CC BY
22
Суслов И.Н., Безус Е.В., Иллек Я.Ю., Зайцева Г.А.
HLA-АССОЦИАЦИИ И ИММУННЫЕ НАРУШЕНИЯ У ДЕТЕЙ С ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ
ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ ГОУ ВПО Кировская ГМА Росздрава, г. Киров Кировский НИИ ГиПК
Введение.
Язвенная болезнь является полиэтиологи-ческим заболеванием и среди многих факторов, обусловливающих её формирование, особенно важное значение придаётся наследственной предрасположенности, генетически обусловленному повышению агрессивности желудочного сока, инфекции Helicobacter pylori, расстройству локального и системного иммунитета. У больных язвенной болезнью выявляется ассоциативная связь с определёнными антигенами главного комплекса гистосовместимости (HLA-антигены I класса В5, В12, В15), обнаруживаются нарушения иммунологической реактивности, отмечается более быстрая положительная динамика клинико-лабораторных показателей и параметров иммунитета при включении в комплексное лечение иммуностимулирующих и иммуномодулирующих препаратов [4, 2, 5, 3, 1, 6].
Однако необходимо отметить, что исследование иммуногенетических параметров при язвенной болезни было выполнено, в основном, у взрослых лиц и проводилось, как правило, без учёта локализации язвенных дефектов (желудок и/или двенадцатиперстная кишка, двойная локализация язвы), а данные литературы о глубине и характере сдвигов показателей иммунитета при язвенной болезни разноречивы. В этой связи мы поставили перед собой цель исследовать особенности распределения антигенов HLA-комплекса I и II класса, дать характеристику изменениям параметров иммунологической реактивности у детей с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки.
Материал и методы исследования.
Под наблюдением в городской детской клинической больнице и областной детской клинической больнице г. Кирова в период с 2003 по 2007 г. находилось 68 детей (38 мальчиков и 30 девочек) русской национальности в возрасте 12-15 лет, страдающих язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (ЯБДК). Продолжительность болезни у пациентов колебалась от 2 до 4 лет, рецидивы заболевания возникали 1-2 раза в год.
Типирование лимфоцитов у больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки по антигенам HLA-комплекса I класса выполнялось в стандартноммикролимфоцитотоксическомтесте с помощью гистотипирующих сывороток, выпускаемых ЗАО «Гисанс» (г. Санкт-Петербург), которые позволяют идентифицировать 15 антигенов локуса А и 32 антигена локуса В. Молекулярное типирование HLA-генов локусов DRB1 и DQB1 проводилось методом полимеразной цепной реакции с набором сиквенс-праймеров (НПФ «ДНК-Технология», г. Москва), который включает в себя серию амплификаций различных участков HLA-генов II класса и позволяет выявлять 14 аллелей гена DRB1, 12 аллелей и групп аллелей гена DQB1.
Расчёт иммуногенетических параметров у больных ЯБДК осуществляли с помощью формул, принятых в популяционной генетике. Частоту встречаемости изучавшихся антигенов определяли как процентное отношение индивидов, несущих антиген, к общему числу обследованных в группе. Частоту внутрилокусных сочетаний антигенов находили отдельно для локусов А и В, частоту' межлокусных сочетаний антигенов рссчитывали по формуле Mattius Р. с соавт. Для установления существенности различий в харатере распределения антигенов в сравниваемых группах определяли критерий согласия (%2) с поправкой на непрерывность вариаций; с помощью специальных математических формул у2 переводили в коэффициент достоверности различий (р). Для определения степени ассоциации ЯБДК с иммуногенетическими параметрами вычисляли критерий относительного риска (RR); при нулевом значении одного из составляющих величину RR рассчитывали по формуле Haldane J. Принято считать, что при RR, равном 2,0 и больше, существует положительная ассоциация признака с заболеванием (предрасположенность к развитию болезни), тогда как значения RR меньше 1,0 указывают на резистентность индивида к данной патологии. Вместе с тем, у больных ЯБДК рассчитывали этиологическую фракцию (EF), характеризующую силу положительной HLA-ассоциации, и превентивную фракцию (PF), характеризу-
ющую силу отрицательной HLA-ассоциации. Математическую обработку результатов HLA-типирования у больных ЯБДК выполняли на персональном компьютере с использованием специальной программы, составленной сотрудниками лаборатории иммуногематологии Кировского НИИ ГиПК на основании указанных выше формул. Контрольную группу в этих исследованиях составили 795 практически здоровых лиц - доноров крови.
Для оценки показателей иммунологической реактивности у больных ЯБДК исследовали содержание CD3-, CD4-, CD8- и СЕ>22-лимфо-цитов в крови (метод непрямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами), уровни иммуноглобулинов (Ig) классов G, А, М (метод радиальной иммунодиффузии с использованием моноспецифических антисывороток) и кон-центрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови (унифицированный метод преципитации с раствором полиэтиленгликоля), фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН), фагоцитарный индекс (ФИ) и тест восстановления нитросинего те-тразолия (НСТ-тест в цитоплазме нейтрофилов (с использованием частиц латекса), уровни интерлейкина-1 бета (ИЛ-1(3) и фактора некроза опухолей-альфа (ФНО-а) в сыворотке крови (метод иммуноферментного анализа). Данные, полученные у больных ЯБДК при исследовании показателей иммунитета, обрабатывали методом вариационной статистики на персональном компьютере в программе Micrisoft ExeI-2007. Контрольную группу' в этих исследования составили 118 практически здоровых детей того же возраста, проживающих в г. Кирове и Кировской области.
HLA-a
Результаты и нх обсуждение.
У большинства наблюдаемых детей с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (68%) была выявлена наследственная отягощённость в отношении гастродуоденальной патологии и 28% родителей этих пациентов сами страдали язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки или желудка. Все наблюдаемые пациенты поступали в стационара с типичными клиническими проявлениями обострения язвенной болезни. У них отмечались изменения гемограммы, свойственные воспалительному процессу: увеличение общего количества лейкоцитов, увеличение абсолютного количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов и эозинофилов, повышение СОЭ. У всех больных отмечались положительные или резко положительные результаты уреазного дыхательного теста, выявлялось присутствие специфических IgG-антител к Helicobacter pylori в сыворотке крови. При фракционном исследовании у пациентов обнаруживались признаки повышения кислотообразующей функции желудка. При эндоскопическом исследовании у 85% пациентов обнаруживался единичный язвенный дефект диаметром 6-8 мм на передней или задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки, гораздо реже (15%) выявлялись множественные язвенные дефекты (2-5) среднего размера на слизистой оболочке луковицы двенадцатиперстной кишки; вместе с тем, у всех пациентов отмечались признаки дуоденита, а у 17% больных
- эрозии слизистой оболочки луковицы двенадцатиперстной кишки.
Результаты, полученные в ходе иммуноге-нетических исследований, позволили выделить HLA-антигены и их комбинации, с которыми ассоциировался высокий относительный риск развития язвенной болезни двенад-цатипёрст-ной кишки у детей (таблица 1).
Таблица 1
у детей с ЯБДК
HLA-антиге-ны и их комбинации Частота встречаемости,%: х2 Р RR EF ] і PF і і
здоровые лица, п = 795 больные ЯБДК, п = 68
DRB1 *01 22.7 39,5 5,46 <0,02 2 22 0.31 -
В5-В7 0,6 2,9 7,36 <0,01 4.63 0,02 -
A1-BI3 0,4 2.3 - - 5,71 - -
AJ-B27 0,0 2.4 - - 2,35 - -
A2-BI8 0,3 1,6 - - 4.57 - -
A9-BI8 0,1 3.2 - - 4,70 - -
A19-BI5 0,3 2.6 - - 7.79 - -
DRBJ*02 41,7 23,3 4,97 <0,02 0.43 - -
DQBi*602-8 38,3 20,5 3,72 <0,05 0,42 - 0,29 !
1 А2-А9 11.8 7,3 4,95 <0,05 0,06 - .
A2-BI6 2.1 0,0 - _ 0.01 - 1 !
Установлено (таблица 1), что представительство НЬА-антигена II класса 011131*01, внутри-локусной комбинации НЬА-антигенов I класса В5-В7, межлокусных комбинаций НЬА-антигенов 1 класса А1-В13, А1-В27, А2-В18, А9-В18 и А19-В15 ассоциировалось с повышением относительного риска (в 2,22-7,79 раза) развития язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у детей (1У1 = 2,22-7,79). Вместе с тем, проведенные исследования позволили выделить НЬА-антигены II класса (01<В1*02 и 0<ЗВ1*602-8), внутрштокусную комбинацию НЬА-антигенов 1 класса (А2-А9) и межлокусную комбинацию НЬА-антигенов I класса (А2-В16), с которыми ассоциировалась определённая резистентность к возникновению этого заболевания у детей (КК = 0,43-0,01).
У наблюдаемых больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки отмечались выраженные сдвиги показателей иммунологической реактивности (таблица 2).
Изменения клеточного звена иммунитета у детей с ЯБДК в фазе обострения заболевания (таблица 2) проявлялись в увеличении относительного и абсолютного количества С 03-лимфоцитов (р<0,001, р<0,001), абсолютного количества С04-лимфоцитов (р<0,001) и С08-лимфоцитов (р<0,001) в крови, а изменения гуморального звена иммунитета проявлялись в увеличении абсолютного количества С022-лим-фоцитов (р<0,001) в крови, повышение уровней иммуноглобулинов О (р<0,001) и М (р<0,001) в сыворотке крови. Наряду с этим, у детей с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки в фазе обострения заболевания обнаруживались признаки нарушения неспецифической резистентности, проявляющиеся в значительном снижении показателей фагоцитарной активности нейтрофилов (р<0,001), фагоцитарного индекса (р<0,001) и НСТ-теста (р<0,001), а также резко выраженное повышение уровней провос-палительных цитокинов (интерлейкин-1 бета и фактор некроза опухолей-альфа) в сыворотке крови (р<0,001, р<0,001).
Таблица 2
Показатели иммунологической реактивности у детей ЯБДК (М±т)
Ґ ' — Показатели Здоровые дети, п= 118 Больные ЯБДК. її — 60
| СТО-лимфоциты,% 64,10± 1,25 73,98±1,31*
СОЗ-л им фоциты, 1 09/л 1,4У±0,07 1,81*0,09*
С D4-. I им фоциты,% 49,50±1,34 46,43± 1,03
С04-ли м фоциты, 10'Ул 0,73±0,03 0,86±0,05*
С08-лнмфоцигы,% 25,73±1,47 26,05±0,76
CDS-лимфоциты, 109/л 0,38±0,02 0,50±0,03*
Индекс CD4/CD8 !,93±0,12 1,95±0,09
С022-лимфои иты,% 9,90±0,77 10,52±0,86
СГ)22-лимфоциты, 10*/л 0,17±0,02 0,26±0,02*
IgG, г/л 9,78±0,15 11,89±0,65*
ГиА,г/л 1,24±0,07 1,28±0,09
lgM.r/л 1,25±0,07 1,91±0,12*
ЦИК.ед.опт.пл. 0,070±0,003 0.068±0,003
ФАН.% 72,90±1,51 51,73±1,91 *
ФИ 10,50±0,21 8,38±0,17*
11С'Т-тест,% 22,1)0±0,90 12,13±1,62*
ИЛ-1 р.пкг/мл 16,26±1,13 140,11±23,24*
ФНО-а, пкг/мл 8,06±1Д)2 73,42±23,34*
Примечание: «*» - р<0,0()1 по сравнению с показателя у здоровых дегей.
Выводы.
1. Идентификацию антигенов главного комплекса гистосовместимости I и II классов рекомендуется использовать для выявления лиц, предрасположенных к развитию язвенной болезни. В качестве иммуногенетического маркера язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у детей может служить повышенная частота встречаемости антигена НЬА-комплекса ГЖВ1-*01, внутрилокусного сочетании антигенов В5-В7, межлокусных сочетаний антигенов А1-В13, А1-В27, А2-В18, А9-В18, А19-В15.
2. В качестве характерного признака обо-
стрения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у детей может служить совокупность изменений следующих параметров иммунологической реактивности: увеличение относительного и абсолютного количества CD3- лимфоцитов, абсолютного количества CD4-, CD8-, СШ2-кле-ток в крови, повышение уровней IgG и IgM в сыворотке крови, снижение показателей ФАН, ФИ и НСТ-теста, повышение уровней ИЛ-ip и ФНО-а в сыворотке крови.
3. Наличие выраженных иммунных нарушений у детей с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки служит показанием для
включения иммуномодулирующей терапии В комплексное лечение больных. С этой целью могут быть использованы иммуномодуляторы нового поколения - имунофан и полиоксидо-ний, которые, наряду с иммунокоррегирующим действием, обладают противовоспалительным, мембраностабилизирующим и аитиоксидатным свойствами, не вызывают развития осложнений и побочных реакций.
Литература.
1. Иллек Я.Ю., Зайцева Г.А., Суслова Е.В., Суслов И.Н Влияние комплексного лечения с включением имунофана на клинико-эндоскопические показатели и состояние иммунитета у детей с язвенной болезнью// Нижегородский медицинский журнал.-2007.-№6.-с.50-53.
2. Маев И.В., Нефедова Ю.Ф., Вьючнова Е.С., Нефедова Е.А. Использование иммунокорректоров в лечении хронических эрозий желудка// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии.-1998.-№4,-с.33-37.
3. Нестерова И.В., Капранова Н.П., Ромен-ская В.А. Интерферон в комплексной терапии язвенной болезни// Вопросы детской диетологии.-2006.-т.4.-№1.-с.70-72.
4. Фролькис А.В. Заболевания желудочно-кишечного тракта и наследственность.-Санкт-Петербург, 1995.-285 с.
5. Шкадова М.Г. Влияние иммуномодулирующей терапии на показатели местного иммунитета у больных с дуоденальной язвой// Физиология и патология иммунной системы.-2004.-т.6.-№1.-с.9-13.
6. Uibo R., Parik J., Samloff I.M. Alpha-I-ant-itrypsin alio- and phenotypes gastric and duodenal ulcer// Scand.. I. Gastroenterol. -1991.- vOI. 26,-sup-pl. 186.-p. 105-107.
Холматов Д.Н., Алимджанов И.И.
ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ НАРУШЕНИЙ РИТМА И ПРОВОДИМОСТИ СЕРДЦА У ДЕТЕЙ
Андижанский государственный медицинский институт
За последние годы произошли существенные изменения взглядов на природу болезней сердца у детей [1,2, 6, 8]. Появились убедительные научные данные, свидетельствующие о том, что в формировании аритмии сердца у детей существенное место занимают генетические факторы [3, 4]. В отечественной кардиоревматологии не уделяется должного внимания диагностике наследственных синдромов и болезней, одним из проявлений которых является аритмии сердца. Известно, что наиболее часто аритмии сердца сочетаются с неполноценнос-
тью (дисплазиями) соединительной ткани организма [5,7].
Цель исследовании - провести клико-эпи-демиологический анализ 66 внешних проявлений дизморфии (пороки развития) и микроаномалий у детей с нарушением ритма (НРС) и проводимости сердца (НПС).
Материалы и методы. Исследования проводились среди школьников Избаскентского района Андижанского вилоята в возрасте 7-14 лет. Проводились общеклинические, электрокардиографические, и морфометрические исследования школьников,
Результаты. В работе проводятся основные внешние проявления (дизморфия) нарушений ритма и проводимости сердца. Показана ассоциативность дизморфии с отдельными видами НРС и НПС у детей.
Результаты и обсуждение. После углубленного клинического обследования школьники с различными видами нарушения ритма и проводимости сердца классифицировались по форме заболевания в зависимости от возраста и пола. Изучение удельного веса дизморфии по частям тела больных с НРС и проводимости сердца показали, что наибольшая доля дизморфий концентрирована в области лица (глаз), носогубного треугольника, нижних конечностей и кожи. Установлено, что дети с дизритмиями отличаются по накоплению частостей дизморфии в области носогубного треугольника, нижних конечностей, а так же на коже и ее производных (р<0,05-0,01). Предстояло изучить, насколько ассоциируется те или иные нарушения ритма и проводимости сердца у детей с дизморфиями в отдельных частях тела (таблица 1).
Данные таблицы 1 свидетельствуют, что с дизморфиями в области черепа ассоциируются 5 нарушений ритма и проводимости, в области глаз - 1, носогубного треугольника-4, нижних конечностях
- 9, коже - 6, с ростом и развитием детей - 8.
Наибольшая ассоциативность нарушений ритма и проводимости сердца с дизморфиями в области черепа обнаруживается при АВБ (Х2=7,99, р<0,01), в орбитальной части лица при синусовой тахикардии (X2 =12,3 р < 0,001), в области носогубного треугольника при синусовой тахикардии (X2 =15,5, р < 0,001), ПВЖ (X2 =14,9, р <0,001), синусовой аритмии (X2 =12,8, р<0,001), в нижних конечностях при синусовой брадикардии (X2 =17,6, р<0,001), синусовой аритмии (X2 =24,5, р<0,001), СРРЖ (Х2=26,5, р<0,001), тахикардиях (X2 =12,9, р<0,01). На коже и ее придатки при синусовой тахикардии (X2 =33,4, р<0,001), ПВЖ (X2 =18,3, р<0,001), с нарушением роста и развития при МВР (Х2 =14,65, р<0,001), ПВЖ (X2 =28,6, р<0,001), синусовой тахикардии (X2 =29,2, р<0,001), синусовой аритмии (X2 =30,4, р<0,001) и брадикардиях (X2 =13,1, р<0,001).
