CC BY
1432
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2011
ХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ДЕМИНЕРАЛИЗАЦИИ И РЕМИНЕРАЛИЗАЦИИ
ЭМАЛИ ЗУБОВ
БУТВИЛОВСКИЙ А.В.*, БАРКОВСКИЙ Е.В.**, КАРМАЛЬКОВА И.С.***
УО «Белорусский государственный медицинский университет»,
Центральная научно-исследовательская лаборатория* , кафедра общей химии** ;
ГУ «Республиканская клиническая стоматологическая поликлиника»***
Резюме. В статье рассмотрены современные представления о химическом составе эмали зубов, ее свойствах и механизмах минерализации. Большое внимание уделено изоморфным и изоионным замещениям в структуре апатитов, этапам проникновения веществ в них, химическим основам деминерализации твердых тканей зуба и условиям восстановления их минерального состава под воздействием ротовой жидкости и реминерализирующих растворов.
Ключевые слова: деминерализация, реминерализация, химический состав эмали зуба, проницаемость
эмали.
Abstract. In this article modern conceptions of chemical composition of teeth enamel, its properties and mechanisms of mineralization are surveyed. Great attention is given to isomorphous and isoionic substitutions in the structure of apatites, the stages of substances penetration into them, chemical foundations of tooth hard tissues demineralization and conditions of their mineral composition restoration under the influence of oral fluid and remineralizing solutions.
В основе патогенеза начального кариеса лежит деминерализация эмали под воздействием кислот, продуцируемых микроорганизмами зубного налета. Процесс деминерализации приводит к возникновению узких воронкообразных дефектов с диаметром входа около 10 нм (ширина 2-х кристаллов апатита), глу -биной 1000 нм. При прогрессировании деминерализации, приводящей к стиранию краев воронок, размер дефекта достигает длины средних волн видимого спектра (около 500 нм) и становится заметен визуально (меловидное пятно) [3].
Адрес для корреспонденции: 220116, г.Минск, пр.Дзержинского, 83. Тел. 8 (017) 272-78-52, тел. моб. 8 (029) 565-50-00 - Бутвиловский А.В.
Известно, что вероятность исчезновения кариозного пятна определяется сохранностью белковой матрицы, размером и степенью его деминерализации, составом и свойствами ротовой жидкости, а также грамотным проведением реминерализирующей терапии, основанном на знании состава и свойств эмали, механизмов потери и накопления в ней минеральных компонентов.
Химический состав эмали
Эмаль состоит из органического, неорганического вещества и воды. Вода составляет 3,8-4,3% от массы эмали и содержится в двух формах - свободной и связанной. Свободная вода (0,8-1%) испаряется при нагре-
вании до 105°С, а связанная (3-3,3%) образует гидратную оболочку кристаллов апатитов и испаряется лишь при 750°С.
Согласно общепринятым данным неорганические вещества составляют 98,7% от сухой массы эмали, а на долю органических веществ приходится лишь 1,3% [10].
Неорганическая часть эмали представлена апатитами и неапатитными формами (менее 2%; Са3(Р04)2, СаС03, М§С03 и др.). Состав апатитов может быть представлен формульной единицей А5(ВО4)3Х, где А - это Са2+, Сг2+, Ба2+, Сё2+, К+, №+ *; В - Р, Аб, Я С и X -Б-, ОН-, С1-, С032-. Необходимо отметить отличительную особенность карбонатных замещений в апатитах - их локализацию в двух анионных позициях (А-тип - в позиции Х, В-тип
- в позиции ВО4).
К основным апатитам эмали относятся гидроксиапатит (75%), карбонапатит (19%), хлорапатит (4,4%) и фторапатит (0,66%). Простейший состав гидроксиапатита выражается формульной единицей Са5(Р04)3(0Н). В состав элементарной ячейки кристалла гидро-ксиапатита входят две формульные единицы Са^(Р04)б(0Н)2 **.
Основным структурным элементом апатитов являются фосфатные тетраэдры Р04, формирующие жесткий каркас. Ионы кальция занимают в структуре апатитов две кристаллографически разные позиции. Каждый из ионов Са12+ связан с 9 атомами кислорода тетраэдров, ионы Са22+ связывают ионы кислорода Р04-групп с анионом (Б-, 0Н-, С1) осевого канала [2]. Таким образом, уточненная формула структуры апатитов кальция может быть представлена как (Са1)4(Са2)6(Р04)6(0Н)2.
В структуре гидроксиапатита молярное соотношение кальция и фосфора составляет 10/ 6=1,67. Значение кальций/фосфорного коэффи-
* Компенсация заряда при замещении двухзарядного Са2+ однозарядными ионами К+, №+ происходит, как правило, за счет замещения фосфатного аниона Р043-ионом карбоната С032-.
** При описании структуры гидроксиапатита, хлора-патита и фторапатита уместно использовать символьные записи вида Са10( Р04)6(0Н)2, Са10(РО4)6С12, Са10(Р04)6Р2 соответственно, поскольку они отражают состав гексагональных элементарных ячеек.
циента может колебаться в пределах от 1,33 до 2,0 [5] по двум причинам:
1) теоретическое отношение кальция к фосфору соответствует составу одной элементарной ячейки или монокристалла бесконечно больших размеров, а реальные кристаллы очень малы и их состав определяется составом ограняющих его плоскостей;
2) модификации апатита. Например, в результате изоморфных замещений ионы кальция могут замещаться на ионы бария, магния, хрома, гидроксония (Н30+) или ионы других элементов с близкими свойствами, что приводит к уменьшению коэффициента Са/Р:
Са^уОНХ+Мв2+ ^ Са9Мв(Р04)6(0Н)2 + Са2+.
Так, образовавшийся в результате данной реакции апатит содержит 9 атомов кальция и 6 атомов фосфора, их молярное соотношение составляет 9/6=1,5.
Замещение гидроксильной группы ионами фтора не изменяет данного соотношения и приводит к возникновению кислотоустойчивых производных - гидроксифторапатита и фторапатита:
Са^(Р04)б(0Н)2 + р- ^ Са^^ОН) + 0Н-
Саю(Р04)бБ(0Н) + Б- ^ Саю(Р°4)бР2 + 0Н-
Воздействие высоких концентраций фтора, особенно в кислой среде приводит к разрушению апатита с образованием практически нерастворимого фторида кальция:
Саю(Р°4)бР2 + 18р- ^
10СаБ2 + 6РО43-
Модель химического состава неорганического вещества эмали зубов, основанную на учете только основных элементов, была предложена Ф. Дриссенсом (1978) и может быть представлена как:
Са9,23Ка0,26К0,3(Р04)5,53(С03)0,47(0Н)1,15С10,16Р0,1
Согласно модели, предложенной в 1997г. [9] и учитывающей еще и вакансии в катионных и анионных подрешетках, химический состав неорганического вещества эмали выглядит следующим образом:
Са^^8^а29К10(Е04)з12НЕ°4и(С03иС^С^0|:78((:03и-
Реакционная способность апатитов определяется их зарядом. Так в десятикальциевом апатите количество зарядов у положительно заряженных ионов (2+х 10=20+) равно количеству отрицательно заряженных ионов (3х6 + 1х2=20). Поскольку кристаллическая решетка апатитов не является идеальной, то в ней могут встречаться дефекты по любому из составляющих ее ионов (в анионной и катионной подрешетках). Так, например в восьмикальциевом апатите зарядов у положительно заряженных ионов (2+х8=16+) значительно меньше количества отрицательно заряженных ионов (3х6 + 1х2=20), в результате чего апатит приобретает отрицательный заряд и повышенную реакционную способность. Значительно реже в апатите могут наблюдаться дефекты в анионных подрешетках, что приведет к появлению положительного заряда.
По данным разных исследователей процентные соотношения компонентов эмали могут отличаться, что связано с тем, что в системе “ эмаль-слюна” протекают гетерогенные равновесия.
Са10(РО4)6ОН2 ^10Са2+ + 6РО43- + 2ОН-
При закислении околозубной среды образовавшиеся при диссоциации гидроксиапати-та ионы 0Н- будут взаимодействовать с ионами Н+ с образованием ^0 и таким образом химическое равновесие приведенной выше реакции будет смещаться вправо (деминерализация). При условии, что околозубная среда будет пересыщена ионами Са2+, РО43-, ОН- равновесие реакции будет смещаться влево (минерализация).
Каждый кристалл апатита покрыт гид-ратной оболочкой толщиной 1 нм. Таким об-
разом, любое проникновение веществ в кристалл связано с преодолением данной оболочки и протекает в 3 стадии:
1) Ионный обмен между гидратной оболочкой и окружением кристалла протекает за несколько минут, в его основе лежит процесс диффузии. В результате в гидратной оболочке накапливаются ионы, способные нейтрализовать заряд апатита (Са2+, Бг2+, Р043-, С032- и др.).
2) Ионный обмен между гидратной оболочкой и поверхностью кристалла протекает часы. Некоторые ионы перемещаются с поверхности апатита в гидратный слой, а на их место встраиваются другие ионы из гидратного слоя (чаще ионы Са2+, Бг2+, №+, Р043-, Б-, С032-), что приводит к нейтрализации заряда кристалла.
3) Внутрикристаллический обмен длится дни и месяцы. Внедрение ионов вглубь кристалла возможно лишь для ионов Са2+, Бг2+, Р043-, Б- [1].
Выделяют 4 порядка структуры апатитов:
I - ячейка гидроксиаппатита (относительная формульная масса около 1000).
II - кристалл гидроксиапатита, состоящий приблизительно из 2500 ячеек (относительная формульная масса около 1000x2500=2500000).
III - эмалевая призма, начинающаяся у эмалево-дентинной границы и идущая к поверхности эмали, состоит из тысяч и миллионов кристаллов [6].
IV - пучок эмалевых призм.
Содержание химических элементов варьирует и в пределах слоев эмали. Так в поверхностном слое (по сравнению с подповерхностным) содержится больше кальция, фосфора и фтора, что и обуславливает его высокую твердость. Такое распределение имеет химическое обоснование, так, например, попадающие на поверхность зуба ионы фтора имеют высокую активность и быстро взаимодействуют с ионами кальция, не успевая проникнуть в более глубокие слои эмали. В подповерхностном слое, напротив увеличивается относительное содержание магния, натрия и карбонат-ионов. Ионы стронция, меди, алюминия и калия равномерно распределены по всей толще эмали [4].
В среднем на долю кальция (табл.) приходится 35-40% массы эмали, на долю фосфо-
ра - 16-18%, фтора - 5х10-5 - 5х10-3%, содержание железа, цинка, меди, стронция и свинца незначительно и колеблется в пределах от 10-5 до 10-4%.
Содержание неорганических веществ в эмали постоянных и временных зубов имеет определенные отличия. Так, содержание кальция в этой ткани постоянных зубов больше (36,4%), чем в таковой временных (35,0%). Более высокое содержание фосфора напротив характерно для временных зубов (18,5%) по сравнению с постоянными (17,4%).
Среди органических веществ эмали примерно третья часть по массе приходится на белки (0,25-0,45%). Белок в эмали содержится в малом количестве (0,5-4%) и отличается от белка дентина и цемента низким содержанием пролина, оксипролина и глицина. Белковые компоненты эмали зубов подразделяются на группы:
• белки, нерастворимые в кислотах и ЭДТА (амелогенины, молекулярная масса 30 кДа),
• водорастворимые белки (энамелины, молекулярная масса 50-70 кДа, предположительно остаточный компонент эмалевого органа),
• кальций-связывающий белок эмали (КСБЭ, молекулярная масса 20 кДа; в эмали зубов человека превалирует мономерный КСБЭ по сравнению с высокомолекулярным агрегатом).
По мере созревания эмали содержание белка в ней падает приблизительно в 100 раз. В эмали также обнаружены пептиды и сво-
бодные аминокислоты (глицин, валин, про-лин, оксипролин).
Говоря о химическом составе эмали необходимо упомянуть об энамелоиде - фазе, располагающейся на границе раздела фаз между эмалью и дентином. Эта фаза состоит из кристаллов апатита, аналогичных таковым эмали, но располагающихся в органической матрице коллагена как в дентине и костной ткани [8].
Химические основы минерализации эмали
Минерализация - образование минеральных компонентов по принципу выпадения осадка из раствора. Известно, что в живых организмах процесс минерализации осуществляется только на белковых матрицах. Функцию такой матрицы в эмали зуба выполняет кальций-свя-зывающий белок, фиксированный на волокнах амелогенинов («мягкий скелет» эмали).
При взаимодействии растворимых мономеров КСБЭ с ионами кальция (одна молекула может связать 8-10 ионов кальция) происходит их полимеризация и образуется нерастворимая в нейтральной среде трехмерная белковая сеть. Функциональные группы КСБЭ (вероятно, фосфат фосфосерина, свободные карбоксильные группы аспартата и глутамата, связанного с белком цитрата и др.) образуют центры (ядра) первичной нуклеации при кристаллизации. КСБЭ может связывать прямо не более 2,5-5,0% минеральной фазы эмали. Затем
Таблица
Сравнение неорганических компонентов эмали, дентина и гидроксиапатита (вес.%) [2, 9]
Компонент Эмаль Дентин Гидроксиапатит
Минерал в ткани 97 72 -
Органика в ткани 1,5 20 -
Са2+ 37,6 40,3 39,6
Р5+ 18,3 18,6 18,5
Са/Р, ат% 1,59 1,67 1,67
т О о 3,5 5,6 -
Б- 0,01 0,07 -
происходит дальнейшая усиленная минерализация за счет гомогенной эпитаксии (осаждение на активных центрах) гидроксиапатита в уже сформированных зонах минерализации. КСБЭ и, возможно, амелогенины ориентируют ход кристаллизации, обеспечивая упорядоченность и равномерность структуры эмали и последовательность ее формирования [7].
Проницаемость эмали является одним из ее важнейших свойств, отражает уровень в ней физико-химических процессов и способствует поддержанию ее гомеостаза. Проницаемость эмали обеспечивается благодаря наличию в ней микропространств, заполненных водой, по которым способны проникать вещества в зависимости от их радиуса. Некоторые органические вещества (например, лизин) поступает в эмаль в основном по ламеллам. Одним из основных механизмов, обеспечивающих перемещение ионов в водной фазе эмали, принято считать осмотическое давление. Оно возникает из-за значительной разности концентраций ряда ионов на поверхности эмали и в эмалевой жидкости.
Проницаемость эмали необходимо рассматривать в двух направлениях: ротовая жидкость ^ эмаль и пульпа ^ дентин ^ эмаль. Большинство исследователей сходятся на том, что основным источником для поступления веществ в эмаль является ротовая жидкость. Так благодаря ее пересыщенности по отношению к ионам, входящим в состав основных компонентов эмали (Са2+,НР042- и Б-), преимущественно обеспечивается трофика эмали.
В прошлом столетии была изучена проницаемость эмали для большого количества ионов (калия, кальция, фтора, стронция, фосфат-ионов и т.д.) и ряда органических веществ (аминокислот и углеводов).
На проницаемость эмали оказывают влияние следующие факторы [1]:
1. Постэруптивный возраст зуба. Уро-вень проницаемости снижается с увеличением возраста, что связано с поступлением минеральных компонентов из слюны и отложением их в эмали в процессе ее созревания.
2. Деминерализация эмали. Проницаемость увеличивается пропорционально степени деминерализации эмали.
3. Кислотность среды. При уменьшении рН наблюдается увеличение проницаемости эмали. Происходящий в зубном налете процесс гликолиза обеспечивает закисление среды и таким образом повышает проницаемость эмали.
4. Ротовая жидкость. В присутствии ротовой жидкости происходит уменьшение проницаемости эмали, что обусловлено наличием в ней муцина.
5. Свойства проникающего вещества. Проницаемость эмали для вещества определяется его биологической активностью, способностью связываться с элементами эмали, путем проникновения. По данным W. Newman & M. Newman (1961), коэффициент активности ионов Cl-, F-, OH-, K+, NO3- равен 0,72, Ca2+
- 0,36, Ba2+ - 0,33, PO43- - 0,06. Из органических веществ наибольшая проницаемость свойственна лизину, меньшая - глицину и наименьшая - глюкозе. Согласно мнению П. А. Леуса (1970), проницаемость эмали для неорганических и органических веществ отличается и не зависит от размера молекулы.
6. Структура и состав эмали. Зубы человека менее проницаемы, чем зубы животных. Проницаемость зубов человека снижается в следующем ряду: непрорезавшиеся ^ постоянные с незрелой эмалью ^ молочные ^ постоянные после завершения минерализации эмали.
7. Групповая принадлежность, поверхность, участок зуба. Проницаемость минимальна у резцов, максимальна у моляров, язычная поверхность более проницаема, чем вестибулярная, пришеечная область вестибулярной поверхности более проницаема.
8. Ферменты. Гиалуронидаза обладает способностью увеличивать проницаемость эмали, а щелочная фосфатаза - снижать ее. В качестве источников ферментов могут выступать как слюна, так и микроорганизмы.
9. Физические факторы. Воздействие электрического тока и ультразвука значительно увеличивает проницаемость эмали.
Деминерализация эмали
Деминерализация - потеря части минеральных компонентов. Поскольку ротовая жидкость сильно пересыщена ионами Ca2+ и PO43-,
то естественные колебания их концентраций оказывают слабое влияние на скорость де- и реминерализации. Таким образом, решающее влияние на растворение и кристаллизацию апатита оказывает концентрация гидроксильных ионов, то есть:
L Ca^(PO4)6(OH)2 « (Coh-)2.
Установлено, что при снижении рН до уровня 5,5 и ниже скорость деминерализации гидроксиапатита значительно превышает таковую реминерализации [3]. Основным источником кислот являются микроорганизмы зубного налета.
Благодаря наличию ионного обмена протоны (ионы гидроксония) до определенного предела могут поглощаться эмалью без разрушения ее структуры. Леонтьев В.К. и Вершинина О.И. установили, что деминерализация эмали в кислых средах in vitro идет с преимущественным выходом ионов Са2+ по сравнению с ионами РО43-, т. е. процесс растворения сопровождается избирательной декальцинацией эмали и предположили параллельное течение двух реакций [1]:
Са^ОДХОН^ + 8H+ ^
10Са2+ + 6НРО42- + 2Н2О
Саю(РО4)6(°Н)2 + 2Н3О+ ^
Са2+ + Са9(Н3°)2(РО4)6(ОН)2.
Таким образом, эмаль является своего рода буферной системой по отношению к кислотам, действующим на ее поверхности. Вытесняя Са2+, ионы Н/Н3°+ связываются гид-роксиапатитом. При этом структура гидрокси-апатита сохраняется, но уменьшается его способность противодействовать кислоте из-за снижения избытка Са. Падение молярного кальций-фосфорного соотношения ниже 1,30 указывает на разрушение кристаллической решетки гидроксиапатита, исчерпание резерва кальция и неспособность эмали далее противостоять растворению. Таким образом, величина Са/Р коэффициента является показателем резистентности эмали к действию кислоты.
Степень деминерализации эмали связана с размером кариозного пятна по принципу: чем больше размер пятна, тем более выражена потеря кальция и фосфора. Деминерализация во всех слоях эмали прогрессирует в следующей последовательности: светло-коричневое ^ коричневое ^ черное кариозное пятно. Деминерализация при кариесе уменьшается в направлении от поверхности эмали к эмалево-дентинному соединению.
Условия реминерализации эмали
Реминерализация - восстановление минеральных компонентов эмали зуба за счет слюны или реминерализирующих растворов. Теоретическим обоснованием реминерализации в профилактике и терапии кариеса является доказательство преобладания деминерализации эмали с сохранением в ней белковой матрицы на ранних стадиях кариеса и данные о возможности поступления различных веществ в эмаль.
Фазы реминерализации эмали
1) Доставка реминерализирующих средств, содержащих ионы, предназначенные для замещения дефектов в кристалле апатита. Для протекания данной фазы необходимо подготовить поверхность эмали, удалив твердые и мягкие зубные отложения. Считается целесообразной и обработка поверхности эмали растворами слабых кислот для растворения карбонатных групп апатитов и их последующего замещения на фосфатные группы.
2) Проникновение ионов, предназначенных для реминерализации с поверхности эмали в гидратный слой кристаллов апатита.
3) Проникновение ионов из гидратного слоя на поверхность кристаллов апатита. Скорость второй и третьей фазы зависит от многих факторов: заряда, ионного радиуса, активности, химических свойств, концентрации ионов, состояния поверхности гидроксиапа-тита, ее заряда, наличия дефектов кристаллической решетки, концентрации ионов на поверхности.
4) Проникновение ионов с поверхности в глубину кристалла. Эта фаза является самой длительной и может осуществляться только за
счет дефектов кристаллической решетки, изои-онных или изоморфных замещений в кристаллической решетке гидроксиапатита. Дефект кристаллической решетки преимущественно замещается тем ионом, который ранее был на этом месте, или сходным по ионному радиусу и химическим свойствам по принципу компенсации заряда. Так, место иона кальция может быть занято Са2+, М§2+, Ва2+, Н30+, фосфат-иона
- Р043-, С032-, иона гидроксила - 0Н-, Б-, С1-.
Установлено, что при концентрации фтора в питьевой воде 0,2-0,3 мг/л, критическое рН реминерализации составляет 5,5 (при более высоких значениях рН происходит - реминерализация, более низких - деминерализация). Однако путем компенсации ионами фтора недостатка гидроксильных ионов можно обеспечить реминерализацию при рН 4,5-5,5.
Зная химический состав и фазы реминерализации эмали, можно сформулировать следующие требования к идеальному реминерализирующему средству:
• Длительная ретенция на поверхности эмали.
• Содержание ионов, способных к проникновению вглубь кристалла (Са2+, Бг2+, Р043-, Б-) и при этом не образующих модификации апатитов, способствующих развитию кариеса или нарушающих ход физико-химических и обменных процессов в тканях зуба (Са2+, Р043-, Б).
• Содержание минеральных веществ в ионизированном состоянии в концентрациях, превышающих их концентрации в гидрат-ном слое.
• Соотношение кальция и фосфора 1,67 и выше, что обеспечит формирование апатитоподобных структур (при меньшем соотношении образуются другие кальций-фосфорные соединения).
• Низкая концентрация ионов фтора (0,1 мг/л), способствующая преципитации апатитов (высокая концентрация определяет образование нерастворимого фторида кальция, при отсутствии ионов фтора формируются растворимые субстанции - например, окта-кальцийфосфат).
Несмотря на большое количество созданных к настоящему времени соединений, препаратов, методик их применения, поиск и ап-
робация новых средств для проведения реминерализирующей терапии не теряют свою актуальность и востребованность в практическом здравоохранении.
Однако эффективность данного поиска, равно как и применения существующих препаратов для реминерализирующей терапии кариозных поражений зависит от знания химических основ деминерализации и реминерализации эмали, что позволяет нам надеяться, что данная статья будет полезна исследователям и врачам-стоматологам.
Литература
1. Боровский, Е.В. Биология полости рта / Е. В. Боровский, В.К. Леонтьев. - М.: Медицина. - 1991. - 304 с.
2. Данильченко, С. Н. Структура и свойства апатитов кальция с точки зрения биоминералогии и биоматериаловедения (обзор) / С.Н. Данильченко // В1сн. СумДУ. Сер. Физика, математика, механика. - 2007.
- № 2. - С. 33-59.
3. Кнаппвост, А. Мифы и достоверные факты о роли фтора в профилактике кариеса. Глубокое фторирование / А. Кнаппвост // Стоматология для всех. -2001. - №3. - С. 38-42.
4. Леонтьев, В.К. Кариес и процессы минерализации (разработка методических подходов, молекулярные механизмы, патогенетическое обоснование принципов профилактики и лечения): автореф. ... дис. д-ра. мед. наук: 14.00.21 / В.К. Леонтьев. - Омск, 1978.
- 45 с.
5. Терехова, Т.Н. Современные данные о составе, структуре и свойствах твердых тканей зуба / Т.Н. Терехова // Соврем. стоматология. - 2002. - № 1. - С. 27-31.
6. Терапевтическая стоматология детского возраста / Л. А. Хоменко [и др.]. - Киев:. Изд-во «Книга плюс», 2007. - 813 с.
7. Чиркин, А.А. Биохимия: учебное руководство / А. А. Чиркин, Е.О. Данченко. - М.: Мед. лит., 2010. -С. 593-603.
8. Dorozhkin, S.V. Calcium orthophosphates / S.V. Dorozhkin // J. Mater. Sci. - 2007. - Vol. 42. - P. 10611095.
9. Elliot, J. C. Calcium phosphate biominerals / J.C. Elliot // Phosphates: geochemical, geobiological and materials importance. Series: Reviews in mineralogy and geochemistry / Eds. M. J. Kohn, J. Rakovan, J. M. Hughes. - 2002. - Vol. 48. - Mineralogical Society of America, Washington, DC. - P. 427-454.
10. Jenkins, G.N. The physiology and biochemistry of the mouth / G.N. Jenkins. - 4th ed. - Oxford, 1978. - 599 p.
Поступила 16.11.2010 г. Принята в печать 18.02.2011 г.
