CC BY
38
ЛИТЕРАТУРА
1. Исаков В.А., Домарадский И.В. Хеликобактериоз. - М., 2003. -412 с.
2. ЛапинаТ.Л.// Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии, под. ред. В.Т. Ивашкина, Ф. Мегро, Т.Л. Лапиной. - М., 1999. - С. 107-116.
3. Мецлер Д. Биохимия. Т. 1-3. - М., 1980. - С. 95-98.
4. Atherton J.С., Washington N., Bleckshaw P.E. et al. // Gut. - 1995. -V. 36. -P. 337-340.
5. Bazzoli F., Zagari M., Fossi S. et al. // Helicobacter. - 1997. - V. 2 (Suppl. 1). -Р. 34-37.
6. BodeG.,RothenbacherD.,BrennerH.,AdterG.//Scand.J.Gastroenterol. -1998-V. 33, No. 5. - P. 468-472.
7. Cadranel S., Corvaglia I., Bontems P. //J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. - 1998. -V. 27, No. 3. - P. 275-280.
8. De Niro G., Epstein D. // Science. - 1978. - V. 197. - P. 261-263.
9. Dominguez-Minoz J.E., Leodolter A., Sauerbrach Т., Malferseiner P. А // Gut. -1997. - V. 40, No. 4. - P. 459-462.
10. Graham D.Y., Klein P. D., Evans D.J. et al. // Lancet. - 1987. -No. 1. - P. 1174-1177.
11. IsomotoH.,InoueК.,ShikuwaS.etal.//Eur.J.Gastroenterol.Hepatol.-2002.-V. 14, No.10. - P. 1093-1100.
12. Miwa H„ Murai Т., Ohkura R. et al. // Helicobacter. - 1997. - V. 2, No. 2. - P. 82-85
13. ReinauerS., GoerzG., RuzickaT. etal.//Acta Derm. Venerol. (Stockh.) - 1994. -V. 74.-P. 361-363.
14. Wang W.M., Lee S.C., Ding H.J. etal. //J. Gastroenterol. - 1998. -V. 33, No. 3. - P. 330-335.
ХИТОЗАН В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ МИКРОБНОГО ПАРАЗИТОЦЕНОЗА ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ ПРИ ЭРОЗИВНО-ЯЗВЕННЫХ ПРОЦЕССАХ
В.М. Червииец, В.М. Боидаренко
Государственная медицинская академия, Тверь НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи
В последние годы предложено большое количество схем лечения язвенной болезни и хронического гастрита, направленных на эрадикацию возбудителя, включающие различные антибактериальные и антисекреторные препараты. Н. pylori относится к числу патогенных бактерий, однако в зависимости от пока еще неясных предрасполагающих условий макроорганизм может вести себя также, как комменсал, обнаруживаемый у здоровых людей [2, 7]. В биоптатах слизистой оболочки при воспа-лительно-эрозивно-язвенных поражениях гастродуоденальной зоны обнаруживаются не только Н. pylori, но и стафилококки, стрептококки, энтеробактерии, грибы рода Candida и др., роль которых в рецидивирующем течении язвенной болезни не определена. При проведении антихе-ликобактерной терапии используют от 3 до 4 антибиотиков широкого спектра действия (кларитромицин, ампициллин, амоксициллин, метронидазол и др.), а также препараты висмута, обладающие антибактериальной активностью [7, 8]. Сроки лечения составляют 7-14 дней, что приводит
к эрадикации Н. pylori только у части больных, при этом применение агрессивной антибактериальной терапии усугубляет дисбиотические сдвиги в кишечнике [5].
Поиск новых направлений антимикробной терапии язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки остается актуальным. Наше внимание в качестве возможного санирующего препарата привлек хитозан, обладающий антимикробным, иммуномодулирующим, сорбирующим и противовоспалительным действием. Он представляет собой аминополи-сахарид, состоящий из цепи ß-(1 -4)-связанных остатков D-глюкозамина и Ы-ацетил-О-глюкозамина. Хитозан и его водорастворимая форма - хитодез - используются в качестве различных пищевых добавок, в основном для связывания жиров и выведения из организма избыточного холестерина [1,6].
Цель работы - определение антимикробного спектра хитозана и возможность его использования для подавления микробного паразитоцено-за слизистой оболочки ульцерозной зоны больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки.
Обследовано 120 больных, из них 47 - язвенной болезнью желудка и 73-язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, лечившихся в терапевтическом отделении 4-й городской больницы, и амбулаторно - в поликлинике УВД г. Твери по поводу рецидива заболевания. Мужчин было 77, женщин - 43, возраст больных - от 18 до 80 лет, в среднем 42 года.
Фиброгастродуоденоскопию проводили натощак. Стерилизация инструмента осуществлялась по методике, рекомендованной фирмой «Olympus» и исключающей дополнительную контаминацию биоптатов. Биоптаты брали из края язвы антрального и фундального отделов желудка с последующей обработкой и бактериологическим исследованием материала в соответствии с методом, опубликованным нами ранее [3]. Для выделения Н. pylori использовали Columbia Agar (BBL) с гемолизиро-ванной кровью. Посевы культивировали соответственно в аэробных, анаэробных и микроаэрофильных условиях с использованием микроанаэро-статов и газогенераторных пакетов в течение 24-72 часов в термостате при 37°С. Идентификацию энтеробактерий осуществляли с помощью систем Enterotube II и Oxi/Ferm Tube (BBL), грибов - Mycotube (BBL). Определение H. pylori и других видов бактерий проводили на API-системах фирмы bio Merieux: Н. pylori - API 20 Campy, анаэробы -API 20 А, стрептококки - API 20 Strept., стафилококки - API 20 Staph. Количество бактерий определяли путем подсчета КОЕ на 1 г биоптата. Хитозан был предоставлен ЗАО «Биопрогресс» (Щелково). Степень де-зацетилирования - в пределах 75-95,7%. В опытах использовали 1% раствор хитозана на 0,2% водной соляной кислоте. Методом диффузии в агар определяли чувствительность 145 клинических штаммов бактерий, относящихся к 14 родам, которые были выделены из биоптатов слизистой оболочки ульцерозной зоны желудка и двенадцатиперстной кишки больных язвенной болезнью.
В процессе исследования была установлена частота встречаемости и количество микроорганизмов в ульцерозной зоне слизистой оболочки же-
лудка больных язвенной болезнью, микроорганизмы распределились следующим образом: представители родов Staphylococcus выявлены у 100% больных, Streptococcus - у 92,8%, Corynebacterium - у 64,3%, Candida - у 50%, Bacteroides - у 42,8%. У 35,7% больных выделены Staphylococcus aureus, Lactobacillus spp. (4,0 Ig КОЕ/г), Micrococcus luteus (2,3 Ig КОЕ/г) и бактерии семейства Enterobacteriaceae (3,7 Ig КОЕ/г). H. pylori выявлен только у трети больных (2,9 Ig КОЕ/г). Обнаружены также представители родов Veillonella и Actinomyces у 21,4%, Micrococcus у 14,3%, в 7,1% случаев выделялись Neisseria, Peptococcus и Bacillus spp. Микроорганизмы выделялись в сочетании до восьми видов в биоптате. Чаще выявлялись сочетания Н.pylori со стафилококками, стрептококками, кори-небактериями, грибами рода Candida, бактероидами, микрококками, энте-робакгериями.
У 73 больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки Н. pylori выделены в 34% случаев, у 68% больных доминировали стрептококки. Часто встречались S.aureus (50%), бактерии семейства Enterobacteriaceae (46,9%), бактероиды (43,7%), грибы рода Candida (40,6%), микрококки (31,2%), с меньшей частотой обнаруживали псевдомонады, бациллы и коринебактерии. Доминирующими в количественном отношении (4,1-5,3 Ig КОЕ/г) были Н. pylori, бактерии родов Peptostreptococcus, Bacteroides, Gemella, Prevotella, Streptococcus, Staphylococcus, Micrococcus и бактерии семейства Enterobacteriaceae. В меньших количествах (2,8-4,0 Ig КОЕ/г) выявляли Candida, бактерии родов Veillonella, Peptococcus, Corynebacterium, Neisseria, Pseudomonas, Alcaligenes, Haemophilus, Actinomyces. Взаимоотношения бактерий, обнаруженных в микробиоценозе, были неслучайными, так как при совместном их культивировании они не оказывали подавляющего действия друг на друга. Оновные представители облигатной нормальной микрофлоры - Bifidobacterium, Lactobacillus, Propionibacterium и др. с низкими титрами выявлены у 90% больных.
Чувствительность к хитозану была определена у 145 штаммов бактерий ульцерозной зоны. Установлено, что большинство микроорганизмов, включая Н. pylori, в той или иной степени чувствительны к 1% раствору хитозана на 0,2% водном растворе соляной кислоты. Грамположитель-ные микроорганизмы были менее чувствительны к 0,2% соляной кислоте и проявляли практически 100% чувствительность к хитозану. Грибы рода Candida показали абсолютную чувствительность к хитозану. Из хитоза-нов разной молекулярной массы (ММ) выраженное антимикробное действие было выявлено у препаратов с ММ 310-350 кД, к которому были чувствительны 82-85% исследуемых штаммов микроорганизмов. Нечувствительными оказались только лактобациллы, представляющие нормальную микрофлору. 71,7% штаммов были чувствительны к хитозану с ММ 128 и 600 кД, 68,3% - к хитозану с ММ 130 кД, 66,6% - к хитозану с ММ 26 кД, 61,7% - к хитозану с ММ 260 кД и 58,2% - к хитозану с ММ 80 кД. Грибы рода Candida показали высокую чувствительность к хитозану в диапазоне ММ от 80 до 350 кД. Н. pylori были более чувствительны к хитозану ММ 26,80 и 320 кД и малочувствительны или нечувствительны к хитозану с другой ММ (см. рисунок).
Степень чувствительности микроорганизмов к хитозану разной молекулярной массы.
Пищевой хитозан с ММ 320-360 кД был применен в качестве антибактериального препарата для эндоскопического орошения эрозий и язв пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки при их воспалительно-эро-зивно-язвенных поражениях. Трансэндоскопическое введение пациентам 1% раствора хитозана, проявляющего антибактериальную активность в отношении Н. pylori и клинических изолятов условно-патогенной микрофлоры, с одновременным пероральным применением хитодеза, показало хорошие результаты. Средние сроки рубцевания язв у половины больных составили 2 недели, что на 1-2 недели меньше, чем при традиционных средствах лечения. После лечения в области слизистой оболочки красного рубца нормализации качественного состава микрофлоры не наступало, но снижалось ее количество. Отдаленные результаты лечения больных язвенной болезнью показывают, что у 51,7% в течение полутора лет не наступало рецидива заболевания. В первом полугодии рецидив отмечен у 13,8% больных, в конце первого года - у 13,8% больных, у 6 больных рецидив отмечался в виде эрозивного бульбита - в 13,8% в течение первого полугодия и у двух больных - через 10-12 месяцев.
ЛИТЕРАТУРА
1. Муццарелли P.A. (ред.). Хитозан per os: от пищевой добавки - к лекарственному средству. - Н. Новгород, 2001. - 372 с.
2. Циммерман Я.С., Зиннатуллин М.Р. // Клин. мед. - 1997. - № 4. - С. 8-13.
3. Червинец В.М., Бондаренко В.М., Базлов С.Н. //Журн. микробиол. - 2001. -№ 5. - С. 12-15.
4. Blaser M.//J. Infect. Dis. - 1999.-V. 179, No. 6.-P. 1523-1530.
5. Buhling A., Radun D., Muller W.A. et al. // Aliment. Pharmacol. - 2001. - V. 15, No. 9. - P. 1445-1452.
6. Rhoades J., Roller S. // Appl. Envir. Microbiol. - 2000. - V. 66, No. 1. - P. 80-86.
7. Suerbaum S., Michetti P. // N. Engl. J. Med. - 2002. - V. 347, No. 15. - P. 1175-1186.
8. Tytgat G.N.J. // Scand. J. Gastroenterol. - 1994. - V. 29 (Suppl. 2). - P. 38-44.
