые содержались в контролируемых условиях вивария при температуре окружающего воздуха 20±2 °С, относительной влажности 60±5%. Для выделения тощей кишки животных анестезировали внутрибрюшинным введением хлоралгидрата (350 мг/кг), вскрывали брюшную полость и удаляли сегменты тощей кишки длиной 2 см и выдерживали в аэрированном нормальном буферном растворе Кребса-Хенселейта. Температура раствора составляла 37 °C при рН 7,4, с непрерывным барботирова-нием смесью 95% кислорода и 5% углекислого газа в течение 1 ч для поддержания физиологических условий. Каждый кусочек тощей кишки помещали в изолированную ванночку для органов (10 мл). Буферный раствор меняли каждые 15 мин. После стабилизации аналитического сигнала в ванну для изолированных органов добавляли двукратные разведения раствора исследуемых гликоалкалоидов в возрастающих концентрациях. После каждого введения раствора исследуемых гликоалкалоидов в анализируемую среду вносили ацетилхолина хлорид (10-6 M раствор) и регистрировали изменение сокращения тощей кишки в течение 8 минут, после чего ванну для изолированных органов промывали свежей порцией буферного раствора и процедуры повторяли с другим аналитом.
В качестве сравнения использовали атропина
сульфат в аналогичном исследуемым гликоалкалои-дам диапазоне концентраций. Анализ выполнен с применением системы для работы с изолированными органами UgoBasile 4000 с изотоническим преобразователем 7006-Р (Италия). 1С50 (мг/мл) рассчитывали методом пробит-анализа. Данные представлены в виде М^ЕМ (среднее значение ± стандартная ошибка среднего). Статистические отличия оценивали при уровне значимости р<0,05 методом ANOVA с пост-процессингом по Тьюки [6]. Все используемые в ходе анализа реактивы и соединения были предоставлены Sigma-Aldrich.
Результаты и их обсуждение. Основными выходными данными, полученными в результате до-кинга, являются значения энергии связывания (ккал/моль). Данные, представленные в табл. 1 свидетельствуют о том, что энергия связывания атропина с гибкими аминокислотными остатками рецептора в наиболее выгодной конформации равна -7,7 ккал/моль для М1, - 9,6 ккал/моль - для М2, -7,5 ккал/моль - для М3. У соланина данный показатель в наиболее выгодной конформации составляет -9,2 ккал/моль, - 9,0 ккал/моль и - 10,8 ккал/моль соответственно. У чаконина - 9,9 ккал/моль, -11,6 ккал/моль и - 12,5 ккал/моль соответственно. Данные показатели являются сопоставимыми, а энергия связывания соланина и чаконина в отношении некоторых типов рецепторов превосходит таковую у атропина, исходя из чего можно делать предположения о сравнимой или превосходящей степени взаимодействия исследуемых веществ и вещества с известной биологической активностью с некоторыми представителями класса М-ацетилхолинорецепторов. Результаты эксперимента представлены в табл. 1.
Таблица 1
Результаты докинга исследуемых лигандов и м-холинорецепторов
№ п/п Энергия связывания, ккал/моль
Атропин Соланин Чаконин
M1 M2 M3 M1 M2 M3 M1 M2 M3
1. -7,7 -9.6 -7,S -9,2 -9.0 -10,8 -9,9 -11.6 -12,S
2. -7,6 -9.4 -7,4 -8,S -S.S -10,6 -9,4 -11.4 -11,8
3. -7,S -9.3 -7,3 -8,2 -S.S -10,6 -9,4 -11.3 -11,6
4. -7,4 -9.2 -7,3 -8,2 -S.S -10,4 -9,4 -11.2 -11,6
5. -7,3 -9.0 -7,3 -8,1 -S.S -9,9 -9,2 -11.2 -11,2
6. -7,3 -S.1 -7,1 -8,1 -S.S -9,8 -9,2 -11.1 -10,8
7. -7,1 -S.1 -7,0 -7,9 -S.7 -9,4 -8,8 -11.1 -10,3
S. -7,1 -7.6 -6,9 -7,9 -S.7 -9,4 -8,7 -10.6 -10,3
9. -7,0 -7.6 -6,3 -7,9 -S.6 -9,4 -8,6 -10.6 -9,8
Примечание: М1 - М1-холинорецептор; М2 - М2-холинорецептор; М3 - МЗ-холинорецептор
Для определения типа воздействия соланина и чаконина на холинорецепторы провели докинг в отношении ацетилхолинэстеразы. Результаты докинга представлены в табл. 2.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 1 - P. 75-79
Таблица 2
Результаты докинга исследуемых лигандов и холинэстеразы
№ п/п Энергия связывания, ккал/моль
Донепезил Соланин Чаконин
1. -12,7 -11,1 -10,1
2. -11,4 -9,8 -10,0
3. -10,6 -9,6 -9,2
4. -10,4 -9,5 -9,1
5. -10,4 -9,4 -8,9
6. -10,3 -9,3 -8,8
7. -10,3 -9,1 -8,5
8. -10,1 -9,0 -8,5
9. -9,9 -8,9 -8,4
Данные, представленные в табл. 2, свидетельствуют о том, что энергия связывания препарата сравнения - донепезила - в наиболее выгодной кон-формации равна - 12,7 ккал/моль, тогда как у соланина и чаконина этот показатель равен - 11,1 и -10,1 ккал/моль соответственно. Так как энергия связывания исследуемых алкалоидов меньше, чем у препарата сравнения, то можно делать предположения о том, что активность алкалоидов в отношении ацетил-холинэстеразы меньше, чем у препарата сравнения или отсутствует вовсе.
Рис. 1. Зависимость «% ингибирования-концентрация»,
полученная при оценке влияния исследуемых гликоалкалоидов на активность ацетилхолинэстеразы
Рис. 2. Зависимость «% ингибирования-концентрация»,
полученная при оценке влияния исследуемых гликоалкалоидов на активность холинорецепторов ex vivo
Анализ влияния изучаемой суммы гликоалкалоидов Solanum tuberosum L. на активность ацетилхолинэстеразы показал (рис. 1), что для референс-со-единения донепезила показатель IC50 составил 0,22±0,005 мг/мл, тогда как для исследуемой суммы алкалоидов данный показатель был существенно выше - 3,44±0,09 мг/мл (p<0,05 относительно доне-пезила), что может свидетельствовать об отсутствии у гликоалкалоидов Solanum tuberosum L ингибирую-щего влияния на активность ацетилхолинэстеразы. Схожие результаты были получены Alozie S, et al., 1978 при изучении антихолинэстеразного действия а-ча-конина, где было показано, что а-чаконин оказывает слабо выраженные ингибирующие свойства в отношении ацетилхолинэстеразы различной локализации (митохондриальной и микросомальной фракции) [3]. В тоже время соланин также известен как низкопотентное антихолинэстеразное соединение, обладающее, однако, более выраженным действием чем а-чаконин [4].
В тоже время оценка влияния гликоалкалоидов на активность холинорецепторов (рис. 2) позволила установить, что IC50 для исследуемой суммы алкалоидов незначительно отличался от аналогичного у атропина (2,1±0,08 мг/мл, против 1,39±0,04 мг/мл), что может свидетельствовать о наличии антихолинергических свойств у изучаемых гликоалкалоидов Solanum tuberosum L.
При этом, учитывая результаты молекулярного докинга можно предположить, что сумма гликоалкалоидов Solanum tuberosum L. будет проявлять некоторую селективность в отношении МЗ-холинорецепторов, открывая тем самым определенные терапевтические перспективы их использования в качестве нейротропных спазмолитических средств.
Заключение. Проведенное исследование показало, что сумма гликоалкалоидов Solanum tuberosum L. может оказывать холиноблоки-рующее действие за счет антагонистической активности по отношению к МЗ-холинорецепторам. При этом изучаемые гликоалкалоиды оказывают слабо выраженное антихолинэстеразное действие, значительно уступая по активности рефе-ренс-соединению донепезилу.
Литература / References
1. Назаренко Е.А., Скрышевская И.В., Корпан Я.И. Гликоалкалоиды картофеля: распространение, физико-химические свойства, токсичность и методы определения // Biopolymers and Cell. 2002. Т. 18, № 6. С. 478-484 / Naza-renko EA, Skryshevskaya IV, Korpan Yal. Glikoalkaloidy kartofelya: rasprostranenie, fiziko-khimicheskie svoystva, tok-sichnost' i metody opredeleniya [Potato glycoalkaloids: distribution, physico-chemical properties, toxicity and methods of determination]. Viopolymers and Cell. 2002;18(6):478-84. Russian.
2. Погорелова О.В. Фармакогностическое исследование ростков картофеля Solanum tuberosum L., как источника соланина // Фармация. 1968. №4. С. 27-30 / Pogorelova OV. Farmakognosticheskoe is-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 1 - P. 75-79
sledovanie rostkov kartofelya Solanum tuberosum L., kak istochnika solanina [Pharmacognostic study of potato sprouts Solanum tuberosum L., as a source of solanine]. Farmatsiya. 1968;4:27-30. Russian.
3. Alozie S.O., Sharma R.P., Salunkhe D.K. Inhibition of rat cholin-esterase isoenzymes in vitro and in vivo by the potato alkaloid, a-chaconine 1, 2 // Journal of Food Biochemistry. 1978. Vol. 2, № 3. C. 259276 / Alozie SO, Sharma RP, Salunkhe DK. Inhibition of rat cholinesterase isoenzymes in vitro and in vivo by the potato alkaloid, a-chaconine 1, 2. Journal of Food Biochemistry. 1978;2(3):259-76.
4. Chen K., Kan J. Harmful Food Constituents. Essentials of Food Chemistry. Springer, Singapore, 2021. C. 511-556 / Chen K, Kan J. Harmful Food Constituents. Essentials of Food Chemistry. Springer, Singapore; 2021.
5. Jonczyk J., Godyn J., Stawarska E. Dual Action of Dipyridothia-zine and Ouinobenzothiazine Derivatives-Anticancer and Cholinester-ase-Inhibiting Activity // Molecules. 2020. Vol. 25, N11. P. 2604 / Jonczyk J, Godyn J, Stawarska E. Dual Action of Dipyridothiazine and Ouinobenzothiazine Derivatives-Anticancer and Cholinesterase-Inhibit-ing Activity. Molecules. 2020;25(11):2604.
6. Marghich M., Amrani O., Mekhfi H., Ziyyat A., Bnouham M., Aziz M. Myorelaxant and antispasmodic effect of an aqueous extract of Artemisia campestris L. via calcium channel blocking and anticholinergic pathways // J Smooth Muscle Res. 2021. Vol. 57. P. 35-48 / Marghich M, Amrani O, Mekhfi H, Ziyyat A, Bnouham M, Aziz M. Myorelaxant and an-tispasmodic effect of an aqueous extract of Artemisia campestris L. via calcium channel blocking and anticholinergic pathways. J Smooth Muscle Res. 2021;57:35-48.
7. Sales M.E. Cholinergic drugs as therapeutic tools in inflammatory diseases: participation of neuronal and non-neuronal cholinergic
systems // Antiinflamm Antiallergy Agents Med Chem. 2013. Vol. 12, N2. P. 109-116 / Sales ME. Cholinergic drugs as therapeutic tools in inflammatory diseases: participation of neuronal and non-neuronal cholinergic systems. Antiinflamm Antiallergy Agents Med Chem. 2013;12(2):109-16.
8. Sigma-Aldrich [Электронный ресурс]: atropine паспорт безопасности // URL: https://www.sigmaaldrich.com/RU/ru/sds/sigma/a0132 (дата обращения 28.06.2022.) Sigma-Aldrich / Sigma-Aldrich [Electronic resource]: atropine safety data sheetKi URL: https://www.sigmaal-drich.com/RU/ru/sds/sigma/a0132
9. Sigma-Aldrich [Electronic resource]: chaconne safety data sheet // URL: https://www.sigmaaldrich.com/RU/ru/sds/sial/phl80075 (date of issue 28.06.2022.) / Sigma-AldrichSigma-Aldrich [Elektron-nyy resurs]: solanine pasport bezopasnostiyu URL: https://www.sigmaal-drich.com/RU/ru/sds/aldrich/s3757
10. Tiina Vaananen Glycoalkaloid Content and Starch Structure in Solanum Species and Interspecific Somatic Potato Hybrids. Academic dissertation. Helsinki, 2007. P. 13-22 / Tiina Vaananen Glycoalkaloid Content and Starch Structure in Solanum Species and Interspecific Somatic Potato Hybrids. Academic dissertation. Helsinki; 2007.
11. Trott O., Olson A.J. AutoDock Vina: improving the speed and accuracy of docking with a new scoring function, efficient optimization, and multithreading // J Comput Chem. 2010. Vol. 31, N2. P. 455-461 / Trott O, Olson AJ. AutoDock Vina: improving the speed and accuracy of docking with a new scoring function, efficient optimization, and multithreading. J Comput Chem. 2010;31(2):455-6.
Библиографическая ссылка:
Воронов В.А., Поздняков Д.И., Золотых Д.С., Дайронас Ж.В., Черников М.В. Холинергические эффекты алкалоидов Solanum Tuberosum L.// Вестник новых медицинских технологий. 2023. №1. С. 75-79. DOI: 10.24412/1609-2163-2023-1-75-79. EDN BGVXLN.
Bibliographic reference:
Voronov VA, Pozdnyakov DI, Zolotykh DS, Daironas JV, Chernikov MV. Kholinergicheskie effekty alkaloidov Solanum Tuberosum L. [Cholinergic effects of alkaloids of Solanum tuberosum L.]. Journal of New Medical Technologies. 2023;1:75-79. DOI: 10.24412/16092163-2023-1-75-79. EDN BGVXLN. Russian.
